橙皮苷对胰岛素抵抗HepG2细胞体外糖代谢的影响

目的探讨橙皮苷(hesperidin)对胰岛素抵抗HepG2细胞体外糖代谢的影响。方法采用高浓度胰岛素(INS)持续作用HepG2 12h建立胰岛素抵抗(IR-HepG2)模型,同时培养液中给予不同质量浓度橙皮苷(10,40和60μg.mL-1)或盐酸二甲双胍(30μg.mL-1)干预。药物作用12h后,换含低浓度INS的培养液培养细胞12h,使细胞同步化。然后,测定各组细胞葡萄糖消耗量、细胞内肝糖原含量、己糖激酶(hexokinase,HK)和丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)的活力。结果与正常组相比,模型组细胞葡萄糖消耗量、肝糖原含量及HK和PK酶活力显著下降(P<0.01);与模型组相比,40和60μg.mL-1的橙皮苷可极显著增加IR-HepG2细胞葡萄糖消耗量、肝糖原合成量及HK酶活力(P<0.01),显著增加PK酶活力(P<0.05)。结论橙皮苷可增加IR-HepG2细胞对葡萄糖的利用,增加肝糖原合成量,提高HK、PK活力,从而促进IR-HepG2细胞糖代谢,改善胰岛素抵抗能力。     

苦参碱与氧化苦参碱抑制HepG2细胞增殖的对比研究

目的比较研究苦参碱与氧化苦参碱体外抑制肝癌HepG2细胞增殖的效果并初步探讨其机制。方法不同剂量苦参碱与氧化苦参碱注射液处理细胞 ,细胞计数及溴化四唑蓝实验观察细胞增殖抑制 ;光镜观察细胞形态改变 ;流式细胞仪和Tunnel实验观察细胞凋亡并检测细胞周期 ;免疫组化观察凋亡相关基因Bax与Bcl 2的表达。结果 0 .8g/L苦参碱处理细胞 3d即可明显抑制HepG2细胞增殖 ,细胞存活率为 5 1% ;1.5g/L苦参碱可明显诱导细胞凋亡 ,用药后大量细胞被阻滞于S期 ;1.5g/L的苦参碱使HepG2细胞凋亡相关基因Bax表达增强 ,Bcl 2的表达减弱。与苦参碱同浓度的氧化苦参碱不能抑制细胞增殖 ,1.5g/L氧化苦参碱处理细胞 3d ,细胞存活率仍为84 .2 % ;氧化苦参碱的浓度增至 8.0g/L时才出现明显凋亡峰。结论体外苦参碱诱导HepG2细胞凋亡能力强于氧化苦参碱 ,并调控了凋亡相关基因的表达 ,而氧化苦参碱浓度 6倍于苦参碱时细胞才出现凋亡。     

软脂酸诱导HepG2细胞胰岛素抵抗及其机理

目的 研究游离脂肪酸（FFA）诱导人肝癌细胞（HepG2）产生胰岛素抵抗及其分子机理。方法 用含0．25mmol／L的软脂酸（软脂酸组）或100nmol／L胰岛素（高胰岛素组）的DMEM培养基培养HepG2细胞,再用100nmol／L胰岛素刺激后,测定其培养液中的葡萄糖浓度、细胞内的糖原含量以及胰岛素受体底物2（IRS-2）的蛋白水甲。加入磷酯酰肌醇3激酶（P13K）的抑制剂wortmannin,再次检测IRS-2的蛋白水平。结果 软脂酸组和高胰岛素组培养液中葡萄糖含量明显高于正常对照组（P＜0．05）,而细胞内糖原含量显著减少（P〈0．01）。软脂酸组胰岛素刺激的IRS2蛋白水平显著低于正常对照组（P〈0．01）。用wortmannin处理后,软脂酸组中的IR导2蛋白水平差异无显著意义（P〉0．05）,而正常细胞组中IRS-2蛋白水平差异有显著意义（P〈0．01）。结论 0．25mmol／L的软脂酸培养24h后,HepG2细胞可产生胰岛素抵抗,且胰岛素信号转导途径存在障碍;P13K是胰岛素信号转导途径中的关键调节点,可能IRS-2和一些P13K相关分子缺陷与游离脂肪酸诱导的肝胰岛素抵抗的形成有关。     

岩藻黄素对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗的影响

摘要：目的 建立胰岛素抵抗细胞模型,探讨岩藻黄素体外改善胰岛素抵抗及降血糖活性。方法 采用高浓度胰岛素诱导HepG2细胞,筛选最佳诱导条件建立IR-HepG2细胞模型。用不同浓度岩藻黄素处理模型细胞,用葡萄糖氧化酶法（GOD-POD) 检测岩藻黄素对IR-HepG2细胞葡萄糖消耗量的影响。结果 10-6 mol/L胰岛素处理细胞24 h为建立IR-HepG2细胞模型的最佳条件。5~20 μmol/L的岩藻黄素均可促进IR-HepG2细胞对葡萄糖的利用,10、12.5和15 μmol/L组的糖消耗量显著高于模型组(P<0.01)。结论 岩藻黄素可改善体外IR-HepG2细胞的胰岛素抵抗,促进IR-HepG2细胞的葡萄糖消耗,具有改善胰岛素抵抗和降血糖活性。     

胰岛素抵抗HepG2细胞模型建立的正交实验研究

目的探索联合应用胰岛素(INS)、棕榈酸(PA)和高糖建立HepG2细胞胰岛素抵抗(IR)模型的最佳实验方法。方法单因素考察INS、PA浓度及孵育时间对HepG2细胞增殖活性的影响;正交实验确定建立HepG2细胞IR模型的最佳条件。蒽酮法检测细胞糖原含量,油红O染色观察细胞形态变化。结果影响HepG2细胞葡萄糖消耗的主次因素顺序为:孵育时间>PA>INS,10 μmol·L-~1 PA联合1.0 μmol·L-~1 INS的高糖培养基孵育HepG2细胞48 h,葡萄糖消耗减少了22.36%。模型组细胞糖原合成较对照组显著减少,细胞脂肪颗粒明显增加。模型细胞IR作用可持续存在48 h,但24 h时作用最强。结论高糖培养基联合小剂量PA和INS,较长时间作用于HepG2细胞建立的IR模型,稳定可靠,重复性好,接近人体IR的病理生理状态,为防治IR药物筛选及发病机制研究奠定基础。     

吡格列酮对胰岛素抵抗HepG2细胞模型的药理学评价

目的应用高胰岛素诱导培养HepG2细胞,建立胰岛素抵抗的细胞模型。并探讨吡格列酮对该模型胰岛素敏感性和糖代谢的影响。方法将HepG2细胞置于5×10-7mol.L-1胰岛素培养液中16 h,采用3H-D-葡萄糖参入试验观察高胰岛素对HepG2细胞葡萄糖摄取率的影响。模型建立后,培养液中加入吡格列酮共同孵育,观察吡格列酮对胰岛素抵抗细胞模型葡萄糖摄取率和葡萄糖消耗量的影响。结果高胰岛素诱导培养的HepG2细胞葡萄糖参入率明显低于未用高胰岛素诱导的HepG2细胞(对照细胞)。将高胰岛素诱导培养的HepG2细胞置于不含胰岛素的培养液中60 h,其细胞葡萄糖摄取率仍明显低于对照细胞。含有吡格列酮(浓度为1×10-6~1×10-4mol.L-1)的胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖参入率与葡萄糖消耗量明显高于不含吡格列酮的胰岛素抵抗HepG2细胞(P<0.01)。结论将HepG2置于5×10-7mol.L-1胰岛素环境中16 h,该细胞对胰岛素的生物学效应产生抵抗,其胰岛素抵抗状态可维持60 h。该方法较为简便、易行、重复性好、成功率高,可广泛用于胰岛素抵抗的研究。吡格列酮能增加胰岛素抵抗模型细胞的胰岛素敏感性,并能明显改善糖代谢。     

荔枝核皂苷和荔枝核黄酮对HepG2细胞胰岛素抵抗作用研究

目的 探讨荔枝核皂苷、荔枝核黄酮对胰岛素抵抗HepG2细胞糖代谢的影响。 方法 采用高浓度胰岛素培养基诱导HepG2细胞形成胰岛素抵抗模型,葡萄糖氧化酶法测定对照组、荔枝核皂苷组、荔枝核黄酮组、罗格列酮组细胞培养上清液中的葡萄糖含量,观察荔枝核皂苷、荔枝核黄酮对HepG2细胞胰岛素抵抗的作用。 结果 HepG2细胞在10^-6mol/L的胰岛素中作用24 h,细胞对胰岛素的抵抗作用最为明显。以此条件构建胰岛素抵抗细胞模型,对该模型给予荔枝核皂苷、荔枝核黄酮干预后,细胞培养上清液中葡葡糖含量未能显著降低。 结论 本研究提示荔枝核皂苷、荔枝核黄酮不能有效改善胰岛素抵抗。     

鬼针草总黄酮对HepG2细胞胰岛素抵抗的影响

目的 探究鬼针草总黄酮(TFB)对人肝癌HepG2细胞胰岛素抵抗(IR)的影响.方法 取鬼针草,用80％乙醇回流提取,制得TFB.利用棕榈酸体外诱导HepG2细胞复制IR模型,考察低、中、高质量浓度(20、40、80 mg/L)TFB对细胞葡萄糖消耗量的影响;以二甲双胍为阳性对照,考察低、中、高质量浓度(20、40、8...     

白子菜水提液对胰岛素抵抗HepG2细胞关键酶活性的影响

摘要 目的 探讨白子菜水提液对胰岛素抵抗HepG2细胞关键酶活性的影响。方法采用葡萄糖临床检测试剂盒、肝糖原测定试剂盒检测白子菜水提液对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗和HepG2细胞的糖原含量的影响;采用葡萄糖 6 磷酸脱氢酶耦联比色法、乳酸脱氢酶耦联比色法及钼酸铵定磷法测定葡萄糖激酶（GK）、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）和葡萄糖 6 磷酸酶（G 6 Pase）的活性。结果白子菜水提液能够促进胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗,使G 6 Pase及PEPCK活性分别降低71.41%,82.14%,使GK活性和糖原含量分别提高28.77%,96.73%。结论白子菜水提液可降低胰岛素抵抗HepG2细胞G 6 Pase和PEPCK的活性,抑制糖异生作用,从而减少细胞内源性葡萄糖的产生。此外,白子菜水提液还提高GK活性,加快糖酵解的进行,增加糖原含量,减轻HepG2细胞的胰岛素抵抗状态。     

HepG2细胞胰岛素抵抗模型建立及盐酸小檗碱改善胰岛素抵抗的实验研究

目的建立HepG2(人肝胚胎瘤细胞)胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)细胞模型,并在该模型上研究小檗碱改善IR的效应。方法用25 mmol·L~(-1)高糖,并分别用10~(-9)、10~(-8)、10~(-7)、10~(-6)、10~(-5)、10~(-4)mol·L~(-1)胰岛素处理,诱导HepG2细胞产生IR;对2-NBDG(荧光素标记葡萄糖)与Hep G2细胞孵育浓度设定为:50、100、200、400、600、800μmol·L~(-1)、孵育时间设定为:20、40、60、80、100 min,拟筛选最佳胰岛素处理浓度、2-NBDG与HepG2最佳孵育浓度和最佳孵育时间,通过检测细胞培养液中葡萄糖的消耗量及细胞对葡萄糖的摄取量作为判定模型成功的标志;用二甲双胍、盐酸小檗碱干预模型细胞,研究盐酸小檗碱在细胞水平上改善IR的效应。结果 6种浓度的胰岛素均可不同程度诱导HepG2产生IR,虽然10~(-5)、10~(-4)mol·L~(-1)剂量最明显,但细胞死亡较多,以10-6mol·L~(-1)剂量制模有效且细胞成活率高,与正常组比较差异具有统计学意义;当2-NBDG与HepG2细胞孵育浓度大于100μmol·L~(-1)时,细胞荧光强度与正常组差异有显著性,孵育时间超过20 min荧光强度与正常组比较有明显差异,超过100 min,细胞内荧光有明显淬灭衰减现象;盐酸小檗碱、二甲双胍能明显增加细胞培养上清液中葡萄糖的消耗及细胞对葡萄糖的摄取,与模型组比较差异具有统计学意义。结论用HepG2制作IR细胞模型时,选择10~(-6)mol·L~(-1)剂量的胰岛素;2-NBDG孵育浓度选择为200μmol·L~(-1)、2-NBDG孵育时间选择为80min较为适宜,盐酸小檗碱及二甲双胍对HepG2细胞IR具有明显的改善作用。     

黑树莓花色苷对HepG2细胞胰岛素抵抗作用研究

目的 探讨黑树莓花色苷（ROAs）对HepG2细胞胰岛素抵抗（IR）的影响。方法 MTT法检测3.75、7.50、15.00、30.00、60.00 μg·mL^-1的ROAs作用24、48 h对HepG2细胞存活率的影响,确定ROAs的给药条件;含高糖（4.5 g·L^-1）、高胰岛素（1.0×10^-7、1.0×10^-6、1.0×10^-5、1.0×10^-4 mol·L^-1）的DMEM培养基培养HepG2细胞24或48 h,采用葡萄糖氧化试剂盒检测每孔上清液中葡萄糖水平,计算每孔细胞葡萄糖消耗量,确定IR细胞模型的建立条件;HepG2细胞分为对照组、模型组、二甲双胍（阳性药,0.01 mol·L^-1）组和ROAs（7.5、15.0、25.0、30.0 μg·mL^-1）组,除对照组外,各组细胞培养24 h后建立IR模型,模型建立后药物处理24 h,试剂盒法检测葡萄糖消耗量,HE染色评价细胞形态学改变。结果 选择7.5、15.0、25.0、30.0 μg·mL^-1作为ROAs后续给药质量浓度,给药时间为24 h;HepG2细胞IR模型建立条件为：含高糖（4.5 g·L^-1）、高胰岛素（1.0×10^-4 mol·L^-1）的DMEM培养基培养24 h。与对照组比较,模型组细胞葡萄糖的消耗量明显降低,具有统计学差异（P＜0.001）;与模型组比较,质量浓度为15.0、25.0、30.0 μg·mL^-1的ROAs组细胞葡萄糖消耗量均显著增加,具有统计学意义（P＜0.05、0.001）。与对照组比较,模型组细胞的形态不固定,细胞核圆形,胞浆不成型,脂滴明显增多;ROAs对HepG2细胞的胞浆形态有改善作用并且使脂滴明显减少。结论 ROAs能够改善高糖、高胰岛素诱导的HepG2细胞IR。     

牛磺酸对胰岛素抵抗HepG2细胞氧化应激的保护作用及机制研究

目的 观察牛磺酸对棕榈酸诱导的HepG2细胞胰岛素抵抗(IR)模型氧化损伤的保护作用,初步探讨其对氧化应激重要信号通路Keap1-Nrf2的调节作用.方法 2020年1月采用0.5 mmol/L棕榈酸诱导24 h建立IR细胞模型,通过CCK8法测定细胞活力确定牛磺酸干预剂量,检测不同质量浓度(10、100、500μg/...     

山药多糖对人肝癌HepG2细胞葡萄糖消耗能力及胰岛素抵抗的影响

目的:研究山药多糖对人肝癌HepG2细胞葡萄糖消耗能力和胰岛素抵抗的影响。方法:采用胰岛素(1×10-7mol/L)持续作用于HepG2细胞24 h以复制细胞胰岛素抵抗模型。将正常HepG2细胞分为正常对照(常规培养液)组、二甲双胍(0.01 mg/ml)组与山药多糖高、中、低浓度(质量浓度分别为1.00、0.10、0.01 mg/ml)组;将胰岛素抵抗HepG2细胞分为模型(常规培养液)组、二甲双胍(0.01 mg/ml)组与山药多糖高、中、低浓度(质量浓度分别为1.00、0.10、0.01 mg/ml)组,另设正常对照(正常细胞,常规培养液)组。加入相应药物后作用24 h,倒置显微镜下观察正常细胞与模型细胞的形态;测定细胞葡萄糖消耗量(ΔGC),MTT法测定单位细胞ΔGC(ΔGC/OD)。结果:与正常对照组比较,山药多糖高、中、低浓度组正常细胞ΔGC增加,ΔGC/OD升高,差异有统计学意义(P<0.01);模型组细胞ΔGC减少,ΔGC/OD降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,山药多糖高、中、低浓度组细胞ΔGC增加,ΔGC/OD升高,差异有统计学意义(P<0.01)。正常Hep G2细胞与胰岛素抵抗Hep G2细胞的形态未见明显差异。结论:山药多糖能改善HepG2细胞的葡萄糖消耗能力,并且可以增强细胞对胰岛素的敏感性,具有体外降糖作用。     

HepG2细胞胰岛素抵抗模型的建立及在筛选桑叶有效部位中的应用

目的体外建立HepG2细胞胰岛素抵抗模型,并用于筛选桑叶防治胰岛素抵抗活性的有效部位。方法采用高浓度胰岛素诱导HepG2细胞建立肝胰岛素抵抗模型,研究桑叶有效部位对胰岛素抵抗模型细胞葡萄糖消耗的影响。结果将HepG2细胞置于10 μg·mL－1胰岛素中48 h,HepG2细胞对胰岛素的抵抗作用最明显,其特性可维持48 h。桑叶水提部位能促进HepG2胰岛素抵抗模型的葡萄糖消耗。结论高胰岛素诱导培养法可以复制出稳定可靠的肝胰岛素抵抗细胞模型。桑叶水提物、多糖、黄酮均可以促进葡萄糖的吸收。     

丹参对HepG2细胞胰岛素抵抗状态的影响

［摘要］ 目的采用高胰岛素体外诱导培养HepG2细胞，建立胰岛素抵抗（IR）的细胞模型；探讨丹参对胰岛素敏感性的影响。方法细胞培养分4组：Ⅰ组为模型组，含5×10-7 mol&#8226;L-1胰岛素；Ⅱ组为对照组，不含胰岛素；Ⅲ组以12 mg&#8226;mL-1丹参溶液处理IR模型细胞；Ⅳ组以3.2 μg&#8226;mL-1罗格列酮处理IR模型细胞。采用3H D 葡萄糖掺入技术，观察丹参对HepG2细胞葡萄糖掺入率的影响。结果①高胰岛素诱导培养的HepG2葡萄糖掺入率明显低于未用高胰岛素诱导的HepG2细胞（对照细胞）的葡萄糖掺入率（P＜0.01）。②含有丹参的胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖掺入率明显高于不含丹参的胰岛素抵抗HepG2细胞（对照细胞）葡萄糖掺入率（P＜0.05）。结论①将HepG2置于5×10－7 mol&#8226;L-1胰岛素环境中16 h，该细胞对胰岛素的生物学效应产生抵抗。②丹参对细胞水平的胰岛素抵抗病理状态的进展有一定的阻止作用。     

芒果苷对胰岛素抵抗HepG2细胞糖脂代谢的影响

目的:分析芒果苷(MGF)对胰岛素抵抗HepG2细胞(IR-HepG2细胞)糖脂代谢的影响,并探讨潜在机制.方法:以人肝癌HepG2细胞为对象,以1 mmol/L棕榈酸+2 mmol/L油酸联合培养建立IR-HepG2细胞模型.以盐酸二甲双胍为阳性对照,分别检测低、中、高浓度MGF(125、250、500μmol/L)...     

HDL对HepG2细胞糖原合成的影响及机制研究

目的探讨HDL对Hep G2细胞糖原合成的影响及其机制。方法采用肝糖原/肌糖原试剂盒测定HDL对糖原合成的影响,并用Western blot实验探讨其机制。结果 HDL可以促进Hep G2细胞对糖原的合成。此过程中发生了PI3K-AKT-GSK-3蛋白通路的磷酸化。结论 HDL促进Hep G2细胞糖原的合成有胰岛素信号途径及其下游PI3K/AKT-GSK-3的参与。     

新型格列酮类化合物ANY2对HepG2细胞糖代谢的影响

目的：体外实验研究新型格列酮类化合物ANY2对糖代谢的影响。方法：采用高浓度胰岛素持续作用肝癌细胞株（HepG2）24h建立胰岛素抵抗模型（IR-HepG2）,并观察ANY2对细胞葡萄糖消耗（GC）、对细胞内糖原含量、糖异生及糖酵解作用的影响。结果：ANY2能显著增加IR-HepG2在高、中、低糖条件下的葡萄糖消耗,并呈明显的剂量依赖性;增加IR-HepG2细胞内糖原含量,但与模型组相比,仅在高浓度差异有统计学意义;减少IR-HepG2细胞以乳酸为底物的糖异生量;提高糖酵解作用中IR-HepG2细胞乳酸的生成和细胞内丙酮酸激酶（PK）活力。结论：ANY2可显著改善IR-HepG2细胞的糖代谢作用。     

多穗柯乙醇提取物不同萃取部位及5个主要成分对HepG2细胞胰岛素抵抗改善作用的研究

目的研究多穗柯乙醇提取物不同萃取部位及5个主要成分(三叶苷、3'-O-乙酰基根皮苷、根皮苷、根皮素及2'-O-乙酰基根皮苷)改善胰岛素抵抗的活性。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测多穗柯乙醇提取物不同萃取部位及其5个主要成分对Hep G2细胞增殖的影响;用葡萄糖氧化酶法检测待测样品对Hep G2细胞糖消耗的影响;用高糖(55 mmol·L-1)诱导Hep G2细胞,建立胰岛素抵抗模型,并用葡萄糖氧化酶法检测待测样品对胰岛素抵抗Hep G2细胞糖消耗的影响。结果在有效浓度范围内,多穗柯乙醇提取物不同萃取部位及其5个主要成分对细胞增殖均无显著影响,对Hep G2细胞的糖消耗亦无显著影响;与模型组相比,乙醇提取物、石油醚层、正丁醇层和水层(25及50μg·m L-1)及根皮苷、根皮素(10及50μmol·L-1)和2'-O-乙酰基根皮苷(10及50μmol·L-1)显著升高胰岛素抵抗Hep G2细胞糖消耗。结论多穗柯乙醇提取物不同萃取部位及5个主要成分中,乙醇提取物、石油醚层、正丁醇层、水层以及根皮苷、根皮素和2'-O-乙酰基根皮苷均能提高胰岛素抵抗的Hep G2细胞的葡萄糖消耗,改善Hep G2细胞的胰岛素抵抗。     

氧化苦参碱黄芩苷组合物对HepG2.2.2.15细胞乙肝病毒抗原表达的抑制作用

目的研究氧化苦参碱黄芩苷组合物对HepG2.2.2.15细胞乙型肝炎病毒抗原表达的影响。方法培养HepG 2.2.2.15细胞并在使用药物处理细胞之后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色分析法检测药物对细胞的毒性作用,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测药物对细胞向培养上清液中分泌HBsAg、HBeAg的抑制作用。结果氧化苦参碱在0.125~1 g.L-1浓度范围内,对HepG 2.2.2.15细胞毒性较小,而2 g.L-1和4 g.L-1的剂量对细胞毒性较大;氧化苦参碱对HBsAg和HBeAg的抑制作用,在0.125~1 g.L-1剂量范围内逐渐增加。黄芩苷在0.625~2 g.L-1浓度范围内,对细胞的毒性作用逐渐增加;黄芩苷对HBsAg和HBeAg的抑制作用,在0.625~1 g.L-1剂量范围内逐渐增加,但是抑制效果明显弱于氧化苦参碱。氧化苦参碱黄芩苷组合物(A~F组)对HepG2.2.2.15细胞株分泌乙肝病毒抗原具有良好的抑制作用,而且对HBeAg的抑制效果优于HBsAg。其中C组氧化苦参碱黄芩苷组合物对乙肝病毒抗原分泌抑制作用优于单独使用氧化苦参碱(HBsAg:P=0.043;HBeAg:P=0.026)。结论氧化苦参碱黄芩苷组合物对HepG 2.2.2.15细胞株分泌乙肝病毒抗原有良好的协同抑制作用。