窖蛋白-1在肺癌中的表达及意义

目的 探讨窖蛋白-1（caveolin-1）在不同类型肺癌组织中的表达及其与微血管密度（MVD）和临床病理因素之间的关系。方法 对154例原发性肺癌、相应癌旁正常肺组织及36例淋巴结转移癌行caveolin-1免疫组织化学染色;对154例原发性肺癌行CD34免疫组织化学（SP法）染色并进行微血管密度计数;Western印迹法检测其中50例新鲜肺癌组织及其癌旁正常肺组织中caveolin-1的表达情况。结果 caveolin-1为膜／质表达蛋白,在正常支气管上皮细胞和肺泡上皮细胞中的阳性率为100％。在肺癌组织中的阳性率为59．1％（91／154）,低于癌旁正常肺组织,P＜0．01;Western印迹结果进一步证实caveolin-1在肺鳞癌、肺腺癌组织中的表达均显著低于癌旁正常肺组织,P＜0．01。caveolin-1在小细胞肺癌（SCLC）和非小细胞肺癌（NSCLC）中的阳性率分别为7．1％和64．3％,二者间差异有统计学意义,P＜0．01。NSCLC中,有淋巴结转移组caveolin-1表达高于无淋巴结转移组（P=0．005）;Ⅲ、Ⅳ期组caveolin-1表达显著高于Ⅰ、Ⅱ期组（P=0．042）,caveolin-1表达与NSCLC的其他临床病理因素及MVD值无关（P＞0．05）。结论caveolin-1其作为一种肿瘤抑制因子的同时,可能还具有促进NSCLC进展和转移的活性。     

非小细胞肺癌中ASPP1和ASPP2基因启动子甲基化的意义

目的 检测非小细胞肺癌(NSCLC)中ASPP1和ASPP2基因启动子CpG岛的甲基化状态和相应的蛋白表达,及癌细胞的凋亡水平和p53蛋白的表达,探讨ASPP基因在NSCLC中的作用及其临床意义.方法 采用甲基化特异性PCR(MSP)检测90例NSCLC组织、25例癌旁肺组织中ASPP1、ASPP2基因启动子的甲基化水平,并测序证实其甲基化位点;免疫组织化学EnVision法检测NSCLC组织中ASPP1、ASPP2和p53蛋白的表达;原位末端转移酶标记检测法(TUNEL)检测癌细胞凋亡,计算其凋亡指数(AI).结果 ASPP1基因启动子甲基化率在NSCLC中为42.2%(38/90),癌旁组织中为16.0%(4/25),二者比较差异有统计学意义(P=0.019);ASPP1基因启动子甲基化与患者年龄、性别、组织类型和分化程度无相关性(均P＞0.05),但与患者的TNM分期和淋巴结转移存在相关性(P=0.031,P=0.030);90例肺癌组织中ASPP1甲基化者其蛋白表达率明显低于ASPP1未甲基化者(P=0.002);ASPP1蛋白阳性组的AI值高于阴性组(P=0.022).90例NSCLC和25例癌旁组织中均未检测到ASPP2基因启动子甲基化;ASPP2蛋白表达阳性组和阴性组之间AI值差异也无统计学意义(P=0.282).ASPP1和p53表达呈负相关,(r=-0.259,P＜0.01),ASPP2和p53的表达状态无关(r=-0.119,P＞0.05).结论 NSCLC中ASPP1基因启动子甲基化可能是ASPP1蛋白表达下调的原因,高甲基化可能与NSCLC的恶性进展有关,ASPP1蛋白的表达能促进细胞凋亡.

Abstract：

Objective To investigate the methylation status of CpG islands in the promoter region and the protein expression of ASPP1 and ASPP2 genes in non-small-cell lung cancer (NSCLC) and their relationship with cellular apoptosis and p53 gene expression. Methods The 5'CpG island methylation patterns of ASPP1 and ASPP2 were evaluated by methylation specific polymerase chain reaction (MSP) followed by confirmation of sequencing. Immunohistochemistry was used to detect the expression of ASPP1,ASPP2 and p53 in lung carcinoma tissue samples ( n= 90) and adjacent non-neoplastic lung tissue samples (n = 25 ) . TUNEL assay was used to detect the apoptotic activity. Results The presence of ASPP1 methylation was significantly higher in NSCLC than that in the adjacent non-neoplastic lung tissue [42. 2%(38/90) vs. 16. 0% (4/25), P =0. 019]. ASPP1 promoter methylation had a close relationship with TNM stage and lymph node metastasis( P =0. 031, P =0. 030), but was not related to the age, sex, histological types and the grades of tumor differentiation (P =0. 389, P =0. 278, P =0. 570, and P =0. 103). Tumors with ASPP1 promoter methylation demonstrated a lower expression of ASPP1 as compared with those without the methylation (P =0. 002). ASPP1 expression was associated with a higher apoptotic index (AI) (P =0. 022) and a decreased p53 expression( r = -0. 259, P ＜ 0. 01 ). Methylation in the promoter region of ASPP2 gene was not detected in lung cancer (n = 90 ) or adjacent non-neoplastic lung tissue (n = 25 ).Expression of ASPP2 protein did not correlate with AI ( P = 0. 282 ) and p53 status in NSCLC. Conclusions High methylation of ASPP1 gene promoter regions is one of the important mechanisms that down-regulate its protein expression in NSCLC. ASPP1 promoter methylation may be associated with the malignant progression of the tumor, and ASPP1 expression promotes cellular apoptosis.     

非小细胞肺癌中窖蛋白1和pERK1/2表达与预后相关性研究

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织窖蛋白1与pERK1/2的表达及其与预后的关系.方法 应用免疫组织化学(sP法)检测160例NSCLC及20例正常肺组织标本中窖蛋白1与pERK1/2的表达.结果 窖蛋白1在NSCLC和正常肺组织阳性率分别为65.6%(105/160)和100%(20120),P=0.002.中-高分化组和低分化组阳性率分别为56.8%(46/81)和75.7%(53/70),P=0.015;Ⅰ-Ⅱ期阳性率为58.2%(53/91),Ⅲ-Ⅳ期阳性率75.4%(52/69),P=0.024;有淋巴结转移组阳性率为77.8%(56/72),无淋巴结转移组阳性率为55.7%(49/88),P=0.003.窖蛋白1阳性患者1、3、5年生存率(71.4%、37.1%、17.1%)低于阴性患者(89.1%、69.1%、43.6%),P=0.000.pERK1/2在NSCLC和正常肺组织阳性率分别为61.3%和0,P=0.000;中-高分化组和低分化组阳性率分别为53.1%(43/81)和71.4%(50/70),P=0.021;Ⅰ-Ⅱ期阳性率为49.5%(45/91),Ⅲ-Ⅳ期阳性率76.8%(53/69),P=0.000;有淋巴结转移组阳性率为80.6%(58/72),无淋巴结转移组阳性率为45.5%(40/88),P=0.000.pEBK1/2阳性患者1、3、5年生存率(74.5%、42.9%、19.4%)低于阴性者(82.3%、56.5%、37.1%),P=0.002.窖蛋白1与pERK1/2负相关,P=0.000.结论 窖蛋白1在NSCLC中低表达,pEBK1/2在NSCLC中高表达.窖蛋白1蛋白阳性表达和pEBK1/2蛋白高表达与NSCLC的发生及侵袭、转移相关.窖蛋白1和pERK1/2可作为NSCLC一个预后预测的指标.     

非小细胞肺癌中Naked1的表达及意义

目的探讨Naked1(NKD1)蛋白在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达与预后的关系。方法采用RT-PCR、Western blot法对35例新鲜肺癌组织进行检测;采用免疫组化SP法对100例NSCLC石蜡标本进行检测。结果在79%的新鲜肺癌标本中,NKD1的蛋白水平明显低于相对应的癌旁正常肺组织,而mRNA水平明显高于正常肺组织(P<0.01)。在78%的NSCLC免疫组化标本中,NKD1的表达明显低于正常肺组织(P<0.01)。在肺鳞癌中NKD1的表达低于腺癌,并与分化程度呈正相关(P<0.01),与淋巴结转移(P<0.05)和TNM分期(P<0.01)呈负相关,NKD1低表达者的术后生存时间明显低于正常表达者(P=0.01)。结论在NSCLC中,NKD1 mRNA上调,而蛋白水平下调,其蛋白的下调程度与临床病理因素和不良预后相关。     

非小细胞肺癌中TRPC1和E-cadherin的表达及意义

目的探讨TRPC1、E-cadherin在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达水平及与临床病理特征的关系。方法收集30例NSCLC组织及对应癌旁组织,采用实时荧光定量PCR法检测TRPC1及E-cadherin在NSCLC组织及对应癌旁组织中的表达水平,并进行相关性分析。结果 TRPC1在NSCLC组织中的表达水平显著高于对应癌旁组织中的表达水平(2. 624±1. 756 vs 1. 000,P 0. 001),且TRPC1表达水平与NSCLC远处转移有关(P=0. 007); E-cadherin在NSCLC组织中的表达水平显著低于对应癌旁组织中的表达水平(0. 525±0. 298 vs 1. 000,P 0. 001),且E-cadherin表达水平与NSCLC远处转移有关(P=0. 016)。NSCLC组织中TRPC1表达水平与E-cadherin表达水平呈显著负相关(r=-0. 458,P=0. 001)。结论 TRPC1在NSCLC组织中高表达,且NSCLC组织中E-cadherin低表达可能与TRPC1高表达有关。     

非小细胞肺癌中Notch1、HIF-1、VEGF蛋白及Notch1 mRNA的表达及意义

目的 探讨Notch1、HIF-1、VEGF蛋白及Notch1 mRNA在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织的表达及其临床病理学意义.方法 采用免疫组化SP法和原位杂交法分别检测65例NSCLC组织、15例正常支气管上皮组织中Notch1、HIF-1、VEGF蛋白及Notch1 mRNA的表达.结果 Notch1、HIF-1、VEGF蛋白及Notch1 mRNA在非小细胞肺癌中阳性表达率分别为81.5%(53/65)、96.9%(63/65)、93.8%(61/65)、73.8%(48/65),均明显高于正常支气管上皮组织阳性表达率(P<0.05);NSCLC中Notch1、HIF-1、VEGF蛋白及Notch1 mRNA的表达均与临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05);Notch1、HIF-1与VEGF蛋白间均正相关;Notch1蛋白与Notch1 mRNA的表达呈正相关.结论Notch1、HIF-1、VEGF蛋白及Notch1 mRNA在NSCLC中均表达上调,提示在肺癌的发生、发展中可能起重要作用;检测NSCLC组织Notch1蛋白及mRNA可作为判断肿瘤侵袭与转移的重要指标.     

非小细胞肺癌患者紧密连接蛋白-1基因启动子甲基化分析及其临床意义

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者中紧密连接蛋白-1(ZO-1)基因甲基化检测的临床意义.方法应用甲基化特异性聚合酶链反应MS-PCR检测101例NSCLC患者癌组织及癌旁组织ZO-1基因启动子甲基化状态,以61例肺部良性病变患者作为对照,并用实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测63例甲基...     

窖蛋白-1与肿瘤

窖蛋白是胞膜窖结构中的特征性结构蛋白。窖蛋白在细胞内吞、胆固醇运输、细胞膜组装、调节信号转导和肿瘤生成、转移等生命活动中扮演了重要角色。窖蛋白基因家族中的窖蛋白-1(Cav-1)可能参与肿瘤生成和转移的病理机制,以及与多药耐药等密切相关。窖蛋白-1参与调节细胞周期与信号转导,在细胞凋亡程序中发挥重要作用,具有抗血管新生,负性调节生长因子,参与肿瘤细胞侵袭和转移的作用。     

非小细胞肺癌细胞中TrxR1的表达及其效应

目的探讨硫氧还蛋白还原酶-1(thioredoxin reductase-1,TrxR1)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达,及其在干预肺癌细胞中所产生的效应。方法应用免疫组化法检测118例NSCLC和27例正常肺组织中TrxR1的表达,并分析其与NSCLC临床病理参数的关系;应用半定量RT-PCR法检测13例NSCLC和4例正常肺组织中TrxR1 mRNA的水平。Western blot法检测正常肺上皮细胞和不同肺癌细胞中TrxR1蛋白的水平;半定量RT-PCR法检测正常肺上皮细胞和不同肺癌细胞中TrxR1 mRNA的水平。沉默A549细胞中TrxR1的表达,并比较沉默前后细胞的增殖情况。结果 NSCLC的免疫组化及半定量RT-PCR结果显示TrxR1在癌细胞中过表达(P<0.05);使用shRNA沉默肺癌细胞中TrxR1的表达后,细胞增殖明显降低。结论 TrxR1 mRNA和蛋白在NSCLC中过表达,提示TrxR1有可能是NSCLC的靶标分子。     

鼻咽癌细胞中上皮细胞钙黏蛋白基因启动子甲基化的研究

目的 探讨鼻咽癌细胞中上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)启动子甲基化对基因表达的影响,以及经去甲基化药物5-杂氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-dC)作用后肿瘤细胞增殖与侵袭能力的变化.方法采用逆转录(RT)-PCR、Western blot与免疫组织化学(polymer法)检测经5-Aza-dC处理前后HNE1和CNE2细胞中E-cadherin的表达水平,以甲基化特异性PCR(MSP)分析启动子甲基化状态,以四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法与侵袭实验测定细胞增殖与侵袭能力的变化.结果 HNE1和CNE2细胞中E-cadherin表达水平减弱,其启动子区域存在部分甲基化现象;经5-Aza-dC作用后可显著上调鼻咽癌细胞E-cadherin的表达水平,降低基因启动子甲基化程度,同时显著抑制肿瘤细胞的增殖能力与侵袭能力.经20 μmol/L 5-Aza-dC作用后,HNE1与CNE2细胞的增殖能力与未处理组相比分别降低27.6%和34.3%,P＜0.05;HNE1与CNE2细胞经5-Aza-dC药物处理后,通过滤膜迁移进至侵袭小室下腔的数量与未处理组相比分别减少37.2%和29.7%,P＜0.05.结论基因启动子区域高甲基化状态是导致E-cadherin表达水平下调的机制之一,应用去甲基化药物可恢复E-cadherin表达并抑制肿瘤细胞的恶性生物学特征.     

Microarray analysis of promoter methylation in lung cancers

Aberrant DNA methylation is an important event in carcinogenesis. Of the various regions of a gene that can be methylated in cancers, the promoter is the most important for the regulation of gene expression. Here, we describe a microarray analysis of DNA methylation in the promoter regions of genes using a newly developed promoter-associated methylated DNA amplification DNA chip (PMAD). For each sample, methylated Hpa II-resistant DNA fragments and Msp I-cleaved (unmethylated + methylated) DNA fragments were amplified and labeled with Cy3 and Cy5 respectively, then hybridized to a microarray containing the promoters of 288 cancer-related genes. Signals from Hpa II-resistant (methylated) DNA (Cy3) were normalized to signals from Msp I-cleaved (unmethylated + methylated) DNA fragments (Cy5). Normalized signals from lung cancer cell lines were compared to signals from normal lung cells. About 10.9% of the cancer-related genes were hypermethylated in lung cancer cell lines. Notably, HIC1, IRF7, ASC, RIPK3, RASSF1A, FABP3, PRKCDBP, and PAX3 genes were hypermethylated in most lung cancer cell lines examined. The expression profiles of these genes correlated to the methylation profiles of the genes, indicating that the microarray analysis of DNA methylation in the promoter region of the genes is convenient for epigenetic study. Further analysis of primary tumors indicated that the frequency of hypermethylation was high for ASC (82%) and PAX3 (86%) in all tumor types, and high for RIPK3 in small cell carcinoma (57%). This demonstrates that our PMAD method is effective at finding epigenetic changes during cancer.Electronic Supplementary Material Supplementary material is available for this article at and is accessible for authorized users.     

非小细胞肺癌EGFR和HER2基因状态及相关性

目的探讨EGFR和HER2基因变化在非小细胞肺癌发生发展中的作用及其二者相关性。方法采用PathVysion^TM探针试剂盒和LSI EGFR SpectrumOrange／CEP7 SpectrumGreen探针组合,对31例中国人非小细胞肺癌石蜡切片标本,其中腺癌20例、鳞癌2例、大细胞癌2例、细支气管肺泡癌4例、腺鳞癌3例,分别进行EGFR和HER2基因状态的检测,并统计分析二者之间的相关性。结果EGFR基因扩增者6例;EGFR基因无扩增的25例中4例为四体,5例为多体,EGFR基因拷贝数增加和基因扩增者共15例（15／31）。HER2基因扩增者2例;HER2基因无扩增的29例中4例为三体,1例为四体,9例为多体,HER2基因拷贝数增加和基因扩增者共16例（16／31）。同时为EGFR和HER2基因异常（包括基因扩增和拷贝数增高）者12例（12／31）,而且几乎都是临床Ⅲ期至Ⅳ期的患者。EGFR和HER2基因异常之间的相关性X^2Adj=7．3045,P确切=0．0069。结论EGFR或HER2基因扩增在非小细胞肺癌中的发生率较低,但基因拷贝数增加是较常发生的事件。EGFR和HER2异常有相关性,EGFR和HER2基因都参与了非小细胞肺癌的发生发展,EGFR和HER2二聚体是肺癌常见的异源二聚体形式,而且它们的相互作用可能与疾病进展有关。     

肺腺癌细胞P15中凋亡相关基因甲基化状态与化疗敏感性的关系

目的:研究肺腺癌细胞P15中凋亡相关基因甲基化状态与化疗敏感性的关系。方法:采用甲基化特异性PCR法检测未处理对照组和地西他滨(DAC)处理组P15细胞的p73、p14ARF、p16INK4a和bax基因甲基化情况,利用RT-PCR检测p73、bcl-x L、bad、bax、p14ARF和p16INK4a的mRNA表达;采用平板克隆形成实验和细胞生长抑制实验检测DAC处理前后P15细胞对顺铂(C-DDP)的敏感性,DAPI染色法检测DAC处理前后C-DDP对P15细胞的凋亡情况。结果:p73、p16INK4a和bax在甲基化状态下均有表达,经DAC处理后p16INK4a表达减弱,p73和bax表达消失。p73、p16INK4a和bax在非甲基化状态下表达较弱,经DAC处理后三者均表达增强。DAC加C-DDP处理组与未处理对照组相比,前者的克隆形成率和细胞生存显著下降(P0.05)。DAC加C-DDP组的细胞凋亡显著高于未处理对照组(P0.05)。结论:由于DAC活化多个因甲基化而表达沉默的促凋亡基因,用DAC处理肺腺癌细胞P15后,P15细胞对化疗药物C-DDP的敏感性增强。DAC和C-DDP协同作用促进了肿瘤细胞的凋亡。DAC与C-DDP联合应用可逆转化疗耐药,恢复肺腺癌细胞对化疗药物的敏感性,两者具有明显的协同抗肿瘤作用。     

BRI基因的表达与非小细胞肺癌发生及转移潜能的关系

目的 探讨BRI基因在人非小细胞肺癌中的差异表达情况及其与肺癌发生及转移能力形成的相关性。方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Northern印迹杂交方法分析BRI基因在一对遗传背景相同、转移能力不同的人肺腺癌细胞系AGZY83-a和Anip-073中的差异表达,并进一步检测BRI基因在另外6个非小细胞肺癌细胞系(SPC-A-1,A549,95D,TKB-18,GLC-82,PAa)及30例临床肺癌标本中的表达情况。结果 BRI基因在2细胞系中存在明显的差异表达,在具有高转移潜能的Anip973中高表达。在其他6个细胞系中BRI的表达与肺癌转移潜能可能有关。同时发现与同一病例的正常肺组织相比,BRI基因在肺癌组织中高表达,其过表达在有淋巴结转移的肺癌为6／8,无转移者为45．5％(10／22),并且BRI基因在肺癌与正常肺组织之间存在转录本的差异。结论 BRI基因在肺癌中表达上调,其1．6kb转录本表达的增加可能与肺癌的发生和转移能力的形成有关。     

hnRNP A2/B1 mRNA在非小细胞肺癌和转移淋巴结中表达及意义

目的：探讨肺癌早期诊断基因核内不均一核糖体表达对肺癌淋巴结微转移的作用。观察hnRNP A2/B1 在各组织类型肺癌中的表达。方法：42例非小细胞肺癌患者开胸手术纵隔淋巴结清扫获取原发灶及纵隔淋巴结病理标本,12例肺良性病变手术切除标本作正常对照。荧光定量PCR检测切除肿块和淋巴结的hnRNP A2/B1 mRNA表达。结果：(1)转移性淋巴结中hnRNP A2/B1 mRNA 表达水平561.393显著高于无转移淋巴结156.669 (P＜0.05)。(2)Ⅲ期肺癌组织中hnRNP A2/B1 mRNA 表达水平305（249,533）显著高于Ⅰ期和Ⅱ期肺癌组织(2＝13.453,P＜0.01)。(3)hnRNP A2/B1 mRNA在鳞癌和腺癌中的表达水平分别为207(152,305)和249(177,476), Z=-0.899,P>0.05。(4)58组淋巴结阳性,84组阴性,42个病人142组区域淋巴结hnRNP A2/B1 mRNA阳性率为40.84%(58/142),12例肺良性疾病组织均阴性,HE染色42个病人的50组转移淋巴结阳性率为35.21%,与FQ-PCR 58枚（52.11%）无显著差异（P>0.05）。结论：NSCLC 癌组织存在着hnRNP A2/B1 的过度表达。NSCLC癌组织中hnRNP A2/B1表达水平与淋巴结转移状态及P-TNM 分期有关。 hnRNP A2/B1 检验敏感性、特异性高,可用于肺癌的辅助诊断的标记。     

散发性乳腺癌及乳腺不典型导管增生组织BRCA1基因启动子区甲基化分析

目的 了解散发性乳腺癌及癌旁增生组织、乳腺不典型导管增生组织BRCA1基因启动子区甲基化状态,探讨其与乳腺癌发生的关系.方法 采用甲基化特异性PCR(MSP)结合巢式PCR技术,研究23例散发性乳腺癌及其癌旁增生组织、6例乳腺不典型导管增生组织及5例健康成人女性外周血淋巴细胞中BRCA1基因启动子区甲基化状态.结果 5例健康成人女性外周血淋巴细胞均表现BRCA1基因启动子区甲基化阴性;23例原发性乳腺癌组织中,BRCA1基因启动子区CpG岛甲基化率为65.22%(15/23);癌旁增生组织检出CpG岛甲基化者11例,甲基化率为47.83%(11/23),且均为癌组织阳性患者;6例乳腺不典型导管增生组织中,BRCA1基因启动子区CpG岛甲基化阳性者2例,甲基化率为33.33%(2/6);统计学检验结果表明,乳腺癌、癌旁增生组织之间,BRCA1基因启动子区甲基化阳性率无显著差异.结论 BRCA1基因启动子区CpG 岛甲基化是散发性乳腺癌发生过程中的早期事件,可能在乳腺癌发生中和乳腺增生病癌变过程中起重要生物学作用.     

乳腺癌发生过程中NOEY2基因启动子区甲基化及mRNA表达

目的 探讨乳腺癌发生过程中抑癌基因NOEY2启动子区甲基化状态及其对mRNA表达的影响。方法 应用甲基化特异性PCR及双亚硫酸钠基因测序技术检测MCF10模型中乳腺增生细胞系MCF10A、癌前细胞系MCF10AT、导管内癌细胞系MCFIODCIS．com、浸润癌细胞系MCF10CA1a、MCF10CA1d、MCF10CA1h及正常乳腺组织中NOEY2基因启动子区CpG岛Ⅰ甲基化状态,然后用RT-PCR和实时PCR技术检测上述样品的mRNA表达水平。结果 MCF10模型的增生细胞系、癌前细胞系、导管内癌细胞系、浸润癌细胞系均发生该基因启动子区CpG岛Ⅰ高度甲基化;与正常乳腺组织相比,上述细胞系mRNA表达显著减少。结论 NOEY2基因启动子区高度甲基化及相应的mRNA表达减少是乳腺癌发生过程中的早期事件,与乳腺癌发生有关,可能成为早期诊断乳腺癌的潜在分子生物学标记。     

启动子DNA甲基化调节胃癌中PDX1基因表达

目的明确PDXl启动子DNA甲基化,探讨启动子甲基化对PDXl在胃癌中表达的调节作用。方法收集3例胃癌活检组织,免疫组化检测PDXl蛋白表达：吉西他滨处理3株胃癌细胞,RT—PCR检测不同药物剂量和作用时间下PDXlmRNA表达;构建PDXl报告基因,检测启动子活性及吉西他滨处理前后启动子活性的变化;甲基化特异性PCR（MSP）检测3株胃癌细胞和8对配对胃癌组织中PDXl启动子甲基化状态。结果免疫组化结果显示胃癌中PDXl表达低于正常胃黏膜;RT—PCR显示吉西他滨使PDXlmRNA重获表达,且随剂量和时间依赖性。F383有最强启动子活性,吉西他滨显著增加了PDXl启动子活性（P〈0．05）。F383在AGS、BCG823、SGC7901中呈DNA完全甲基化状态;87．5％的胃癌组织出现F383部分甲基化,12．5％出现完全甲基化。癌旁正常组织仅有37．5％出现F383部分甲基化,未出现完全甲基化,两者比较有显著性差异（P〈0．05）。结论PDXl启动子存在DNA高甲基化,抑制了胃癌中PDXl的表达。