慢性丙型肝炎患者血清HCV-RNA水平与抗-HCV抗体和肝纤指标水平相关性分析

目的探讨丙型肝炎患者RNA水平与抗-HCV抗体和肝纤指标水平的关系。方法收集96例慢性丙型肝炎患者的血清,实时荧光定量PCR测定HCV-RNA和ELISA法检测抗-HCV抗体。化学发光法检测LN、PCⅢ、CⅣ及放免法检测HA。并对抗-HCV抗体、HCV-RNA水平与血清肝纤指标之间的关系进行分析。结果本研究的96例抗-HCV抗体阳性的慢性丙型肝炎患者中,HCV-RNA阳性52例,阳性率为54.2%。随着抗-HCV抗体的S/CO值升高,HCV-RNA检出率也在增高,分别为9.5%、37.1%和92.5%。高病毒载量组与低病毒载量组比较,血清HA、LN、PCⅢ及CⅣ水平的差异无统计学意义(P0.05)。结论慢性丙肝患者HCV-RNA阳性检出率与抗-HCV抗体的S/CO值有关,S/CO值越高,HCV-RNA阳性率越高。而RNA水平与肝纤指标水平没有相关性。     

化学发光免疫分析检测丙型肝炎病毒抗体与重组免疫印迹试验确证阳性的关联研究

目的：探讨化学发光免疫分析（CLIA）检测丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）与重组免疫印迹试验（RI-BA）确证结果的关系。方法对10309例在山东大学附属省立医院就诊的门诊及住院患者采用 CLIA 法进行抗-HCV 检测，对检测为有反应性的标本通过 RIBA 作进一步确证。结果CLIA 初筛抗-HCV 抗体有反应性的标本共计106例，采用 RIBA 试剂对106例反应性标本进行检测，确认阳性37例、不确定28例、阴性41例，确认阳性比例为34．91％，且确认阳性标本比例与 S/CO 比值呈正相关。确证阳性标本条带检出率有差别，Core 检出率最高，其次依次为 NS3、NS4、NS5。结论确证结果与确证的条带分布有关，可根据 CLIA 法 S/CO 比值预测确证结果，有利于对结果进行正确和合理解释。     

抗-HCV,HCV RNA检测在丙型肝炎中的应用价值探讨

目的探讨抗-HCV,HCV RNA检测在丙型肝炎诊断中的临床价值。方法选择2018年5月-2018年12月检验科收集的143例抗-HCV(S/CO≥1)初筛实验阳性的血清标本,分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)及荧光定量聚合酶链反应法(PCR)、日立7600全自动生化分析仪,进行抗-HCV、HCV RNA病毒载量、ALT检测。结果143例抗-HCV初筛阳性患者中,99例HCV RNA阳性(69.23%),且随着S/CO比值的增高HCV RNA检出的阳性率增加,差异有统计学意义(P<0.01);99例HCV RNA阳性患者中93例抗-HCV的S/CO>10,但随着S/CO的增大,HCV RNA病毒载量高低水平出现的阳性率没有增加(P>0.05);HCV RNA阳性患者ALT异常率(46.46%)高于阴性患者(20.45%),差异有统计学意义(P<0.05);44例HCV RNA阴性(30.76%)患者中有33例的S/CO>10,且有9例ALT异常。结论ELISA法检测血清抗-HCV诊断丙型肝炎与荧光定量PCR检测法均存在假阳性或假阴性情况;荧光定量PCR法的阳性率低于ELISA法;在临床诊断中ELISA法抗-HCV初筛阳性的样本应同时进行HCV RNA及ALT的联合检测,以避免漏诊、误诊,也为临床抗病毒的有效评估提供可靠的实验室依据。     

两种方法检测HCV-RNA的结果分析

目的比较两种方法检测丙型肝炎病毒核酸(HCV-RNA)的结果。方法逆转录套式定性PCR(RT-nestedPCR)和荧光定量PCR对288例抗-HCV阳性的丙型肝炎患者血清标本进行HCV-RNA检测。结果288例抗-HCV阳性血清标本有248例RT-nested-PCR结果阳性,阳性率为86.1%(248/288);226例荧光定量PCR检测HCV-RNA>103拷贝/ml,检出率为78.5%(226/288),两种检测结果的阳性符合率为85.9%(219/255)。同时,29例标本定性结果阳性,定量结果<103拷贝/ml;7例标本定性结果阴性,定量结果>103拷贝/ml,差异具有统计学意义(χ2=12.25,P<0.01)。结论两种方法检测HCV-RNA,可以提高检测的灵敏度,为临床治疗提供依据。     

酶联免疫法和PCR在丙型肝炎诊断中的应用对比

探讨酶联免疫法和PCR检测在丙型肝炎诊断中的应用。选取我院2015年1月~2015年12月收治的180例疑似丙型肝炎患者,对其血清标本进行酶联免疫法（ELISA）检测抗-HCV,并对所有标本进行荧光定量PCR法（FQ-PCR）检测HCV-RNA。ELISA检测抗-HCV的阳性率为49.4%,PCR法检测HCV-RNA的阳性率为46.7%,HCV-RNA阳性患者中抗-HCV阳性率和HCV阴性患者差异有统计学意义（P〈0.01）。PCR检测HCV-RNA在丙型肝炎诊断中具有很好的应用价值,ELISA法检测抗-HCV可作为丙型肝炎诊断的确证实验,结合酶联免疫法能有效提高丙型肝炎患者的检出率,具有积极临床意义。     

110例丙肝患者HCV-RNA载量及抗-HCV与肝功能指标的相关性研究

目的 研究丙型病毒性肝炎(简称丙肝)患者血清HCV-RNA含量及抗-HCV与ALT、AST浓度的关系.方法 采用实时荧光定量PCR法检测110例患者的血清HCV-RNA,ELISA法检测抗-HCV,全自动生化分析仪检测ALT、AST.结果 丙肝患者抗-HCV滴度显著高于健康对照组,大部分患者的ALT、AST水平均有显著性上升;HCV-RNA含量与ALT、AST水平有显著相关性,而与抗-HCV的S/CO值无显著相关性.结论 HCV-RNA和抗-HCV检测与肝功能指标各有利弊,三者结合起来在早期准确诊断及监测疗效中具有重要意义和价值.     

抗-HCV联合丙型肝炎病毒核酸检测在丙型肝炎患者中的临床价值

目的探讨抗-HCV阳性和抗-HCV阴性与丙型肝炎核酸(HCV-RNA)载量关系及其在丙型肝炎检测中的应用价值。方法回顾性分析2010年9月至2013年10月该院236例丙型肝炎患者,抽取所有患者血清标本,采用化学发光微粒子免疫法检测抗-HCV,实时荧光定量聚合酶链反应法检测HCV-RNA,并对检测结果进行比较。结果抗-HCV总检出率为83.4%(197/236),HCV-RNA总检出率为87.1%(207/236),两者比较差异有统计学意义(P=0.00),抗-HCV和HCV-RNA联合检测的准确率为98.7%(233/236)。HCR-RNA阳性和阴性患者ALT阳性率比较,差异有统计学意义(P=0.00)。HCR-RNA和ALT相关系数为r=0.86(P=0.00)。结论联合检测抗-HCV和HCV-RNA,可早期确诊HCV感染患者。     

临汾地区丙型肝炎病毒感染检测结果分析

目的了解本地区普通人群中丙型肝炎病毒(HCV)感染实验室检测情况。方法收集2015年1月1日至12月31日来山西省临汾市人民医院就诊的申请检测丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)的门诊及住院患者标本共21 120例,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行抗-HCV的筛查,对ELISA筛查阳性的标本采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法进行丙型肝炎病毒核酸(HCV RNA)检测。结果 21 120例标本中抗-HCV筛查阳性率为0.69%(146/21 120);在146例抗-HCV标本中其中47例检测出HCV RNA,检出率为32.2%(47/146);检测出HCV RNA标本的抗-HCV的浓度试剂测量值/阳性判定值之比值(S/CO值)介于8.32~25.80(8.0)。结论在山西临汾地区就诊的普通人群中抗-HCV阳性分布比例以及HCV RNA检出率均较低,可检出HCV RNA的患者抗-HCV浓度相对较高。     

丙肝病毒核心抗原检测的临床价值及其与HCV-RNA、ALT、AST的关系研究

目的 探讨丙肝病毒核心抗原(HCV-cAg)检测的临床价值及其与HCV-RNA、ALT、AST的关系。方法 留取112例HCV-cAg检测阳性标本,205例丙肝病毒核心抗体(HCV-Ab)阳性标本,利用实时定量PCR法测定HCV-RNA,同时进行肝功能(ALT、AST)检测。结果 112例HCV-cAg阳性和205例HCV-Ab阳性标本中,HCV-RNA阳性分别为95例(阳性率84.8%)和142例(阳性率69.3%),前者显著高于后者(P0.05);前者肝功能异常70例(占62.5%),后者肝功能异常95例(占46.3%),前者显著高于后者(P0.05)。HCV-cAg结果S/CO值增高与HCV-RNA 阳性率和肝功能异常率呈正相关。结论 HCV-cAg检测阳性结果与HCV-RNA符合率高,并能够反应肝功能损伤程度,HCV-cAg检测对辅助临床诊疗具有重要的价值。     

维持血液透析患者丙型肝炎抗-HCV ELISA检测灰区标本确认的意义

目的探讨维持血液透析患者酶联免疫吸附试验(ELISA)抗-HCV检测灰区标本确认的临床价值。方法选取ELISA检测抗-HCV吸光度/临界值(S/CO)比值在0.5~3.5之间的标本95份用荧光定量聚合酶链反应(PR-PCR)进行确认。结果在抗-HCV灰区(0.5≤S/CO3.5)的95份标本中,0.5≤S/CO1.0的标本13份,经PR-PCR荧光定量进行确认阳性2份,阳性率15.4%(2/13);1.0≤S/CO3.5两个区段标本82份,经PR-PCR确认25份,阳性率分别33.3%(10/30)和28.8%(15/52)。结论维持血液透析患者(MHD)抗-HCV ELISA检测灰区标本应进一步确认,以防止漏诊误诊。     

两种方法对丙型肝炎病毒检测的对比研究

目的探讨荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）和酶联免疫吸附试验（ELISA）在检测丙型肝炎病毒（HCV）方面的差异。方法 60例确诊为丙型肝炎的住院患者样本作观察组,80例健康体检人群样本作健康对照组,应用FQ-PCR和ELISA分别对这两组样本进行HCV-RNA和抗HCV抗体（抗-HCV）检测。结果 60例观察组样本中,FQ-PCR和ELISA分别检出阳性54例和49例,阳性率分别为90%和81.67%,80例健康对照组样本中,FQ-PCR和ELISA分别检出阴性80例和77例,阴性率分别为100%和96.25%。结论在检测HCV方面,FQ-PCR比ELISA更具灵敏性和特异性,其结果更加符合患者真实情况,且FQ-PCR检测HCV具有更好的临床应用价值,若两种方法同时使用,则可大大提高临床对丙型肝炎的准确诊断。     

抗-HCV联合TMA定性检测HCV—RNA在维持性血液透析患者丙型肝炎病毒感染早期诊断中意义的探讨

目的研究维持性血液透析患者丙型肝炎病毒（HCV）感染的血清学诊断方法,探讨抗．HCV联合HCV-RNA检测在维持性血液透析患者HCV感染早期诊断中的意义,以期获得维持性血液透析患者HCV感染早期诊断的可靠方法。方法选择深圳市第二人民医院血液透析中心183例维持性血液透析患者为研究对象,分别使用国产和进口HCV抗体试剂盒检测抗-HCV,使用TMA法定性检测HCV—RNA,荧光定量PCR法定量检测HCV-RNA,比较不同产品及诊断方法对HCV的检出率,评价ALT变化与HCV—RNA载量的关系,评价抗-HCVS／CO值与HCV-RNA载量的关系。结果国产和进口试剂检测抗-HCV的检出率均为7．1％（P=1．000）;TMA法定性检测HCV—RNA的检出率为8。7％,免疫荧光定量PCR法的检出率为5．5％,但两者之间差异有统计学意义（x^2=87．537,P=0．000）;HCV-RNA定性检测比检测抗．HCV的检出率高,两者的差异有统计学意义（x^2=81．531,P=0．000）;联合抗-HCV和HCV-RNA定性检测结果HCV阳性共19例,检出率为10．4％,与单独检测抗．HCV比较差异有统计学意义（P=0．031）,但与单独定性检测HCV—RNA比较差异无统计学意义（P=0．250）。HCV．RNA的载量和ALT的变化无相关性（r=0．189,P=0．536）;抗-HCV初筛的S／CO值与HCV—RNA载量无相关性（r=0．174,P=0．569）。结论HCV．RNA定性检测较抗．HCV检测能缩短维持性血液透析患者HCV感染检出的窗口期,有利于早期诊断。HCV—RNA定性检测能较临床现行的HCV．RNA免疫荧光定量检测显著提高HCV感染的检出率。联合抗-HCV和TMA法定性检测HCV—RNA既能缩短HCV感染的“窗口期”,也能显著提高HCV感染的检出率,可避免漏检处于血清转换期或慢性病毒携带或既往感染的“隐性”患者,值得临床推广应用。ALT的变化和HCV载量无明显相关性,在血液透析患者中辅助早期诊断HCV感染的作用较小。     

核酸纯化柱提取核酸定量检测丙型肝炎病毒RNA的临床应用

目的观察核酸纯化柱提取法（简称柱提法）对血浆标本中丙型肝炎（简称丙肝）病毒核糖核酸（HCV-RNA）进行定量检测的临床应用效果。方法分别用柱提法和酚-氯仿提取法提取血浆标本中的HCV-RNA,用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）技术对117例抗-HCV阳性的丙肝患者同时进行HCV-RNA定量检测,并对结果进行比较分析。结果117例抗-HCV阳性丙肝患者以酚-氯仿提取法提取核酸进行HCV-RNA定量检测的阳性率为66．7％（78／117）,以柱提法提取核酸进行HCV-RNA定量检测的阳性率为79．5％（93／117）。两法比较,差异有统计学意义（X^2=4．26,P〈O．05）。将两法所测浓度结果换算成对数值,经“检验两者差异无统计学意义（μ=1．61,P〉0．05）。结论采用核酸柱提法提取血浆标本中HCV-RNA进行定量检测简单、快速,分离效率高,容易掌握,适于临床常规应用。     

HCV RNA载量与肝脏组织损伤的关系

目的探讨丙型肝炎病毒（HCV）RNA复制水平与肝功能丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）之间的相互关系。方法收集1182例疑似丙肝病人血清标本,采用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测HCV RNA,利用酶动力法测定ALT、AST,采用ELISA测定抗HCV抗体。数据采用SPSS16.0统计软件处理。结果病人血清样本中,HCV RNA阳性801例（64.8%）,其中抗HCV阳性766例（95.6%）;HCV RNA阴性381例（32.2%）,其中抗HCV阳性100例（26.2%）。HCV RNA阳性样本中同时抗-HCV阳性者ALT,AST异常率分别为59.0%和60.8%;抗-HCV阴性者为31.4%和34.2%。HCV RNA阴性样本中同时抗-HCV阳性者ALT,AST异常率分别为24.0%和15.0%,抗-HCV阴性者为13.9%和12.1%。HCV RNA含量与ALT、AST水平明显成正相关,r=0.62,P〈0.05。结论 HCV RNA含量与肝组织损伤程度成正相关。     

对血液抗-HCV筛查结果的确认分析

目的 探讨对抗－HCV ELISA阳性血液进行确认分析的重要性。方法 用第三代免疫印迹法（RIBA 3．0）对抗HCV ELISA阳性血液进行确认，并对部分样品用荧光定量聚合酶链反应（FQ－PCR）检测HCV－RNA。结果 80份抗HCV ELISA阳性血样经RIBA确认，其中阳性38份（47．5％），可疑20份（25％），阴性22份（27．5％），c22、c33c的检出率高于c-100和NS5，而且20份RIBA 3．0可疑血样的HCV－RNA为阴性。结论 对抗－HCV阳性血液确认尤为重要，能提高诊断HCV的准确性。     

应用回归方程设置CLIA法检测梅毒抗体的灰区范围

目的研究化学发光免疫分析(CLIA)法检测梅毒抗体时S/CO值与阳性预测值的相关关系,建立两者间的回归方程,并应用于设置该方法的灰区范围,以应对检测结果出现假阳性的问题。方法收集CLIA法检测梅毒抗体呈阳性(S/CO值≥1)的血清标本878例,按照S/CO值在1~<3、3~<5、5~<7、7~<9、9~<11、≥11的范围将所有标本分为6个组;以梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验(TPPA)为确证试验对各组标本梅毒抗体进行确认检测,计算各组标本CLIA法的阳性预测值;用SPSS20.0统计软件对CLIA法S/CO值与阳性预测值的关系进行曲线估计,获取最佳曲线模型并建立回归方程,通过回归方程设置CLIA法检测血清梅毒抗体的灰区范围。结果878例CLIA法检测梅毒抗体呈阳性的血清标本,经TPPA检测确认阳性(包括弱阳性)779例,阴性99例;S/CO值在1~<3、3~<5、5~<7、7~<9、9~<11、≥11这6个组的阳性预测值分别为50.77%、79.28%、89.28%、97.80%、98.57%、100.00%;回归分析显示CLIA法S/CO值与阳性预测值的关系呈S型曲线,回归方程为Y=e-1.692/X+0.174,CLIA法检测梅毒抗体的灰区范围设置为1≤S/CO值≤7.52。结论通过建立CLIA法S/CO值与阳性预测值的回归方程,可以为该方法检测梅毒抗体设置较为理想的灰区范围,并可以对检测的假阳性状况进行评估。     

JAK2V617F 基因突变的定量测定及在慢性骨髓增殖性疾病中的应用

目的：探讨荧光定量 PCR 的方法检测 JAK2V617F 基因突变并分析其在慢性骨髓增殖性疾病（CMPD）中的诊断价值。方法采用荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测68例确诊 CMPD 患者骨髓标本中 JAK2V617F 基因突变的阳性率和相对定量,分析其在 CMPD 中的诊断价值以及和临床资料之间的联系。结果68例确诊患者的骨髓标本均成功扩增 JAK2V617F 野生型和突变型。JAK2V617F 基因突变的总阳性率为66．2％（45/68）,其中真性红细胞增多症（PV）患者阳性率75．0％（21/28）,原发性血小板增多症（ET）阳性率60．6％（20/33）,特发性骨髓纤维化（IMF）阳性率57．1％（4/7）。PV 患者 JAK2V617F 突变阳性率明显高于 ET 和 IMF 患者。PV 患者 JAK2V617F 的相对定量和血红蛋白数和白细胞数呈正相关。ET 患者中 JAK2V617F 的相对定量和患者的血小板计数呈正相关。结论荧光定量 PCR 的方法能够快速准确的检测 JAK2V617F 基因突变及其突变比例,为临床诊断 CMPD 提供有效的实验室指标,JAK2V617F 的相对定量和患者的临床血液学指标存在一定关系。     

丙肝病毒抗体化学发光酶免疫分析方法的建立和应用

【目的】建立丙肝病毒抗体化学发光酶免疫分析方法（CUA）并应用于临床检测。【方法】以辣根过氧化物酶（HRP）为酶标记物,以鲁米诺为发光底物,采用双抗原夹心法检测血样中的抗丙肝病毒（HCV）,建立抗HCV化学发光酶免疫分析方法;并与常规使用的抗HCV酶联免疫分析方法（ELISA）同时检测500例血浆标本中的抗HCV,以荧光定量PCR为金标准,探讨其临床应用价值。【结果]CLIA方法敏感度为0．2ng／mL,变异系数〈10％,稳定性好。CLIA和ELISA同时检测500例血浆标本,ELISA检测出7例阳性,CLIA检测出8例阳性,经PCR检测最终确定结果与CLIA相符。【结论]CLIA法检测HCV敏感、准确、稳定性好,适合临床推广应用。     

化学发光法检测梅毒螺旋体特异性抗体的实验评价

目的应用免疫印迹法（WB）比较临床常用的梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）与化学发光法（CLIA）检测血清梅毒螺旋体特异性抗体的符合率。方法收集7 805份临床检测的血清标本,分别用TPPA和CLIA进行梅毒螺旋体特异性抗体检测,对结果不一致的标本应用WB检测确证。结果 7 805份血清标本中,CLIA检测阳性310例,TPPA检测阳性262例。对结果不一致的48例标本应用WB检测验证,结果证实阳性36例,临界阳性8例,阴性4例,而TPPA的结果均为阴性。TPPA检测总符合率为99.44%,CLIA检测总符合率为99.95%。结论 CLIA敏感性优于临床常用的TPPA,且具有结果客观、易分析、重复性好等优点,但也存在个别假阳性和钩状效应,因此应结合TPPA及临床资料确诊。     

实时荧光聚合酶链反应检测患儿手足口病病原体

目的采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测患儿手足口病病原体,为防治手足口病提供依据。方法收集手足口病疑似患儿189例(按年龄分为<3岁组113例、3～5岁组76例)及39例手足口病密切接触儿童的咽拭子、疱疹液,用FQ-PCR检测标本中的肠道病毒通用型(EV)、肠道病毒71型(EV71)及柯萨奇病毒A组16型(CoxA16),并与酶联免疫吸附试验(ELISA)结果进行比对。结果 189例手足口病患儿疑似组FQ-PCR检测EV阳性141例,阳性率为74.6%,其中<3岁阳性91例、3～5岁阳性50例,3～5岁组EV检出率明显低于<3岁组(P<0.05);EV71阳性135例,CoxA16阳性65例;咽拭子标本阳性率为74.5%(120/161),疮疹液标本阳性率为82.1%(23/28);ELISA检测EV阳性76例(40.2%);39例手足口病密切接触者FQ-PCR检测EV阳性率为33.3%(13/39),ELISA检测阳性率为17.9%(7/39)。结论 FQ-PCR是一种特异性强、灵敏度高、检测较快速、效率高的方法,对检测手足口病病原体及进行相关流行病调研有重要价值。