五种培养基分离El-Tor霍乱弧菌比较

4号、庆大、亚胆、亚洗、双洗都是分离El-Tor霍乱弧菌的常用培养基.我们利用浙江省卫生防疫站制备的上述几种培养基成品,对污染不同量El-Tor霍乱弧菌的大便标本进行了分离培养,现将实验方法和结果报告如下:     

宁波市发现非O1群霍乱弧菌抗0／129磷酸盐特性的初步研究

O/ 12 9(二氨基二异丙基喋啶磷酸盐 )是一种弧菌抑制剂 ,长期以来 ,被用作鉴别弧菌科细菌、气单胞菌科细菌及邻单胞菌属细菌种间的一项重要试验。目前认为 ,弧菌属细菌对15 0 μgO/ 12 9均敏感 ,而霍乱弧菌还对 10 μgO/ 12 9敏感。我们在对分离自饮服业从业人员的非O1群霍乱弧菌进行鉴定时发现其抗O/ 12 9,因此 ,对这些菌株作了初步研究 ,现将结果报告如下 :1　材料与方法1.1　菌株来源　 4株菌株均来自饮服业从业人员 ,按文献[1]方法分离 ,其生物学特性为葡萄糖产酸不产气 ,在无盐胨水和3%盐胨水中生长 ,6 %盐胨水不生长 ,动力阳性 ,鸟…     

外环境水样霍乱弧菌检测注意事项

开展外环境霍乱弧菌的监测 ,及时发现、消灭致病源 ,保护人民群众身体健康具有重要意义。根据市防疫站的霍乱监测计划 ,在本辖区内的水域进行布点监测。检测过程中 ,针对往年曾检测 1例小川型霍乱弧菌 ,在检测时应注意的事项及体会进行整理 ,具体归纳如下 :1　检测过程1 1　水样标本处理　采集来的水样按 1:10比例加入浓缩碱性蛋白胨水进行增菌 ,并用 1ｍｏｌ/ＬＮａＯＨ校正ｐＨ(9.2～ 9.4)并加入 1%亚碲酸钾 0 .5ｍｌ以抑制杂菌 ,置 37℃温箱过夜。1 2　分离培养　本实验室分离培养基选用弱选择性培养基碱性琼脂。增菌后的水样标本 ,用碱…     

改良"庆大霉素琼脂培养基"-加快霍乱弧菌的培养分离

庆大霉素琼脂培养基广泛地应用于霍乱弧菌实验室的分离培养,它有选择性强、菌落易识别、弧菌分离效果好的优点,但是由于在培养基传统的配方成分中,有着一定量的抗菌物质,硫酸庆大霉素、多粘菌素B(或E)、抑制剂亚碲酸钾(以下简称传统庆大琼脂).这些物质在有效地抑制肠杆菌、革兰氏阳性菌的同时,亦影响着霍乱弧菌的生长速度.     

原发性肝癌患者及其家族成员血清免疫抑制酸性蛋白的分析

目的　评估血清免疫抑制酸性蛋白 (IAP)与原发性肝癌 (PHC)发生的相关性。方法　应用单向免疫琼脂扩散法检测3 0例PHC患者、3 0例家族成员 (FM)和 3 0例正常健康人 (NS)血清IAP水平。结果　PHC患者血清IAP水平 (85 1± 2 12 ) μg/ml与正常健康人 (2 78± 10 4) μg/ml比较有显著差异 (P <0 0 1) ;FM组 (5 73± 2 2 8) μg/ml与NS组比较有统计学差异 (P <0 0 1)。结论　IAP水平的改变可能与PHC发生相关 ,且IAP检测可被用于PHC易患个体的筛选。     

从居民井水中分离出霍乱弧菌

20 0 1年 7月深圳市龙岗区某镇某村发生了 2例疑似霍乱病例 ,经采样分离、鉴定 ,从病人粪便中检出了稻叶型霍乱弧菌。为了尽快找同传染源 ,防疫站采集了大量的各类外环境样品 ,成功地从一居民井水中分离出了与病人相同血清型的霍乱弧菌 ,现报道如下。1　材料与方法1.1　样品来源来自疑似病例居住周围环境样品。主要有 :井水 3份、海产品 30份、海水 10份、山泉水 5份、水沟水 5份、水塘水3份。按《霍乱防治手册》规定采集合格样品。1.2　培养基及分离鉴定硷性旦白胨水、 4 #琼脂、 TCBs琼脂 ,由杭州微生物试剂厂生产 ,均在有效期内 ,按《…     

肠道门诊中病原性弧菌的分离鉴定及流行病学调查

我们于 2 0 0 0年 5～ 10月随机对天津市河西区卫生防病中心下属医院肠道门诊的 985例急性腹泻病患者进行针对弧菌科细菌的调查。培养基为碱性蛋白胨水 ,4号琼脂平板 ,ＴＣＢＳ琼脂平板 ,ＭａＣ琼脂平板 ,ＳＳ琼脂平板 ,氨苄西林(ＡＳＢＡ2 0 )血琼脂平板。通过对 985例腹泻患者的病原学调查 ,共分离出弧菌科细菌 16种 182株 ,检出率为 18.5 %。182株病原性弧菌构成比分别为弧菌属 :副溶血性弧菌2 2 .0 % (40株 )、霍乱弧菌小川型 0 .5 % (1株 )、霍乱弧菌Ｏ139群 1.1% (2株 )、霍乱弧菌非Ｏ1群 12 .6 % (2 3株 )、海鱼弧菌 7.7% (14株 )、…     

乐山市首例霍乱弧菌小川型菌株分离鉴定报告

1999年 6月 ,我们首次从乐山市市中区茅桥镇一急性腹泻病人的水样便中分离出了霍乱弧菌小川型菌株 ,并进行了鉴定 ,现将结果报告于后 :1　材料和方法1.1　培养基碱性胨水 ,4号琼脂。1.2　诊断血清[作者单位 ]四川省乐山市卫生防疫站 ,6 14 0 0 0[作者简介 ]牟怀德 ,男 ,35岁 ,主管技师 .[收稿时间 ] 1999— 11— 2 1卫生部兰州生物制品研究所生产 ,由四川省防疫站提供。1.3　药敏纸片中国药品生物制品检定所监制 ,北京天坛药物技术开发公司生产 ,计 2 2种。1.4　检验方法按卫生部防疫司《霍乱、副霍乱防治手册》 (1982年版 )进行。2　检验结…     

深圳市8～10岁儿童碘营养水平评价

目的　对深圳市 8～ 10岁儿童碘营养水平进行评价。方法　点状采集在本市连续居住3年以上、发育良好、无慢性疾病的 8～ 10岁儿童尿、家用盐及饮水 ,同时测定其甲状腺体积、体重及身高。水碘和尿碘采用砷铈催化比色法、盐碘采用直接滴定法、甲状腺采用B超测定。结果　 2 30例8～ 10岁儿童尿碘中位数 (M) 197 6 0 μg/L ,甲状腺肿大率 6 0 9% ,盐碘合格率均≥ 99% ,水碘M 19 15μg/L ;116例市区儿童尿碘处于适宜范围 (10 0～ 2 0 0 μg/L) ,占 2 6 7% ;114例郊区儿童占 31 6 % ,但前者 >2 0 0 μg/L为 6 5 5 %高于后者 (4 3 9% ) ,而后者 <10 0 μg/L占 2 4 6 %高于前者 (7 8% ) (P均 <0 0 1) ;市区水碘M 2 2 5 0 μg/L ,90 %以上 >10 μg/L ,而郊区有 5 0 %水碘 <10 μg/L ;市区女生甲状腺体积 /体重比值 0 16 1,高于郊区 0 134(P <0 0 1) ,其中市区 4例甲状腺肿全都发生在 9岁女生组。结论　该市 8～ 10岁儿童碘营养水平适宜 ,比 3年前有明显改善 ;以饮水碘可判定市区应不归于碘缺乏病(IDD)流行区 ,郊区还应强化KAP教育 ;市区有防止高碘危害的必要 ,长期补碘可考虑下调碘盐浓度为 (15± 5 )mg/kg ,市区可自主购买     

膜免疫层析法快速诊断试纸现场检测O1霍乱弧菌

常规的霍乱诊断以分离培养鉴定出霍乱弧菌为主要依据。我们在对 6 2例疑似霍乱患者的便标本进行Ｏ1霍乱弧菌常规分离培养鉴定过程中 ,用Ｏ1霍乱弧菌膜免疫层析法快速诊断试纸 (Ｏ1快速试纸 )同时检测。结果如下。1.材料与方法 :Ｏ1霍乱弧菌诊断血清、庆大培养基和碱性蛋白胨水购自中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所 ;Ｏ1霍乱弧菌膜免疫层析法快速诊断试纸购自北京耀华生物技术有限公司 ,均在有效期内使用。 6 2例便标本来源于本市疑似霍乱患者。按《霍乱防治手册》(第五版 )所述分离培养鉴定方法和Ｏ1快速试纸同时检测 ,并对结果进…     

重组(CHO细胞)乙型肝炎疫苗稳定性的研究

为了观察 10 μg/ml、2 0 μg/ml的重组中国仓鼠卵巢细胞 (CHO细胞 )乙型肝炎 (乙肝 )疫苗的稳定性 ,将 10 μg/ml、2 0 μg/ml疫苗放置 4℃ 2、3、4年后 ,分别接种NIH(美国国立卫生研究院 )小鼠 ,采用放射免疫试验 (RIA)检测血清中乙肝病毒表面抗体 (抗 HBs)。根据疫苗的ED50 算出相对效力。 10 μg/ml剂量疫苗相对效力平均值分别为 2年 1 83,3年 1 36 ,4年 0 83;2 0 μg/ml剂量疫苗相对效力平均值分别为 2年 1 91,3年 1 75 ,4年 1 75。结果表明 ,2 0 μg/ml疫苗的稳定性相对优于 10 μg/ml疫苗。     

高效液相色谱法同时测定植物油中的BHA、BHT和游离棉酚

〔目的〕建立高效液相色谱法同时测定植物油中氧化剂BHA(叔丁基羟基茴香醚 )、BHT(二叔丁基羟基甲苯 )和有毒物质游离棉酚的方法。〔方法〕采用HypersilODS( 2 5 0mm× 4.6mm ,10 μg)色谱柱 ;流动相为甲醇 -磷酸水 ( 3 3 0 0 ) =84 16;流速 :1.2ml min ;检测波长 :2 3 0nm。〔结果〕此三种物质分离良好 ,BHA、BHT和游离棉酚的最低检出量分别为 5ng、10ng和5ng ,回收率为 90 .7%～ 10 5 .1% ,相对标准偏差为 0 .93 %～ 1.7%。〔结论〕该方法简便、快速、准确及重现性好     

分光光度法测定锌盐泡制皮蛋中微量锌

本文着重介绍双硫腙比色法测定无铅皮蛋中的锌以及讨论了用锌盐代替铅盐泡制皮蛋的重要意义。选用的方法精密度高 ,且比较灵敏 ,适于皮蛋中锌的测定。现报告如下。1　实验部分1 1　试剂与仪器　所用试剂均为分析纯 ,无锌水 :用全玻璃容器重新蒸馏蒸馏水 ;0 0 1%双硫腙四氯化碳溶液 (10 0 μg/ml) ;2 5 %硫代硫酸钠溶液(pH4 0～ 5 5 ) ;锌标准溶液 (1μg/ml) :精密称取锌粒 0 10 0 0 g ,溶解于 10ml 2N盐酸中 ,加重蒸馏水稀释到 10 0 0ml,配成 10 0 μg/ml的贮备液 (贮存瓶事先用浓硝酸处理后备用 ) ,精密吸取贮备液 1ml,用重蒸馏水稀释…     

基因重组乙型肝炎疫苗用于成人的免疫程序和接种剂量的研究

目的　探讨成人基因重组乙型肝炎(乙肝)疫苗的免疫程序和免疫剂量。方法　选择射阳县盐东镇和盘湾镇一般健康状况良好的15～6 0岁、经筛查乙肝病毒表面抗原(HBsAg)、乙肝病毒表面抗体(抗HBs)、乙肝病毒核心抗体(抗 HBc)均为阴性的116 8名农民为对象,随机分为12个研究小组,选用重组(酵母)乙肝疫苗(5 μg、10 μg)、重组[中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞) ]乙肝疫苗(10 μg、2 0 μg)和0、1、2个月与0、1、6个月两种免疫程序进行免疫效果观察。结果　全程免疫后1个月时,12个组抗 HBs阳性率为72 . 83%～98 .99% ,抗 HBs几何平均滴度(GMT)为34 .4 5mIU/ml～2 0 .1 0 8mIU/ml;6个月时,12个组抗 HBs阳性率为5 5 . 0 0 %～95 . 10 % ,抗 HBsGMT为2 7. 0 1mIU/ml～81. 81mIU/ml。不同免疫方案之间抗HBs阳性率和GMT的差异均有非常显著的统计学意义。高剂量疫苗组抗 HBs阳性率、GMT和抗体高滴度分布比例均高于低剂量疫苗组;0、1、6个月程序抗HBs阳性率和GMT高于0、1、2个月程序;重组(CHO细胞)乙肝疫苗抗 HBs阳性率和GMT高于重组(酵母)乙肝疫苗,重组(CHO细胞)乙肝疫苗10 μg诱导的抗 HBsGMT显著优于10 μg重组(酶母)乙肝疫苗,但抗HBs阳性率差异无显著的统计学意义。结论　对成人开展乙肝疫苗接种应选择高剂量的乙肝疫苗,     

水体及水产品霍乱弧菌疫源监测研究

目的　研究水体及水产品霍乱弧菌污染情况及疫源性 ,判断疫源地性质。　方法　采用霍乱弧菌常规检测方法及多基因 PCR方法 ,分别对深圳本地、内地及进口来源的水体及水产品进行霍乱弧菌检测。　结果　深圳河水体霍乱弧菌阳性率 1.2 1% ,海产品养殖水、大鹏湾水体经多年监测未检出霍乱弧菌 ;本地来源水产品未检出霍乱弧菌 ,内地来源水产品霍乱弧菌阳性率 0 .0 6% ,进口水产品检出霍乱弧菌阳性率 3 .2 %。分离的 EVC群菌株为产毒株 ,分离的 O1 39群菌株为非产毒株。　结论　深圳地区海水未形成霍乱弧菌自然繁殖地 ,水产品疫源主要为进口来源 ,属于输入性     

β-胡萝卜素辅致癌机制体外实验研究

[目的 ]建立改进的BALB/c 3T3细胞转化试验方法 ,简便、快速检测 β 胡萝卜素通过诱导细胞色素P45 0酶提高苯并 (a)芘、吸烟焦油致癌作用。 [方法 ]每组 12瓶细胞 ,每瓶接种 10 4细胞 ,2 4h后加受试物 ,1周后 2瓶细胞用结晶紫方法测定细胞毒性 ,其余 10瓶换含 2 %胎牛血清和 1%ITES( 2 0 0 μg/ml胰岛素 ,2 0 0 μg/ml人转铁蛋白 ,12 2 μg/ml氨基乙醇 ,0 0 3 4μg/ml亚硒酸钠 )DMEM /F12转化表达培养液。每周换液 2次 ,第 2 5天甲醇固定 10min ,2 5 %Giemsa染色 5～ 10min ,肉眼计数直径 >2mm转化灶。 [结果 ] 0 5、1μmol/Lβ 胡萝卜素、10 μmol/Lα 萘黄酮、10 μmol/L苯并 (a)芘和 2μg/ml吸烟焦油对细胞相对存活率均大于 90 %。 1μmol/Lβ 胡萝卜素能提高苯并 (a)芘、吸烟焦油的细胞转化率平均每瓶细胞转化灶分别增高 3 2 %和 5 0 0 %。α 萘黄酮可以抑制 β 胡萝卜素增强吸烟焦油和苯并 (a)芘细胞转化作用。[结论 ]β 胡萝卜素增强苯并 (a)芘和吸烟焦油对BALB/c 3T3细胞转化能力 ,可被混合功能氧化酶抑制剂α 萘黄酮阻止 ,提示 β 胡萝卜素辅致癌作用是通过诱导细胞色素P45 0酶所致     

SPE-HPLC同时测定水产品中己烯雌酚、甲基睾酮的研究

目的:固相萃取高效液相色谱法同时测定水产品中己烯雌酚(DES)、甲基睾酮(MET)的残留量。方法:固相萃取小柱为AlltechExtract cleancolumnsC18,2 0 0mg/ 4.0ml,洗脱液为甲醇;色谱柱为SUPELCODiscoveryC185 μm2 5 0×4.6mm ,流动相为:甲醇∶水=75∶2 5 (V/V) ,流速为1 0ml/min ,二极管阵列检测器,检测波长为2 4 5nm。结果:该方法的线性范围为:0.5～10.0 μg/ml;标准曲线线性良好,其回归方程及相关系数r分别为己烯雌酚:y =6 1 3 10 4 2x+ 2 3 86 15 ,r =0 99994 ;甲基睾酮:y =6 6.5 5 4 2 7x + 2.3 2 4 91 ,r =0.99994。最低检出限分别为:己烯雌酚9 5 μg/kg ;甲基睾酮5 4μg/kg ;回收率在95 %～10 2 %之间,相对标准偏差小于1.3 %。结论:该方法操作简便、快捷,是水产品激素残留的快速而准确的检测方法     

婴儿奶粉中维生素B1和B2的高效液相荧光测定法

目的 检测婴儿配方奶粉中低含量的维生素B1和维生素B2.方法婴儿配方奶粉中加入0.5%乙酸溶液沉淀蛋白、过滤进样,采用反相高效液相法,选用含35%甲醇+65%0.05mol/L醋酸钠溶液(pH=4.5)作为流动相,流量1 ml/min,经Zorbax SB-Aq 100%水相反相色谱柱分离,柱温为室温,维生素B1的激发波长(λer)为375 nm,发射波长(λem)为435 nm,以0.25 g/L碱性铁氰化钾溶液为柱后衍生剂,流量为0.3 ml/min,反应温度为室温;维生素B2直接进行荧光测定(λex=462nm,λem=522 nm).结果 方法的线性范围为10～1 000 μg/L,相关系数均为0.9999,维生素B1最低定量检出限为5.1 μg/L,方法检出限为1.5 μg/L,维生素B2最低定量检测限为4.7 μg/L,方法检测限为1.4 μg/L,平均回收率为86.5%～98.1%,相对标准偏差小于5%.结论 该方法简便快捷、灵敏,满足日常快速分析要求.     

干洗场所空气中TCE、PCE气相色谱测定方法研究

本文提出用活性碳管吸附、以二硫化碳溶剂解吸、气相色谱氢火焰离子化检测器分析测定干洗场所空气中三氯乙烯 (TCE)、四氯乙烯 (PCE) ,色谱条件 :色谱柱长 2米、内径 3mm不锈钢柱 ,填充聚乙二醇6 0 0 0∶6 2 0 1红色担体 (6 0— 80目 ) =5∶10 0 ,柱温 96℃ ,气化室 170℃ ,氢火焰离子化检测器 170℃ ,载气流量N2 2 0ml/min ,线性范围TCE 0 .10— 0 .6 0mg/ml,PCE 0 .10— 2 .0 0mg/ml,相关系数 0 .9995— 0 .9997,检出限TCE 0 .14ug/ml,PCE 1.4ug/ml,方法的精密度TCE 2 0、10 0、2 0 0ug/ml标准溶液分析 ,变异系数分别为1.2 9%、2 .6 2 %、1.2 2 % ,PCE 14、15 5、2 90mg/L标准溶液分析 ,变异系数分别为 3 .76 %、1.82 %、1.6 8% ,稳定性PCETCE在活性碳管中 7天内稳定 ,变异系数 0 .6 5— 3.2 1% ,回收率 91.0— 10 8.4% ,二硫化碳对TCEPCE的解吸效率 91.12— 10 6 .1% ,测定中与PCETCE共存物质二氯甲烷、三氯甲烷、苯、甲苯不干扰目标组分测定。方法适用于日常卫生监督监测工作 ,可同时测定作业场所空气中三氯乙烯、四氯乙烯     

不同剂量和种类基因工程乙型肝炎疫苗免疫效果研究

为探讨不同剂量和种类基因工程乙型肝炎 (乙肝 )疫苗的免疫效果 ,在北京市大兴县、顺义区抽取健康新生儿 193名 ,随机分为 3组 :Ⅰ组接种重组酵母乙肝疫苗 10 μg -5 μg -5 μg ,Ⅱ组接种重组酵母乙肝疫苗 5 μg -5 μg -5 μg ,Ⅲ组接种中国仓鼠卵巢(CHO)细胞乙肝基因工程疫苗 10 μg -10 μg -10 μg ,3组均按 0、1、6月程序接种。结果 :全程免疫后 1年 ,抗 -HBs阳转率分别为85 5 1%、86 44%、10 0 .0 0 % ,几何平均滴度 (GMT)分别为 5 0 5 0mIU/ml、5 2 34mIU/ml、14 3 19mIU/ml;全程免疫后 2年 ,抗 -HBs阳性率分别为 79 6 6 %、70 2 1%、95 5 6 % ,GMT分别为 2 5 98mIU/ml、30 48mIU/ml、6 9 5 8mIU/ml。表明 :对HBsAg阴性母亲所生的新生儿采用重组酵母乙肝疫苗 10 μg -5 μg -5 μg与 5 μg -5 μg -5 μg接种 ,其抗 -HBs阳转率及GMT差异无显著的统计学意义 ,但免疫后第 2年 ,采用 5 μg -5 μg -5 μg免疫组的抗体下降速度较 10 μg -5 μg -5 μg组为快 ;两个重组酵母乙肝疫苗接种组与CHO乙肝基因工程疫苗接种组比较抗 -HBs阳性率和GMT的差异均有显著的统计学意义 ,CHO乙肝基因工程疫苗接种组免疫效果最好