心肌营养素-1在大鼠缺血再灌注心肌中的表达及神经调节蛋白-1对其表达的促进作用

目的研究大鼠缺血再灌注心肌中心肌营养素-1(CT-1)的表达及神经调节蛋白-1(NRG-1)对其表达的影响。方法制备大鼠缺血再灌注心肌模型,分为模型组(n=8),NRG-1预处理组(n=9),假手术组(n=8)和正常对照组(n=10)。利用RT-PCR技术检测各组CT-1 mRNA表达,计算CT-1 mRNA相对量,并作统计学处理。结果模型组CT-1 mRNA结果(63.96±9.34)高于假手术组(36.16±5.43)和正常对照组(36.84±4.64),三者比较差异有显著性(F=47.37 P<0.01);NRG-1预处理组(89.49±6.99)高于模型组,差异有显著性(t=6.43 P<0.01)。结论大鼠心肌缺血再灌注后CT-1 mRNA表达升高,其原因可能是缺血再灌注激活机体内源性保护机制,NRG-1预处理对心肌的保护作用可能与提高心肌细胞中CT-1的表达有关。实用儿科临床杂志,2006,21(1):29     

心脉隆对窒息新生鼠心肌缺氧诱导因子-1α的影响

目的：心脉隆是从昆虫类美洲大蠊中提取和制备的化合物,主要用于心血管疾病的治疗。该文研究心脉隆对窒息新生鼠心肌缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与血浆内皮素1（ET-1）的影响,探讨心脉隆对心肌缺氧缺血性损伤的保护机制。方法：新生7日龄Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组(n=30)、窒息组(n=30)、心脉隆组(n=30)。每组再分6 h,24 h,72 h 3个时间点,每个时间点各10只,心脉隆组在进行窒息前5 min给予心脉隆注射液5 mg/kg腹腔注射。检测新生鼠心肌的HIF-1α,ET-1,心肌酶CK及心肌组织病理学。结果：窒息组4只鼠死亡,心脉隆组1只鼠死亡。窒息组心肌HIF-1α的表达与血浆ET-1水平于6 h升高,24 h达到高峰,72 h下降,均高于假手术组(P＜0.01);3个时间点均可见心肌缺血,24 h还可见细胞坏死;HIF-1α的表达与血浆ET-1水平呈正相关(r=0.876,P＜0.01)。与窒息组同时间点比较,心脉隆组心肌酶CK、血浆ET-1的水平和心肌HIF-1α的表达均显著减低(P＜0.01),且可见心肌缺血改善,未见细胞坏死。结论：窒息时心肌HIF-1α表达和血浆ET-1,CK水平升高;心脉隆可降低HIF-1α表达,降低血浆ET-1的水平,减轻心肌缺氧缺血性损伤。［中国当代儿科杂志,2009,11（8）：683-686］     

缺氧缺血性脑病新生大鼠心肌血红蛋白加氧酶-1 mRNA表达与心肌细胞凋亡的关系

目的探讨HIE新生大鼠心肌血红蛋白加氧酶-1(HO-1)mRNA的表达及其与心肌细胞凋亡的关系。方法7日龄SD大鼠制备HIE经典模型。分为HIE组、HIE+Znpp组和对照组。采用原位杂交法观测其不同时间点各组HIE新生大鼠心肌细胞HO-1mRNA表达,采用图像分析半定量法检测其阳性强度,原位缺口末端标记(TUNEL)法检测其凋亡心肌细胞。结果1.HIE组心肌细胞HO-1mRNA表达6h开始上调(P<0.05),12h达高峰,48h开始略有下降,72h后仍高于对照组(Pa<0.01);与对照组比较,HIE+Znpp组心肌细胞HO-1mRNA表达下调,48h开始升高,72h后略低于对照组(P<0.05)。2.HIE组心肌细胞凋亡6h开始升高,48h达高峰,72h后略降低;HIE+Znpp组心肌细胞凋亡6h开始升高,12h达高峰,24h后略降低,但仍高于对照组和HIE组(P<0.01,0.05)。结论HIE新生大鼠心肌HO-1mRNA表达增加,可能降低了心肌细胞凋亡,提示HO-1参与HIE时机体对心肌细胞保护机制之一。     

缺氧缺血性心肌损伤新生儿血浆心肌营养素-1的变化及意义

目的 观察血浆心肌营养素-1(CT-1)在新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)合并心肌损伤中的变化及临床意义.方法 选择HIE患儿45例(轻度15例、中度24例、重度6例)为观察组,根据有无心肌损伤分为心肌损伤组(19例)和无心肌损伤(26例)两个亚组.20例正常新生儿为对照组.采用双抗体夹心酶标免疫分析法检测血浆CT-1水平.同时检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)和心肌肌钙蛋白I(CTnI)水平.结果 轻度、中/重度HIE组血浆 CT-1水平分别为169±20、287±44 pg/mL,均 高于对照组(30±8 pg/mL)(P<0.01),且中/重度HIE组高于轻度HIE组(P<0.01).HIE患儿急性期血浆CT-1水平与血清CK-MB、CTnI均呈显著正相关(r分别为0.565、0.621,均P<0.01).心肌损伤亚组血浆CT-1水平较非心肌损伤亚组升高(249±35 pg/mL vs 177±26 pg/mL;P<0.01).心肌损伤亚组急性期血浆CT-1水平(249±35 pg/mL)明显高于恢复期(157±19 pg/mL)(P<0.01).结论 检测HIE患儿血浆CT-1水平有助于HIE新生儿心肌损伤的诊断,且有助于判断HIE病情.     

单核细胞趋化蛋白-1在多柔比星肾病大鼠模型中表达的意义

目的 观察单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在多柔比星肾病大鼠肾组织及尿液中的表达,探讨MCP-1在微小病变肾病综合征(MCNS)中的作用机制.方法 雄性Wistar大鼠83只.随机分为正常对照组(n=40)和肾病组(n=43).大鼠尾静脉单次注射多柔比星5 mg/kg制备模型.在实验第7、14、28、42天检测各组大鼠24 h尿蛋白定量, 同时采用ELISA检测各组大鼠尿、肾组织MCP-1水平,采用SPSS 11.0软件对各组间差异进行t检验和两变量间的相关性分析.结果 1.肾病组大鼠尿蛋白排泄量逐渐增加,第7、14、28、42天与正常对照组比较,均有显著性差异(Pa<0.01).2.不同时期肾病组大鼠肾组织及尿液MCP-1均明显高于同期正常对照组(Pa<0.01).3.不同时期肾脏及尿液中MCP-1的变化分别与24 h尿蛋白定量呈正相关(r=0.583,0.651 Pa<0.01).尿液MCP-1水平与肾脏MCP-1水平也呈正相关(r=0.810 P<0.01).结论 MCP-1参与了多柔比星肾病大鼠蛋白尿的发生.尿液中MCP-1水平可反映肾组织MCP-1水平,可作为判断MCNS病情的检测指标之一.     

白细胞介素-1受体拮抗剂对多柔比星肾病大鼠的治疗作用

目的 探讨IL-1受体拮抗剂(IL-1Ra)对多柔比星(ADR)肾病大鼠的治疗作用.方法 采用前瞻性随机方法 ,通过查随机数字表将无特定病原体(SPF)级雄性SD大鼠随机分为正常对照组(A组,n=10),ADR肾病组(B组,n=10),ADR肾病IL-1Ra治疗组(C组,n=10),ADR肾病9 g/L盐水治疗组(D组,n=10).检测治疗前及治疗后2周各组大鼠尿蛋白、血清IL-1、TNF-α、清蛋白(Alb)、总胆固醇(TC)、BUN、肌酐(Scr)水平.结果 B、D组及C组大鼠治疗前血清IL-1、TNF-α水平均明显高于A组(Pa<0.01);血清BUN、Scr与A组比较均无显著性差异(Pa>0.05);C组大鼠IL-1Ra治疗2周后,24 h尿蛋白、血清IL-1、TNF-α、TC水平均较B、D组及C组治疗前明显降低(Pa<0.01),24 h尿蛋白、血清IL-1、TNF-α均接近A组水平(Pa>0.05),血清Alb仍较A组低,二者比较有显著性差异(P<0.01),但高于治疗前水平(P<0.01),TC明显低于治疗前水平(P<0.01),但较A组高,有显著性差异(P<0.01),血清BUN、Scr水平各组间比较,均无显著性差异(Pa>0.05).结论 IL-1Ra能从多方面阻断IL-1在肾病综合征大鼠的发生发展的作用,对改善预后等方面起重要作用,可使ADR肾病大鼠尿蛋白排出减少、提高血清Alb、降低血清TC和IL-1、TNF-α水平;对血清BUN、Scr水平无无影响.     

大环内酯类药物对哮喘大鼠肺组织凋亡相关蛋白表达的影响

目的 研究大环内酯类药物对哮喘大鼠肺组织窖蛋白-1(Cav-1)和凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)蛋白表达的影响及二者的相互关系.方法 将40只大鼠随机分为4 组:对照组、模型组、红霉素干预组(A1组)、红霉素+地塞米松干预组(A2组).以卵白蛋白致敏制作大鼠哮喘模型.应用免疫组织化学法和蛋白印迹方法检测不同组别大鼠肺组织Cav-1和Bcl-2蛋白的表达.结果 免疫组织化学法和蛋白印迹方法检测不同组别大鼠肺组织Cav-1和Bcl-2蛋白表达结果一致.模型组大鼠肺组织Cav-1蛋白表达显著低于其他各组(Pa<0.01).A2组大鼠肺组织Cav-1蛋白表达显著高于A1组(P<0.05),但A1组和A2组均显著低于对照组(Pa<0.01).模型组大鼠肺组织Bcl-2蛋白表达显著高于对照组和A2组(P<0.05,0.01),但与A1组相比差异无统计学意义(P＞0.05).A1组、A2组与对照组相比,Bcl-2蛋白表达均显著升高(Pa<0.01),但A1组与A2组比较差异无统计学意义(P＞0.05).Cav-1与Bcl-2蛋白表达呈显著负相关(r=-0.618,P<0.01).结论 大环内酯类药物可协同糖皮质激素通过上调Cav-1表达和下调Bcl-2表达促进细胞凋亡,从而发挥抗炎作用.     

地塞米松、1,6-二磷酸果糖对内毒素血症大鼠心肌酶及心肌超微结构的影响

目的探讨地塞米松(DXM)、1,6-二磷酸果糖(FDP)对内毒素血症大鼠心肌酶谱(cTnI、CK-MB)及心肌细胞超微结构的影响。方法将80只SD大鼠随机分为4组:9g.L-1盐水对照组(NS组,n=8),腹腔注射9g.L-1盐水1mL;内毒素组(LPS组,n=24),腹腔注射LPS5mg·kg-1;DXM组(n=24),LPS注射后1h,腹腔注射DXM5mg·kg-1;FDP组(n=24),LPS注射后1h,腹腔注射FDP1g.kg-1。分别于注射后6、12、24、72h,经腹主动脉采血3mL,同时取其心肌标本,采用化学发光法检测其血清CK-MB和cTnI,心肌标本HE染色及制作电镜切片,光镜及电镜下观察其心肌结构改变。结果与NS组比较,LPS组6h血清cTnI和CK-MB水平明显升高(P<0.01,0.05),24h达峰值,光镜及电镜下心肌细胞出现病理改变,随着时间的延长,其病理改变逐渐加重。各时间点DXM组、FDP组血清cTnI和CK-MB值较LPS组均显著降低(Pa<0.01),光镜及电镜下心肌细胞的病理改变较LPS组同时间点减轻,72hDXM组和FDP组心肌细胞形态基本正常,FDP组较DXM组恢复好...     

转化生长因子-β1/Smad3信号通路在肾间质纤维化大鼠肾脏组织中的表达和作用

目的 通过检测单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾脏组织转化生长因子-β1(TGF-β1)和Smad3的表达,探讨TGF-β1/Smad3信号通路在肾间质纤维化(RIF)中的作用.方法 雄性6周龄Wistar大鼠48只随机分为假手术组和UUO组,每组24只.UUO组大鼠麻醉后,背侧切口行左侧输尿管结扎术,假手术组大鼠在同样条件下仅探及肾包膜.分别于造模第7、14、21、28天每组各处死6只大鼠,取其左侧肾脏.HE染色和Masson染色行肾脏病理学检查,并计算RIF指数,应用Western blot法和实时荧光定量-PCR检测肾脏组织Smad3蛋白及其mRNA表达;免疫组织化学法检测肾脏组织TGF-β1、Ⅳ型胶原蛋白(Col-Ⅳ)和纤维连接蛋白(FN)的蛋白表达.结果 1.与假手术组大鼠比较,UUO组大鼠各时间点:(1)病理学检查显示,肾小管上皮细胞萎缩,胶原纤维化形成,弥散性单核细胞、淋巴细胞浸润,RIF指数显著增高(P<0.01),梗阻时间越长,RIF指数越高;(2)肾脏组织Smad3蛋白及其mRNA表达均增高(Pa<0.05),梗阻时间越长,表达水平越高;(3)肾脏组织TGF-β1、Col-Ⅳ和FN的蛋白表达均增高(Pa<0.05),梗阻时间越长,表达水平越高.2.相关性分析:(1)UUO组大鼠肾脏组织Smad3、TGF-β1蛋白表达与RIF指数均呈显著正相关(r=0.520、0.727,Pa< 0.01);(2)Col-Ⅳ和FN的蛋白表达与RIF指数均呈显著正相关(r= 0.794、0.786,Pa<0.01);(3) Smad3的蛋白表达与TGF-β1、Col-Ⅳ和FN的蛋白表达均呈显著正相关(r= 0.592、0.672、0.508,Pa<0.01).结论 UUO所致RIF大鼠肾脏组织TGF-β1及Smad3表达均显著升高,梗阻时间越长,表达水平越高,RIF程度越重.TGF-β1/Smad3信号通路可能参与了RIF的发生发展.     

过敏性紫癜患儿血树突状细胞共刺激分子表达及其与辅助性T淋巴细胞1/辅助性T淋巴细胞2平衡相关性

目的观察过敏性紫癜(HSP)患儿外周血树突状细胞(DC)共刺激分子表达及其与辅助性T淋巴细胞(Th)1/Th2平衡的相关性。方法HSP患儿40例。健康对照儿童18例。酶联免疫吸附法(ELISA)检测其血浆IFNγ-、IL-4水平。对其中HSP 28例及18例健康对照儿童外周血单个核细胞(PBMC)体外经细胞因子重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、rhIL-4和rhTNF-α以诱生DC并培养8 d,流式细胞仪检测DC表面CD86(B7-2)、CD80(B7-1)、CD83表达率。结果1.HSP组血浆IFN-γ水平显著低于健康对照组(t=4.26 P<0.01),IL-4水平显著高于健康对照组(t′=5.09 P<0.01),IFN-γ/IL-4比值显著低于健康对照组(t′=7.98 P<0.01)。2.HSP组外周血DC表面CD83表达率与健康对照组无显著性差异(P>0.05);HSP组外周血DC表面CD86表达率显著高于健康对照组(t=3.94 P<0.01),CD80低于健康对照组(t′=2.60 P<0.05)。3.二组外周血DC表面CD86表达率与血浆IL-4水平均呈显著正相关(r=0.53,0.63 Pa<0.01),与IFN-γ/IL-4比值均呈显著负相关(r=-0.55,-0.80 Pa<0.01),而与血浆IFN-γ水平均无相关性(Pa>0.05);二组外周血DC表面CD80表达率与血浆IFN-γ水平均呈正相关(r=0.43,0.49 Pa<0.05),与IFN-γ/IL-4比值均呈显著正相关(r=0.49,0.63 Pa<0.05),而与血浆IL-4水平均无相关性(Pa>0.05)。结论HSP患儿存在Th1/Th2失衡,HSP患儿DC表面共刺激分子差异表达直接或间接导致Th1/Th2失衡。     

基质金属蛋白酶-1与基质金属蛋白酶抑制剂-1在纤维性肌性斜颈患儿中的表达

目的探讨基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)在先天性纤维型肌性斜颈胸锁乳突肌的表达。方法采用Masson三色胶原染色法观察先天性肌性斜颈患儿胶原的增生情况,并进行肌肉型和纤维型分组,获得纤维型标本22例,应用免疫组织化学染色法观察MMP-1、TIMP-1在纤维型组中的表达情况,并与6例对照组比较。结果免疫组织化学染色显示,MMP-1在先天性纤维型肌性斜颈胸锁乳突肌患儿明显减少,与对照组比较有显著性差异(P<0.01);先天性纤维型肌性斜颈胸锁乳突肌患儿TIMP-1表达与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。结论先天性肌性斜颈胸锁乳突肌的纤维化与MMP-1减少有关。     

Formula intake of 1- and 4-month-old infants

This study was designed to estimate energy intake in exclusively formula-fed infants. Formula intake of twenty-four 1- and 4-month-old infants was studied for 5 consecutive days; six boys and six girls were in each age group. Intake was estimated by laboratory-determined weights of formula consumed, spilled, and regurgitated. Two additional methods were used to estimate intake in the first nine infants during the 1st day of observation: test-weighing the infant at each feeding and mother's weighing of formula consumed, regurgitated, and spilled at each feeding. No consistent differences were detected among methods, but test-weighing appeared to have the greatest feed-to-feed variability. Intake was estimated to be 747 +/- 100 g or 125.5 +/- 17 kcal/kg, and 958 +/- 131 g or 94.0 +/- 13 kcal/kg for 1- and 4-month-old infants, respectively. The day-to-day variability (expressed as the coefficient of variation) was 13 and 15% (CV, g/kg) for 1- and 4-month-old infants, respectively. Between-infant variability of intake was approximately 8% (CV, g/kg) for both age groups. Energy intakes of 1-month-old formula-fed infants were similar to published values of breast-fed infants of similar age, but the energy intakes of 4-month-old formula-fed infants were significantly higher than values published for 4-month-old breast-fed infants.     

Glutathione S-transferase Alpha 1-1 and aminotransferases in umbilical cord blood

Recent data suggest that levels of glutathione S-transferase Alpha 1-1 in umbilical cord plasma may be a good indicator of neonatal hepatocellular integrity. In order to fully understand the significance of this new marker we compared the values of glutathione S-transferase Alpha 1-1 (GSTA1-1) with that of the well known liver function markers alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) in arterial and corresponding venous umbilical cord blood of 93 patients. In addition, in 49 of these patients maternal venous blood was also studied. Both arterial and venous umbilical cord GSTA1-1 and AST levels were significantly higher than corresponding maternal venous levels, whereas ALT levels were not. Arterial umbilical cord GSTA1-1 correlated significantly with the corresponding AST and ALT levels (R = 0.46, P < 0.0001 and R = 0.41, P < 0.0001, respectively). Arterial umbilical cord AST correlated significantly with corresponding ALT levels (R = 0.58, P < 0.0001). Arterial umbilical cord plasma GSTA1-1 levels were significantly lower in the cesarean delivery group as compared to the vaginal birth group, whereas no difference was noted for AST or ALT. Arterial umbilical cord AST and GSTA1-1 levels correlated significantly with base deficit (R = 0.29, P = 0.005; R = 0.29, P = 0.005, respectively), whereas ALT did not (R = 0.06, P = 0.54). Arterial umbilical cord AST, ALT, and GSTA1-1 levels correlated significantly with birthweight. In conclusion, GSTA1-1 levels as assessed in neonatal umbilical cord blood, being unrelated to maternal levels, seem to be a more sensitive marker for early neonatal hepatocellular integrity as compared to ALT or AST and even might detect impaired hepatocellular integrity due to the vaginal birth process. Umbilical cord GSTA1-1 may provide a valuable indicator of neonatal condition immediately after birth, the clinical relevance of which needs to be further established.