三七皂苷Rg1对大鼠脑缺血再灌注损伤中BDNF mRNA含量的影响

目的:探讨三七皂苷Rg1对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤大脑组织中脑源性神经营养因子(brain-de-rived neurotroph ic factor,BDNF)mRNA表达的影响。方法:雄性SD大鼠36只,随机分为脑缺血再灌注模型组、药物治疗组(100 mg/kg)和阳性药物对照组(尼莫地平,1 mg/kg),采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,各组分别于术后1、3、5天随机取4只大鼠处死后取出脑组织。提取脑组织的总RNA,进行RT-PCR扩增BDNFmRNA特异性片段,构建重组质粒并测序。以倍比稀释后的重组质粒作为阳性标准模板,使用Taqm an探针法对BDNF mRNA进行实时定量PCR检测,分析各组大鼠脑组织中BDNF mRNA的变化。结果:与模型组及阳性对照组相比,三七皂苷Rg1组能明显改善脑缺血的神经缺失症状,并在各时间段均能上调脑缺血再灌注损伤大鼠的脑组织中BDNF mRNA的含量(P<0.05)。结论:三七皂苷Rg1通过上调大鼠脑缺血再灌注损伤时脑组织中BDNF mR-NA的含量,促进脑组织内BDNF蛋白的合成,BDNF与其特异性受体TrkB相结合,产生相应的效应分子而对缺血神经元起保护作用,从而发挥其对脑缺血损伤的治疗作用。     

三七皂苷Rg1对大鼠脑缺血再灌注损伤后海马BDNF mRNA表达的影响

现代药理研究证实,三七总皂苷对多种动物脑缺血及再灌注损伤有良好的保护作用。本实验旨在从分子水平上探讨三七皂苷Rg1对脑缺血再灌注损伤的保护作用及其作用机理。1材料与方法1.1药品来源三七皂苷Rg1单体由昆明制药厂提供,纯度>95,为白色粉末状。配制成2的浓度备用。尼莫地平注射液为德国拜耳公司生产,批号:BXNZAG1,规格:50mL∶10mg。1.2实验动物及分组♂SD大鼠36只,体重280~320g,由昆明医学院动物科提供,合格证号:SCXK(滇)2005-0004。随机将大鼠分为脑缺血再灌注(middle cerebral artery occlu-sion/reperfusion,MCAO/R)模型组(…     

三七总皂苷对大鼠脑缺血再灌注损伤保护研究

目的：观察三七总皂苷（PNS）对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法：采用栓线阻断大鼠大脑中动脉血流制备脑缺血模型,进行神经病学体征观察,TTC染色测定缺血侧大脑脑梗死面积。另取大鼠分别测定颈总动脉血栓形成时间和血小板聚集率。结果：与模型组相比,脑梗死面积缩小,大鼠神经功能缺损症状得到不同程度的改善。与空白组相比,血栓形成时间延长,血小板聚集率下降。结论：三七总皂苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有明显的保护作用。     

牛磺酸对降低大鼠脑缺血再灌注损伤中细胞凋亡的作用

牛磺酸（ｔａｕｒｉｎｅ，Ｔａｕ）对脑缺血再灌注神经元损伤具有保护作用，其机制尚不清楚。近年，研究提示细胞凋亡是脑缺血损伤的重要形式。本实验通过建立全脑缺血模型，观察Ｔａｕ保护性治疗后细胞凋亡的变化，证明了Ｔａｕ能够降低脑缺血中细胞凋亡的发生，为在脑缺...     

三七皂甙单体Rg1对心肌细胞膜钙离子通道的影响

目的 :探讨Rg1对豚鼠心肌细胞膜L 型电压依赖性钙通道的影响。方法 :采用标准全细胞膜片钳技术。结果 :在保持电位 -40mV ,细胞去极化至 4 0mV ,刺激频率 0 .5Hz,时程 1 5 0ms条件下Rg11 0 μmol·L- 1和 30 μmol·L- 1对BayK86 4 4和Nifedipine敏感的钙内向电流均无明显影响 (P >0 .0 5 ,n =5 )。结论 :Rg1对L 型钙通道无抑制作用     

三七总皂苷对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用及机制的实验研究

目的：探讨三七总皂苷注射液对局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法：40只Wistar大鼠被随机分为4组：假手术组、缺血再灌注损伤模型组、尼莫地平对照（Nim）组、三七总皂苷注射液处理组（PNS）。建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型，对脑水肿和脑梗死进行测量，并采用硫代巴比妥酸盐法测定MDA含量、邻苯三酚自氧化法测定SOD活性。结果：PNS组与模型组比较，脑组织含水量减少（P〈0．01），脑梗死面积显著减小（P〈0．05）；SOD活力显著升高（P〈0．05），MDA含量显著降低（P〈0．05）。结论：MDA是反映组织损伤程度的物质、SOD是体内重要的内源性保护物质，三七总皂苷注射液可降低缺血脑组织MDA的含量、增加SOD活性而发挥对脑的保护作用。     

中药单体对脑缺血再灌注损伤保护的实验研究进展

中医药在对脑缺血再灌注损伤的干预方面具有多靶点、多向调节的作用。文章从脑缺血再灌注后神经元超微结构变化、脑血流量改变、钙离子超载、炎症反应、兴奋性氨基酸神经毒性、一氧化氮脑神经毒性和保护作用、自由基损伤和氧化作用及神经元凋亡相关基因的表达八个方面,就近几年中药单体对脑缺血再灌注损伤干预的实验研究现状予以综述,并对存在的问题进行讨论。     

人参皂苷Rg1对脑缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障的保护作用

目的 研究人参皂苷Rg1对大鼠脑缺血再灌注损伤后血脑屏障(blood brain barrier, BBB)的保护作用及其可能的机制。方法 将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、人参皂苷Rg1低剂量组(10 mg·kg^-1)、中剂量组(20 mg·kg^-1)、高剂量组(40 mg·kg^-1)和阳性药依达拉奉组(10 mg·kg^-1)。采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,于拔栓后立刻尾静脉注射给药,模型组和假手术组给予等量生理盐水。再灌注24h后,采用Zea Longa法进行神经功能缺损评分,尼氏染色观察缺血后皮层内神经元死亡情况,伊文思蓝(Evans blue, EB)染色评估BBB通透性,透射电镜验证人参皂苷Rg1对BBB超微结构的保护作用,免疫印迹(Western blot)检测闭锁小带蛋白1(zonula occludens 1,ZO-1)、闭锁蛋白(occludin)、基质金属蛋白酶-2 (matrix metalloproteinase-2, MMP-2)、基质金属蛋白酶-9 (m...     

三七皂甙Rg1对脂多糖诱导的大鼠肝细胞损伤的防护作用

目的探讨脂多糖诱导大鼠肝细胞的损害特点,并探讨三七皂甙Rg1抗肝细胞损害的保护作用。方法用胶原酶灌流法分离肝细胞。脂多糖诱导大鼠肝细胞损害,透射电镜观察肝细胞形态学的变化,DNA凝胶电泳观察其生化变化,用单细胞凝胶电泳法(SCGE)进一步探讨肝细胞损害的特点,并探讨三七皂甙Rg1对肝细胞损害的保护作用。结果由脂多糖诱导的肝细胞在形态上表现出染色质凝聚、凋亡小体形成等凋亡特征,生化方面表现出典型的DNA梯度,此过程可被凋亡抑制剂Quinaceine抑制。用SCGE法检测出,肝细胞凋亡和死亡数量与脂多糖的诱导时间有明显的相关性。在此基础上,观察到三七皂甙Rg1可抑制肝细胞凋亡和坏死,其抑制效果与Quinaceine无明显差异。结论三七皂甙Rg1可显著抑制肝细胞凋亡和坏死,是防治肝细胞损害的良好药物。     

三七皂苷Rg1对大鼠脑缺血-再灌注损伤的保护作用及机制探讨

目的探讨三七皂苷R g1对局灶性脑缺血-再灌注损伤大鼠大脑皮质中脑源性神经营养因子(BDNF)阳性蛋白的水平和阳性神经元数目是否具有上调作用。方法选取成年雄性SD大鼠60只,随机分为脑缺血-再灌注模型组、三七皂苷R g1高、中、低剂量(200、100、50 m g/kg)组和阳性对照(尼莫地平,1 m g/kg)组,采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血-再灌注模型,各组ig给药并分别于给药后1、3、7 d随机取4只大鼠,以灌注法取脑组织,冰冻法切片,免疫组织化学ABC法染色,用高清晰度彩色病理图文报告分析系统测量、分析各组大鼠大脑皮质中BDNF阳性蛋白的水平和阳性神经元数目的变化,并观察大鼠脑缺血-再灌注后的神经功能缺失症状。结果与模型组相比,三七皂苷R g1高、中、低剂量均能明显改善脑缺血-再灌注的神经功能缺失症状,并能上调大鼠脑缺血-再灌注损伤的大脑皮质中BDNF阳性蛋白的水平和阳性神经元数量(P<0.05);各剂量的作用强于或相当于阳性对照。结论三七皂苷R g1能上调BDNF阳性蛋白的表达,通过BDNF对脑缺血-再灌注神经元损伤所起的保护作用,从而发挥其对脑缺血的治疗作用。     

三七皂甙Rg_1及Rb_1对离体大鼠肝细胞损害的保护作用

目的:探讨三七皂甙 Rg_1及 Rb_1对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)引起急性肝损害的保护作用。方法:用胶原酶原位灌流法分离肝细胞,用透射电镜观察肝细胞形态学变化,用 Fura-2-AM 测定细胞内游离钙离子浓度。用[~3H]油酸标记的生物膜法测定分泌型磷脂酶 A_2(secretory phospholipase A_2,sPLA_2),用ELISA 法检测前列腺素 E_2(PGE_2)的活性,用 RT-PCR 检测 sPLA_2基因表达。结果:三七皂甙 Rg_1、Rb_1能显著抑制 LPS 所致的肝细胞凋亡与坏死,明显抑制 LPS 引起的胞内 Ca~(2+)超载,抑制 sPLA_2的活性、PGE_2水平和 sPLA_2基因的表达。结论:三七皂甙 Rg_1、Rb_1能显著抑制急性肝损害可能与其对钙的拮抗和对 sPLA_2的抑制作用有关。     

三七总皂苷抗缺血再灌注损伤机制研究进展

三七总皂苷(panax notoginseng saponins PNS)是中药三七主要有效活性成分,具有抗缺血再灌注(ischemia-reperfusion injury I/R)损伤作用。近年研究表明主要通过抑制炎症反应、抗氧化应激、阻滞细胞内钙超载、改善能量代谢、减少细胞凋亡等途径保护组织器官再灌注损伤。现对三七总皂苷的具体成分、抗I/R损伤作用机制进行系统的总结和综述。     

三七总皂苷注射液对脑出血大鼠脑水肿的影响

目的探讨活血化瘀中药三七总皂苷超早期治疗大鼠出血性中风的疗效。方法采用胶原酶法制备高血压脑出血模型。60只大鼠随机分为5组（假手术组、模型组及三七总皂苷高、中、低剂量组）,每组12只;造模后4h开始每12h腹腔注射药物或生理盐水1次,共5次。于造模后24h、72h,各组大鼠测脑组织含水量,钠离子、钾离子含量,脑内血肿直径。结果三七总皂苷治疗各组大鼠的神经缺损症状加重（P〈0．05）,出血侧皮质及基底节脑水含量及钠离子含量较模型组均增加（P〈0．05）,钾离子含量较模型组减低（P〈0．05）;三七总皂苷各组治疗后血肿直径较脑出血模型组变小（P均〈0．05）。结论三七总皂苷超早期治疗大量脑出血,可加剧早期脑水肿,引起大鼠神经功能缺损计分增加,但有利于加速治疗后血肿的吸收。大量脑出血超早期应用三七总皂苷治疗应慎重。     

三七总皂苷对大鼠心肌肥厚的保护作用

目的研究三七总皂苷(total sapon ins of Panax notoginseng,PNS)对异丙肾上腺素所致大鼠心肌肥厚的保护作用。方法用异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)5 mg.kg-1.d-1,sc,连续7 d,建立大鼠心肌肥厚模型。造模第2天开始给大鼠腹腔注射PNS25和50 mg.kg-1.d-1,连续14 d,测定全心重量指数(HW/BW),左心室重量指数(LVW/BW即LVI);采用试剂盒用分光光度法检测左心室心肌组织中羟脯氨酸(Hyp)和一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NDS)活力;用放免分析法检测左心室心肌组织中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量。结果ISO模型组大鼠的HW/BW,LVI明显升高;左心室Hyp、AngⅡ含量增高;NO水平下降,诱生型NOS(iNOS)活力显著升高,结构型NOS(cNOS)活力显著降低。PNS能明显提高心肌组织NO水平和cNOS活力,降低胶原的含量及iNOS活力,抑制AngⅡ产生,使HW/BW及LVI下降,抑制心肌肥厚。结论PNS对ISO所致大鼠心肌肥厚具有保护作用。     

三七总皂苷对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护机制研究

目的:探讨三七总皂苷对脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法:SD大鼠分成假手术组,模型组,三七总皂苷组。模型组和三七总皂苷组采用线栓法建立大鼠大脑中动脉局灶缺血再灌注损伤模型,三七总皂苷组在缺血前15 min和缺血后6 h分别ip三七总皂苷100 mg.g-1,模型组ip等量生理盐水。术后24 h评价神经行为学变化,测定脑梗死体积,脑组织中伊文思蓝含量及白介素-β(IL-1β),肿瘤坏死因子α(TNF-α),白介素-6(IL-6),白介素-8(IL-8)水平。结果:三七总皂苷可有效降低脑缺血再灌注损伤大鼠的脑梗死体积,明显减轻脑缺血区血脑屏障破坏的程度。三七总皂苷组脑组织中细胞因子及伊文思蓝的含量较缺血再灌注组显著降低(P<0.05)。结论:三七总皂苷对脑缺血再灌注损伤有显著的脑保护作用,其作用机制与降低脑缺血再灌注损伤中脑部细胞因子的表达和降低血脑屏障通透性有关。     

乙酰葛根素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的抗脂质过氧化作用

 目的探讨异黄酮类化合物乙酰葛根素对脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法采用大脑中动脉阻塞法(MCAO)制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。测定脑组织超氧化物歧化酶活性、丙二醛的含量和总抗氧化能力,并进行神经生物学评分。结果乙酰葛根素能使脑缺血大鼠的神经功能缺损评分明显低于缺血再灌组(P<0.01)。乙酰葛根素能明显降低缺血再灌注损伤后脑组织中的丙二醛含量,提高超氧化物歧化酶活性和总抗氧化能力。氯化三苯四氮唑染色显示,缺血再灌组在大脑皮质、基底节等均出现梗死灶。乙酰葛根素对缺血性脑梗死有改善作用。结论乙酰葛根素具有脑保护作用,其作用机制可能与抗氧自由基、抗脂质过氧化作用有关。     

三七总皂苷对小鼠巨噬细胞炎性反应的影响

目的:观察三七总皂苷(PNS)对小鼠巨噬细胞炎性反应的治疗作用,同时探讨其可能机制。方法:通过蛋白质免疫印迹实验、实时PCR法、酶联免疫吸附试验,对照研究PNS对小鼠巨噬细胞系RAW 246.7细胞中炎性反应调控因子过氧化物酶体增殖物激活受体-α(PPAR-α)以及其下游调控的炎性反应递质肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)和重组人巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF),白细胞介素6(IL-6),炎性反应相关氧化因子诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和环氧化酶-2(COX-2)表达的影响。结果:小鼠巨噬细胞炎性反应模型制备后TNF-α、CRP、M-CSF、IL-6、iNOS及COX-2水平明显上调,三七总皂苷给药后,细胞炎性反应递质与造模组比较有显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:三七总皂苷可明显抑制小鼠巨噬细胞炎性反应效应,其作用机制可能通过激活调控因子PPAR-α实现。     

三七总皂苷对顺铂肾损害大鼠的保护作用

目的:应用血清代谢组学方法探讨三七总皂苷(PNS)对早期的顺铂肾损害大鼠的保护作用。方法:顺铂组大鼠单剂量腹腔注射顺铂,PNS干预组大鼠注射顺铂后再腹腔注射PNS,每天1次。24 h后,评价大鼠肾功能,苏木精-伊红染色(HE)观察肾脏组织病理学的改变,并使用核磁共振代谢组学技术进行血清代谢组学的检查。结果:PNS可降低血清肌酐(SCr),血尿素氮(BUN)的浓度和改善肾组织病理损伤。另外,血清标本的主成分分析(PCA),偏最小二乘法判别分析(PLSDA)和正交偏最小二乘法判别(OPLS-DA)分析显示,顺铂模型组,PNS干预组均与正常组有显著的区分,而顺铂模型组与PNS干预组之间有部分重叠。与正常组比较,顺铂模型组和PNS干预组的丙酮,n-乙酰糖蛋白信号,丙酮酸,脂质和极低密度脂蛋白(VLDL)表达降低,而葡萄糖、缬氨酸和酪氨酸的表达升高。而且,顺铂模型组的乳酸表达较PNS干预组高。另外,正常组和PNS干预组大鼠苯丙氨酸的表达较顺铂模型组高,而酪氨酸的表达较顺铂模型组低。差异代谢物涉及的代谢通路主要有戊糖磷酸途径、糖酵解/糖异生途径、丙酮酸途径等与能量代谢相关的通路。结论:PNS对顺铂肾毒性有保护作用,其保护机制可能和逆转顺铂肾损害引起的代谢紊乱尤其是能量代谢障碍有关。     

西洋参茎叶总皂苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤后FOXO3a/Bim信号通路的影响

目的:探讨西洋参茎叶总皂苷(PQS)对大鼠心肌缺血再灌注损伤后FOXO3a/Bim信号通路的影响。方法建立心肌缺血再灌注模型(IR组),心肌缺血再灌注+PQS预处理组(IR+P)在术前3 d腹腔注射PQS,假手术组(S组)仅接受假手术。再灌注24 h后TUNEL法检测心肌细胞凋亡、生化指标测定、免疫组化和Western blots检测心肌FOXO3a,p-FOXO3a和Bim蛋白表达,实时荧光定量PCR检测心肌Bim mRNA表达。结果:TUNEL结果显示,与S组(0.6±0.0)相比,IR组(23.1±3.7)和(IR+P)组(12.4±3.1)凋亡率明显升高(P<0.01),且(IR+P)组明显低于IR组(P<0.01)。IR组和(IR+P)组心肌SOD明显低于S组(P<0.01),且(IR+P)组明显高于IR组(P<0.01);IR组和(IR+P)组心肌MDA、CK、LDH高于S组(P<0.05或P<0.01),且(IR+P)组明显低于IR组(P<0.05或P<0.01)。免疫组化和Western blots结果发现,三组心肌组织FOXO3a蛋白表达差异没有统计学意义(P>0.05);IR组和(IR+P)组p-FOXO3a蛋白明显低于S组(P<0.01),(IR+P)组高于IR组(P<0.01);IR组和(IR+P)组Bim蛋白明显高于S组(P<0.05或P<0.01),(IR+P)组低于IR组(P<0.05或P<0.01)。实时荧光定量PCR结果显示,与S组比较,IR组和(IR+P)组Bim mRNA明显升高(P<0.01),(IR+P)组低于IR组(P<0.01)。结论西洋参茎叶总皂苷可能是通过基因转录和蛋白质翻译水平调节FOXO3a/Bim信号通路对心肌缺血再灌注损伤起到保护作用。     

伴生物质对三七总皂苷喷雾干燥适应性的影响研究

目的探索伴生物质对三七总皂苷喷雾干燥适应性的影响。方法对伴生物三七总皂苷Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ、Ⅶ分别采用喷雾干燥,以样品收率、含水率,以及三七总皂苷含量为考察指标,结合样品外观性状进行综合评价其对相对密度及雾化器转速的适应性。结果不同伴生物质组成三七总皂苷喷雾干燥工艺的最佳工艺参数差异较大,且所得产物的定性、定量指标也有较大差异。结论伴生物质对喷雾干燥的适应性影响较大。