血小板GP Ⅱ_b/Ⅲ_a受体之抗体在冠心病之应用

前言 过去数年来,血栓溶解疗法(thrombolytic therapy)已使急性心肌梗塞的治疗有了突破性的进展。但是治疗后仍有许多如心肌缺氧、心肌再梗塞以及冠状动脉再阻塞等问题,仍未能完全获得解决。 根据许多研究显示,由血小板为主成份所形     

口服维拉帕米的抗凝作用──抑制血小板膜糖蛋白Ⅱ_b／Ⅲ_a受体与血小板功能

选择冠心病稳定型心绞痛病人２６例，口服维拉帕米１８０ｍｇ／日２周，采用竞争性酶联免疫法测定血小板膜糖蛋白Ⅱｂ／Ⅲａ（ＧＰⅡｂ／Ⅲａ）受体分子数并分析其服药前后变化与血小板功能变化关系。结果显示：服药２周后血小板ＧＰⅡｂ／Ⅲａ．分子数明显减少（３９１９６±３４１７对８２４８７±５２８和４７８６１±４７９６对４０７４９±２５６２分子数／血小板，Ｐ＜０．００５和Ｐ＜０．００１）．二者均与血小板粘附率变化差值呈良好相关（Ｐ＜０．００１）。本研究说明口服常规剂量的维拉帕米能降低血小板膜ＧＰⅡｂ／Ⅲａ。受体分子数，具有抑制血小板功能作用。     

水蛭注射液对大白鼠血小板粘附和血小板聚集功能的影响

目的　探讨水蛭注射液对大白鼠血小板粘附性和聚集性的影响。方法　采用大白鼠 2 4只 ,随机分成两组 ,实验组给药 ,对照组以实验组同样的方法和剂量给予生理盐水 ,5d后由颈总动脉取血 ,做血小板粘附性和聚集性试验。结果　水蛭注射液对大鼠血小板粘附性和聚集性具有显著的抑制作用 ,实验组与对照组抑制率有显著的统计学意义 (P <0 0 0 1)。结论　水蛭注射液能够抑制大白鼠血小板的粘附和聚集。     

血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa与心血管疾病的关系

<正>血小板膜糖蛋白在血小板黏附聚集和释放反应中起着重要作用,当血小板受刺激活化时,血小板膜糖蛋白发生改变。血小板聚集主要取决于GPⅡb/Ⅲa复合体与Fs,vWF,纤维连接蛋白和体外连接蛋白的潜在相互作用。血小板聚集除与GPⅡb/Ⅲa受体数量有关外,主要取决于其亲和力的高低。GPⅡb/Ⅲa可直接反应血小板活化的状态,其分子数量增高成为血小板黏附性增高的重要原因。研究发现,血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa与血栓性疾病尤其是心血管疾病的发生发展有密切关系,成为某些疾病诊断的有效临床指标。     

中药水蛭素对微循环及体液免疫的影响

目的研究中药水蛭素的作用机制,为临床提供理论依据。方法分别取小鼠44只、48只,随机分成4组,每组11只、12只。模型对照组给予生理盐水,阳性对照组给予活化丹,实验组分别给予不同剂量的中药水蛭素。连续灌胃用药5天、8天,小鼠尾静脉注射垂体后叶素使血流速度减慢,腹腔注射绵羊红细胞(SRBC)进行免疫。取血、离心处理后,显微视像循环仪测定小鼠耳廓动脉的血流变化,分光光度计测定HC50值。结果中药水蛭素能加快小鼠耳廓的血流速度,提高小鼠血清溶血素抗体的水平。结论中药水蛭素具有促进微循环的作用,同时对小鼠的体液免疫具有显著的影响。     

甘油对毕赤酵母高密度发酵表达重组水蛭素Ⅱ的影响

目的:考察甘油对毕赤酵母生长和重组水蛭素Ⅱ表达的影响。方法:在摇瓶和10L发酵罐中用含有不同浓度甘油的培养基培养毕赤酵母,测定毕赤酵母的生长和重组水蛭素Ⅱ的表达。结果:发酵培养基中初始甘油浓度为5 g/L时,毕赤酵母生长速度明显加快;补料过程中甘油浓度大于70 g/L时,毕赤酵母生长受到抑制。与不加甘油相比较,诱导表达期维持培养基中甘油浓度在5 g/L以下,重组水蛭素表达可提前4 h,诱导30 h其活性达13 000 ATU/mL,比仅用甲醇诱导时效价提高了7.7%。结论:降低初始培养基中甘油浓度有利于毕赤酵母生长,补料过程中培养基甘油浓度应维持在抑制毕赤酵母生长的浓度之下,诱导阶段培养基中少量的甘油有利于水蛭素的表达。     

丹参素对血小板聚集性及血小板膜流动性的影响

丹参素具有明显抑制由凝血酶或ADP诱导的血小板聚集作用。为进一步探索丹参素仰制血小板聚集的分子机制,本文用荧光探剂DPH标记血小板膜脂,借助荧光偏振技术,监测丹参素对血小板膜脂质流动性的影响。实验结果表明:抑制血小板聚集剂量的丹参素,能明显升高血小板膜的流动性。提示丹参素治疗冠心病有效,可能与纠正冠心病患者血小板膜的分子缺陷,增加血小板膜的流动性有关。     

水蛭及水蛭素对大鼠系膜细胞外纤维连接蛋白和Ⅳ型胶原影响的比较研究

目的 探讨水蛭、水蛭素对大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)外纤维连接蛋白和Ⅳ型胶原含量的影响.方法 应用ELESA法测定培养细胞上清液纤维连接蛋白(FN)和Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)的含量.结果 水蛭和水蛭素均可降低FN和Col-Ⅳ的含量,但水蛭的作用弱于水蛭素(P<0.01).结论 水蛭素在抑制体外培养的大鼠GMCs产生FN和Col-Ⅳ的作用方面强于水蛭.     

水蛭素对脓毒症大鼠凝血功能障碍影响的实验研究

目的 探讨水蛭素对脓毒症大鼠凝血功能障碍的影响。方法 将75只大鼠随机分为假手术组、模型组和水蛭素组。除假手术组外,其余各组以盲肠结扎穿孔的方法建立脓毒症大鼠模型。术后取大鼠静脉血样本,检测各组及各时间点的常规凝血功能指标和凝血与血小板功能分析仪参数,取大鼠肺和回肠组织进行病理切片观察,采用方差分析各组的凝血指标,并观察各组大鼠48h的生存率。结果 术后48h,假手术组、模型组和水蛭素组大鼠的存活率分别为100%、10%和50%。术后6h:水蛭素组大鼠的血小板计数较模型组显著降低;模型组大鼠的活化凝血时间(activated clotting time, ACT)较假手术组、水蛭素组明显缩短(F=7.190,P<0.05);模型组、水蛭素组大鼠的凝血速率(clot rate, CR)值较假手术组显著上升(F=4.549,P<0.05)。术后12h:模型组和水蛭素组大鼠的血小板计数较假手术组明显降低(F=4.780,P<0.05);模型组大鼠的ACT值和CR值明显延长(F=4.863、12.923,P<0.05);水蛭素组大鼠的CR值上升;模型组、水蛭素组大鼠的C...     

水蛭素对实验大鼠血流变学的影响

目的观察水蛭素对急性血瘀大鼠血液流变学的影响。方法 SD雄性大鼠100只,随机分为水蛭素组（25只）、肝素钠对照组（25只）、模型对照组（25只）和空白对照组（25只）,各组均采用尾静脉给药。给药1周后,除空白对照组外,其余各组大鼠均采用冰水游泳加注射肾上腺素的方法制作成急性血瘀模型,然后颈动脉采血,观察各组大鼠血液流变学情况的差异。结果水蛭素组各项血流变学指标均优于模型对照组,与肝素钠组相当。结论水蛭素具有改善急性血瘀大鼠血液流变学指标的作用。     

重组水蛭素Ⅲ的分离纯化与鉴定

目的 :从分泌型重组水蛭素 Ⅲ 基因工程菌发酵液中分离纯化水蛭素 Ⅲ。 方法 :将发酵液经离心、大孔吸附树脂处理后 ,用DEAE- celluloseDE5 2离子交换层析 ,进而用HPLC反相层析。结果 :总收率达 5 0 %以上 ,纯度达 99.9% ,比活力达 90 0 0ATU/mg。结论 :分离纯化系统令人满意 ,回收率较高。     

血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa基因多态性与血栓性疾病

动脉血栓性疾病的高发病率和病死率给社会带来沉重的负担,其主要并发症包括冠状动脉综合征,缺血性卒中、外周血管闭塞性疾病等。在急性血栓形成和慢性动脉粥样硬化进程中血小板起着重要作用。当血管内皮损害暴露内皮下组分时血小板就会被活化,同时血小板膜糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa受体被激活,发生构象改变,从而与胶原、血管假性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)、纤维蛋白原和纤维连接蛋白结合,发生血小板的黏附和聚集,此过程为血小板聚集、黏附和血小板血栓形成的最终关键步骤。GPⅡb/Ⅲa基因多态性可能导致血小板激活和聚集的改变,影响…     

冠心病患者血小板膜P选择素(CD62p)和GPⅡbⅢa(PAC-1)的变化及其临床意义

目的:探讨冠心病患者血小板膜P选择素(CD62p)和GPⅡbⅢa(PAC-1)的变化及其临床意义。方法:选择冠心病患者60例为观察组,同时选择健康人员60例为对照组,测量两组患者血小板膜P选择素(CD62p)以及GPⅡbⅢa(PAC-1)指标,分析冠心病患者出现的变化。结果:观察组患者同对照组患者比较而言,血小板膜PAC-1阳性百分率及平均荧光强度(Mean fluorescentintensity,MFI)明显增高。结论:血小板膜P选择素(CD62p)和GPⅡbⅢa(PAC-1)的变化在有无冠心病人群之中存在显著差异,对其进行检测能够在临床上识别同时预测易损斑块,从而及时采取有效的治疗措施,防止冠心病恶化进而降低冠心病患者的病残率以及病死率。     

用抗血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa单克隆抗体检测ITP自身抗体的临床应用

本文利用抗血小板膜糖蛋白Ⅱ、b、Ⅲa(GPⅡb、GPⅢa)单克隆抗体,采取酶联免疫双抗体夹心法分别检测了26例特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者血浆抗GPⅡb、GPⅢa自身抗体.结果显示3例抗GPⅡb阳性(约占11.5%),1例抗GPⅢa(约占3.8%),7例同时抗GPⅡb.GPⅢa(约占26.9%),阳性总数为11例(约占42.3%);且抗GPⅡb. GPⅢa阳性结果与血小板数无关.     

GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂RGDS对血小板聚集和胞浆游离钙的影响

[目的]探讨血小板GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂RGDS对血小板聚集和血小板[Ca2+]i的影响.[方法]比浊法测定PAG;采用Fura-3/AM荧光探针标记血小板胞浆钙离子,使用共聚焦显微镜观察单个血小板荧光强度的变化,计算机图像系统分析血小板[Ca2+]i的变化.[结果]凝血酶(0.03 U/mL)为激动剂时,血小板PAG(M)为(78.2±12.4)%.在所取的62.5～1 000μmol/L RGDS内的5种浓度下,RGDS可呈浓度依赖性地抑制凝血酶诱导的PAG(M).正常人静息血小板[Ca2+]i荧光强度值为376.1±70.5;凝血酶(0.03 U/mL)激动的血小板[Ca2+]i荧光强度值升高为977.9±108.8;GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂RGDS(250 μmol/L)对静息血小板的[Ca2+]i荧光强度值无抑制作用;GPⅡ b/Ⅲa受体拮抗剂RGDS(250μmol/L)作用于血小板后,凝血酶(0.03 U/mL)激动的血小板[Ca2+]i荧光强度值升高受到抑制,抑制率为(9.37±7.5)%.[结论]凝血酶(0.03 U/mL)可以引起血小板的聚集和血小板[Ca2+]i的升高.GP Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂RGDS可以抑制凝血酶(0.03 U/mL)引起的血小板聚集和[Ca2+]i的升高.     

水蛭素对大鼠急性心肌梗死后室性心律失常的影响

【目的】 探讨凝血酶的直接抑制剂重组双功能水蛭素对大鼠急性心肌梗死后室性心律失常的影响及相关机制&#65377;【方法】 将70只雄性SD大鼠随机分为10组:水蛭素(HIR)结扎前(HIR 0 min)组,HIR结扎后5 min(HIR 5 min)组, HIR结扎后10 min(HIR 10 min)组,HIR结扎后20 min(HIR 20 min)组,HIR结扎后30 min(HIR 30 min)组),和生理盐水(NS)对应的各时间组,即NS 0 min,NS 5 min,NS 10 min,NS 20 min,NS 30 min,最终每组7只&#65377;观察各组室性心律失常的发生情况,Evans法计量各组心梗面积及采用逆转录聚合酶链反应对各组缺血心肌组织的IP3R家族的三种亚型进行测定&#65377; 【结果】 水蛭素组发生室性心律失常的持续时间及心律失常评分较生理盐水组在结扎后5 ~ 20 min均减少(P < 0.05);IP3R家族的三种亚型均与心梗后室性心律失常持续时间呈正相关性;但IP3R2 mRNA在结扎后10 min及IP3R3 mRNA在结扎后10 min和20 min,HIR组较NS组下调(P < 0.05)&#65377; 【结论】 水蛭素有抗心梗后室性心律失常的发生作用,其机制可能为通过IP3R2和IP3R3实现的,而并非IP3R1&#65377;     

血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa及其受体拮抗剂与冠心病

血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa是血小板膜上的一种糖蛋白受体,在凝血过程中的血小板黏附和聚集中起关键作用,血小板激活导致GPⅡb/Ⅲa构型发生变化,继而使GPⅡb/Ⅲa受体与配体纤维蛋白原的结合加强,纤维蛋白原在相邻血小板分子间形成桥梁,导致血小板聚集的加速。GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂正是基于这一原理应用于冠心病的治疗中,临床实验已证实其在PTCA术后、不稳定性心绞痛、急性心肌梗死具有良好的疗效,研究GPⅡb/Ⅲa及其受体拮抗剂具有重要意义。因而,本文对GPⅡb/Ⅲa及其受体拮抗剂与冠心病作一简要阐述。     

水蛭素对大鼠缺血皮瓣血管生成的促进作用及机制

【摘要】目的 研究水蛭素对大鼠缺血皮瓣血管生成的促进作用及其可能机制。方法 取10只SPF级SD大鼠,分别于大鼠背部中线双侧制备缺血皮瓣模型,右侧皮下注射水蛭素2 ATU（实验组）,左侧皮下注射等量生理盐水（对照组）。分别于术后3、7 d,对皮瓣组织行HE染色,经免疫组织化学染色检测后计算血管密度值;术后7 d时,计算皮瓣成活率,用蛋白质免疫印迹法检测血管内皮细胞生长因子（VEGF）、血小板反应蛋白1（TSP l）、p38 MAPK及ERK1/2磷酸化表达情况。结果 HE染色显示,实验组术后3、7 d时皮瓣组织坏死较对照组明显减少,新生血管较对照组明显增多（P＜005）。与对照组比较,实验组术后7 d时皮瓣成活率明显增高（P＜001）。免疫组织化学染色结果显示,术后3 d对照组皮瓣组织表皮层、真皮层均出现明显坏死;术后7 d时,由于对照组皮瓣组织大面积坏死,未观察到成功染色的血管;实验组术后3、7 d时皮瓣组织均未见明显坏死区。实验组术后3、7 d时血管密度值较对照组明显增加（P＜001）,实验术后7 d时血管密度值明显高于术后3 d（P＜005）。实验组术后7 d时VEGF表达水平较对照组明显升高,TSP 1表达水平较对照组明显降低（P＜001）。与对照组比较,实验组术后7 d时p38 MAPK磷酸化表达水平明显降低,ERK1/2磷酸化表达水平明显升高（P＜005）。结论 水蛭素具有促进大鼠缺血皮瓣新生血管形成的作用,其作用机制可能在于诱导血管内皮生长促进因子VEGF的表达和下调血管内皮生长抑制因子TSP 1的表达,可能与p38 MAPK、ERK1/2信号通路密切相关。