基于λ一级红波长补偿器与偏振光显微镜联合应用对木通类药材及其混淆品的生药学显微鉴别研究＊

目的 对显微鉴别3种视场（正常光明场、偏振光暗场、λ一级红波长补偿器与偏振光显微镜联合应用显微鉴别法）进行方法学研究，并基于该研究结果对市场上8种常见木通类药材及其混淆品（木通、三叶木通、白木通；小木通、绣球藤；粗齿铁线莲、钝萼铁线莲；关木通）进行生药学再研究，为显微鉴别技术提供新方法，也为市场上常见木通类药材及其混淆品的鉴定提供依据。方法 采用传统性状鉴别法、微性状鉴别法、正常光明场、正交偏振光暗场及λ一级红波长补偿器与偏振光显微镜联合应用显微鉴别法对比研究，结合大型图像拼接及实时景深扩展技术获取全息彩色影像数据。结果 建立了λ一级红波长补偿器与偏振光显微镜联合应用于木通类药材及其混淆品的微鉴别研究新方法；通过方法学研究获取了8种木通类药材及其混淆品的性状及精细结构微性状影像数据、药材横断面及粉末正常光明场、正交偏振光暗场及λ一级红波长补偿器与偏振光显微镜联合应用视场下全息彩色影像数据，结果显示木通类药材及其混淆品横断面特征具有差异较大。结论 木通类药材及其混淆品髓部微性状及断面维管束分布规律具有较大差异；λ一级红波长补偿器与偏振光显微镜联合应用适合木通类药材及其混淆品的显微鉴别，方法学研究结果表明正常光明场下获得的全息彩色影像数据可真实展示显微组织横切面完整信息，正交偏振光暗场下所获得的全息彩色影像数据可以突显双折性物质的植物组织构造及细胞内含物显微特征及分布规律，适于木化组织构造和结晶类细胞内含物存在部位的整体观察，缺点是非双折射性组织构造及内含物融入黑色背景，导致该部分形态学信息缺失，λ一级红波长补偿器与偏振光显微镜联合应用显微鉴别法可以使具有双折射性特征的组织构造被突显的同时，无偏振光现象的非双折射性组织构造能够显示，综合体现了正常光、正交偏振光显微影像下的共有优势，一级红波长条件下，细胞间隙等透明部分呈粉色背景，但由于色彩过多，易影响完整组织图像缩略图观察效果，适合局部特征观察；基于λ一级红波长补偿器与偏振光显微镜联合应用显微鉴别法为生药显微鉴别的方法学研究提供了新借鉴，也为木通类药材及其混淆品的鉴别提供科学依据。     

不同来源救必应药材的质量评价

目的 对收集的22批救必应药材进行性状、显微、HPLC指纹图谱鉴别.方法 以粉末显微特征为主,并采用HPLC法,色谱柱为Dikma C18(200 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-0.1％磷酸水溶液(B)为流动相,进行梯度洗脱,体积流量为1.0 mL/min;检测波长210 nm;柱温35℃.结果 性状、粉末鉴别评价所得出的药材质量优劣结果与指纹图谱相似度评价结果相一致,所建立的指纹图谱精密度、重复性、稳定性良好,可反映救必应药材的整体特征.结论 所建立的性状、粉末鉴别方法可以用于救必应药材及其混淆品的鉴别,HPLC指纹图谱可用于救必应药材的质量评价.     

三七及其混淆品的HPLC指纹图谱鉴定

目的：建立三七及其混淆品的指纹图谱鉴定方法。方法：采用HPLC方法，测定三七、人参、西洋参、姜状三七、三七不同部位及其2种混淆品的指纹图谱。结果：三七与人参、西洋参、姜状三七及其2种混淆品的指纹图谱有明显区别，三七不同部位也有差异。结论：HPLC皂苷指纹图谱鉴别三七及其混淆品具有重复性好、特征性强、方法简便等特点，可作为三七药材的鉴别方法。     

中药材厚朴的DNA扩增产物指纹分析研究

采用DNA扩增产物指纹分析（DNA amplification fingerprinting,DAF)技术鉴别中药材厚朴、凹叶厚朴及其常见的伪品、混淆品、获得了清晰可靠的DNA指纹图谱。根据聚丙烯酰胺凝胶上显示的DNA带型差异可简便地区分出厚朴、凹叶厚朴和其它伪品、混淆品。证明DNF技术可以准确、快速地鉴别出中药材厚朴及其伪、混品、在正确引种方面具有较高的价值。     

通关藤及其混淆品的鉴别研究

目的比较鉴别通关藤及其6种混淆品,为控制药材质量,指导临床用药提供重要依据。方法采用性状、显微鉴别手段,对通关藤及其混淆品进行了比较鉴别。结果通过比较通关藤及其混淆品在性状、组织构造、粉末特征上均发现存在显著差异。结论归纳的通关藤与其6种混淆品性状、显微特征的区别要点,可简单快速地鉴别药材的真伪。     

商品防己真伪质量考查报告(Ⅰ)

目的:考查现时中药材市场和使用单位所使用的商品防己的真伪与质量情况。方法:采用药材市场调研与使用部门抽样,用性状、显微分析的方法,对6批商品防己药材及5批饮片、4批混淆品广防己药材及5批饮片、4批木防己类药材、18批伪防己饮片,共42批商品进行比较检定考查分析。结果:防己药材性状上呈缢缩的结节状,有横沟,断面富粉性,中心无髓,木部导管束呈稀疏的放射状排列,气无,味苦;粉末显微上淀粉粒极多,草酸钙结晶为长形柱状及方形结晶,无簇晶。其他类似品及伪品的性状与显微特征也较明显。结论:药材市场与使用部门均有用马兜铃科广防己、宝兴马兜铃、穆坪马兜铃、耳叶马兜铃等类似品及其他伪品充当防己科的防己销售与使用的现象;可通过其主要性状、粉末显微特征加以鉴别。     

香港市售蒲公英及其混淆品土公英的DNA指纹鉴别研究

采用分子生物技术包括任意引物聚合酶链式反应(AP-PCR)和随意引物扩增的多态性DNA(RAPD)方法扩增蒲公英及其6种土公英混淆品的基因组DNA,获得清晰可靠的DNA指纹图谱。根据琼脂糖凝胶上显示的DNA带型差异可鉴别蒲公英和土公英混淆品。     

砂仁及其混淆品的高效液相色谱指纹图谱鉴别研究

目的建立砂仁及其混淆品的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱鉴定方法。方法采用RP—HPLC（DAD）法，梯度洗脱，测定阳春砂、海南假砂仁及艳山姜的指纹图谱，并作相似度比较分析。结果砂仁及其混淆品的HPLC指纹图谱有明显差异。结论HPLC指纹图谱具有重现性好，特征性强，方法简便等特点，可用于砂仁与其混淆品药材的鉴别。     

灵芝与混淆品硬孔灵芝的鉴别研究

目的 灵芝及其混淆品硬孔灵芝进行比较和鉴别.方法 采用性状、显微和薄层色谱鉴别生药材.结果 灵芝和混淆品硬孔灵芝在性状、显微和薄层色谱特征上有明显区别.结论 该研究结果为灵芝的鉴别提供参考依据.     

郁李仁及其混淆品的性状和显微鉴定研究

目的 探讨郁李仁及其混淆品毛樱桃和榆叶梅的生药学鉴别研究。方法 运用体式荧光显微镜和光学显微镜等仪器设备,分别从正面观、侧面观、腹面观、表面观等外观性状,横剖面和纵剖面内部结构,以及横切面和粉末显微特征,对3种郁李仁及其混淆品进行比较鉴别。结果 3种郁李仁及其混淆品在性状、显微方面有一定共性特征,但可根据种子外观性状、表面纹理等性状鉴别特征及种皮细胞表面观、石细胞等显微鉴别特征进行鉴别。结论 通过本研究,归纳了3种郁李仁及毛樱桃和榆叶梅的生药学鉴定特征,可为郁李仁药材的监督检验、标准修订提供鉴定参考。     

川木通红外光谱指纹图谱的建立及其与相近中药的鉴别

川木通为常用的利尿通淋药;因多来源于野生药材,性状特征差异大,有效成分及特征性成分不明,难以鉴别。为了建立准确鉴别川木通的方法,该研究收集了24份川木通和7份相近中药木通和关木通样品,利用傅里叶变换红外光谱技术测定4 000~400 cm-1的一维和二维相关红外光谱。首先随机选取20份川木通样品为校正集样品,发现其红外光谱的峰形、峰位、峰强相似,相关系数大于0.994 3;以其模拟平均红外光谱为指纹图谱,其特征峰位于3 412,2 932,1 739,1 639,1 509,1 456,1 426,1 376,1 332,1 261,1 159,1 035,897,609 cm-1等。然后,根据统计学的"3σ规则",计算用红外光谱相关系数判别川木通真伪的域值(Mean-3σ=0.992 6)。再用另外4份川木通样品、4份关木通和3份木通样品检验该指纹图谱鉴别川木通的效果。结果表明,这4份川木通的红外光谱均与指纹图谱相似,相关系数也大于域值而判别为川木通;而关木通和木通与川木通的指纹图谱明显不同,相关系数均小于域值而判别为非川木通。进一步比较了川木通、木通、关木通的二维相关红外光谱,发现自动峰和交叉峰数目、位置、强度等特征均不同。由此可见,建立的川木通红外光谱指纹图谱可用于川木通的真伪鉴别,为川木通提供了一种简便、快速鉴别的新方法。     

关木通HPLC-ESI-MS指纹图谱的化学模式识别研究

目的：以24批不同产地关木通的HPLC-ESI-MS指纹图谱为基础，采用化学计量学方法对其进行化学模式识别，并对不同的模式识别方法进行比较。方法：将关木通指纹图谱信息进行预处理，采用关木通HPLC-ESI-MS指纹图谱中的29个特征峰为基准，以各峰的保留时间、相对峰面积和质荷比作为数量化基础，采用SIMCA，SPSS 11.5等数据处理软件进行化学模式识别，比较SIMCA分类法和聚类分析法异同。结果：2种模式识别方法可以对关木通样品进行产地鉴别。结论：综合色谱指纹图谱技术和多变量的化学计量学分析方法研究可用于关木通的质量分析。     

木通与川木通及关木通的快速PCR鉴别

目的:建立一种准确、快速、高效鉴别木通、川木通及关木通的分子鉴别方法。方法:采集不同产地的木通、川木通及关木通基原植物,所有样品进行总DNA的提取,通过对木通、川木通及关木通样品trn L-trn F片段进行扩增、测序,进行同源比对后根据其变异位点设计特异性鉴别引物,采用2步法进行PCR扩增,从而对木通、川木通及关木通进行鉴别。结果:通过对影响PCR反应时间的退火温度、变性温度、退火时间、变性时间、循环次数等因素进行优化,并对不同型号PCR仪进行考察,分别获得木通、川木通及关木通快速PCR反应程序。在PCR产物中加入SYBR Green I染料,正品显示出明亮绿色荧光,而混淆品不显示荧光。结论:快速PCR方法可以简单快速鉴别木通、川木通及关木通,为实现药材分子鉴别的现场运用提供技术支撑。     

山豆根、北豆根及其混淆品的鉴别

山豆根与北豆根为《中国药典》收载的常用中药,二者在生药学等方面均有较大区别。但在近年的商品流通领域和临床应用中常常混为同种用,更有甚者把北豆根及其混淆品马兜铃科植物棉毛马兜铃Aristolochia mollissima Hance的干燥根茎,习称“寻骨风”作北豆根用。为保证用药准确、有效,本文对两味生药及其混淆品的基源、性状、显微及理化等方面进行比较、鉴别。 1 基源鉴别(见表1) 表1 山豆根、北豆根及其混淆品基源鉴别 类 别 山豆根(广豆根) 北豆根 混淆品 原植物 豆科、越南柔枝槐 Soprora tonkinensis Gapnep et Chen 防己科…     

中药材厚朴的随机扩增多态性DNA指纹图谱研究

目的:鉴别中药材厚朴及其伪品、混淆品.方法:采用随机引物扩增多态性DNA(RAPD)技术扩增植物基因组DNA样品.结果:此种分子生物学鉴别方法可以获得清晰可靠的DNA指纹图谱,根据琼脂糖凝胶上显示的DNA带型差异可准确区分出厚朴、凹叶厚朴和其伪品、混淆品.结论:RAPD方法可以准确、快速、简便地鉴定中药材厚朴及其伪、混品,尤其在正确引种方面具有很高的价值.     

冬虫夏草与其伪品及混淆品的鉴别

对冬虫夏草及其 6种伪品的来源、性状、有无子座等特征进行了分析 ;对冬虫夏草及其 4种混淆品的来源、性状、子座横切面显微鉴别特征等方面进行了比较。发现冬虫夏草的正品、伪品、混淆品在性状、子座等方面各具特征 ,据此可以清楚地鉴别它们     

中药苍术炮制前后DNA指纹图谱研究

目的:探讨苍术炮制前后DNA指纹图谱研究方法。方法:采用RAPD技术对不同产地的茅苍术炮制前后进行DNA指纹图谱研究。结果:不同产地的茅苍术生品DNA指纹图谱一致,几种麸炒苍术的DNA指纹图谱与生品有较大差异。结论:DNA指纹图谱可用于鉴别同种药材的生品。     

厚朴的任意引物PCR指纹图谱分析

目的：鉴别中药材厚朴，凹叶厚朴及其常见的伪品和混淆品，方法：采用任意引物PCR（arbitrarily primed PCR,AP-PCR)技术扩增植物基因组DNA样品。结果：AP－PCR技术获得清晰可靠的DNA指纹图谱，根据琼脂糖凝胶上显示的DNA带型差异可迅捷地区分厚朴，凹叶厚朴及其伪品，混淆品。结论：为应用AP－PCR技术在分子水平上鉴别中药材厚朴，保证引种的准确性奠定了基础。     

意大利牛舌草与其易混淆品的鉴定

目的:研究建立意大利牛舌草及其易混淆品的鉴别方法,为意大利牛舌草的质量控制提供依据。方法:采集不同产地的意大利牛舌草及其混淆品,采用药材显微鉴别、薄层色谱鉴别和DNA分子鉴别方法,对意大利牛舌草及其混淆品进行鉴别研究。结果:意大利牛舌草与琉璃苣、倒提壶在显微、薄层色谱有较为明显的差异,DNA分子鉴定表明,意大利牛舌草及其混淆品的最小种间K-2-P距离大于种内最大K-2-P距离,邻接法(NJ)树中意大利牛舌草的样品聚为一支,琉璃苣、倒提壶混淆品分别表现出单系性,可明显区分开。结论:该文在对意大利牛舌草及混淆品的茎、粉末显微特征比较研究的基础上,采用药材显微鉴别、薄层色谱鉴别与DNA分子鉴定手段相结合的综合鉴别模式,确定了意大利牛舌草及其混淆品的鉴别要点,DNA分子鉴定技术对于意大利牛舌草及其混淆品的鉴别有较大的优势,该法专属性强、灵敏度高,是传统鉴别技术的重要补充,具有较大的潜力和应用前景。建议进一步提高和完善意大利牛舌草的质量标准,加强意大利牛舌草的质量控制。     

云南产主要药用石斛的鉴别研究进展

目的:云南境内石斛除了《中国药典》收载品种外,其他品种应用也较广泛,为规范石斛市场,区别药用石斛的良莠。方法:对主产药用石斛已有的性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别、DNA分子鉴别等方法进行系统归纳整理,总结综合鉴别方法,为区别石斛属药材及其混淆品提供有效手段。结果:性状可鉴别伪品,但同科属的近似品种则需用显微鉴别、理化鉴别及DNA分子鉴别。结论:石斛类药材作为重要的药用植物,利用多学科理论知识和技术手段是解决石斛品种混淆的有效方法。