散发性大肠管状腺瘤癌变过程中STAT3和p38的表达及意义

目的探讨STAT3和p38在散发性大肠管状腺瘤癌变过程巾的可能作用。方法采用免疫组化方法检测107例散发性大肠管状腺瘤伴不同程度异型增生及癌变组织中STAT3和p38的蛋白表达水平,采用原位杂交方法检测STAT3 mRNA的表达。同时选取25例正常大肠黏膜作为对照。结果STAT3蛋白在正常大肠黏膜、大肠管状腺瘤伴上皮异型增生和癌变组中的阳性表达率分别为12.0%、59.0%和91.7%,STAT3 mRNA的阳性表达率分别为8.0%、51.8%和100.0%,p38蛋白的阳性表达率分别为8.0%、47.0%和91.7%。大肠管状腺瘤伴上皮异型增生组和癌变组STAT3蛋白、STAT3 mRNA和p38蛋白的阳性表达率均明显高于正常大肠黏膜组(P均<0.05),而癌变组均高于大肠管状腺瘤伴上皮异型增生组(P均<0.05)。大肠管状腺瘤伴上皮异型增生患者中,STAT3蛋白、STAT3 mRNA和p38蛋白的阳性表达率均随异型增生程度增高而增高(P<0.05)。STAT3与p38的表达呈正相关(r=0.515)。结论STAT3和p38均可能在散发性大肠管状腺瘤癌变过程中起一定作用。     

散发性大肠管状腺瘤癌变过程中JNK1 Raf-1和Livin的表达及其意义

目的 探讨JNK1、Raf-1和Livin在散发性大肠管状腺瘤癌变过程中的可能作用.方法 采用免疫组化方法,检测21例正常大肠黏膜、65例散发性大肠管状腺瘤伴上皮不同程度异型增生及22例管状腺瘤癌变组织中,JNK1 、Raf-1和Livin的蛋白表达水平.结果 正常大肠黏膜组、散发性大肠管状腺瘤伴上皮异型增生组、大肠管状腺瘤癌变组,JNK1蛋白的阳性表达率分别为33.3%、63.1%和90.9%,Raf-1蛋白的阳性表达率分别为23.8%、52.3%和77.3%,Livin蛋白的阳性表达率分别为14.3%、52.3%和77.3%,大肠管状腺瘤伴上皮异型增生组和癌变组JNK1 Raf-1和Livin蛋白的阳性表达率均高于正常大肠黏膜组(均P＜0.05),而癌变组均高于大肠管状腺瘤伴上皮异型增生组(均P＜0.05).在大肠管状腺瘤伴上皮异型增生组中,Raf-1的阳性表达率随异型增生程度的增高而升高(P＜0.05),而上皮不同程度异型增生组间JNK1和Livin蛋白的阳性表达率差异无统计学意义(均P＞0.05).87例散发性大肠管状腺瘤组织中,JNK1、Raf-1和Livin蛋白表达两两正相关(JNK1和Raf-1:r=0.451,P＜0.05;JNK1和Livin:r于0.499,P＜0.05;Raf和Livin;r=0.445,P＜0.05).结论 JNK1、Raf-1和Livin在大肠管状腺瘤癌变过程中可能起一定作用.     

散发性大肠管状腺瘤癌变过程中NGX6ILK和c-Jun的表达及意义

目的:探讨NGX6、ILK和c-Jun在散发性大肠管状腺瘤癌变过程中的可能作用.方法:采用免疫组化法检测22例异型增生性畸变隐窝灶(ACF)、68例大肠管状腺瘤伴上皮不同程度异型增生、21例大肠管状腺瘤癌变和21例正常对照中NGX6、ILK和c-Jun的表达情况.结果:NGX6蛋白在正常对照、异型增生性ACF、大肠管状腺瘤伴上皮异型增生及大肠管状腺瘤癌变组中阳性表达率逐步降低,而ILK蛋白和c-Jun蛋白的阳性表达率则明显升高(P<0.05).异型增生性ACF、大肠管状腺瘤伴上皮轻、中、重度异型增生组中NGX6蛋白的阳性表达率分别为77.27%、70.83%、37.50%、35.00%,其中,大肠管状腺瘤伴上皮中、重度异型增生组中NGX6蛋白的阳性表达率明显低于异型增生性ACF及腺瘤伴上皮轻度异型增生组(P<0.05).异型增生性ACF、大肠管状腺瘤伴上皮轻、中度异型增生组中ILK蛋白的阳性表达率明显低于腺瘤伴上皮重度异型组(P<0.05);c-Jun蛋白阳性表达率在大肠管状腺瘤伴上皮轻、中、重度异型增生和大肠管状腺瘤癌变组明显高于异型增生性ACF(P<0.05).在大肠管状腺瘤癌变过程中NGX6和ILK间呈负相关(r=-0.455,P<0.05);NGX6和c-Jun间呈负相关(r=-0.417,P<0.05);ILK和c-Jun之间呈正相关(r=0.390,P<0.05).结论:NGX6低表达可能与ILK及c-Jun高表达有关,这可能在散发性大肠管状腺瘤形成及癌变过程中发挥一定作用.     

WNK2及MEK-1、ERK1/2在散发性结肠管状腺瘤癌变过程中的表达及意义

目的 探讨WNK2、MEK-1和ERK1/2在散发性结肠管状腺瘤癌变过程中的可能作用.方法 采用免疫组织化学方法检测112例散发性结肠管状腺瘤伴不同程度异型增生及癌变组织中WNK2、MEK-1和ERK1/2在蛋白水平的表达情况.结果 WNK2蛋白在正常结肠黏膜、结肠管状腺瘤伴异型增生及腺瘤癌变组中阳性表达率逐渐降低(P＜0.05),分别为100％、70％和42.86％,而MEK-1及ERK1/2蛋白阳性表达率明显升高,且异型增生组和癌变组中MEK-1和ERK1/2的蛋白阳性表达率均明显高于正常结肠黏膜组(P＜0.05).WNK2蛋白的表达随结肠管状腺瘤异型增生程度的增高而降低,而MEK-1和ERK1/2的蛋白阳性表达随结肠管状腺瘤异型增生程度的增高而升高(P＜0.05).WNK2与MEK-1及与ERK1/2间存在负相关关系(r=0.372,r=-0.371,P＜0.05).MEK-1与ERK 1/2存在正相关关系(r=0.475,P＜0.05).结论 WNK2可能通过负向调节MEK 1及ERK1/2促进散发性结肠管状腺瘤的形成及癌变的发生.     

雌激素受体β在不同大肠病变组织中的表达及其临床意义

[目的]探讨雌激素受体β（ERβ）在大肠癌发生发展过程中表达及其临床意义。[方法]收集正常人大肠黏膜、FAP腺瘤、FAP腺瘤癌变、腺瘤、腺瘤癌变和散发性大肠癌标本共162例,应用浙江大学附属第二医院自行研制的ZM-1型组织芯片制备仪制作石蜡组织芯片,行免疫组织化学染色。[结果]散发性大肠癌组ERβ阳性表达率（81.25%）明显高于正常大肠黏膜组（44.44%）（P=0.017）;FAP腺瘤癌变组（47.62%）和腺瘤癌变组（38.89%）的ERβ阳性率分别低于FAP腺瘤组（80.00%）和腺瘤组（80.00%）（P=0.005,P=0.033）;且FAP腺瘤癌变组和腺瘤癌变组的ERβ阳性率低于散发性大肠癌组（P〈0.05）;FAP腺瘤组与腺瘤组的ERβ阳性率却均高于正常大肠黏膜组（P〈0.05）。[结论]ERβ在散发性大肠癌组织中的高表达提示ERβ可能是一个散发性大肠癌临床诊断的鉴别标志。FAP腺瘤和腺瘤癌变过程所涉及的分子机制可能与散发性大肠癌变分子机制不同。     

NGAL基因表达上调与大肠肿瘤发生的关系研究

目的：研究大肠腺瘤-腺癌序列过程中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）表达的变化及相互关系,以阐明其在大肠癌发生发展中的作用。方法：采用组织芯片与免疫组织化学SP法检测94例瘤旁/癌旁组织、92例腺瘤（其中管状腺瘤36例, 管状绒毛状腺瘤47例,绒毛状腺瘤9例）、54例腺瘤伴不典型增生或癌变及60例腺癌中NGAL和MMP-9蛋白的表达情况。结果：在大肠腺癌、腺瘤伴不典型增生或癌变、腺瘤、瘤旁/癌旁组织中,NGAL蛋白表达的阳性率分别为55%（33/60）、37% （20/54）、23% （21/92）和2% （2/94）,MMP-9蛋白表达的阳性率分别为74% （44/60）、44% （24/54）、25% （23/92）、6% （6/94）,NGAL和MMP-9蛋白的表达在腺瘤、腺瘤伴不典型增生或癌变肠腺癌组织中显著高于瘤旁/癌旁组织,差异具有统计学意义 （P<0.01）, 并且在正常肠黏膜→腺瘤→腺瘤伴不典型增生或癌变→腺癌这一过程中两者的表达逐渐增高, 差异具有统计学意义 （P<0.01）,然而二者在腺瘤组中管状腺瘤、 管状绒毛状腺瘤、 绒毛状腺瘤三者之间的表达差异无统计学意义 （P>0.05）。NGAL与MMP-9蛋白的表达在整个序列过程中 （正常肠黏膜组、 腺瘤组、 腺瘤伴不典型增生或癌变组、 腺癌组） 呈显著正相关 （rs=0.622, P<0.01）。结论： NGAL蛋白和MMP-9蛋白表达的上调可能在大肠腺瘤-腺癌序列的发展过程中发挥一定作用, 二者的异常表达可能参与大肠腺癌的发生。     

胰岛素样生长因子Ⅰ受体表达与大肠息肉癌变相关性研究

目的:研究胰岛素样生长因子Ⅰ受体(IGF-ⅠR)在大肠息肉和大肠癌中的表达及其意义.方法:收集内镜下黏膜切除技术(EMR)或黏膜下层剥离术(ESD)完整切除并经病理确诊的32例患者的47个大肠息肉,包括炎性息肉、管状腺瘤、绒毛状腺瘤;另选12例正常结肠黏膜组织及20例结肠腺癌黏膜组织作为对照.用免疫组化SP法检测IGF-ⅠR的表达,分析IGF-ⅠR的表达程度及其与大肠癌的相关性.结果:经Mann-Whitney U检验炎性息肉IGF-ⅠR与其正常黏膜中IGF-ⅠR比较差异无统计学意义,P=0.251;经Mann-Whitney U检验管状腺瘤、绒毛状腺瘤IGF-ⅠR与其正常黏膜IGF-ⅠR间差异有统计学意义,P均<0.001,故管状腺瘤、绒毛状腺瘤IGF-ⅠR水平比其正常黏膜高.IGF-ⅠR在正常对照组、炎性息肉组、管状腺瘤组、绒毛状腺瘤组和大肠癌组5组病例间经Spearman's双变量等级相关性分析,差异有统计学意义,r=0.574,P<0.001.3组之间从年龄、性别及病例数差异无统计学意义,P>0.05.结论:管状腺瘤、绒毛状腺瘤IGF-ⅠR水平比其正常黏膜高;IGF-ⅠR在正常组织、炎性息肉、管状腺瘤、绒毛状腺瘤和大肠癌中的表达依次增加.IGF-ⅠR在评价息肉处于黏膜增生-腺瘤-癌变的发展中起了重要的作用.     

大肠锯齿状腺瘤和腺癌组织HIF-1α表达及其与VEGF和血管密度相关性的探讨

目的:探讨大肠锯齿状腺瘤和腺癌组织HIF-1α的表达及其与VEGF和血管密度的关系。方法:采用免疫组化法检测HIF-1α和VEGF蛋白的表达。用CD34单克隆抗体标记血管内皮细胞并计数。结果:锯齿状腺瘤HIF-1α蛋白阳性率(62.5%)显著高于正常大肠黏膜组(13.3%),χ2=15.78,P<0.01;显著低于大肠癌组(85.0%),χ2=4.8,P=0.028。锯齿状腺瘤VEGF蛋白阳性率(53.1%)显著高于正常大肠黏膜组(10.0%),χ2=13.17,P<0.01;而与大肠癌组(72.5%)比较差异无统计学意义,χ2=2.89,P=0.089。HIF-1α表达与VEGF正相关(r=0.317,P=0.041);与MVD正相关,r=0.468,P=0.02。结论:HIF-1α促进肿瘤血管生成,参与大肠锯齿状腺瘤癌变。     

NF-кB和CXCR4在大肠腺癌中的表达及临床意义

目的:探讨NF-кB和CXCR4在大肠腺癌发生、发展、浸润转移中的作用及临床意义.方法:应用免疫组织化学S-P法检测60例大肠腺癌、23例大肠管状腺瘤、25例正常大肠黏膜组织中NF-кB和CXCR4的蛋白表达情况.结果:大肠腺癌组中的阳性表达均高于大肠管状腺瘤组和正常大肠黏膜组,大肠管状腺瘤组中NF-кB和CXCR4的阳性表达均高于正常大肠黏膜组,且大肠腺癌组、大肠管状腺瘤组、正常大肠黏膜组中的阳性表达差异均有统计学意义(P均<0.05);大肠腺癌组中NF-кB和CXCR4的阳性表达均与癌组织的浸润深度、有无淋巴结转移有关(P均<0.05),与患者的性别、年龄及癌组织的分化程度无关(P均>0.05);大肠腺癌组织中NF-кB和CXCR4的表达呈正相关(r=0.346,P=0.007).结论:NF-кB和CXCR4的高表达与大肠腺癌的发生、发展、浸润转移密切相关.     

MTA1和TSLC1表达与结肠腺瘤癌变相关性研究

目的 结肠腺瘤是结肠癌的癌前病变,积极诊断和治疗结肠腺瘤是控制、减少结肠癌发病的重要途径.本研究探讨肿瘤转移相关基因1(metastsis associated gene 1,MTA1)和肺癌肿瘤抑制因子1(tumor suppressor in lung cancer 1,TSLC1)在结肠腺瘤和结肠癌组织中的表达,以及MTA1和TSLC1在结肠腺瘤癌变过程中的作用.方法 选择2010-04-01-2015-12-31河北医科大学附属邢台市人民医院手术切除的结肠癌标本104例、肠镜活检结肠腺瘤标本114例及癌旁正常结肠组织(距离癌组织>3 cm)30例为研究对象,应用免疫组织化学法检测3组标本中MTA1和TSLC1蛋白的表达.结果 正常结肠组织中MTA1阳性表达率为6.67%,管状腺瘤为42.86%,绒毛状腺瘤为63.64%,结肠癌为84.62%,呈逐渐上升趋势,χ2=68.668,P<0.001;中重度异型增生结肠腺瘤中MTA1的阳性表达率(81.25%)高于轻度异型增生结肠腺瘤(39.02%),χ2=16.421,P<0.001;正常结肠组织中TSLC1阳性表达率为96.67%,管状腺瘤为88.57%,绒毛状腺瘤为63.64%,结肠癌组为42.31%,呈逐渐下降趋势,χ2=52.679,P<0.001;中重度异型增生结肠腺瘤中TSLC1阳性表达率(37.50%)明显低于轻度异型增生结肠腺瘤(95.12%),差异有统计学意义,χ2=45.982,P<0.001.结论 结肠癌组织中MTA1呈高表达,TSLC1表达缺失.MTA1和TSLC1参与正常组织、癌前病变和癌组织的发生发展,在结肠腺瘤的癌变过程中起着重要的作用.     

大肠癌组织中Cox-2和FasL的表达及意义

目的:探讨Cox2和FasL蛋白在大肠癌组织中的表达、相互关系及临床意义。方法应用免疫组化SP法检测60例大肠癌、20例大肠腺瘤及20例正常大肠组织Cox2和FasL蛋白的表达情况。结果:1)大肠癌组织、大肠腺瘤和正常大肠组织Cox2表达阳性率分别为78.3%(47/60)、55.0%(11/20)和25.0%(5/20),Cox2在大肠癌组织中阳性表达率显著高于腺瘤组织及正常大肠组织阳性表达率,P=0.000。大肠癌、大肠腺瘤和正常大肠组织阳性表达率分别为86.7%(52/60)、50.0%(10/20)和20.0%(4/20)FasL在大肠癌组织中阳性表达率显著高于腺瘤组织及正常组织,P=0.000。2)Cox2和FasL的表达与肿瘤组织学分级及肿瘤生长部位无关Cox2与肿瘤Duke’s分期和淋巴结转移有相关性,P值分别为0.0.25和0.006。Cox2的表达与肿瘤大小有关,P=0.005。3)大肠癌组织中Cox2与FasL蛋白的表达为正相关性,r=0.627,P=0.000。结论:大肠癌组织中Cox2和FasL高表达,两者之间的表达强度有等级相关性。Cox2蛋白可通过诱导FasL蛋白的表达上调,增加大肠癌细胞侵袭力,从而成为其促进癌细胞浸润、转移的途径之一。     

蛋白激酶C-α、CyclinD1和Cdk4在大肠癌中表达的相关性及临床意义

目的 探讨PKC α,CyclinD1和Cdk4在大肠癌中表达的相关性及其与临床病理学特征的关系。方法 应用免疫组化SP法对83例大肠组织中PKC α,CyclinD1和Cdk4的表达进行检测。结果 PKC α在大肠癌组织中阳性表达31/47（66.0%）与正常组织3/15（20.0%）及腺瘤10/21（47.6%）相比差异有统计学意义（P<0.05）,与大肠癌分化程度,Dukes分期,淋巴结转移及CEA水平明显相关（P<0.05）。CyclinD1和Cdk4在大肠癌中阳性表达分别为26/47（55.5%）、28/47（59.6%）,与正常组织中2/15（13.3%）、1/15（6.70%）及腺瘤组织中8/21(38.1%)、9/21（42.9%）相比呈递增趋势（P<0.05）。大肠癌中CyclinD1阳性表达与肿瘤分化程度,Dukes分期,淋巴结转移呈正相关（P<0.05）,而与CEA水平关系不大（P＞0.05）;Cdk4阳性表达则与分化程度,Dukes分期有关（P<0.05）,与淋巴结转移及CEA水平关系不密切（P＞0.05）。PKC α与CyclinD1呈正相关关系（r=0.348,P<0.05）,CyclinD1和Cdk4呈正相关关系（r=0.393,P<0.05）,PKC α和Cdk4则无明显相关性（r=0.167,P＞0.05）。结论 蛋白激酶C α与CyclinD1及Cdk4的过表达在大肠癌的发生、发展中起着重要的协同作用。三者的过表达与大肠癌的分化程度,Dukes分期密切相关。     

大肠癌组织中CyclinD1和p16及Rb的表达及其临床意义

目的:探讨细胞周期调控因子在大肠癌组织中的表达及其与大肠癌临床病理特征的关系。方法:应用免疫组化SP法对70例大肠癌组织及距癌灶3cm以外的癌旁组织和10cm以外的正常组织中CyclinD1、p16和Rb进行检测。结果:CyclinD1在大肠癌中过度表达为51.4%(36/70),并与肿瘤分化程度呈反比,有淋巴结转移的大肠癌,CyclinD1阳性率为70.0%,无淋巴结转移的大肠癌阳性率为44.0%,两者相比差异有统计学意义(P=0.049)。p16在大肠癌中为低表达47.1%(33/70),癌旁组织和正常组织中p16的表达分别为57.1%和71.4%。Rb在大肠癌、癌旁及正常组织中的表达分别为65.7%、78.6%和85.7%。CyclinD1与p16表达呈负相关(P=0.000,r=-0.514),p16与Rb表达呈负相关(P=0.001,r=-0.403)。结论:CyclinD1过度表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移密切相关;p16表达可能受Rb蛋白的负调控;CyclinD1过度表达和p16低表达在大肠癌发生中起协同作用;大肠癌发生机制涉及CyclinD1、p16和Rb调节环路中多个基因的异常。     

Alteration of O6-methylguanine-DNA methyltransferase in colorectal neoplasms in sporadic and familial adenomatous polyposis patients

DNA repair failure is known to be a critical event during carcinogenesis of colorectal cancers. To investigate whether O(6)-methylguanine-DNA methyltransferase (MGMT) is altered during colorectal carcinogenesis, we performed immunohistochemical staining on 265 sporadic colorectal cancers, 113 sporadic adenomas, 33 familial adenomatous polyposis (FAP) colorectal cancers, and 93 FAP adenomas. Sixty-seven of 265 sporadic colorectal cancer cases and five of 113 sporadic adenoma cases showed loss of MGMT expression (P < 0.001). Among FAP patients, four of 33 cancers and six of 93 adenomas showed loss of MGMT protein expression. When we compared the association between MGMT promoter hypermethylation and protein expression, almost all cases without a methylated allele were positive for the expression of MGMT. In contrast, cases with promoter methylation frequently showed loss of MGMT expression (P < 0.01). Loss of MGMT was correlated with some clinicopathological characteristics, i.e., tumor invasion (P = 0.013) and stage (P = 0.035) in sporadic colorectal cancer, and degree of atypism (P = 0.042) in sporadic adenoma. Our results show that loss of expression of MGMT occurs more frequently in cancer than in adenoma in both sporadic and FAP patients, and that loss of expression of MGMT is associated with hypermethylation of the promoter area of MGMT gene.     

散发性结直肠癌、腺瘤组织中hMLH1和突变型p53表达

[目的]探讨hMLH1和p53基因在散发性结直肠癌发生机制中所起的作用。[方法]采用PV-6000二步法免疫组化检测技术对60例散发性结直肠癌，45例大肠腺瘤和26例正常大肠黏膜石蜡切片进行hMLH1和p53表达的检测。[结果]（1）60例散发性结直肠癌hMLH1蛋白阴性表达和p53蛋白阳性表达分别为11例（18．3％）和32例（53.3％），hMLH1蛋白阴性表达和p53蛋白阳性表达与患者年龄、肿瘤部位、组织学类型和分化程度密切相关（P〈0．05或P〈0．01），而与患者性别、肿瘤大体类型、肿块大小、浸润深度、淋巴结及远处转移与否和患者的Duke’s分期均无显著相关性（P〉0．05）。（2）大肠腺瘤患者p53蛋白阳性表达与患者腺瘤部位、组织学类型和不典型增生程度密切相关（P〈0．05），而与患者性别、年龄无显著相关性（P〉0．05）。（3）散发性结直肠癌中hMLH1蛋白阴性表达组p53蛋白阳性表达率（18.2％，2/11）低于阳性表达组（61．2％，30／49）（P〈O．05）。[结论]（1）大部分散发性结直肠癌是沿染色体不稳定途径发生，其中抑癌基因p53的突变起重要作用。同时，一定比例的散发性结直肠癌中存在错配修复基因的缺陷，并具有相对特殊的临床病理特征。（2）大肠腺瘤组织中有一定比例的hMLH1蛋白阴性表达和p53蛋白阳性表达，提示hMLH1和p53基因的突变可能是散发性结直肠癌发生的早期事件之一。     

CyclinD1在大肠良、恶性肿瘤中的表达及与大肠癌生物学特性关系的研究

目的研究CyclinD1在大肠良、恶性肿瘤中的表达,探讨其在大肠癌发病中的作用机制及与大肠癌生物学特性的关系.方法应用免疫组织化学SABC法进行研究.结果CyclinD1在大肠癌中的过表达率显著高于大肠腺瘤,而正常大肠粘膜中未见CyclinD1过表达,CyclinD1过表达与肿瘤部位、组织学类型、组织分化程度、淋巴结转移均无相关性,只与组织浸润深度呈显著正相关.结论CyclinD1过表达在大肠癌形成过程中起重要促进作用,且CyclinD1过表达可作为大肠癌预后不良的指标之一.