HCV NS-5区分型引物法检测新疆两城市HCV基因型

目的：了解新疆两城市丙型肝炎病毒感染者中存在哪些基因型，以便为今后防治ＨＣＶ感染提供依据。方法：用ＲＴ－ＰＣＲ技术，选择ＨＣＶＮＳ－５区设计的分型引物（１ａ、１ｂ、２ａ和２ｂ）进行基因分型。结果：我们检测了１２８例（乌鲁木齐市９７例，克拉玛依市３１例）已证实为丙型肝炎病毒感染者的血清，其中基因分型检测出的９８例中可分为１ａ型１４例（１４．３％）、１ｂ型５８例（５９．３％）、２ａ型１１例（１１．８％）、２ｂ型１０例（１０．３％），混合感染５例（５．２％）（１ａ＋１ｂ型４例，１ｂ＋２ａ型１例）。在乌鲁木齐市和克拉玛依市的ＨＣＶ感染者中１ａ型分别为１１／７３例和３／２５例，１ｂ型分别为４６／７３例和１２／２５例。结论：表明新疆至少存在ＨＣＶ１ａ、１ｂ、２ａ和２ｂ基因型，但以１ｂ基因型感染为主。比较乌鲁木齐市和克拉玛依市两城市的ＨＣＶ基因型分布显示１ａ型和１ｂ型分布有明显差别（χ２＝３６，Ｐ＜０．００１）。另３０例用本方法未能检出分型，提示可能还有其它基因型存在     

肝炎后肝硬化150例血清学分析

本文对１５０例肝炎后肝硬化（ＣＩＲ）患者的血清标本回顾性地检测了ＨＢＶ、ＨＣＶ及ＨＤＶ感染标志，结果ＨＢＶ感染率为１００％，ＨＣＶ感染率为３９．３％，ＨＤＶ感染率为４２．０％，有６２．７％ＣＩＲ患者重重叠感染了二种以上肝炎病毒。其中二重感染率：ＨＢＶ／ＨＣＶ２０．７％，ＨＢＶ／ＨＤＶ２３．３％，三重感染率为１８．７％，均显著高于慢性乙型肝炎患者（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）。结果提示，ＨＢＶ、ＨＣＶ和ＨＤＶ感染与肝硬化的发生关系密切，肝炎病毒重叠感染可能导致肝病加重。     

干扰素治疗丙型肝炎效果随访研究

目的：探讨丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因型与干扰素治疗后ＨＣＶＲＮＡ阴转远期效果的相关性。方法;采用反转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）方法。结果：干扰素治疗后,经过１８ｍｏ－２６ｍｏ的随访,Ⅱ－１ｂ型ＨＣＶＲＮＡ持续阴转率为２０．０％;Ⅲ／２ａ型为７０．０％,两型疗效相差非常显。结论;干扰素治疗丙型肝炎的疗效与丙型肝炎病毒基因型有关,对Ⅲ／２ａ型的疗效优于Ⅱ／１ｂ。     

少年儿童肝炎72例血清抗—HCV检测及HCV、HBV重叠感染的临床意义

对７２例少年儿童各型肝炎进行丙型肝炎病毒抗体（抗—ＨＣＶ）和乙型肝炎病毒标志（ＨＢＶＭ）检测，发现抗—ＨＣＶ阳性率为４０．３％，ＨＢＶＭ阳性率为６１．１％，输血后肝炎抗—ＨＣＶ阳性率（６６．６％）高于非输血后肝炎者（３７．８％）。ＨＣＶ、ＨＢＶ重叠感染率分别为：ＡＨ５．８％，ＣＰＨ２７．２％、ＣＡＨ６８．７％，各组差异有高度显著性（Ｐ＜０．０１）。提示本地少年儿童肝炎仍以乙型肝炎为主，但ＨＣＶ感染不容忽视；输血是ＨＣＶ感染的主要途径；ＨＣＶ、ＨＢＶ重叠感染易使病情慢性化和重症化。     

肝细胞癌和其它慢性肝病HCV HBV感染比较分析

对１２８例有病理诊断依据的肝细胞场（ＨＣＣ）、４７例慢迁肝（ＣＰＨ）、１０５例慢活肝（ＣＡＨ）、４６例肝硬化（ＬＣ）．采用嵌套式ＰＣＲ技术检测其血标本中的丙型肝炎病毒（ＨＣｖ）ＲＮＡ和乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＩＩＡ，对这两种病毒的血清学标志也进行了研究。结果：在ＨＣＣ组。ＨＣＶＲＮＡ１４．１％阳性，ＨＢＶＤＮＡ７ｉ．３％阳性。ＣＰＨ，ＣＡＨ，ＬＣ和ＨＣＣ的ＨＢＶ感染率均在９０％左右，而ＨＣＶ感染率则分别为８．５％、９．５％、１７．４％和１９．５％，显示ＨＣＶ感染率随肝病严重程度的增加而有增加的趋势；晚期肝病组的ＨＣＶ感染率（１９．０％）显著高于慢性肝炎组（９．２％，Ｐ＜０．０５）。提示ＨＣＶ感染后经过慢性肝炎、肝硬化发展为ＨＣＣ可能是一个逐渐演进的病理过程。ＨＣＶ，ＨＢＶ重叠感染率。ＨＣＣ组高于ＣＰＨ，ＣＡＨ，而与ＬＣ相近，显示ＨＣＶ重叠感染在原有ＨＢＶ感染的基础上促进病变向着迁延化、慢性化，进而向着肝硬化、ＨＣＣ方向发展。     

用套式RT—PCR法检测肝细胞癌中丙型肝炎病毒基因型

检测人肝细胞癌（ＨＣＣ）组织中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因型。方法 用ＲＴ－ＰＣＲ法常规检测ＨＣＣ组织和部分患者因清ＨＣＶ,再以巢工地ＨＣＶ阳性标本中５种ＨＣＶ基因型进行鉴别。地多数标本中ＨＢｓＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ也进行了免疫互助 化和原位杂交检测。结果 ＨＣＶ组织中ＨＣＶ阳性率为５０％,与ＨＢＶ者,差异无显著性意义,两者重叠感染率３４％。在１０例血清ＨＣＶ一ＨＣＣ患者中,３例ＨＣＣ冰冻组织检出ＨＣＶ     

乙型肝炎病毒ＢＣＰ、ＰｒｅＣ和Ｃ区基因突变与母婴传播免疫失败的相关性

【目的】 探讨ＢＣＰ、ＰｒｅＣ和Ｃ区基因突变率及突变热点与ＨＢＶ母婴传播免疫失败的关系。【方法】 选取血清ＨＢｓＡｇ阳性且ＨＢＶ ＤＮＡ定量＞１０００Ｕ／ｍＬ的孕妇,以所分娩的新生儿是否发生免疫失败和孕妇血清ＨＢＶ ＤＮＡ定量水平将孕妇分为免疫失败组（１９例）和对照１组（免疫成功且ＨＢＶ－ＤＮＡ定量≥１．０ × １０７ Ｕ／ｍＬ,４８例）、对照２组（免疫成功且ＨＢＶ－ＤＮＡ定量＜１．０ × １０７ Ｕ／ｍＬ,３８例）。对３组孕妇血中ＨＢＶ进行ＢＣＰ／ＰｒｅＣ／Ｃ区基因ＰＣＲ扩增和测序,比较３组的突变率和突变位点的不同。【结果】免疫失败组与对照１组间ＨＢＶＤＮＡ定量相比,差异无统计学意义（Ｐ ＞ ０．０５）,但均大于对照２组（Ｐ ＜ ０．０５）;ＢＣＰ、ＰｒｅＣ、Ｃ区基因突变率,免疫失败组与对照１组间相比,差异无统计学意义（Ｐ＞ ０．０５）,但均低于对照２组（Ｐ ＜ ０．０５）。突变热点ｎｔＡ１７６２Ｔ、ｎｔＧ１７６４Ａ、ｎｔＧ１８９６Ａ在３组中的发生率差异无统计学意义（Ｐ ＞ ０．０５）。【结论】ＢＣＰ／ＰｒｅＣ／Ｃ区基因突变率与ＨＢＶ ＤＮＡ定量有关,但未见其与ＨＢＶ母婴传播免疫失败有明显相关性;也未见ｔＡ１７６２Ｔ、ｎｔＧ１７６４Ａ、ｎｔＧ１８９６Ａ等突变热点与免疫失败的相关性。     

丙型肝炎病毒和乙型肝炎病毒重叠感染对肝细胞癌的影响

运用巢式聚合酶锭反应检测３６例经外科手术治疗的肝细胞癌（ＨＣＣ）２的肝癌组织或癌周组织中的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ，并检测血清中的乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）表面抗原来显示ＨＣＣ患者中ＨＣＶ和ＨＢＶ的感染情况。，同时收集一般临床资料。结果表明３６例ＨＣＣ２中，ＨＣＶ感染者１３例（３６．１％），ＨＢＶ感染者３０例９８３．３％），两者重叠感染者１２例（３３．３％），并发现ＨＣＶ、ＨＢＶ重叠感染者较仅ＨＢ     

慢性肝病中HBV／HCV双重感染的血清学调查及意义

采用酶免疫法检测１０４例慢性肝病和１６４例献血员丙型肝炎抗体（抗－ＨＣＶ），阳性率分别为１８．３％（１９／１０４）、１．８％（３／１６４）；慢性肝病中ＨＢＶ／ＨＣＶ双重感染１３例。ＨＢＶ／ＨＣＶ双重感染组（Ｂ组）与单纯丙型肝炎组（Ａ组）谷丙转氨酶（ＡＬＴ）差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。与单纯慢性乙型肝炎组（Ｃ组）ＡＬＴ差异有显著性（Ｐ＜０．０５）；３组间血清总胆红素差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。本文结果表明：ＨＢＶ／ＨＣＶ双重感染可加重肝脏损害，多数病例未见ＨＢＶ与ＨＣＶ干扰现象；正常人群也存在丙型肝炎隐性感染。     

α1b—干扰素治疗慢性乙型肝炎与慢性丙型肝炎疗效比较

目的研究国产干扰素（α１ｂ－ＩＦＮ）对慢性乙型肝炎（ＣＢＨ）与慢性丙型肝炎（ＣＨＣ）疗效差异方法对４６例ＣＢＨ与３９例ＣＨＣ患者分别采取用α１ｂ－ＩＦＮ３００万Ｕ隔日一次，疗程３ｍｏ，同时设立对照组ＣＢＨ５７例，ＣＨＣ３３例，于治疗前、治疗后８ｗｋ、治疗结束及治疗后０．５ａ采血清测ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇＨＢＶ、ＤＮＡ、ＨＣＶ、ＲＮＡ并动态观察丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）变化结果对ＣＢＨ及ＣＨＣ的ＡＬＴ复常效果皆优于对照组，并且ＩＦＮ对ＣＨＣ疗效优于ＣＢＨ（Ｐ＜０．０５），ＩＦＮ对ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ阴转疗效皆不明显（Ｐ＜０．０５），但对ＨＢＶ．ＤＮＡ阴转疗效明显（Ｐ＜０．０５），对ＨＣＶ．ＲＮＡ阴转有明显疗效（Ｐ＜０．０１），并且ＩＦＮ对ＨＣＶ．ＲＮＡ阴转疗效明显优于ＨＢＶ．ＤＮＡ（Ｐ＜０．０５）结论提示ＩＦＮ对ＣＨＣ疗效优于ＣＢＨ。     

慢性肝病和肝癌中丙型肝炎病毒感染的病理学研究

目的 研究广西肝细胞癌（ＨＣＣ）及慢性肝病病变组织中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染状况。探讨ＨＣＶ感染在肝癌发病中的应用。方法 用免疫组化ＳＰ法,检查２０１例病变肝组织中丙肝病毒核心区抗原（Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ Ｃｏｒｅ Ａｎｔｉｇｅｎ,ＨＣＡｇ）和乙肝病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）,分析各种肝脏病变中ＨＣＶ的感染状况及其与病变程度的关系。结果：１１６例ＨＣＣ和８５例慢性现中的ＨＣＶ感染率分别是４４．８     

HCV NS5b1b与1b混合感染指标在干扰素治疗中的应用

目的 :探讨丙型肝炎病毒 (HCV)感染的基因型及其与干扰素应答效果的关系。方法 :应用逆转录—聚合酶链反应 (RT PGR)技术对 2 69例肝炎病人血清进行HCVNS5b区基因片段扩增 ,并对 5 6例阳性PCR产物进行酶切分型 ,同时观察干扰素α 2b对其中 48例慢性丙型肝炎的疗效。结果 :HCV单纯 1b型感染、1b与 1b混合感染及 2a型感染对干扰素的应答率分别为 70 % (14 /2 0 )、9 5 % (2 /2 1)、71 4% (5 /7) ;其中完全应答分别为 45 % (9/2 0 )、4 8% (1/2 1)、5 7 1% (4 /7) ;部分应答分别为 2 5 % (5 /2 0 )、4 8% (1/2 1)、14 3 % (1/7)。 1b与 1b混合感染组同单纯 1b型及 2a型感染组比较有显著性差异 (P <0 0 1) ,而单纯 1b型感染组与 2a型感染组比较无明显差异 (P >0 0 5 )。结论 :HCV单纯 1b型感染或 2a型感染者对干扰素敏感 ,而 1b与 1b混合感染者干扰素治疗效果极差 ,可作为预测干扰素疗效的一项新的重要指标     

三种肝炎病毒在肝细胞癌组织及慢性肝炎肝组织中的表达

目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)及庚型肝炎病毒(HGV)在肝细胞癌(HCC)及慢性肝炎肝组织中的存在状态。方法:分别采用抗HBVS,抗-HBVC,抗HCVNS5及抗-HGVNS5单克隆抗体,以免疫组织化学SPAB法检测27例HCC及37例慢性肝病患者石蜡包埋的肝组织中HBVS抗原(HBsAg)、HBVC抗原(HBcAg)、HCVNS5抗原(HCAg)和HGVNS5抗原(HGAg)。结果:HCC中检出HBsAg18例(66.7%),HCAg13例(48.2%)及HGAg9例(33.3%)。其中HBV/HCV/HGV重叠感染7例,HBV/HCV重叠感染4例,HBV单独感染7例,HCV单独感染2例,HGV单独感染2例;在慢性肝炎中检出HBsAg26例(70.3%),HCAg19例(51.4%)及HGAg12例(32.4%)。其中HBV/HCV/HGV重叠感染10例,HBV/HCV重叠感染5例,HBV单独感染11例,HCV单独感染5例,HGV单独感染2例。HBsAg、HCAg、HGAg均表达于肝细胞或肝癌细胞浆内,呈细颗粒状分布。HBcAg表达于肝细胞或肝癌细胞胞核或胞浆内。结论:慢性肝炎及HCC患者有较高的HBV、HCV及HGV感染率,HBV感染在HCC的发生过程中起重要作用,HCV和HGV的感染可能是HCC发生的相关因素。     

HBV基因型在HBV感染性肝癌及慢性HBV感染自然史不同阶段的分布

目的探讨乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)基因型在HBV相关性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)及慢性HBV感染自然史不同阶段的分布。方法选择广西桂北地区46例HBV感染相关性HCC患者,慢性HBV感染自然史不同阶段者共90例,通过实时荧光定量PCR鉴定HBV基因型。临床实验室检查结果和病理资料摘抄自患者病案。结果本地区慢性HBV感染者中基因型B占77.8%,基因型C占18.9%,非B非C占3.3%;HCC中基因型B占78.3%,基因型C占21.7%,慢性HBV感染者和HCC之间的基因型分布差异无统计学意义(P>0.05)。慢性HBV感染不同阶段者之间的基因型分布差异无统计学意义(P>0.05)。慢性HBV感染者中基因型B、C比较,临床资料差异无统计学意义(P>0.05),HCC中基因型B、C间HBV-DNA比较差异有统计学意义(P<0.01)。慢性HBV感染不同阶段组和HCC组比较,ALT、AST、TBIL、ALB、年龄,性别差异均有统计学意义(P<0.05)。结论广西桂北地区的慢性HBV感染者和HBV相关性HCC以基因型B为主,基因型在HBV感染自然史不同阶段和HCC对比分布无差别。基因型C的HBV-DNA水平更高。     

肝细胞癌组织中丙型肝炎NS3蛋白对P53蛋白表达的影响

目的探讨肝细胞癌（ＨＣＣ）及其癌旁肝组织中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＮＳ３蛋白对Ｐ５３蛋白表达的影响及其在肝癌发生中的作用。方法用免疫组织化学技术检测４７例乙型肝炎病毒阴性的ＨＣＣ及其癌旁肝组织中ＨＣＶＮＳ３蛋白和Ｐ５３蛋白的表达。结果ＨＣＶＮＳ３蛋白在ＨＣＣ中的阳性率（６２％）明显低于癌旁肝组织（８３％）,Ｐ＜００２５。癌组织中其表达强度与癌细胞分化程度呈相关性（Ｐ＜００２５）。Ｐ５３蛋白在癌组织中的阳性率（８１％）明显高于癌旁组织（４７％）,Ｐ＜００２５;癌细胞分化愈差,表达愈强（Ｐ＜００５）;癌组织中Ｐ５３蛋白表达与ＨＣＶＮＳ３蛋白的表达无相关性（Ｐ＞０５）,而癌旁肝组织中两者表达呈显著相关性（Ｐ＜００１）,ＨＣＶＮＳ３蛋白阳性患者中Ｐ５３蛋白表达明显高于ＨＣＶＮＳ３阴性病例,Ｐ＜００５。结论ＨＣＶＮＳ３蛋白可能是在肝细胞转化早期通过内源性机制间接作用于Ｐ５３基因使其突变导致肝细胞癌变。     

人肝癌组织中黄曲霉毒素和肝炎病毒基因检测分析

以肝细胞场（ＨＣＣ）患者手术切除标本为研究材料，采用高效液相色谱荧光法检测组织中的黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１），嵌套式多聚酶链反应技术检测组织中的ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ。在６９．２％（１８／２６例）的ＨＣＣ患者中检出了３．６５－８９．０６ｎｇ不等的ＡＦＢ１／ｇ肝组织；ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ检出率分别为９０．５％（５７／６３例）和１２．７％（８／６３例）。其中，ＡＦＢ１和ＨＢＶＤＮＡ重叠检出率为６１．５％（１６／２６例），ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ重叠检出率为７．９％（５／６３例），４例ＨＣＣ患者重叠检出了ＡＦＢ１、ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ；同步检测对照组５例，无１例出现这种情况。结果表明，上述３种因素均与人类肝癌密切相关，并且可能存在协同致癌效应。     

肝细胞癌组织中HBV，HCV，HGV的表达

目的　探讨乙型肝炎病毒 (HBV) ,丙型肝炎病毒 (HCV)及庚型肝炎病毒 (HGV)在肝细胞癌 (HCC)组织中的存在状态。方法　分别采用抗 -HBVS ,抗 -HCVNS5及抗 -HGVNS5三种单克隆抗体 ,以免疫组织化学SPAB法检测 2 6例HCC患者石蜡包埋的肝癌及癌旁肝组织中HBVS抗原 (HBsAg) ,HCVNS5抗原 (HCAg)和HGVNS5抗原(HGAg)。结果　检出HBsAg 17例 ( 65 % ) ,HCAg 13例 ( 5 0 % )及HGAg 9例 ( 3 5 % ) ,其中HBV/HCV/HGV重叠感染 7例 ,HBV/HCV重叠感染 4例 ,HBV单独感染 6例 ,HCV单独感染 2例 ,HGV单独感染 2例 ,另有 5例均不表达上述三种抗原 ;HBsAg与HGAg阳性率之间差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,HBsAg与HCAg及HCAg与HGAg阳性率之间差异均无显著性(P >0 0 5 ) ;HBV ,HCV及HGV均表达于肝细胞或肝癌细胞浆内 ,呈细颗粒状分布 ,癌组织表达强度均弱于癌旁组织。结论　HCC患者中有较高的HBV ,HCV及HGV感染率 ,感染率顺序为HBV >HCV >HGV ;推测HBV感染在HCC发生过程中起重要作用 ,HCV和HGV感染可能是HCC发生的相关因素。     

HCV及其与HBV重叠感染患者血清HCVRNA检测的临床意义

目的探讨HCV及其与HBV重叠感染患者血清HCV RNA检测的临床意义。方法收集我院HCV感染及其与HBV重叠患者血清标本共179例,分为慢性丙型肝炎组（n=101）、肝硬化组（n=45）和肝癌组（n=33）。采用ELISA法检测血清抗HCV,用荧光定量PCR检测HCV RNA;对重叠感染HCV和HBV的31例患者同时检测HBVDNA。结果 179例患者抗HCV的总阳性率为97.8%,高于HCV RNA的阳性率（69.8%）（P〈0.01）。肝硬化组和肝癌组HCV RNA的阳性率分别为82.2%和84.8%,高于慢性丙型肝炎组阳性率64.4%（P〈0.05）。HCV与HBV重叠感染组的HCV RNA的阳性率为48.4%,低于单纯HCV感染组的HCV RNA阳性率（71.6%）（P〈0.05）。HCV与HBV重叠感染患者的HBV DNA阳性率为35.5%,也显著低于单纯HBV感染患者阳性率（76.7%）（P〈0.01）。HCVRNA阳性组ALT异常率（60.8%）高于HCV RNA阴性组（35.2%）（P〈0.05）。结论对HCV感染相关的不同疾病患者联合检测抗HCV、HCV RNA和ALT,对于HCV和HBV重叠感染者同时检测HBV DNA,有利于疾病的明确诊断、病情观察及预后判断。     

海南乙肝患者HBV基因型分布及临床指标的相关性

目的 研究海南地区乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）的基因型在乙肝携带者、肝硬化和肝癌患者中的分布状态,以及这些基因型与临床相关指标如肝功能转氨酶谱、腺苷脱氨酶（adenosine deaminase ,ADA）、α-L-岩藻糖苷酶（α-L-fucosidase, AFU）、甲胎蛋白（alpha-fetoprotein, AFP）之间的关系和临床意义。方法 利用巢式PCR方法对海南省第三人民医院163例就诊有HBV感染的携带者、肝硬化和肝癌临床患者的血清标本进行HBV DNA扩增,并用聚合酶链反应–限制性片段长度多态性法鉴定HBV基因型;同时收集患者的民族、临床资料和实验室检查结果等资料,利用SPSS统计软件进行t检验、卡方检验、Logistics回归分析等统计分析。结果 总共检测了207例乙型肝炎病毒感染患者的血清标本,其中44例未获得有效的基因型数据。在检测出具体基因型的163例HBV感染者中,HBV B基因型25例占15.3%,HBV C基因型132例占81.0%,HBV B/C混合型6例占3.7%。HBV基因型之间的患者年龄、性别、民族、疾病状态、乙型肝炎e抗原（HBeAg）阳性率、HBV DNA水平差异并无统计学意义。HBV C型感染者天冬氨酸转移酶（aspartic transferase,AST）水平高于HBV B型感染者。所有HBV C基因型患者中,肝硬化及肝癌患者占的比例最高。患者ADA数值与HBV基因型的状态有明显关联,ADA值升高的患者,感染HBV B型病毒的可能性增加（P=0.044）。结论 海南地区乙型肝炎患者HBV基因型以 C型为主,HBV C型感染者的肝脏功能更容易受损,ADA数值较低,临床上易向肝硬化及肝癌进展。