鼠胚在人类辅助生殖培养环境质量控制的作用研究

目的:利用小鼠体外受精技术对新建辅助生殖实验室进行质量控制的研究.方法:手术获得昆明小白鼠配子,体外受精后培养6d,观察受精率、卵裂率、囊胚率.结果:共进行6个周期的体外受精周期,取卵233枚,受精率85.8%,卵裂率96.0%,2-细胞胚胎囊胚形成率86.5%.结论:用鼠胚对新建辅助生殖胚胎培养环境进行质量控制,结果符合各项标准.     

鼠胚胎培养在辅助生殖实验室质量控制中的应用研究

目的探究鼠胚培养在辅助生殖实验室培养质量控制中的作用。方法利用昆明白鼠进行体内外受精实验,体外受精实验组在小白鼠促排卵后,手术获得配子后进行培养;体内受精实验组在促排卵后合拢交配,手术获取原核胚进行培养。观察并记录两组小鼠胚胎发育情况。结果体内外受精组的受精率分别为(77.64±5.38)%、(79.01±1.24)%,卵裂率分别为(95.48±1.06)%、(92.04±1.01)%,囊胚形成率分别为(81.42±1.13)%、(78.15±0.98)%,两组间差异无统计学意义(P0.05)。结论利用鼠胚实验可建立一套健全、完整的质量控制体系以确保培养环境及系统的可靠性,能为临床诊治提供依据。     

鼠胚培养在体外授精(IVF)实验室质量控制中的应用

目的 :检测胚胎培养实验室的培养体系是否存在对胚胎有害的内毒素 ,以保证培养体系的可靠性 ;方法 :采用小鼠配子体外授精法和 2细胞胚胎收集法对胚胎进行培养 ,观察胚胎发育情况 ;结果 :小鼠配子体外授精法的受精率为 83 % ,采用两种方法 ,40小时和 64小时的卵裂率及优良胚胎率无显著性差异 ,P >0 .0 5,而卵裂球的数目有极显著性差异 ,P <0 .0 1 ;两种方法比较卵裂球数目、卵裂率及优良胚胎率无显著性差异 ;结论 :建立一个高水平的生殖中心 ,必须同时有一套严格的实验室控制系统 ,上述两种方法均能作为实验室培养体系检测的评价指标。但是 ,对于新建立的胚胎培养实验室 ,应用小鼠配子体外授精法作为实验室的质量控制更能全面反映培养体系对胚胎的影响 ,同时还可熟练IVF基本的操作技能     

新建辅助生殖实验室的鼠胚实验报告

目的 探讨用鼠胚实验对新建辅助生殖实验室的培养体系进行评估的可行性.方法 对昆明系小鼠进行体内、体外受精实验,观察常规培养条件下不同受精方式来源小鼠胚胎的发育情况以及不同培养环境对小鼠体外受精胚胎发育的影响,并计算受精率、卵裂率及囊胚率.结果 常规培养条件下,体内受精组的受精率和卵裂率均显著高于体外受精组(P＜0.05),两组囊胚率比较差异无统计学意义(P＞0.05).在体外受精中,三气培养组的卵裂率和囊胚率显著高于两气培养箱组(P＜0.05),两组受精率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 小鼠体内、体外受精获得的受精卵均有较高的成胚率,鼠胚培养可对新建辅助生殖实验室的培养体系进行评估.常规培养条件下体内受精胚胎的发育潜能优于体外受精,而体外受精胚胎在三气培养环境下的发育潜能优于两气培养环境.     

辅助生殖技术的实验室质量控制

以体外受精 胚胎移植为主的辅助生殖技术 ,为不孕妇女开辟了一条辅助生殖途径 ,但临床妊娠率一直较低。影响临床妊娠成功的因素除了超排卵方案、卵子质量外 ,实验室培养系统也是重要一环。本文就辅助生殖技术的实验室质量控制进行探讨。1　资料与方法1 .1　一般资料　 2 0 0 0年 1 0月～ 2 0 0 1年 1 2月在我院不孕症门诊就诊的 2 1 0例不孕妇女 ,年龄 2 5～ 4 3岁 ,平均3 2 .3± 5 .1岁 ,其中原发性不孕 5 4例 ,继发不孕 1 3 2例 ,不明原因不孕 2 4例。不孕原因包括子宫内膜异位症 2 5例 ,多囊卵巢综合症 (ＰＣＯＳ) 1 2例 ,双侧输卵管阻塞…     

不同来源小鼠胚胎培养在辅助生殖实验室质量控制中的应用

目的:利用小鼠胚胎体外培养技术对新建人类辅助生殖实验室进行质量控制,以保证培养体系的可靠性,并比较两种小鼠胚胎培养方法在实验室质量控制中的作用。方法:采用小鼠配子体外授精法和2-细胞胚胎收集法对胚胎进行培养,观察胚胎发育情况。结果:小鼠配子体外授精法的受精率为80.98%,受精卵的卵裂率、优质胚胎率及囊胚形成率分别为90.60%、68.15%、85.93%与收集的体内2-细胞卵胚胎的88.98%、70.33%、83.89%比较无显著性差异,P>0.05。结论:两种不同来源鼠胚培养方法均可作为实验室培养体系检测的评价指标。对于新建的胚胎培养实验室,小鼠配子体外授精法可对IVF的全过程进行检测,更能反映培养体系对胚胎的影响,同时还可熟练IVF的操作技能。     

GnRH类似物促进人早期胚胎体外发育能力的实验研究

目的研究促性腺激素释放激素（GnRH）类似物对人类早期胚胎体外发育能力的影响.方法IVF的受精卵进行体外培养.实验一的培养基中,GnRH类似物的浓度分别是0,0.1,0.2,0.5,0.8和1.0μg/mL;实验二的培养基中都含有0.5μg/mL的GnRH类似物,而GnRH拮抗剂的浓度分别为0,0.2,0.4,0.8,1.0和1.2μg/mL.结果培养基中的GnRH类似物浓度在0.5μg/mL及以上时,实验组的桑椹胚/囊胚生成率显著高于对照组（P〈0.05）,而且,实验组的8-细胞期胚胎形成率也同时显著高于对照组（P〈0.05）.培养基中含0.8μg/mL及以上浓度的GnRH拮抗剂时,实验组的桑椹胚/囊胚生成率显著低于对照组（P〈0.05）,而且8-细胞期胚胎形成率也显著降低（P〈0.05）.结论GnRH类似物对体外培养的人早期胚胎有促进分裂的作用,这种促进早期胚胎发育的效果在8-细胞期就能显现出来.GnRH拮抗剂能抵消GnRH类似物对早期胚胎发育的促进效果.     

改进的EBSS培养液与常用商品化试剂对鼠胚体外发育的影响

目的：利用改进后的EBSS(SIGMA)培养液和常用商品化培养液G1/G2（Vitrolife）,Quinn's1026/Quinn's1029（SAGE）对昆明系小白鼠胚胎进行体外培养,以对新建IVF实验室进行评估。方法对简单培养液EBSS进行改进,分别制得卵裂培养液和囊胚培养液以构成序贯培养系统。卵裂培养液：EBSS中加入适当浓度的丙酮酸钠,乳酸钠以及5种非必须氨基酸;囊胚培养液：EBSS中加入适当浓度的5种非必须氨基酸及6种必须氨基酸。将胚胎分成4组,A组使用EBSS（Earle's Bal-anced Salt Solution）培养液,B组使用改进后的EBSS培养液,C组使用G1和G2培养液,D组使用Quinn's1026和Quinn's1029培养液,四种培养液均添加10%人血清白蛋白。结果72 h后,鼠胚总体囊胚形成率为70.57%（614/870）,其中A组的囊胚形成率为26.21%（27/103）,B组为72.22%（143/198）,C组为73.81%（155/210）,D组为80.50%（289/359）B,C,D 3组的囊胚形成率显著高于A组（P<0.001)。结论通过鼠胚体外培养,对新建试管婴儿实验室进行了较好的质控检测,经改进后的EBSS培养液在鼠胚囊胚形成率上与商品化序贯培养液G1/G2,Quinn's1026/Quinn's1029相近,均远高于简单培养液EBSS,但前者成本较之常用商品化试剂有大幅度的降低,说明改进的EBSS培养液在鼠胚体外培养上具有较好的实用价值。     

IVF实验室质控中影响鼠胚体外培养的因素分析

目的 :建立适宜的小鼠胚胎体外培养体系 ,探讨CO2 气体纯度和培养器皿对小鼠胚胎体外发育的影响。 方法 :采用微滴法培养 2 细胞鼠胚 ,以 4～ 8 细胞鼠胚和桑椹胚形成率作为判断培养效果的指标。 结果 :普通纯度CO2 气体培养组的 4～ 8 细胞形成率、桑椹胚形成率分别为 12 .5 %、0 .0 % ,高纯度CO2 气体培养组分别为6 7.6 %、4 4 .1% ,两组比较差异有统计学意义 (P均 <0 .0 0 1)。国产玻璃器皿培养组的 4～ 8 细胞形成率、桑椹胚形成率分别为 74 .4 %、5 3.5 % ,进口一次性器皿培养组分别为 85 .7%、6 2 .8% ,两组比较差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 :高纯度CO2 气体更适宜鼠胚的体外发育 ;国产玻璃器皿与进口一次性器皿对鼠胚体外发育的效果相近     

不同质量卵裂期胚胎发育至囊胚能力的研究

目的 探讨体外受精治疗中第3天(D3)不同质量卵裂期胚胎培养至囊胚的发育潜能,为囊胚培养提供实验室依据.方法 对2015年4月—2019年4月D3移植或冷冻后剩余行囊胚培养的5510枚胚胎进行了回顾性分析.按D3胚胎质量、卵裂球数目、均一性及碎片率分组,比较囊胚形成率,优质囊胚形成率及可利用囊胚形成率,并分析各因素与可...     

受精第3天胚胎卵裂速度和囊胚发育潜能的关系

目的 探讨受精第3天胚胎卵裂速度是否可以预测囊胚发育潜能及辅助生殖临床结局.方法 回顾性分析2016年1月1日至2018年12月31日于我中心行体外受精/卵胞质内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)治疗的150例不孕症患者的临床资料及所有366枚新鲜囊胚移植的胚胎数据.根据受精第3天卵裂球的细胞数目将胚胎分为...     

新鲜周期卵裂胚和囊胚移植单胎分娩的新生儿结局及影响因素

目的分析新鲜周期体外受精(IVF)-胚胎移植治疗中移植卵裂胚和囊胚后单胎分娩的新生儿结局及其影响因素。方法回顾性分析2014年1月至2016年6月郑州大学第三附属医院生殖医学中心接受IVF/卵胞浆质内单精子注射(ICSI)助孕单胎分娩的1 371例不孕症患者的临床资料及分娩新生儿信息,根据移植胚胎体外培养时间将患者分为囊胚组(n=181例)和卵裂胚组(n=1 190例),比较2组新生儿的早产率、出生体质量、出生缺陷等指标,并对新生儿主要观察指标影响因素进行分析。结果囊胚组早产(PTB)比例高于卵裂胚组(P <0. 05); 2组剖宫产比例、分娩孕周及极早产儿、低出生体质量儿、极低出生体质量儿、大于胎龄儿(LGA)、小于胎龄儿(SGA)及出生缺陷比例比较差异均无统计学意义(P> 0. 05)。Logistic回归分析显示,囊胚移植及母亲年龄与新生儿PTB相关(P <0. 05),不孕类型、产次、母亲体质量指数与LGA有关(P <0. 05),母亲体质量指数与SGA有关(P <0. 05)。结论新鲜周期囊胚移植可增加新生儿PTB发生率,不孕症患者的体质量指数是影响新生儿出生体质量的一个重要因素。     

人胚胎囊胚期培养及相关因素研究

目的 分析受精后第3天 (D3)胚胎的细胞数、质量分级与囊胚形成之间的关系 ,比较不同囊胚培养液的囊胚形成率。方法 将体外授精 (IVF)患者胚胎移植后的剩余胚胎54个 ,移入含10 %合成血清代用品(SSS)的囊胚培养液 (IVC -Three、Blastocyst)或人输卵管液 (HTF)中 ,每天观察胚胎卵裂情况 ,直至退化或受精后第7天。 结果 总囊胚形成率29.6% ,囊胚形成率与D3胚胎细胞数呈显著正相关 (r=0.99,P<0.01) ,胚胎质量级别1～2.5级的卵裂球较3～4级者具有更高的囊胚形成率 (34.9%比9.1% )。IVC -Three培养液中囊胚形成率达56.1 % ,与其他两种培养液比较有显著差异 ( χ21=5.77,χ22=3.95,P<0.05)。 结论 序贯培养的囊胚期胚胎培养技术是简便可行的。D3胚胎细胞数及质量分级与囊胚形成有密切关系。IVC -Three培养液是良好的囊胚培养液 ,可应用于临床     

瘦素在着床前小鼠胚胎中的表达及其对胚胎发育的影响

目的 探讨瘦素(leptin)在围着床期小鼠胚胎中的表达规律和分布情况以及leptin抗体对小鼠胚胎体外发育的影响.方法 雌性NIH小鼠超排后与雄鼠交配,分别在妊~4 d上午从输卵管或子宫角冲取相应时期的胚胎,用于以下实验:①分别提取总RNA,检测胚胎中leptin mRNA表达情况.②采用免疫荧光技术,观察leptin蛋白在囊胚的表达和分布情况.③将8-细胞小鼠胚胎培养于含不同浓度leptin抗体的培养液中,观察囊胚形成及脱透明带的情况.结果 leptin mRNA仅在囊胚期特异性表达,其余各时期胚胎未见表达;leptin蛋白在囊胚的滋养层细胞和内细胞团的细胞质和细胞膜呈阳性表达,而在细胞核无表达.一定浓度的leptin抗体可明显降低囊胚的形成率(1∶400, P<0.05) 和脱带率(1∶1 600, P<0.05),且随着抗体浓度的增加,这种抑制作用更明显.结论 leptin能促进着床前胚胎发育,同时也可能参与了胚胎着床过程.     

输卵管积液影响体外培养胚胎质量的实验研究

目的：分析输卵管积液的形成及其化学成分，探讨输卵管积液对体外培养胚胎生长发育的影响及其机制。方法：建立输卵管积液动物模型，测定其成分；用不同浓度输卵管积液培养小鼠2-细胞胚胎，观察胚胎形态。结果：输卵管积认中K^ 、HCO3^-和表皮生长因子（EGF）含量明显低于输卵管液；pH值明显增高。输卵管积液组囊胚形成率和胚胎孵化率均明显低于输卵管液。结论：结扎兔输管两端能诱导输卵管积液形成；机械诱导的输卵管积液成分改变能影响早期胚胎的质量。     

玻璃化冷冻囊胚复苏移植与玻璃化冷冻胚胎复苏后继续培养至囊胚移植的妊娠结局比较

目的比较玻璃化冷冻囊胚复苏后移植与玻璃化冷冻胚胎复苏后继续培养至囊胚移植的临床妊娠结局。方法回顾性分析2013年1月至2014年12月在郑州大学第二附属医院生殖中心行玻璃化冷冻复苏后移植囊胚的不孕症患者134例(134个周期)的妊娠情况,其中卵裂期胚胎培养至囊胚冷冻复苏后移植者79个周期(A组),卵裂期胚胎冷冻复苏后继续培养至囊胚再移植者55个周期(B组)。比较2组患者临床妊娠率、着床率及早期流产率。结果 A组79个周期,复苏囊胚数151个,存活囊胚数133个,复苏率88.08%(133/151);获得可移植囊胚72个周期,妊娠周期46个,妊娠率为63.89%(46/72),着床率51.56%(66/128),早期流产率为15.21%(7/46)。B组55个周期227个胚胎,复苏存活170个胚胎,复苏率74.89%(170/227);其中45个周期共形成可移植囊胚93个,囊胚形成率为54.70%(93/170);获得妊娠周期23个,妊娠率为51.11%(23/45),着床率为36.56%(34/93),早期流产率13.04%(3/23)。A组囊胚复苏率高于B组卵裂期胚胎复苏率(P<0.05),且A组着床率显著高于B组(P<0.05),但2组临床妊娠率、流产率、异位妊娠率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论玻璃化冷冻囊胚复苏移植能获得较高的着床率和妊娠率,囊胚可能是玻璃化冷冻胚胎的较好阶段。