瑞舒伐他汀抑制NF-κB活化下调LPS诱导小胶质细胞TNF-α表达的实验研究

目的 探讨瑞舒伐他汀能否通过抑制NF-κB活化下调LPS诱导的小胶质细胞TNF-α的表达.方法 将BV2细胞分为3组即对照组（Control组）、LPS组和瑞舒伐他汀＋LPS（Ros＋ LPS组）.在干预24小时后使用RT-PCR法和western blot法对BV2细胞TNF-α mRNA和蛋白的表达水平进行检测;并使用western blot法对细胞NF-κB p65磷酸化水平（Phospho-NF-κB p65/NF-κB p65比值）进行分析.结果 与Control组相比较,在LPS干预24小时后BV2细胞TNF-α mRNA和蛋白的表达水平以及phospho-NF-κB p65/NF-κB p65比值均明显升高,差异均有统计学意义（P均＜0.05）;但LPS组较Ros＋ LPS组TNF-α mRNA和蛋白的表达的升高以及Phospho-NF-κB p65/NF-κB p65比值的增加更加显著,差异均有统计学意义（P均＜0.05）.结论 瑞舒伐他汀可能通过抑制NF-κB的活化下调了小胶质BV2细胞TNF-α的合成和释放.     

铁对激活的小胶质细胞乳铁蛋白表达影响

目的探讨枸橼酸铁铵（FAC）对脂多糖（LPS）激活的大鼠小胶质细胞乳铁蛋白（Lf）表达影响。方法分别使用FAC、LPS、FAc＋LPS处理原代培养的大鼠小胶质细胞,应用酶联免疫吸附试验方法检测细胞上清液中Lf的含量;采用实时荧光定量PCR方法检测细胞LfmRNA的表达。结果与对照组相比较,LPS处理组U蛋白和mRNA表达水平均明显增高,差异有显著性（F=458．153、78．884,q=18．786、10．683,P〈O．05）;FAC＋LPS组Lf蛋白表达水平较LPS组明显增高,差异有显著性（q=12．831,P〈O．05）,但LfmRNA水平未见明显升高;FAC处理组与对照组相比较,Lf蛋白和mRNA表达水平差异无显著性（P〉O．05）。结论单独FAC不能引起小胶质细胞Lf的表达增高;LPS激活的小胶质细胞合成和释放Lf增多;高铁状态提高激活的小胶质细胞Lf蛋白的释放,但不影响其mRNA合成。     

脂多糖活化小鼠大脑小胶质细胞后炎性细胞因子的表达

目的采用细菌脂多糖（LPS）对原代培养的BALB/c小鼠大脑皮质小胶质细胞进行刺激,检测小胶质细胞IL-1bI、L-6和TNF-α等细胞因子的基因表达情况。方法分离纯化小胶质细胞,采用1μg/ml LPS刺激24h,再采用RT-PCR检测IL-1bI、L-6和TNF-a mRNA表达水平。结果体外培养的小胶质细胞经LPS刺激后,细胞因子IL-1bI、L-6和TNF-a mRNA表达水平明显上调。结论 LPS活化的小胶质细胞可产生大量的炎性细胞因子。     

丙泊酚对小胶质细胞炎症因子的影响及其机制研究

目的 探讨丙泊酚对小胶质细胞炎症因子的影响及其机制。方法 将小胶质BV-2 细胞分为对照组、丙泊酚组、脂多糖（LPS）组、LPS+ 丙泊酚组,对照组细胞加入PBS 液,丙泊酚组细胞加入丙泊酚30μmol/L,LPS 组细胞加入LPS 1μg/ml,LPS+ 丙泊酚组细胞加入丙泊酚30μmol/L+LPS 1μg/ml。采用MTT 比色实验测定细胞活性,采用酶联免疫吸附法测定细胞上清液中白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平,采用逆转录- 聚合酶链反应测定细胞p38MAPK 和TLR4mRNA 的表达,采用Western blot 检测细胞p38MAPK 和TLR4 蛋白表达量。结果 LPS 组和LPS+ 丙泊酚组小胶质细胞活性低于对照组和丙泊酚组（P <0.05）,LPS+ 丙泊酚组小胶质细胞活性高于LPS 组（P <0.05）;LPS 组和LPS+ 丙泊酚组小胶质细胞上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α 水平高于对照组和丙泊酚组（P <0.05）,LPS+ 丙泊酚组小胶质细胞上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α 水平低于LPS 组（P <0.05）;LPS 组和LPS+ 丙泊酚组小胶质细胞p38MAPK、TLR4 mRNA 和蛋白表达量高于对照组和丙泊酚组（P <0.05）,LPS+ 丙泊酚 组小胶质细胞p38MAPK、TLR4 mRNA 和蛋白表达量低于LPS 组（P <0.05）;丙泊酚组和对照组小胶质细胞各指标比较,差异无统计学意义（P >0.05）。结论 丙泊酚能抑制小胶质细胞过度活化和炎症反应,其机制可能与丙泊酚可下调TLR4-p38MAPK 信号通路有关。     

脂多糖对人肺微血管内皮细胞细胞骨架及TNF-α, IFN-γ表达的影响

摘 要 目地 探讨脂多糖 (lipopolysaccharide LPS) 直接诱导人肺微血管内皮细胞 (HPMVEC)后,细胞骨架的改变,肿瘤坏死因子α（TNF-α）、干扰素γ（IFN-γ）mRN的表达及细胞培养上清中TNF-α、IFN-γ的表达水平的改变。方法 HPMVEC生长至80 %以上融合时,加入LPS 以 500 ng/ml浓度刺激细胞分别至 0、4、6、8 h,经鬼笔环肽染色后采用激光共聚焦观察HPMVEC细胞骨架的变化。至预定时相点离心收集培养液上清,利用实时荧光定量RT-PCR法检测TNF-α、IFN-γ mRNA的表达,采用 ELISA方法测定细胞培养上清中TNF-α、IFN-γ的表达水平,并进行统计学分析。结果 发现LPS 刺激培养后,8h组细胞开始出现细胞骨架改变;4h组TNF-α、IFN-γ mRNA表达与0h组无差异（P>0.05）,6h组TNF-α、IFN-γ mRNA表达则高于0h组（P<0.05）,8h组TNF-α、IFN-γ表达高于0h组（P<0.05）;4h 组细胞培养上清TNF-α、IFN-γ的表达水平与0h组比较无差异（P>0.05）,6h 组细胞培养上清TNF-α、IFN-γ的表达水平与0h组比较升高（P<0.05）,8h组细胞培养上清TNF-α、IFN-γ的表达水平与0h组比较升高（P<0.05）。结论 表明细菌致病因子LPS能直接刺激HPMVEC使细胞结构发生改变,同时影响细胞因子( cytokine, CK)的分泌,使促炎因子TNF-α、IFN-γ分泌升高,参与肺损伤。这可能是LPS发挥其毒性作用诱发ALI/ARDS的一个重要途径。     

槐定碱预处理对LPS诱导RAW264.7细胞表达NF-κB的影响

目的观察槐定碱预处理对LPS诱导RAW264.7细胞NF-κB p65、TNF-α表达的影响,探讨槐定碱抗内毒素机制。方法培养RAW264.7细胞,分为空白对照组、槐定碱预处理对照组、LPS模型组、槐定碱预处理＋LPS组。各组处理完毕后5、30、60、120min,分别获取细胞与细胞培养液。Western Blot和RT-PCR分别检测细胞NF-κB p65蛋白与mRNA表达,放免法检测细胞培养液TNF-α含量。结果单独槐定碱对NF-κB p65以及TNF-α表达无影响;LPS模型组各时间点NF-κB p65 mRNA与蛋白以及TNF-α表达均显著高于空白对照组（P〈0.01）,且随LPS刺激时间延长而持续升高,至120min未见下降;槐定碱预处理＋LPS组NF-κB p65mRNA与蛋白及其下游TNF-α表达均较同时间点LPS模型组降低,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论槐定碱预处理可通过抑制LPS诱导的RAW264.7细胞的NF-κB p65表达及TNF-α分泌发挥抗炎作用。     

柿叶黄酮对同型半胱氨酸诱导小胶质细胞细胞因子表达的影响

目的：观察柿叶黄酮对同型半胱氨酸诱导的小胶质细胞表达白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响,并与银杏叶提取物EGb761进行比较。方法将体外培养的小鼠小胶质细胞（BV-2细胞）分成空白对照组、同型半胱氨酸组（Hcy）、Hcy＋EGb761组（100mg/L）和Hcy＋低、中、高（12.5、25、50μg/mL）剂量柿叶黄酮组,培养72h。应用RT-qPCR方法评价各组IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA表达,酶联免疫吸附法（ELISA）测定培养上清液中上述细胞因子的蛋白浓度。结果与空白对照组比较,同型半胱氨酸组细胞内IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA表达和细胞培养上清液中蛋白浓度明显增加（P〈0.05）;与同型半胱氨酸组比较,Hcy＋EGb761组和Hcy＋低、中、高剂量柿叶黄酮组各细胞因子mRNA表达及培养上清液中蛋白浓度均降低（P〈0.05）,尤其是高剂量柿叶黄酮组结果与Hcy＋EGb761组作用相似。结论柿叶黄酮能抑制同型半胱氨酸诱导小胶质细胞表达IL-1β、IL-6和TNF-α,在一定浓度条件下其作用不亚于银杏叶提取物。     

LPS刺激对大鼠视网膜小胶质细胞CD80、CD86和CD40表达的影响

目的 研究脂多糖(LPS)刺激对CD80、CD86、CD40在大鼠视网膜小胶质细胞上表达的影响,探讨视网膜小胶质细胞在视网膜和视神经病变中与T细胞活化的关系.方法 分离培养大鼠视网膜小胶质细胞并进行OX42染色鉴定,当细胞培养达80%融合状态时分为正常培养组和LPS刺激组.采用RT-PCR法检测两组细胞CD80、CD86和CD40 mRNA的表达,硝酸还原法和ELISA法检测两组细胞一氧化氮(NO)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的分泌量.结果 RT-PCR检测显示,LPS刺激组的视网膜小胶质细胞CD80、CD86和CD40 mRNA的表达较正常培养组显著增加,两组比较差异有统计学意义(均P<0.01).正常培养组的视网膜小胶质细胞有少量NO和TNF-α分泌,LPS刺激组的小胶质细胞培养上清液中NO和TNF-α的分泌量较正常组显著增加[(18.10±1.57)μmol/L vs (1.55±0.15)μmol/L,(51.07±4.30)pg/mL vs (2.37±0.31)pg/mL],两组比较差异有统计学意义(均P<0.01).结论 培养的大鼠视网膜小胶质细胞有共刺激分子表达,LPS刺激后表达上调,提示视网膜小胶质细胞可能与T细胞活化有关.     

LPS刺激对大鼠视网膜小胶质细胞CD80、CD86和CD40表达的影响

目的 研究脂多糖(LPS)刺激对CD80、CD86、CD40在大鼠视网膜小胶质细胞上表达的影响,探讨视网膜小胶质细胞在视网膜和视神经病变中与T细胞活化的关系.方法 分离培养大鼠视网膜小胶质细胞并进行OX42染色鉴定,当细胞培养达80%融合状态时分为正常培养组和LPS刺激组.采用RT-PCR法检测两组细胞CD80、CD86和CD40 mRNA的表达,硝酸还原法和ELISA法检测两组细胞一氧化氮(NO)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的分泌量.结果 RT-PCR检测显示,LPS刺激组的视网膜小胶质细胞CD80、CD86和CD40 mRNA的表达较正常培养组显著增加,两组比较差异有统计学意义(均P<0.01).正常培养组的视网膜小胶质细胞有少量NO和TNF-α分泌,LPS刺激组的小胶质细胞培养上清液中NO和TNF-α的分泌量较正常组显著增加[(18.10±1.57)μmol/L vs (1.55±0.15)μmol/L,(51.07±4.30)pg/mL vs (2.37±0.31)pg/mL],两组比较差异有统计学意义(均P<0.01).结论 培养的大鼠视网膜小胶质细胞有共刺激分子表达,LPS刺激后表达上调,提示视网膜小胶质细胞可能与T细胞活化有关.     

脂多糖对人肺微血管内皮细胞骨架及TNF-α和IFN-γ表达的影响

目的 探讨脂多糖 (LPS) 直接诱导人肺微血管内皮细胞 (HPMVEC)后细胞骨架的改变,肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)mRNA的表达及细胞培养上清液中TNF-α、IFN-γ的表达水平的改变.方法 HPMVEC生长至80 %以上融合时,加入LPS 以 500 ng/mL浓度刺激细胞分别至 0、4、6、8 h,经鬼笔环肽染色后采用激光共聚焦显微镜观察HPMVEC细胞骨架的变化.至预定时相点离心收集培养液上清液,利用实时荧光定量RT-PCR法检测TNF-α、IFN-γ mRNA的表达,采用 ELISA方法测定细胞培养上清液中TNF-α、IFN-γ的表达水平,并进行统计学分析.结果 LPS 刺激培养后,8 h组细胞开始出现细胞骨架改变;4 h组TNF-α、IFN-γ mRNA表达与0 h组差异无统计学意义(P>0.05),6 h组TNF-α、IFN-γ mRNA表达高于0 h组(P<0.05),8 h组TNF-α、IFN-γ表达高于0 h组(P<0.05);4 h 组细胞培养上清液TNF-α、IFN-γ的表达水平与0 h组比较差异无统计学意义(P>0.05),6 h 组细胞培养上清液TNF-α、IFN-γ的表达水平高于0 h组(P<0.05),8 h组细胞培养上清液TNF-α、IFN-γ的表达水平高于0 h组(P<0.05).结论 细菌致病因子LPS能直接刺激HPMVEC使细胞结构发生改变,同时影响细胞因子的分泌,使促炎因子TNF-α和IFN-γ分泌升高,参与肺损伤.这可能是LPS发挥其毒性作用诱发急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征的一个重要途径.     

甲亢伴周期性麻痹13例报告

周期性麻痹是以反复发作的骨骼肌松弛性瘫痪为特征的一组疾病,发作时大都伴有血清钾的变化,分为低钾性、正常血钾性和高钾性3种.低钾性中部分伴甲状腺功能亢进.我院于1996年1月～2005年12月共收治甲亢性周期性麻痹患者13例,现分析总结如下.     

4 468名中学生口腔龋齿调查

龋齿是口腔常见病,直接影响青少年的健康.为了了解石家庄市中学生龋病流行情况,便于有计划、有成效地开展口腔预防保健工作提供第一手资料,我们于2005年10月对石家庄市长安区4 468名中学生进行了龋齿调查,现报告如下.     

中青年急性脑梗死患者 UA、Hcy、LPA 水平变化

目的：探讨中青年急性脑梗死患者血尿酸（blood uric acid,UA）、血清同型半胱氨酸（homocysteine, Hcy）、溶血磷脂酸（lysophosphatidic acid,LPA）水平的变化。方法选择符合条件的中青年急性脑梗死患者（中青年急性脑梗死组）98例,中青年健康体检者（对照组）98例,检测2组的 UA、Hcy、LPA 水平并进行比较、分析。结果中青年急性脑梗死组 UA、Hcy、LPA 水平均明显高于对照组（P ＜0．01）;中青年急性脑梗死组高 UA、Hcy、LPA血症发生率也均明显高于对照组（P ＜0．01）。结论中青年急性脑梗死患者 UA、Hcy、LPA 水平升高,UA、Hcy、LPA 可能是中青年急性脑梗死患者的发病因素。     

273份蛋白阴性胆红素阳性尿液的管型分析

目的：观察干化学检验蛋白阴性胆红素阳性尿液沉渣中管型的阳性率和类型。方法选取干化学检测蛋白阴性胆红素阳性尿液样本273份,检验尿沉渣中管型的阳性率和类型。结果胆红素（＋）管型阳性率为2.4％,胆红素（＋＋）管型阳性率为6．8％,胆红素（＋＋＋）管型阳性率为14．2％。其中胆红素管型占80．9％,透明管型14．3％,颗粒管型4．8％。结论尿干化学检测蛋白阴性胆红素（＋＋）及以上管型阳性率明显升高,以胆红素管型为主。干化学蛋白阴性胆红素阳性尿液应联合显微镜检测,提高管型检测的准确性。     

129例附睾结核临床特点分析

目的：探讨附睾结核的临床特点和诊治方法,以提高附睾结核的诊治水平。方法回顾性分析附睾结核患者129例,分别从临床资料（包括发病情况、病程、发病部位、临床表现及查体）、实验室检查（包括尿液检查、其他检查）总结其特点。结果附睾结核临床最常见的症状是阴囊无痛性肿块或阴囊肿痛,左侧72例,右侧48例,双侧 9例。并发肺结核45例（34．8％）,不典型附睾结核66例（51．2％）。结论左侧较右侧更易发生附睾结核。附睾结核早期诊断困难,需综合分析临床表现、实验室检查及影像学检查。     

孕早期胎儿颈项透明带增厚对产前诊断的意义

目的：探讨胎儿颈项透明带（nuchal translucency,NT）增厚对产前诊断的意义,积累有价值的临床资料。方法选择接受常规产检的单胎孕妇,孕龄为11～13＋6周,经腹彩色多普勒超声检查胎儿 NT,NT≥3 mm 视为异常,收集74例异常病例为研究对象,追踪妊娠结局。结果在74例 NT 增厚的病例中,正常足月分娩56例,自然流产1例,原因不明死胎1例,因胎儿发育异常妊娠中期引产16例（其中染色体核型分析异常引产5例,器官异常引产11例）。74例 NT 增厚者有25例行介入性产前诊断,染色体异常8例,染色体异常率32．00％（8／25）,其中21-三体综合征 5例,18-三体综合征2例,13-三体综合征 1例,21-三体综合征占染色体异常的62．50％（5／8）。因器官异常引产的11例中,心脏畸形 5例,脑积水2例,先天性膈疝 1例,淋巴管囊肿 1例,全身水肿 1例,多囊肾 1例,先天性心脏畸形胎儿占所有胎儿畸形的45．45％（5／11）。结论 NT 增厚对于胎儿染色体异常及结构异常筛查有重要意义,NT 增厚胎儿不良妊娠结局风险增加。     

自体骨植骨修复膝关节置换术中胫骨缺损的临床研究

目的：观察自体骨移植修复膝关节置换术中胫骨平台截骨术后缺损的临床疗效。方法行全膝关节置换术及自体胫骨植骨术的胫骨近端骨缺损患者18例（22膝）。术中在胫骨平台标准截骨后,将不规则的缺损转变为平整的缺损,采用截骨获得的骨块,修剪至与缺损处相匹配,覆盖缺损处,恢复胫骨截骨面的解剖结构。结果术后随访12～32个月,平均28．5个月。术后膝关节畸形得到矫正,疼痛消失,美国膝关节协会评分（American Knee Society Knee Score,AKS）70～94分,平均（84．8±6．8）分,较术前明显提高。结论采用自体骨移植术重建胫骨平台稳定性的方法,简单、实用,术后膝关节功能及放射学复查结果良好,是一种较好的修复全膝关节置换术中胫骨平台骨缺损的处理措施。     

本刊关于录用稿件签单的规定

根据《中华人民共和国著作权法》等有关法律、法规的规定,为了扼制一稿两投(多投)、论文剽窃以及论文抄袭等学术不端行为,本刊决定对录用稿件实行签单程序,即凡本刊录用稿件均需由全体作者、通讯作者、在读硕(博)士研究生第一导师、第一作者所在单位共同签属《<河北医科大学学报>论文专有使用权授权书》。     

改良腮腺手术切口及美容处理60例效果观察

随着生活水平的提高,患者对手术质量的要求越来越高,尽管常规腮腺手术切口原则上选择相对隐蔽,但实际上仍不能避免较明显的"刀口"瘢痕,这给一些患者带来心理压力,尤其是年轻患者.因此,我们自1996～2004年对60例腮腺手术切口进行改良并辅以美容处理,效果明显,报告如下.     

品管圈在降低床旁交接班缺陷率中的应用

目的：探讨品管圈在降低床旁交接班缺陷率中的应用。方法由9名儿科护士组成品管圈小组,采用头脑风暴及柏拉图等科学方法,确立“降低床旁交接班缺陷率”为主题,应用床旁交接班缺陷查检表,连续15 d 对晨晚床旁交接班进行现况调查,分析造成床旁交接班缺陷的因素,采取有效措施进行持续质量改进。结果经过为期4个月的品管圈活动,床旁交接班缺陷率显著降低,由 活动 前 的 38．0％ 降 到 活动 后 的 16．70％,目标达成率是10．0％,进步率是56．0％。结论品管圈的应用能够有效地降低床旁交接班的缺陷率。