乌司他丁对重症中暑小鼠心功能损害的保护作用及机制研究

目的 研究乌司他丁对重症中暑所致小鼠心功能损害的保护作用,并进一步探讨其可能机制.方法 BALB/c小鼠20只按随机数字表法分为常温+生理盐水组(Sham+NS组)、常温+乌司他丁组(Sham+UTI组)、热打击+生理盐水组(HS+NS组)、热打击+乌司他丁组(HS+UTI组)4组,每组5只.在热打击开始前腹腔注射乌司他丁105U/kg进行预处理.常温两组置于环境温度23.0±0.5℃条件下,热打击两组置于高温气候动物培养箱(温度36.5±0.5℃,湿度65.0％±2.0％)内,以直肠温度(Tr)达42℃作为重症中暑标准.达中暑标准后,移至常温(23.0±0.5℃)进行自然降温处理,降温6h后进行心脏超声检测,分离心肌组织,进行病理学观察,Western blotting检测总p38及磷酸化p38(p-p38)含量.结果 在中暑热打击组中,HS+UTI组小鼠体温达42℃的时间较HS+NS组明显延长(P=0.044).与Sham+NS组相比,HS+UTI组与HS+NS组动物心输出量(CO)均明显下降(P=0.017),炎症损伤评分明显升高(P＜0.001),p-p38/p38比值升高(P＜0.001),而HS+UTI组CO下降程度明显低于HS+NS组(P=0.030),对应的炎症损伤评分(p＜0.001)及p-p38/p38比值(P=0.001)也均明显低于HS+NS组.结论 重症中暑热打击可导致小鼠心肌炎性损伤和心功能障碍,而乌司他丁对重症中暑小鼠心功能具有保护作用,可能与其下调p-p38水平,减轻心肌组织炎症损伤有关.     

热打击诱导血管内皮细胞组织因子早期表达分泌的初步研究

目的 探讨热打击诱导血管内皮细胞组织因子(TF)早期表达分泌的规律。方法 将30只SPF级C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组与热打击后复温0、3、6、9 h组(n=6)。热打击组小鼠暴露于动物孵箱热环境，核心温度达42.5℃时即为发生重症中暑。采用HE染色观察小鼠肝脏、肺脏及肾脏组织病理学变化；RT-qPCR检测小鼠组织TF mRNA表达水平；ELISA法检测小鼠血浆TF浓度。体外建立人脐静脉内皮细胞(HUVECs)热打击模型，分为对照组与热打击后复温0、3、6、9 h组。采用RT-qPCR、Western blotting及细胞免疫荧光化学技术分别检测HUVECs中TF mRNA及蛋白表达水平；采用ELISA法检测HUVECs培养上清中TF水平。结果 对照组小鼠各组织未见明显病理损伤，热打击复温小鼠存在不同程度组织细胞结构性损伤及出血性、炎症性损伤。与对照组小鼠比较，热打击复温0、3 h组肾脏(1.719±0.018、1.241±0.178 vs. 1.000±0.063)、复温3 h组肺脏(2.444±0.511 vs. 1.000±0.106)及复温6 h组肝脏(7.312±0...     

抑制组织蛋白酶B对脓毒症急性肺损伤小鼠肺组织细胞焦亡的影响

目的 探讨组织蛋白酶B(CTSB)下调对脓毒症急性肺损伤(ALI)小鼠肺组织细胞焦亡的影响.方法 SPF级健康雄性C57BL/6小鼠30只,随机分为假手术组(n=6)、脓毒症组(n=15)及脓毒症+组织蛋白酶B抑制剂CA-074组(脓毒症+CA-074组,n=9).采用盲肠结扎穿孔法(CLP)建立脓毒症模型.假手术组除...     

氧化应激在中暑大鼠急性肝损伤中的作用及机制研究

目的 探讨氧化应激在中暑急性肝损伤发生中的作用及其可能机制.方法 32只大鼠按随机数字表法分为4组:假加热正常对照组(Sham组)、中暑组(HS组)、假加热N-乙酰半胱氨酸治疗组(Sham-NAC组)以及中暑NAC治疗组(HS-NAC组),每组8只.通过人工气候舱制备中暑大鼠模型,监测大鼠直肠温度(Tr)、脉率(HR)、收缩压(SBP).记录中暑发生的时间.于中暑开始后12h处死大鼠,测定大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和总胆红素(TBIL)水平,以及肝脏组织匀浆IL-6、IL-1β、TNF-α、丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽(GSH)等指标的变化,组织学观察肝脏氧自由基(ROS)含量、中性粒细胞浸润以及病理损伤情况.结果 中暑发生时HS-NAC组与HS组Tr、HR、SBP、中暑发生时间等比较差异无统计学意义(P＞0.05),但HS-NAC组的生存时间与HS组相比明显延长,差异有统计学意义(P=0.039).中暑发生后12h,HS组肝组织匀浆中ROS和MDA含量及血清ALT和TBIL水平较其他3组明显升高(P=0.000),肝组织匀浆中T-SOD和GSH含量较其他3组明显下降(P=0.000).病理观察显示HS-NAC组肝损伤较HS组减轻(P=0.000).HS组肝脏中性粒细胞浸润水平及IL-6、IL-1β、TNF-α浓度均明显高于HS-NAC组(P=0.000).结论 氧化应激在中暑肝损伤中起重要作用,其机制可能与直接细胞毒和介导炎症反应有关.     

抗氧化剂对热打击人脐动脉血管平滑肌细胞收缩反应的影响

目的 研究抗氧化剂对热打击过程中人脐动脉血管平滑肌细胞(HUASMCs)收缩反应的影响.方法 将HUASMCs分为对照组、热打击组(HS组)和热打击前超氧化物歧化酶(SOD)预处理组(SOD+HS组),每组分别用低浓度NE(0.05mg/L)及常规浓度NE(1.0mg/L)刺激.各组细胞于41℃恒温水箱中分别培养0.5、1、1.5、2h后添加NE刺激,采用细胞表面积收缩比(%)反映细胞对NE的反应性.结果 与对照组比较,无论是给予低浓度或常规浓度NE刺激,HS组细胞热打击1h时对于NE的反应性均明显增高,2h时对于NE的反应性则明显降低(P<0.05或P<0.01);SOD+HS组细胞对NE的反应性在热打击至2h后均出现明显下降(P<0.05或P<0.01).对照组及HS组细胞对不同浓度NE刺激的反应性差异无统计学意义(P>0.05),SOD+HS组细胞在热打击过程中对常规浓度NE的反应性明显高于对低剂量NE的反应性(P<0.05或P<0.01).无论给予常规浓度或低浓度NE刺激,SOD+HS组细胞对NE的反应性均低于HS组(P<0.05或P<0.01).结论 热打击过程中,HUASMCs对NE的反应性呈时相性变化.抗氧化剂在中暑早期可能可以纠正HUASMCs对NE的过反应现象,但在热打击中后期,抗氧化剂并不能改善其反应性的下降.     

右美托咪定对七氟醚致老年小鼠脑组织炎性反应的影响

目的 探讨右美托咪定预处理对七氟醚致老年小鼠脑组织炎性反应的影响.方法 将126只雄性出生后12月龄C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为3组:对照组(Con组)、七氟醚组(Sevo)、七氟醚+右美托咪定组(Se-vo+Dex组).Sevo组和Sevo+Dex组小鼠给予连续2 h的3％七氟醚+33％氧气麻醉处理.Con...     

热休克蛋白70对中暑大鼠急性肺损伤的保护作用及机制研究

目的 观察热休克蛋白70(HSP70)对急性肺损伤的保护作用.方法 64只SD大鼠按随机数字表法分为假加热正常对照组(Sham组)、中暑组(HS组)、中暑加谷氨酰胺处理组(HS+GLN组)和中暑加槲皮素处理组(HS+QU组),每组16只.Sham组大鼠置于温度23℃,湿度55％ ± 5％环境中,其余3组大鼠置于模拟热气候动物舱(舱内温度39℃,相对湿度65％)内.监测大鼠直肠温度、收缩压和脉率,比较各组大鼠热应激反应的差异.以收缩压从峰值开始下降作为中暑的开始,之后将大鼠移至常温复温.分别在中暑恢复期0h和6h处死大鼠,每个时间点8只,留取支气管肺泡灌洗液(BALF)后分离肺脏组织行组织学观察.采用酶联免疫法检测BALF中的IL-1β、TNF-α和IL-6浓度,以及肺组织匀浆中的HSP70浓度.结果 与HS组和HS+QU大鼠比较,HS+GLN组大鼠承受更多的热负荷后才发生HS(P＜0.001),起病后的中位生存时间明显延长(P＜0.001).与Sham组比较,HS组大鼠肺组织匀浆HSP70浓度呈时间依赖性升高(P＜0.001);HS+GLN组HSP70浓度在各个时点与HS组比较均明显升高(P＜0.001),而HS+QU组的HSP70表达则受到明显抑制时点与Sham组比较差异无统计学意义(P＞0.05),但明显低于HS组和HS+GLN组(P＜0.001).与HS组和HS+QU组比较,HS+GLN组大鼠BALF中的IL-1β、TNF-α和IL-6浓度明显降低(P＜0.001),病理结果显示其肺损伤更轻(P＜0.001),而HS+QU组则相反.结论 HSP70具有保护HS大鼠急性肺损伤的作用,其机制可能与增强大鼠热耐受能力和抑制HS大鼠肺部炎症相关.     

重症中暑早期大鼠认知功能及脑能量代谢核磁共振氢谱研究

目的 研究重症中暑(HS)早期大鼠认知功能及脑能量代谢的变化.方法 25只雄性SD大鼠随机分为对照组(n=11)与HS组(n=14).HS组大鼠持续暴露于40℃热仓中,当核心体温达到42℃时取出复温3 h造模,对照组置于(25.0±0.5)℃环境中.HS组大鼠分别在造模前、造模后复温0 h、造模后复温3 h采用改良神经...     

辅助腹腔复苏对休克大鼠肠系膜淋巴活性的影响

目的 探讨辅助腹腔复苏(IR)对失血性休克(HS)大鼠肠系膜淋巴活性的影响.方法采用股动脉放血法制作Hs大鼠模型,在HS或假休克(SS)后60min行传统方法(CR)或CR联合辅助腹腔复苏(CR+IR).实验大鼠分为6组:①SS组(n=4),②SS+CR组(n=4),③SS+CR+IR组(n=4),④HS组(n=4),⑤HS+CR组(n=5),⑥HS+CR+IR组(n=5).所有HS大鼠的平均动脉压(MAP)控制在40mmHg,SS大鼠仅行动脉插管不放血,CR处理时静脉给予乳酸林格液(80ml/kg),IR处理时在CR的基础上同时腹腔注射腹膜透析液20ml/只.复苏后2h剖腹收集肠系膜淋巴液,测定与淋巴液共培养后的中性粒细胞呼吸爆发活性.实验结束时处死大鼠,取回肠组织,光镜下观察肠黏膜绒毛形态,评价肠黏膜损伤程度.结果 HS组肠系膜淋巴活性显著高于SS组.与CR处理比较,CR+IR能显著抑制休克肠系膜淋巴介导的中性粒细胞的呼吸爆发作用(P<0.05),降低休克淋巴的活性水平.HS组肠黏膜绒毛顶端损伤增多,与SS组比较差异显著(P<0.01);与CR处理相比,CR+IR能明显减轻肠黏膜绒毛的损伤(P<0.01).结论 在CR基础上进行IR能有效保护肠道屏障的完整性,降低休克后肠系膜淋巴活性.     

精脒对老龄小鼠股骨微结构的影响

目的 探讨精脒(Spermidine)对老龄小鼠股骨微结构的影响.方法 选取20只21月龄C57老龄小鼠随机分为对照组(Vehicle,n=10)和实验组(Spermidine,n=10),Spermidine组在饮水中按3 mmol/L的浓度加入Spermidine,干预时间为12周.每周测量各组小鼠的体重;实验结束...     

小鼠严重烫伤延迟复苏后肺组织中白介素-21变化的临床意义

目的探讨C57BL/6小鼠严重烫伤延迟复苏后肺组织中白介素21(IL-21)的变化及其意义。方法雄性C57BL/6小鼠100只,随机分为延迟复苏组(DFR组,n=40)、即时复苏组(IFR组,n=50)和正常对照组(CG组,n=10),建立体表面积25%的Ⅲ度烫伤模型,分别于致伤后1、6、24、72 h和168 h取材。采用组织病理学、免疫组织化学染色、图像分析技术,观察不同实验组小鼠肺脏组织的病理学变化与IL-21的表达。结果 IL-21的阳性表达位于肺泡上皮细胞的胞核与胞质,延迟复苏组与即时复苏组IL-21的表达分别明显高于正常对照组,且延迟复苏组小鼠肺组织IL-21的表达高于即时复苏组小鼠肺组织IL-21的表达(P<0.05)。结论 IL-21表达强度的变化与严重烫伤延迟复苏小鼠肺组织损伤有关。     

间歇性热量限制对辐射所致认知障碍的保护作用

目的:探讨间歇性热量限制对辐射所致小鼠认知功能障碍的作用及可能机制。方法:将36只7周龄c57BL/6J雄性小鼠按随机数表法分为假辐射+随意饮食组(sham-irradiation and ad libitum,Sham-AL)、辐射+随意饮食组(irradiation and ad libitum,IR-AL)、辐射...     

跑台运动对帕金森病模型小鼠黑质、海马CA1区ERK1/2信号通路及记忆能力的影响

目的:观察跑台运动干预后帕金森病(PD)小鼠记忆能力以及黑质、海马CA1区突触可塑性蛋白的变化,并探讨ERK1/2信号通路在运动改善PD小鼠记忆能力中的作用.方法:36只C57BL/6小鼠随机分为生理盐水对照组(SC组)、PD模型组(PD组)、生理盐水+运动组(SE组)、PD+运动组(PDE组)、PD+运动+二甲基亚砜...     

脂多糖注射及盲肠结扎穿刺诱导脓毒血症肾损伤模型的对比研究

目的:对比脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)腹腔注射及盲肠结扎穿刺(cecum ligation and puncture,CLP)诱导脓毒血症肾损伤建模方法的肾脏损伤情况及炎症过程特点.方法:将48只8～10周龄C57BL/6雄性小鼠分为LPS组(n = 16),磷酸盐缓冲溶液(phosphate...     

大剂量γ射线照射对小鼠免疫系统损伤远期影响的研究

目的 探讨亚致死剂量6Gyγ射线一次性全身照射小鼠免疫细胞对脂多糖刺激反应性的远期影响.方法 将实验小鼠分为假照射组和照射组,假照射组不接受照射,照射组给予6 Gyγ射线照射.照射后10周,分别将假照射组和照射组小鼠按组别腹腔注射脂多糖(20 mg/kg),对照组注射等量的生理盐水.分别于24 h和1 h后取材,进行外周血白细胞计数及CD4、CD8、B220细胞比例检测.取脾脏和胸腺称重,计算脏器指数.冲洗单侧股骨进行有核细胞计数.结果 与假照射刘照组小鼠相比,照射对照组小鼠的CD4细胞比例显著升高(t=2.940,P＜0.05),CD8和B220细胞比例显著下降(t=6.485和4.351,P均＜0.01).照射+脂多糖1h组小鼠的CD4 (t=2.510,P＜0.05)、CD8(t=2.862,P＜0.05)和B220(t=7.074,P＜0.01)细胞比例较假照射+脂多糖1h组小鼠显著降低,差异有统计学意义.与假照射+脂多糖24 h组小鼠相比,照射+脂多糖24 h组小鼠单侧股骨有核细胞计数显著升高,差异有统计学意义(t=2.078,P＜0.05).结论 6 Gyγ射线一次性全身照射后10周,小鼠免疫系统尚未完全恢复;与假照射组相比,在接受脂多糖刺激后照射组小鼠胸腺指数和外周血中CD8和B220细胞比例未见显著变化.辐射对小鼠免疫系统损伤的远期影响有待进一步研究.     

中药抗休克合剂对严重烫伤大鼠早期肠损伤的影响

【摘要】 目的 观察在高渗盐溶液 (HS) 补液基础上应用中药抗休克合剂对严重烫伤大鼠早期肠损伤的影响。方法 选取 32 只 8 周龄 SD 大鼠, 按照随机数表法将其随机分为假伤组、LR 组、HS600 组、HS600+中药组,每组 8 只。假伤组大鼠建立假伤模型以及 LR 组、HS600 组、HS600+中药组大鼠建立烫伤模型后, LR 组大鼠采用乳酸钠林格注射液 (LR) 补液, HS600 组大鼠采用 600 mmol / L HS 补液, HS600+中药组大鼠采用 600 mmol / LHS 补液+中药抗休克合剂灌胃。对比观察模型建立 24 h 后各组大鼠血 Na+浓度, 血清炎症因子水平以及小肠组织氧化应激水平与 p38 丝裂原活化蛋白激酶 (p38MAPK) 通路活化程度。结果 LR 组大鼠血 Na+浓度明显低于假伤组、HS600 组及 HS600+中药组 (q = 14.910、32.211、30.010, P 均<0.001), 且 HS600 组与 HS600+中药组无明显差异 (q = 2.198, P= 0.130)。LR 组、HS600 组及 HS600+中药组大鼠血清肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-10、白细胞介素-18 水平以及小肠组织中丙二醛水平和磷酸化 p38MAPK 与 p38MAPK 比值均明显高于假伤组 (肿瘤坏死因子-α: q = 16.070、10.810、7.579, P 均<0.001; 白细胞介素-10: q = 15.920、20.210、23.850, P 均<0.001;白细胞介素-18: q = 12.750、7.562、3.897, P < 0.001、P < 0.001、P = 0.049; 丙二醛: q = 28.450、20.320、10.160, P 均<0.001; 磷酸化 p38MAPK 与 p38MAPK 比值: q = 54.310、15.090、9.196, P 均<0.001), 且 HS600+中药组大鼠血清肿瘤坏死因子-α 与白细胞介素-18 水平以及小肠组织中丙二醛水平和磷酸化 p38MAPK 与p38MAPK 比值均明显低于 LR 组与 HS600 组、白细胞介素-10 水平明显高于 LR 组与 HS600 组 (肿瘤坏死因子-α:q = 8.494、3.932, P<0.001、P = 0.048; 白细胞介素-18: q = 9.357、4.165, P<0.001、P = 0.031; 丙二醛: q =18.290、10.160, P 均<0.001; 磷酸化 p38MAPK 与 p38MAPK 比值: q = 45.110、5.899, P<0.001、P= 0.001; 白细胞介素-10: q = 7.929、3.939, P<0.001、P= 0.047)。LR 组、HS600 组及 HS600+中药组大鼠小肠组织中超氧化物歧化酶水平均明显低于假伤组 (q = 20.880、14.120、11.110, P 均<0.001), 且 HS600+中药组明显高于 LR组与 HS600 组 (q = 9.772、4.008, P<0.001、P= 0.043)。结论 与单独应用 LR 或 HS 补液相比, 在 HS 补液基础上加用中药抗休克合剂可有效降低严重烫伤大鼠机体炎症反应及氧化应激反应程度、抑制 p38MAPK 通路过度活化, 从而减轻早期肠损伤。     

白细胞介素-4介导低强度运动对慢性坐骨神经缩窄性损伤小鼠的镇痛作用

目的 探讨低强度运动能否通过白细胞介素(IL)-4介导对慢性坐骨神经缩窄性损伤(CCI)小鼠发挥镇痛作用.方法 雄性C57/BL6健康小鼠48只,采用随机数字表法分为6组(n=8):假手术/静坐组(SS组)、假手术/生理盐水/运动(SNE组)、假手术/抗IL-4/运动(SAE组)、CCI/静坐组(CS组)、CCI/生理...     

辛伐他汀对apoE-/-小鼠HDL抗炎抗氧化功能的影响

目的 研究辛伐他汀对高脂喂养apoE缺失(apoE-/-)小鼠高密度脂蛋白(HDL)抗炎抗氧化功能的影响.方法 18只8周龄C57BL/6J小鼠给予普通饲料喂养作为对照组,30只8周龄apoE-/-小鼠采用高脂饲料喂养,喂养4周后随机处死两种小鼠各6只,检测相应指标作为研究基线.其余24只apoE-/-小鼠随机均分为动脉粥样硬化组(AS组)和辛伐他汀组,剩下的12只C57BL/6J小鼠仍作为对照组,对照组和AS组小鼠采用原饲料喂养,辛伐他汀组在高脂饲料喂养基础上给予辛伐他汀5mg/(kg·d)灌服,第8、16周末处死3组小鼠(各时间点6只),测定血脂水平、血清屏氧酶1(PON1)活性、髓过氧化物酶(MPO)活性、高敏C反应蛋白(hs-CRP)含量及HDL炎症指数(HII),并观察主动脉内膜斑块面积/血管内膜表面积比值.结果 实验8周后,辛伐他汀组血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)与同时间AS组相比无明显变化;实验16周后,与AS组相比,辛伐他汀组LDL-C水平明显降低(P＜0.01),HDL-C水平显著升高(p＜0.05).实验8周、16周后,与AS组相比,辛伐他汀组血清PON1活性明显升高,MPO活性、hs-CRP含量及HII明显下降,主动脉斑块面积/血管内膜表面积比值明显减小(P＜0.05或P＜0.01).结论 辛伐他汀除降低LDL-C、升高HDL-C水平外,还可通过升高PON1活性、降低MPO活性、降低HII等改善HDL的抗炎抗氧化功能,从而减少主动脉斑块面积,发挥抗动脉粥样硬化作用.     

血必净注射液对烫伤大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1表达的影响及意义

目的 观察中药血必净注射液(简称血必净)对烫伤大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达及炎症反应的影响.方法 采用大鼠30% TBSA三度烫伤延迟复苏模型.78只雄性Wistar大鼠随机分为假烫伤组(n=18)、烫伤组(n=30,伤后2h静脉注射生理盐水4ml/kg)和血必净组(n=30,伤后2h静脉注射血必净4ml/kg),于伤后8、24、72h活杀动物,留取肺组织,采用RT-PCR和Western blot检测HMGB1基因和蛋白的表达,酶学分光光度法测定髓过氧化物酶(MPO)活性.结果 与假烫伤组比较,烫伤组肺组织HMGB1基因和蛋白表达在伤后8～72h显著增强(P＜0.05或0.01),MPO活性在伤后8h及24h明显增高(P＜0.01).与烫伤组比较,血必净组大鼠肺组织HMGB1表达在伤后24h及72h显著下调(P＜0.05或0.01),MPO活性在24h时间点显著降低(P＜0.01).结论 HMGB1作为晚期炎症因子参与了烫伤后肺组织炎症反应的病理过程,血必净治疗可明显下调肺组织HMGB1表达,并减轻烫伤延迟复苏所致急性肺损伤.     

慢性间歇性低压低氧改善全脑照射造成的小鼠记忆认知功能障碍的研究

目的观察全脑照射后小鼠海马(CA)1区损伤的表现, 探讨慢性间歇性低压低氧(CIHH)预处理对全脑照射后小鼠记忆认知功能的影响。方法采用完全随机法将48只成年雄性C57BL/6小鼠分为健康对照组、CIHH组、单纯照射组(IR)和CIHH+IR组。IR组采用6 MV X射线单次10 Gy全脑照射构建脑损伤模型。CIHH处理为小鼠在接受照射前置于低压氧舱预处理。Mirrors水迷宫实验观察小鼠逃避潜伏期、穿越平台次数以及目标象限停留时间, 应用尼氏染色法观察海马CA1区神经元细胞的变化, 应用免疫荧光法检测小鼠神经元前体细胞的微管相关蛋白(DCX)在海马齿状回(DG)颗粒下区(SGZ)的表达来评价神经发生情况。结果全脑照射后30 d, IR组与健康对照组相比, 小鼠逃避潜伏期延长, 穿越平台次数减少(P<0.001), 目标象限内探索时间减少(P<0.001)。X射线引起小鼠CA1区神经元细胞排列紊乱、神经元细胞变性、坏死, 小鼠CA1区DCX表达量明显减少。与IR组比较, CIHH+IR组可使小鼠逃避潜伏期缩短, 穿越平台次数增加[(2.08±0.26)次vs. (0.83±...