9-顺式维甲酸部分抑制脂多糖诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7向树突样细胞分化

目的探讨激活视黄醇类X受体对脂多糖诱导巨噬细胞向树突状细胞分化的影响及其机制。方法小鼠巨噬细胞系RAW264.7经脂多糖诱导48h后分化为树突样细胞,观察同时给予视黄醇类X受体激动剂9-顺式维甲酸对脂多糖诱导分化的干预作用并检测细胞内活性氧的生成,相差显微镜观察细胞形态,流式细胞仪检测与树突状细胞免疫成熟和激活有关的细胞表面标志物(CD40、CD86和CD83),CM-H2DCFDA荧光探针测定细胞内活性氧浓度。结果9-顺式维甲酸部分抑制脂多糖诱导出现的树突样细胞形态改变,使被脂多糖诱导上调的细胞表面标志物CD40、CD86和CD83分别下降约50%、40%和38%,作用表现剂量依赖性;脂多糖引起细胞内活性氧浓度显著升高(平均荧光强度98.9±9.6比12.3±1.8,P<0.05),9-顺式维甲酸在10-8mol/L和10-7mol/L剂量水平分别降低平均荧光强度到69.4±5.8和37.0±4.2,较脂多糖单独处理组差异有显著性(P<0.05)。结论激活视黄醇类X受体能够部分抑制脂多糖诱导巨噬细胞向树突状细胞分化,其机制可能与减轻细胞氧化应激损伤有关。     

9-顺式维甲酸抑制PMA诱导人单核细胞系THP-1表达MMP-9

目的探讨视黄醛X受体（retinoid X receptors,RXRs）特异性激动剂9-顺式维甲酸（9-cisRA）对佛波酯（PMA）诱导人单核细胞系THP-1基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达及活性的影响。方法体外培养THP-1细胞,PMA诱导分化为巨噬细胞,采用9-cisRA对不同浓度PMA组进行干预,应用Realtime-PCR、Westerblotting测定THP-1细胞MMP-9的基因和蛋白水平表达水平,通过Gelatin Zymography法检测MMP-9的酶活性。结果9-cisRA（100nmol/L）对不同浓度PMA组（10、20和40 nmol/L）干预24 h,9-cisRA可明显抑制THP-1细胞MMP-9转录水平,MMP-9的mRNA抑制率分别28%、60%、88%（P<0.01）。MMP-9蛋白水平及酶活性也呈显著下降。结论RXRs特异性激动剂9-cisRA可显著抑制PMA诱导THP-1的MMP-9转录和蛋白水平表达及其酶活性。     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子通过Toll样受体-4信号通路调节巨噬细胞自噬水平

目的 探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)是否通过Toll样受体-4(TLR4)通路调节巨噬细胞自噬水平.方法 用终浓度为5ng/ml的佛波酯(PMA)诱导人单核细胞白血病细胞系(THP-1)THP-1单核细胞48h,采用分化成功的巨噬细胞进行实验.实验分为空白对照组、EMMPRIN组和TAK-242组....     

低密度脂蛋白对THP-1源性巨噬细胞PCSK9和低密度脂蛋白受体表达的影响

目的用低密度脂蛋白处理THP-1源性巨噬细胞后,检测低密度脂蛋白受体和PCSK9(proprotein convertase subtilisin/kexintype9)的表达并研究PCSK9与低密度脂蛋白受体之间的相关性。方法160nmol/L佛波酯孵育THP-1源性巨噬细胞24h,使其诱导分化成贴壁的巨噬细胞后,分别用0、10、20和     

弓形虫感染对THP-1巨噬细胞极化影响的研究

目的 探讨弓形虫感染对体外诱导的人外周血单核细胞(Human acute monocytic leukemia cell line,THP-1)极化特点的影响。方法 用佛波酯(PMA)诱导THP-148 h使之由悬浮的单核细胞诱导为贴壁的巨噬细胞,体外选择不同时间点感染弓形虫,用Diff染色分析弓形虫在细胞内的增殖情况。Western blot检测极化相关蛋白,Q-PCR检测mRNA的表达情况。结果 成功诱导得到贴壁的巨噬细胞模型,感染弓形虫后,M1型巨噬细胞标志性蛋白iNOS 及M2型巨噬细胞标志型蛋白Arg-1 36 h表达量与对照组差异明显(t=10.23,P<0.05)。Q-PCR的结果显示不同的处理组IL-1、IL-12、iNOS和TNF-α逐渐减少,而IL-10、Arg-1呈逐渐增加,到36 h达到顶峰(t=9.587,P<0.05)。结论 弓形虫RH株感染THP-1巨噬细胞后可以在胞内生长增殖,THP-1细胞感染后向M2型巨噬细胞方向极化。     

白细胞介素37对THP-1源巨噬细胞泡沫化的影响

目的:研究白细胞介素(白介素)-37对人THP-1源巨噬细胞泡沫化的影响及机制。方法:体外培养THP-1,用佛波酯(PMA)刺激24h使其分化为巨噬细胞后,进行以下处理:①用IL-37和(或)ox-LDL刺激THP-1源巨噬细胞24h;②用不同浓度的IL-37和ox-LDL同时刺激24h;③用ox-LDL刺激THP-1源巨噬细胞24h,再加IL-37干预24h,收集细胞。采用油红染色观察各组泡沫细胞所占细胞总数的比例,TC试剂盒测定细胞内TC的含量,利用RT-PCR、Western blot实验方法从mRNA水平和蛋白水平测定泡沫细胞清道夫受体CD36和SRA和ABCA-1的表达。结果:与对照组比较,IL-37能够明显减少泡沫细胞的形成,降低泡沫细胞TC的聚集[(303.10±8.90)ng/mg∶(150.40±7.36)ng/mg,P0.01],显著抑制巨噬细胞清道夫受体CD36和SRA的表达,并增强ABCA-1的表达,且作用效果与溶度呈正相关。对ox-LDL诱导的泡沫细胞,给予IL-37后仍能够显著上调ABCA1的表达,显著下调SRA、CD36的表达。结论:白细胞介素-37可抑制THP-1源巨噬细胞的泡沫化,其作用机制可能是通过IL-37抑制清道夫受体CD36和SRA、促进ABCA-1的表达实现的。     

C反应蛋白和高密度脂蛋白对血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1表达的影响

目的观察C反应蛋白和高密度脂蛋白对单核细胞株THP-1来源的巨噬细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1蛋白和mRNA表达的影响,以及血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1表达的变化与细胞内胆固醇含量变化的关系。方法THP-1单核细胞株经佛波酯诱导分化为巨噬细胞。用不同浓度C反应蛋白或高密度脂蛋白在体外干预巨噬细胞,测定干预前后巨噬细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1蛋白和mRNA表达的变化,并采用高效液相色谱测定巨噬细胞内胆固醇含量的变化。结果与对照组相比,C反应蛋白或高密度脂蛋白均可以诱导THP-1来源的巨噬细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1蛋白和mRNA表达增加(P<0.05),C反应蛋白使巨噬细胞内总胆固醇和胆固醇酯含量显著增加(P<0.01),而高密度脂蛋白使细胞内总胆固醇和胆固醇酯显著降低(P<0.01)。结论C反应蛋白和高密度脂蛋白都能引起THP-1来源的巨噬细胞表面血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1表达上调,提示血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1并不是介导巨噬细胞参与炎症反应病理生理变化的关键性受体。     

Toll样受体4信号通路在巨噬细胞调节基质金属蛋白酶9和14中的作用机制

目的探讨Toll样受体4(TLR4)信号通路在细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)所介导的单核细胞白血病细胞株(THP-1)巨噬细胞调节基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP-14中的作用机制。方法实验分为对照组:THP-1巨噬细胞;刺激组:THP-1巨噬细胞+EMMPRIN(1ng/ml)刺激6h;抑制组:THP-1巨噬细胞+TAK-242(5μmol/L)抑制4 h,PBS清洗3次,再加EMMPRIN刺激6 h。运用qRT-PCR和Western blot检测MMP-9、MMP-14基因;MMP-9、MMP-14和TLR4蛋白表达。结果光学显微镜下观察显示,THP-1单核细胞悬浮生长,呈圆形或类圆形,经100 ng/ml佛波酯诱导分化48 h,细胞体积增大,可伴有伪足伸出,呈椭圆形、长条梭形或短棒状,95%以上细胞贴壁生长。与对照组比较,刺激组MMP-9、MMP-14基因以及MMP-9、MMP-14和TLR4蛋白表达明显升高,抑制组TLR4蛋白表达明显下降,差异有统计学意义(P0.05)。与刺激组比较,抑制组MMP-9、MMP-14基因以及MMP-9、MMP-14和TLR4蛋白表达明显下降(4.384±0.732 vs 6.473±0.739,3.178±0.492 vs 4.937±0.538,0.635±0.115 vs 0.832±0.114,0.454±0.067 vs 0.733±0.128,0.206±0.058 vs 0.481±0.086,P0.05)。结论 TLR4信号通路在EMMPRIN所介导的THP-1巨噬细胞上调MMP-9、MMP-14表达中起积极作用。     

过氧化体增殖物激活型受体γ对巨噬细胞脂质蓄积及CD36表达的影响

目的观察过氧化体增殖物激活型受体γ激动剂和拮抗剂对THP-1巨噬细胞胆固醇蓄积及CD36表达的影响。方法实验分对照组、氧化型低密度脂蛋白组、Ciglitazone处理组和GW9662处理组,后两组用50 mg/L氧化型低密度脂蛋白分别与过氧化体增殖物激活型受体γ激动剂Ciglitazone(10μmol/L)及拮抗剂GW9662(10μmol/L)共同孵育24 h,高效液相色谱分析法检测细胞总胆固醇蓄积情况,RT-PCR和Western blot分别检测THP-1巨噬细胞CD36 mRNA和蛋白的表达。结果与对照组(76.28±10.36 mg/g)相比,氧化型低密度脂蛋白(121.63±13.32 mg/g)能使细胞总胆固醇含量显著增加,而Ciglitazone能使氧化型低密度脂蛋白处理的细胞总胆固醇含量进一步增加(136.23±14.78 mg/g),GW9662能使氧化型低密度脂蛋白处理的细胞总胆固醇含量减少(98.52±11.45 mg/g)。过氧化体增殖物激活型受体γ拮抗剂GW9662使巨噬细胞CD36 mRNA和蛋白的表达下调及胆固醇蓄积减少,过氧化体增殖物激活型受体γ激动剂Ciglitazone使巨噬细胞CD36 mRNA和蛋白的表达上调及胆固醇蓄积增多。结论过氧化体增殖物激活型受体γ拮抗剂使THP-1巨噬细胞胆固醇蓄积减少及氧化型低密度脂蛋白诱导的CD36表达下调。     

白藜芦醇抑制可溶性CD40配体作用下巨噬细胞基质金属蛋白酶-9的表达

目的 探讨白藜芦醇抑制可溶性CD40配体(sCD40L)作用下对巨噬细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响.方法 佛波酯诱导人单核细胞株(THP-1)细胞分化为巨噬细胞.依次给予白藜芦醇和可溶性sCD40L孵育细胞,利用半定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白免疫印迹法、明胶酶谱法检测巨噬细胞内MMP-9和组织基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)基因的转录、蛋白表达和酶活性.结果 给予sCD40L刺激后巨噬细胞内MMP-9基因转录增多(1.53±0.04与0.75±0.01,P<0.05),蛋白分泌明显增加(244 930.8±31 268.6与192 976.8±20 223.1,P<0.05);白藜芦醇可抑制巨噬细胞MMP-9基因转录及蛋白分泌(P<0.01),降低MMP-9酶活性(P<0.05),升高巨噬细胞TIMP-1基因转录和蛋白分泌(P<0.05).结论 白藜芦醇可以抑制CD40途径活化的巨噬细胞内MMP-9的表达,调节MMP-9的活性,这可能是其抗动脉粥样硬化、稳定粥样斑块的作用机制之一.     

激活视黄醇类X受体对氧化型低密度脂蛋白诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7向树突样细胞分化的影响

目的探讨激活核受体视黄醇类X受体（RXR）对氧化型低密度脂蛋白（ox—LDL）诱导巨噬细胞向树突状细胞分化的影响及其机制。方法小鼠巨噬细胞系RAW264．7经ox-LDL诱导48h后分化为树突样细胞,相差显微镜观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞表面标志物,CM-H2DCFDA荧光探针测定细胞内活性氧浓度。结果ox—LDL诱导48h后,表达与树突状细胞免疫成熟和激活有关的细胞表面标志物CIMO、CD86、CD83、MHCClassⅡ和CD1d的RAW264．7细胞比例明显升高,同时给予天然型RXR特异性配体9-cisRA（10^-7mol／L）上述比例分别下降约47％、43％、48％、32％和17％,同时给予合成型RXR特异性配体SR11237（10^-6mol／L）上述比例分别下降约38％、38％、46％、36％和32％,并且均表现剂量依赖性。相差显微镜观察发现树突样细胞形态改变也得到部分抑制。ox-LDL引起细胞内活性氧浓度显著升高[平均荧光强度（MFI）38．24±4．20比4．46±0．39,P〈0．05],同时给予9．cisRA（10.mol／L）或SR11237（10^-6mol／L）MFI分别降低到12．60±1．52和17．89±1．91,较ox-LDL单独处理组差异有统计学意义（P〈0．05）。结论激活核受体RXR能够部分抑制ox-LDL诱导巨噬细胞向树突状细胞分化,其机制可能与减轻细胞氧化应激损伤有关。     

激活视黄醇类X受体对氧化型低密度脂蛋白诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7凋亡的影响

目的探讨激活视黄醇类X受体对氧化型低密度脂蛋白诱导巨噬细胞凋亡的影响及其机制。方法小鼠巨噬细胞系RAW264.7经氧化型低密度脂蛋白处理24h诱导凋亡,同时观察给予视黄醇类X受体特异性配体9-cisRA或SR11237对氧化型低密度脂蛋白诱导凋亡的干预作用,MTT法检测细胞活力,流式细胞仪PI单染法和DAPI染色检测细胞凋亡,CM-H2DCFDA荧光探针测定细胞内活性氧浓度。结果RAW264.7细胞经氧化型低密度脂蛋白(100mg/L)处理24h后细胞活力较对照组下降约60,细胞凋亡百分率较对照组升高约75,10-8mol/L和10-7mol/L9-cisRA及10-7mol/LSR11237能够显著抑制氧化型低密度脂蛋白诱导引起的细胞活力下降和凋亡(P<0.05)。给予氧化型低密度脂蛋白(100mg/L)4h后细胞内活性氧水平显著升高约17倍以上,如联合给予9-cisRA(10-7mol/L)或SR11237(10-6mol/L),平均荧光强度分别下降约52和28,较氧化型低密度脂蛋白单独处理组有显著性差异(P<0.05)。结论激活视黄醇类X受体能够抑制氧化型低密度脂蛋白诱导巨噬细胞凋亡,其机制可能与减轻细胞氧化应激损伤有关。     

不对称二甲基精氨酸对THP-1源性巨噬细胞表达巨噬细胞移动抑制因子的影响

目的 研究不对称二甲基精氨酸对THP-1源性巨噬细胞表达巨噬细胞移动抑制因子的影响.方法 150 nmol/L佛波酯诱导THP-1细胞48 h使其转化为巨噬细胞,并用抗人CD68进行免疫细胞化学鉴定,以不同浓度的不对称二甲基精氨酸(1、5、10、20和30μmoL/L)作用于THP-1源性巨噬细胞24 h及20 μmol/L不对称二甲基精氨酸作用于THP-1源性巨噬细胞0 h、6 h、12 h、24 h及48 h ,逆转录聚合酶链反应检测各组细胞的巨噬细胞移动抑制因子Mrna表达水平,酶联免疫吸附法检测各组细胞上清液中巨噬细胞移动抑制因子的蛋白含量.结果 与对照组相比,5、10、20和30μmol/L的不对称二甲基精氨酸作用于THP-1源性巨噬细胞24 h后,巨噬细胞移动抑制因子的Mrna和蛋白表达水平均明显提高(P<0.05).与0 h组相比,20 μmol/L不对称二甲基精氨酸作用于THP-1源性巨噬细胞12、24和48 h,巨噬细胞移动抑制因子的Mrna和蛋白表达水平均明显提高(P<0.05).结论 不对称二甲基精氨酸可上调THP-1源性巨噬细胞的巨噬细胞移动抑制因子表达,并呈剂量和时间依赖性,不对称二甲基精氨酸可能通过诱导巨噬细胞移动抑制因子的表达而促进动脉粥样硬化的发生和发展.     

NOD1/RIP2信号通路对巨噬细胞炎性活化的作用

目的以人单核细胞株THP-1为基础,探讨NOD1/受体相互作用蛋白2(RIP2)信号通路对巨噬细胞炎性活化及表型的影响。方法用160 nmo L/L的佛波酯(PMA)将THP-1单核细胞诱导分化成巨噬细胞,分别用10、25和50 mg/L浓度的氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激THP-1源性巨噬细胞24 h,以空白组为对照组。应用RT-PCR法检测NOD1和RIP2的mRNA表达情况;应用Western blot法检测NOD1和RIP2的蛋白表达情况;应用ELISA法检测细胞培养液中单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和巨噬细胞移动抑制因子(MIF)的分泌;应用流式细胞学检测巨噬细胞表面抗原CD16、CD68表达。结果 ox-LDL能以剂量依赖的方式激活THP-1源性巨噬细胞中NOD1/RIP2信号通路,随着ox-LDL刺激浓度的增加,NOD1、RIP2的mRNA和蛋白表达水平升高(P0.05)。NOD1/RIP2信号通路激活后能使细胞培养物上清液中炎症因子MIF和MCP-1的表达增加,随着ox-LDL刺激浓度的增加,MCP-1和MIF的分泌增多(P0.05)。NOD1/RIP2信号通路激活后能改变巨噬细胞表面抗原CD16、CD68的表达,随着ox-LDL刺激浓度的变化,巨噬细胞表面抗原CD16/CD68的平均荧光强度发生变化,其中50 mg/L组能显著下调CD16/CD68的表达(P0.01)。结论巨噬细胞中NOD1/RIP2信号通路能被ox-LDL以剂量依赖的方式激活,NOD1/RIP2信号通路激活后能导致巨噬细胞的炎性活化及其表型变化,这可能是其参与动脉粥样硬化形成和发展过程的主要机制。     

Ox-LDL induces monocyte-to-macrophage differentiation in vivo: Possible role for the macrophage colony stimulating factor receptor (M-CSF-R)

Monocyte-to-macrophage differentiation and LDL oxidation play a pivotal role in early atherogenesis. We thus questioned possible mechanisms for oxidized LDL (Ox-LDL)-induced monocyte-to-macrophage differentiation in vivo. Mouse peritoneal mononuclear cells, that were isolated 1, 2, or 3 days after Ox-LDL intraperitoneal injection, gradually exhibited the characteristic macrophage morphology, along with the expression of the cell-surface antigen CD11b. Molecular mechanisms involved in Ox-LDL-induced differentiation were further investigated in vitro using the THP-1 monocytic cell line. THP-1 cells incubated with Ox-LDL in the presence of as low as 1 ng/ml of PMA differentiated into macrophages, as evidenced by morphologic, phenotypic, and functional properties. Stimulation of monocyte-to-macrophage differentiation was selective to Ox-LDL (and not native LDL), was dependent on the extent of LDL oxidation, and required Ox-LDL internalization by the cells. These effects of Ox-LDL could be attributed to its major oxysterols, 7-ketocholesterol and 7beta-hydroxycholesterol. Finally, the stimulation of monocyte differentiation to macrophages by Ox-LDL was shown to require the M-CSF-receptor, since blocking the binding to the receptor abolished Ox-LDL/7beta-hydroxycholesterol-induced differentiation. Furthermore, Ox-LDL/7beta-hydroxycholesterol elicited tyrosine phosphorylation and activation of the M-CSF-R. We thus conclude that Ox-LDL induces monocyte differentiation to macrophages in vivo and this phenomenon involves activation of the M-CSF-receptor.     

Relationship between TNF-alpha and iron metabolism in differentiating human monocytic THP-1 cells

The human monocytic cell line THP-1 differentiates along the macrophage line after phorbol-12-myristate-13-acetate (PMA) supplementation and can be stimulated to secrete tumour necrosis factor alpha (TNF-alpha) by interferon gamma (IFN-gamma) addition. We found that, in the early stage of differentiation (1-48 h), PMA induction elicited an upregulation of intracellular H ferritin and H ferritin binding sites and a downregulation of transferrin receptor. In addition, we found that iron administration to PMA-differentiating cells induced the expression of TNF-alpha mRNA and TNF-alpha secretion to levels even higher than those induced by IFN-gamma alone. The iron chelator desferrioxamine showed the opposite effect and reduced TNF-alpha release. In contrast, preincubation of the cells with iron before PMA induction resulted in a decrease of the TNF-alpha secretion induced by IFN-gamma, whereas the opposite was true after preincubation with desferrioxamine. The data support a co-ordinate interaction between iron and TNF-alpha in monocyte macrophages, with an iron-mediated upregulation of TNF-alpha in the early phase of differentiation and an iron-mediated inhibition at later stages. This complex relationship has to be considered in evaluating the effects of iron on inflammation.     

Expression of CD4 controls the susceptibility of THP-1 cells to infection by R5 and X4 HIV type 1 isolates

The monocytic THP-1 cell line has been used to study HIV-monocyte/macrophage interactions and the relationship between differentiation, virus production, and virus latency. Undifferentiated THP-1 cells are susceptible to infection by T-tropic human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) isolates that use the coreceptor CXCR4 (X4 strains). Treatment with phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) induces differentiation of THP-1 cells into adherent macrophage-like cells, which are susceptible to M-tropic, CCR5-dependent isolates (R5 strains). The aim of this study was to determine whether variabilities observed in the susceptibility of THP-1 cells to HIV-1 infection may be related to the differential expression of CD4, CCR5, and CXCR4. Both propagation and PMA treatment of THP-1 cells resulted in a marked decrease in CD4-positive cells, whereas the expression of CCR5 and CXCR4 was not reduced during propagation. Both coreceptors were also relatively "resistant" to PMA-induced downregulation when compared with the low percentage of CD4-positive cells in differentiated cultures. In undifferentiated THP-1 cells, low CD4 expression significantly reduced the susceptibility of the cells to infection with the R5 HIV-1(BaL) isolate, whereas a PMA-induced decrease in CD4 expression reduced permissiveness of the cells to the X4 HIV-1(IIIB) isolate. Thus, cell surface CD4 plays a primary role in determining how efficiently THP-1 cells can be infected with the X4 and the R5 isolates.     

辣椒来源外泌体样纳米囊泡通过ERK1/2通路拮抗巨噬细胞向泡沫细胞转化

目的]研究辣椒来源外泌体样纳米囊泡(CDELN)抑制氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导THP-1源性巨噬细胞泡沫化的作用机制。 [方法]通过组织破碎、差速/超速离心及蔗糖密度梯度离心等步骤,分离提纯CDELN。利用ox-LDL刺激THP-1源性巨噬细胞24 h建立泡沫细胞模型,并进一步研究CDELN对巨噬细胞泡沫化的作用及其机制。采用激光共聚焦显微镜检测THP-1源性巨噬细胞对CDELN和人DiL标记乙酰化低密度脂蛋白(DiL-ac-LDL)的摄取;采用油红O染色检测细胞内胆固醇含量,通过分析细胞油红O染色阳性面积评估细胞内脂质累积影响;RT-qPCR和Western blot检测清道夫受体A(SRA)、脂肪酸转运蛋白(CD36)、凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)、ATP结合盒转运体A1/G1(ABCA1/G1)以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路p-ERK、p-p38 MAPK和p-c-Jun的mRNA和蛋白表达水平。 [结果]CDELN是大小均一、具有双层膜结构、富含蛋白质和核酸的外泌体样纳米囊泡,能被巨噬细胞摄取。DiL-ac-LDL摄取实验提示CDELN可抑制巨噬细胞的胆固醇摄取。油红O染色实验提示CDELN可减轻ox-LDL诱导下的胞内胆固醇蓄积。RT-qPCR及Western blot显示,CDELN能够显著降低ox-LDL诱导的THP-1源性巨噬细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)、SRA、CD36、LOX-1的mRNA水平,以及降低p-ERK、SRA、CD36、LOX-1蛋白水平。加入p-ERK激动剂Yoda1后,CDELN的保护作用被明显逆转。[结论]CDELN可显著抑制巨噬细胞泡沫化,该作用可能与抑制MAPK通路ERK1/2的磷酸化水平有关。     

Amphotericin B induces expression of genes encoding chemokines and cell adhesion molecules in the human monocytic cell line THP-1

Amphotericin B is known to elicit immunomodulatory effects on neutrophil, monocyte, and lymphocyte function. It also has been shown to induce the release of proinflammatory cytokines from human monocytes and macrophages. Release of these cytokines has been associated with the infusion-related toxicity observed after administration of this drug. The present study demonstrates that amphotericin B increases mRNA for the chemokines interleukin (IL)-8, monocyte chemoattractant protein (MCP)-1, and macrophage inflammatory protein (MIP)-1beta, as well as the cell adhesion molecules intercellular adhesion molecule (ICAM)-1 and CD44 in the human monocytic cell line THP-1. Amphotericin B increased the concentrations of IL-8, MCP-1, and MIP-1beta in a dose-dependent fashion. Amphotericin B also induced expression of ICAM-1 but not CD44 in these cells. Production of these proteins in response to amphotericin B may play a role in the immunomodulatory activity and toxicity of this antifungal agent.