CEA蛋白、CEAmRNA检测在大肠癌、胃癌早期诊断中的价值及方法探讨

目的研究癌胚抗原（CEA）蛋白、CEAmRNA在大肠癌、胃癌患者血清、癌组织中的表达,为大肠癌、胃癌的早期诊断提供理论依据,并探讨最佳诊断方法。方法选取21例大肠腺癌、20例胃腺癌住院患者和20例胃肠道良性疾病患者,检测其术前血清CEA蛋白表达;用免疫组织化学法和实时荧光定量RT—PCR法检测癌组织、癌旁组织及良性胃肠道疾病组织中CEA蛋白和CEAmRNA表达。结果大肠癌、胃癌组织CEA蛋白及CEAmR-NA的表达均高于癌旁组织及良性胃肠道疾病组织（P〈0．01,或〈0．05）,胃癌组织CEAmRNA表达与血清及组织中CEA表达比较有统计学差异（P〈0．05）;大肠癌组织CEAmRNA表达与血清CEA表达比较有统计学差异（P〈0．05）。结论应用实时荧光定量RT—PCR法检测组织CEAmRNA在大肠癌和胃癌早期诊断中有重要价值。     

CK19与CEA在非小细胞肺癌外周血微转移中的对比研究

目的检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血细胞角蛋白（CK19）及癌胚抗原（CEA）的表达,探讨对检测NSCLC微转移的可行性。方法应用RT—PCR技术检测48例NSCLC患者、15例肺良性疾病（BLD）患者和10例健康人外周血CK19及CEA mRNA的表达。结果NSCLC患者外周血中CK19及CEA mRNA的阳性表达率分别为68．75％、58．33％,在BLD组中表达率分别为13．33％、6．67％,而对照组外周血中均无表达,NSCLC组CK19及CEA表达均高于BLD组及对照组（P〈0．05）。外周血CK19及CEA的表达与临床分期及淋巴结转移密切相关,与病理类型及分化程度无关。结论CK19与CEA均可作为检测NSCLC患者外周血微转移较为合适的分子标志物,联合检测有助于提高检测的阳性率。     

腹水中CEAmRNA和CEA检测在良、恶性腹水鉴别中的意义

目的分析测癌胚抗原信使核糖核酸（CEAmRNA）和癌胚抗原（CEA）在恶性腹水和良性腹水表达的差别，探讨应用CEAmRNA和CEA指标诊断与鉴别诊断恶性腹水的价值。方法研究对象包括恶性腹水组38例，良性腹水组32例，采集腹水为检测标本，应用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测CEA、逆转录聚合酶链反应（PT—PCR）技术检测CEAmRNA。结果CEAmRNA的阳性表达为：恶性腹水组30例（78．9％）、良性腹水组3例（9．4％）；CEA的阳性表达为：恶性腹水组20例（52．6％）、良性腹水组2例（6．2％）。结论在恶性腹水中CEANA和CEA均有较高的阳性表达，CEAmRNA的表达显著高于CEA表达（P〈0．01）。可以作为诊断与鉴别良恶性腹水的指标应用。     

神经颗粒素蛋白在系统性红斑狼疮患者外周血细胞异位表达的临床意义

目的探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单个核细胞表达神经颗粒素蛋白（Ng）的临床意义。方法采用半定量RT—PCR和Western blot共检测72例SLE患者外周血单个核细胞Ng表达状态,依据RT—PCR电泳条带的灰度值或是否可见Western blot条带,将72例SLE患者分成病例研究组（53例）和病例对照组（19例）,分别比较两组临床特征。结果病例研究组SLE疾病活动指数评分（SLEDAI）明显高于对照组（P〈0．05）,具有较高的发生肾损害（P〈0．05）的危险性。结论SLE患者外周血单个核细胞过度表达Ng提示疾病活动性较高,可能与肾损害和血液学异常相关联。     

乳腺癌患者外周血hMAM mRNA的表达与C-erbB-2、ER、PR及p53的相关性

目的探讨外周血人乳腺珠蛋白（hMAM）的表达与乳腺癌相关临床病理参数、癌基因C-erbB-2、雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）及抑癌基因p53的关系及其临床意义。方法收集经病理证实的乳腺癌患者外周血标本58例,运用RT-PCR法检测外周血中hMAM的表达。结果hMAM在乳腺癌患者外周血的阳性表达率为34．5％,乳腺良性肿瘤患者和正常对照者均无阳性表达;乳腺癌患者外周血hMAM的阳性表达与患者的淋巴结转移情况、TNM临床分期及C—erbB-2的表达均有相关性（P均〈0．05）,而与患者的年龄、原发肿瘤大小、临床病理类型、月经状态、激素受体状况、p53等无相关性（P均〉0．05）。结论hMAM可作为乳腺癌微转移的检测指标,hMAM与C—erbB-2的表达呈正相关,而与激素受体及P53等均无相关性。     

慢性粒细胞白血病患者sorcin基因表达及其临床意义

目的探讨慢性粒细胞白血病患者可溶性耐药相关钙结合蛋白（sorcin）基因表达与临床耐药和疗效的关系。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测31例慢性粒细胞白血病（CML）患者（CML组）和27例健康人（对照组）sorcin基因表达。结果CML组sorcin基因阳性表达率明显高于对照组（P〈0．01），其急变期患者阳性率高于慢性期和加速期患者（P分别为0．03和0．18）；CML临床耐药者sorcin基因表达显著高于非临床耐药者，疗效显著低于非临床耐药者。结论CML患者sorcin基因呈高表达，与临床耐药和预后密切相关；sorcin表达可作为检测临床耐药和判断CML患者预后的指标之一。     

实时定量PCR检测TRF1、TRF2和hRAP1基因在急性髓细胞性白血病中mRNA表达

目的：建立一种实时荧光RT—PCR方法,定量检测急性髓细胞性白血病（AML）患者外周血白细胞细胞TRF1、TRF2和hRAP1mRNA的表达水平及相互关系。方法：选取48例初治AML患者和21例健康志愿者,采用实时荧光RT—PCR与Lightcyeler荧光PCR仪定量检测TRFI、TRF2和hRAP1mRNA的表达水平;采用2^—△△Ct法处理实时荧光定量RT—PCR数据。结果：AML首治患者TRF1、TRF2和hRAP1mRNA表达水平较对照组健康志愿者分别下降了2．9倍,2．2倍和16．6倍,且差异有统计学意义;AML患者组TRF1和TRF2mR—NA的表达改变具有一定的相关性（r=0．57,P〈0．01）。结论：成功利用患者外周血检测出端粒结合蛋白TRF1,TRF2在白血病细胞中mRNA的表达水平下降,并首次检测发现hRAP1在AML患者细胞中存在表达下降,间接说明了hRAP1的表达下降也是白血病的发病原因之一。     

乳腺癌组织中组织蛋白酶D的表达及意义

应用免疫组化SP法检测50例乳腺囊性增生和50例乳腺癌标本中组织蛋白酶D（CathD）和雌激素受体（ER）的表达。结果乳腺癌组织中CathD阳性表达26例,明显高于乳腺囊性增生组的10例。乳腺癌患者中伴腋窝淋巴结转移者CathD阳性表达23、3例绝经前、后者CathD阳性表达18、8例;ER阳性者CathD阳性表达率78．2％（18／23）,明显高于ER阴性者的29．6（8／27）。可见临床检测CathD的表达对预测乳腺癌患者预后有一定的价值。     

T-bet、GATA-3在慢性特发性血小板减少性紫癜患者外周血中的表达及意义

目的进一步探讨慢性特发性血小板减少性紫癜（CITP）的发病机制。方法选择25例CITP患者（CITP组）及25例健康体检者（正常对照组）,采用ELISA法检测外周血Th细胞因子IFN-γ、IL-10表达;采用RT—PCR检测外周血淋巴细胞中转录因子T-bet、GATA-3mRNA表达。结果与正常对照组相比,CITP组IFN—γ表达显著升高、IL-10表达显著降低（P〈0．01）,T—betmRNA表达明显升高、GATA-3mRNA表达明显下降（P〈0．05）。结论T-bet、GATA-3表达异常在CITP发生、发展过程中发挥重要作用,可能机制为增强TM细胞功能、抑制Th2细胞功能。     

IL-3受体α在CML中的表达意义

应用半定量RT—PCR技术，对12例慢性粒细胞白血病慢性期（CML-CP组）、5例慢性粒细胞白血病急变期（CML—BP组）患者及15例正常者（对照组）行IL-3受体α（IL-3Rα）mRNA检测。结果与对照组比较，CML-CP组IL-3RαmRNA表达阳性率升高，但无统计学差异（P〉0．05）；CML-BP组明显升高（P〈0．05）。提示IL-3RαmRNA在CML—BP患者中呈高表达，与疾病分期有关。     

结直肠癌患者外周血中癌胚抗原-mRNA的表达及其临床意义

目的：肿瘤复发转移仍是威胁患者生存的重要原因，及早检出外周血中的循环肿瘤细胞并进行有效的综合治疗有着重要的临床意义。检测结“直肠癌患者外周血中癌胚抗原（CEA）－mRNA的表达及血清CEA蛋白的含量，并分析其临床价值。方法：35例有明确临床肿瘤病灶存在的结直肠癌患者、9例根治术后患者和37例健康志愿者，分别以逆转录PCR（RT－PCR）检测其外周血中CEA－mRNA的表达，时间分辨荧光方法测定其血清CEA蛋白的含量。结果：35例结直肠癌患者CEA－mRNA阳性率为45．7％，而健康对照组阳性率为2．7％，两者比较差异有显著性（P＜0．05）；9例术后患者CEA－mRNA仅2例阳性；CEA－mRNA阳性表达率与肿瘤分期相关，与肿瘤细胞分化程度并不相关。CEA－mRNA阳性组血清CEA蛋白阳性率（72．2％）显著高于CEA－mRNA阴性组（42．3％）。结论：外周血细胞中CEA－mRNA的表达与肿瘤分期相关，有可能作为结直肠癌微转换的一个监测指标。长期的随访有助于评价其临床价值。     

乳腺癌外周血细胞角蛋白19 mRNA的检测及临床价值

目的应用荧光定量RT-PCR检测乳腺癌外周血中的表达情况,并评价其表达的临床意义。方法用荧光定量RT-PCR方法检测49例乳腺癌患者外周血CK19mRNA表达。结果49例乳腺癌患者外周血中CK19mRNA检测阳性28例,阳性率57.1%,统计结果显示乳腺癌患者外周血CK19mRNA的表达阳性率在患者不同年龄、病理类别、临床分期、ER、PR状态的各组差异无显著性(P>0.05),在淋巴结转移状态间有显著差异。结论CK19mRNA可作为RT-PCR法检测乳腺癌患者外周血微转移的分子标志物,有助于早期预测乳腺癌发生血道微转移,指导临床治疗。     

进展期胃癌VEGF-C的表达及与淋巴结转移的关系

目的研究血管内皮生长因子-C(VEGF-C)在进展期胃癌中的表达,探讨其与淋巴结转移的关系。方法将88例进展期胃癌手术病例,分为伴淋巴结转移组和不伴淋巴结转移组,另设10例正常胃黏膜为对照组。应用免疫组化EnVision TM两步法检测VEGF-C的表达。结果进展期胃癌组织VEGF-C阳性表达率为52%,明显高于正常黏膜。伴淋巴结转移组VEGF-C阳性表达率较不伴淋巴结转移者更高,P<0.05。Logistic回归分析发现与胃癌区域淋巴结转移相关的自变量有4个,根据与淋巴结转移的相关联系强度及促进淋巴结转移的贡献大小,VEGF-C表达对进展期胃癌淋巴结转移贡献最大,相关联系强度较高。结论进展期胃癌组织VEGF-C阳性高表达,并与进展期胃癌淋巴结转移密切相关。     

食管鳞癌中Paxillin mRNA的表达及其与癌转移的关系

目的探讨Paxillin mRNA表达与食管癌转移的关系。方法采用原位杂交方法检测54例食管鳞癌、癌旁不典型增生组织及其正常食管组织中Paxillin mRNA的表达。结果有淋巴结转移的21例（A组）食管鳞癌组织、癌旁不典型增生组织和正常食管组织中Paxillin mRNA阳性表达率分别为90．48%（19／21）、52．38％（11／21）和0，无淋巴结转移的33例（B组）食管鳞癌组织、癌旁组织和正常食管组织中的Paxillin mRNA阳性表达率分别为33．33％（7／33）、23．80％（5／33）和0。两组癌组织、癌旁不典型增生组织中Paxillin mRNA阳性表达率比较，P均〈0．05。结论Paxillin mRNA表达与食管鳞癌的转移密切相关。     

胃癌组织MMP-2表达与SCT的相关性研究

目的探讨胃癌螺旋CT(SCT)表现的分子病理学基础,寻找与胃癌浸润转移相关的生物学标志,从分子水平对胃癌的侵袭、转移、预后作出正确评估。方法对81例进展期胃癌患者行SCT平扫及三期动态增强扫描,术后HE染色及金属蛋白酶(MMP-2)免疫组织化学染色。结果81例进展期胃癌组织中MMP-2表达率为69.1%,MMP-2表达与胃癌TNM分期、淋巴结转移、肿瘤侵袭程度密切相关(P<0.05)。结论MMP-2表达与SCT强化幅度、SCT显示的浸润深度和淋巴结转移有关。     

PLK1和PCNA在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨乳腺癌组织中PLK1、增殖细胞核抗原（PCNA）的表达及其临床意义。方法 应用免疫组织化学S-P法检测32例乳腺癌患者癌组织及16例乳腺良性增生患者乳腺增生组织中PLK1、PCNA的表达。结果 乳腺癌组织中PLK1、PCNA的阳性表达率分别为56、3％（18／32）、71．9％（23／32），PLK1表达与年龄、组织学类型、肿瘤大小、淋巴结状态、肿瘤分期及人类表皮生长因子受体-2（HER-2）的表达等因素无关（P均〉0．05），与肿瘤分化程度、雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）表达有关（P均〈0．05）。PCNA的表达与肿瘤分化程度、ER表达有关（P均〈0．05）；与年龄、组织学类型、肿瘤大小、淋巴结状态、PR及HER-2表达等因素无关（P均〉0．05）。乳腺良性增生组织中PLK1、PCNA表达均为阴性或弱表达。结论 PLK1在乳腺癌组织中表达具有一定肿瘤特异性，有望成为乳腺癌治疗的新靶点。     

CD44s mRNA在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨CD44s mRNA在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法采用核酸原位杂交技术检测66例胃癌（胃癌组）、25例浅表性胃炎（胃炎组）和25例胃上皮不典型增生（增生组）中CD44s mRNA的水平。结果胃炎组无阳性表达;增生组中阳性率为20％;在胃癌组中阳性率为62．12％,胃癌组低分化组织中阳性率明显高于高分化组织（P〈0．05）,有淋巴结转移组阳性率明显高于无淋巴结转移组（P〈0．05）。结论CD44s mRNA表达与胃癌组织分化程度和转移有相关性;CD44s mRNA基因水平可作为判断胃癌病情和预后的指标。     

MTA1蛋白在乳腺癌中的表达及临床意义

目的探讨肿瘤转移相关基因1（M TA 1）蛋白表达与乳腺癌生物学行为之间的关系。方法应用免疫组化SP法检测56例乳腺癌组织中M TA 1蛋白及雌激素受体（ER）的表达。结果56例乳腺癌组织中39例M TA 1蛋白阳性表达,阳性率为69.6%（39/56）。M TA 1高表达与乳腺癌组织学分级、临床分期和淋巴结转移有关（P〈0.05）,与年龄和ER状况无关（P〉0.05）。结论M TA 1蛋白可作为诊断乳腺癌转移复发的参考指标,并有望成为乳腺癌基因治疗的新靶点。