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1.
目的 了解临床分离的耐亚胺培南铜绿假单胞菌(IRPa)中Ⅰ类整合子及β-内酰胺类抗生素耐药相关基因存在状况.方法 自临床分离28株IRPa,采用聚合酶链反应及序列分析的方法检测Ⅰ类整合子遗传标记(intI1和qacE△1-sul1基因)及18种β-内酰胺类抗生素耐药相关基因.结果 28株中,intI1、qacE△1-sul1、blaTEM、blaOXA-10群和blaCARB基因阳性株数(%)分别为21株(75.0%)、24株(85.7%)、20株(71.4%)、1株(3.6%)和1株(3.6%),经序列分析分别确认为blaOXA-10(GenBank注册号:AY841859)和blaCARB-3.25株(89.3%)oprD基因缺失,blaIMP、blaVIM、blaSHV、blaPER、blaVEB、blaGES、blaMIR、blaDHA、blaSPM、blaGIM、blaOXA-1群、blaOXA-2群、blaBEL-1、blaCTX-M-1群基因均阴性.结论 临床分离的IRPa中Ⅰ类整合子携带率很高,至少存在blaTEM、blaOXA-10和blaCARB-3种β-内酰胺酶基因,oprD基因缺失突变是其对亚胺培南耐药的主要原因.  相似文献   

2.
目的了解大肠埃希菌产β-内酰胺酶(BLA)的类型及其耐药特征.方法采用生物梅里埃ATB系统G-5药敏条做药敏试验.用NCCLs确证试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),根据表型检测AmpC BLA、对β-内酰胺酶抑制剂敏感性下降的BLA和水解碳青霉烯类的BLA.结果162株大肠埃希菌产ESBLs74株(45.7%);表型鉴别产AmpC BLA 9株(5.6%)、对β-内酰胺酶抑制剂敏感性下降的BLA2株(1.2%)、未检到水解碳青霉烯类的BLA.药敏结果显示产ESBLs菌对20种抗菌药物的耐药率均显著高于非产酶菌株(亚胺培南、美洛培南除外).碳青霉烯类、阿米卡星、头孢西丁对产ESBLs菌有较高活性.头孢他定、头孢噻肟的耐药率差异显著分别为25.0%和91.7%.结论大肠埃希菌以产ESBLs为主,筛选时以头孢噻肟为检测底物优于头孢他定.产ESBLs菌耐药率明显高于非产酶株,碳青霉烯类是目前少数对ESBLs高度稳定的抗生素之一.  相似文献   

3.
目的分析革兰阴性杆菌所产β-内酰胺酶的表型及基因分型,并研究其耐药分子机制。方法用纸片扩散初筛试验、扩散确证试验进行超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum beta-lactamases,ESBLs)表型检查,头孢西丁三维试验进行AmpCβ-内酰胺酶的表型检查,纸片协同试验筛选产金属β-内酰胺酶(metallo-beta-lactamase,MBL)菌株;用多重PCR技术扩增β-内酰胺酶基因并进行DNA测序;用PCR技术扩增基因元件整合子、插入序列ISEcp1B和转座子tnpU;用MIC药敏法分析革兰阴性杆菌的药物敏感性。结果①革兰阴性杆菌β-内酰胺酶的表型总检出率为24.28%(42/173),主要由单产ESBLs引起,占13.29%,β-内酰胺酶的基因型总检出率为24.86%;②整合子检出49株占28.32%,ISEcp1B插入序列检出29株占16.76%,转座子tnpU检出28株占16.18%,基因元件阳性的菌株大多数β-内酰胺酶表型为阳性;③β-内酰胺酶阳性菌株对抗生素的耐药率显著高于阴性菌株。结论革兰阴性杆菌可携带多种β-内酰胺酶,基因元件广泛分布于革兰阴性杆菌中,可能在多重耐药机制中起重要作用。  相似文献   

4.
变形杆菌超广谱β-内酰胺酶的检测和耐药性分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的研究临床分离变形杆菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的产生情况及体外抗菌药物耐药性分析,拟揭示其主要耐药机制,指导临床合理用药。方法用纸片扩散确证试验和三维试验检测ESBLs的表型;用聚合酶链反应(PCR)扩增细菌的β-内酰胺酶基因,并将产物测序分析;药敏试验采用K-B法。结果45株变形杆菌菌株中检出ESBLs阳性株3株(E30,E38和E64),3株菌株用PCR扩增和测序,在Genbank中比对,结果显示均含CTX-M-14和TEM-1基因,未扩增到SHV和其它的基因型。所有菌株对青霉素类,第1、第2、第3代头孢菌素类,单环β-内酰胺类,氟喹诺酮类,磺胺类等药物耐药率为3%~50%不等;未检出耐亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦的菌株。结论我院分离的变形杆菌中检出产ESBLs株,其基因型为CTX-M-14,且同时携带TEM-1型广谱β-内酰胺酶基因。实验室有必要加强对产β-内酰胺酶变形杆菌的检测。亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦是治疗变形杆菌的首选药物。  相似文献   

5.
目的 研究临床分离变形杆菌超广谱β-内酰胺酶(ESBs)的产生情况及体外抗菌药物耐药性分析,拟揭示其主要耐药机制,指导临床合理用药.方法 用纸片扩散确证试验和三维试验检测EsBLs的表型;用聚合酶链反应(PCR)扩增细菌的β-内酰胺酶基因,并将产物测序分析;药敏试验采用K-B法.结果 45株变形杆菌菌株中检出ESBLs占阳性株3株(E30.E38和E64),3株菌株用PCR扩增和测序,在Cenbank中比对,结果显示均含CTX-M-14和TEM-1基因,未扩增到SHV和其它的基因型.所有菌株对青霉素类,第1、第2、第3代头孢菌素类,单环β-内酰胺类,氟喹诺酮类,磺胺类等药物耐药率为3%~50%不等;未检出耐亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦的菌株.结论 我院分离的变形杆菌中检出产ESBLs株,其基因型为CTX-M-14,且同时携带TEM-1型广谱β-内酰胺酶基因.实验室有必要加强对产β-内酰胺酶变形杆菌的检测.亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦是治疗变形杆菌的首选药物.  相似文献   

6.
目的确定浙江省嘉兴地区临床分离的多重耐药肺炎克雷伯菌E3株所产β-内酰胺酶编码基因序列及亚型.方法肺炎克雷伯菌E3株经酶抑制剂增强的肉汤稀释法鉴定为产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌,聚合酶链反应(PCR)扩增其β-内酰胺酶编码基因片段,克隆入pGEM-Teasy载体,双脱氧链终止法测定核苷酸序列并确定亚型,重组细菌表型鉴定.结果E3株同时产SHV和TEM型2种β-内酰胺酶,其中SHV基因片段含812个核苷酸,编码产物有266个氨基酸,应为SHV-11型β-内酰胺酶;TEM基因片段含973个核苷酸,编码产物有288个氨基酸,应为TEM-1型β-内酰胺酶.含TEM-1和SHV-11编码基因的重组细菌经酶抑制剂增强的肉汤稀释法鉴定为阴性.结论E3株肺炎克雷伯菌同时产生SHV-11和TEM-1 2种ESBLs,其可影响ESBLs的表型检测结果.  相似文献   

7.
摘要 目的 调查耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)临床分离株β-内酰胺酶基因携带情况,分析该菌株临床耐药性。方法 分别收集2所医院临床分离的CRKP菌株各20株,检测40种β-内酰胺类酶基因携带情况;对blaKPC型β-内酰胺酶基因与插入序列(ISKpn 6) 进行连锁检测。结果 两所医院菌株药敏结果相同,但β-内酰胺类酶基因检出率存在差异。CRKP临床分离菌株均检出blaTEM与blaKPC β-内酰胺酶基因,blaKPC-ISKpn6连锁检测结果均为阳性。此外其中1所医院还检出blaCTX-M-1群、blaLAP、blaDHA群、blaOXA-1群基因。结论 CRKP临床分离株携带的β-内酰胺类酶基因以blaTEM和blaKPC基因型为主,不同医院存在差异。提示应依据药敏试验结果选择临床抗菌药物。  相似文献   

8.
目的将一种新型快速检测β-内酰胺酶试剂盒(Cica-Beta Test,主要成分为HMRZ-86)应用于临床分离的产β-内酰胺酶革兰阴性杆菌产酶情况的检测并初步分型。方法收集2006年10月至2007年5月瑞金医院临床微生物科临床分离的头孢噻肟和/或头孢他啶耐药革兰阴性杆菌。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌根据临床实验室标准化研究所(CLSI)推荐的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)纸片确证试验确证。根据Cica-Beta Test试剂盒说明书步骤对100株菌进行β-内酰胺酶检测及分型。结果40株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌均产ESBLs。Cica-Beta Test试剂盒检测结果显示,产青霉素酶或窄谱头孢菌素酶17株、ESBLs 47株、AmpC酶8株、金属酶1株、D类酶或复数ESBLs 27株。有3株菌试剂盒检测为产青霉素酶或窄谱头孢菌素酶,而纸片确证试验为ESBLs产生株。结论Cica-Beta Test试剂盒可应用于革兰阴性细菌β-内酰胺酶检测及初步分型,敏感性较高,快速、简便,但如果产酶量过低可能会影响检测结果,应结合细菌鉴定和药敏试验结果作出适当判断。  相似文献   

9.
目的 研究广州地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌CTX-M型超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的分子表型、流行病学和耐药基因环境特征.方法 收集2007-2008年广州地区9家医院临床分离产ESBLs的181株大肠埃希菌和180株肺炎克雷伯菌,通过PCR检测ESBLs分子表型;通过接合试验、质粒图谱、PCR分析CTX-M-15型ESBLs的基因环境,肠杆菌科基因间重复序列引物PCR(ERIC-PCR)分析产CTX-M-15型ESBLs菌株的分子同源性.结果 67.3%(243/361)的ESBLs产生株为CTX-M表型,其中CTX-M-1群和CTX-M-9群各占46.9%(114/243)和53.1%(129/243),未发现其他CTX-M亚群.CTX-M-14和CTXM-15是最常见的ESBLs基因型,其中CTX-M-14在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率分别35.4%(64/181)和28.3%(51/180),CTX-M-15在这两种菌的检出率分别为21.5%(39/181)和26.1%(47/180),此外还检出对头孢他啶有水解活性的CTX-M-55、CTX-M-19和CTX-M-27.采用ERIC-PER分析CTX-M-15产生株的同源性,39株大肠埃希菌被分为28个基因型,47株肺炎克雷伯菌被分为30个基因型.67.6%(25/37)和32.4%(12/37)bla相似文献   

10.
目的对十堰地区2014年分离的35株多重耐药嗜麦芽窄食单胞菌(SMA)进行耐药表型、耐药基因研究。方法收集十堰地区2014年分离的35株多重耐药SMA,采用纸片扩散法检测细菌耐药性。超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)采用标准纸片法检测,头孢菌素酶(AmpC)和金属β-内酰胺酶(MBLs)检测采用三维试验,非金属碳青霉烯酶(KPC)检测采用改良Hodge试验。采用PCR法检测细菌耐药基因,对阳性结果进行基因正、反向测序分析。结果 35株多重耐药SMA中,ESBLs、AmpC、MBLs、KPC阳性率分别为45.7%、14.3%、94.3%、0.0%。耐药基因blaTEM、blaSHV、blaCARB、blaIMP、blaOXA-10、oprD2的阳性率分别为22.8%(8/35)、11.4%(4/35)、17.1%(6/35)、94.3%(33/35)、8.6%(3/35)、28.5%(10/35)。结论该地区的多重耐药SMA对碳青霉烯类抗菌药物的耐药状况非常严重,应引起重视。  相似文献   

11.
一种新基因型TEM-128β-内酰胺酶的发现及其临床意义   总被引:4,自引:0,他引:4  
目的 分析产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)鲍曼不动杆菌TEM型β-内酰胺酶(BLA)的编码基因并确定其亚型。方法 采用聚合酶链反应(PCR)扩增BLA编码基因TEM、SHV、OXA、CTX—M-1、CTX—M-2、CTX—M-9、PER和VEB片段,双脱氧链终止法测定核苷酸序列、确定亚型。结果临床分离的鲍曼不动杆菌HZ38株产生TEM型BLA,其扩增片段含1049个核苷酸,核苷酸及相应的氨基酸序列经Gen—Bank查询无相同序列,为新发现的一种BLA TEM-128型(GenBank注册号:AY359287)。结论 临床分离的鲍曼不动杆菌HZ38株所产BLA为TEM-128亚型,为一种新发现的新型BLA。  相似文献   

12.
目的:分析呼吸内科肺炎患者痰液分离鲍曼不动杆菌携带β-内酰胺酶基因及主动外排泵基因情况。方法:收集经生化鉴定为醋酸钙-鲍曼不动杆菌复合体的菌株160株,将鲍曼不动杆菌特异性片段(Ab-ITS)的二重PCR法确认为鲍曼不动杆菌者纳入研究。用PCR法检测鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶基因和主动外排泵基因,包括A类β-内酰胺酶(blaTEM、blaPER和blaCARB)、B类β-内酰胺酶(blaIMP和blaVIM)、C类β-内酰胺酶(blaADC和blaDHA)、D类β-内酰胺酶(blaOXA-23、blaOXA-24、blaOXA-51和blaOXA-58)和主动外排泵相关基因(adeB、adeJ、macB、emrB、emrA、abeS、abeM和craA)。以微量肉汤稀释法检测加入外排泵抑制剂羰基氰化氯苯腙(CCCP)前后,携带adeB基因鲍曼不动杆菌对亚胺培南的最低抑菌浓度(MIC)的变化。结果:临床分离160株醋酸钙-鲍曼不动杆菌复合体中鲍曼不动杆菌143株(占90%),包括亚胺培南耐药株119株(占83.2%)和敏感株24株(占16.8%)。所有鲍曼不动杆菌均检出blaOXA-51基因,其中,亚胺培南耐药株中检出blaOXA-23(98.3%)、blaTEM(41.4%)、blaADC(98.3%)和blaDHA(0.7%),blaPER、blaCARB、blaIMP、blaVIM、blaOXA-24和blaOXA-58均未检出;敏感株中未检出blaOXA-23。adeJ、macB、abeM和craA基因在143株鲍曼不动杆菌中的携带率均为100%;emrB、emrA和abeS基因携带率均超过80%。adeB基因在亚胺培南耐药株中检出117株(98.3%)。在CCCP干预试验中,携带adeB基因的鲍曼不动杆菌MIC50降低1/2。结论:呼吸内科鲍曼不动杆菌主要携带blaOXA-23和adeB主动外排泵基因,可能与亚胺培南耐药密切相关。  相似文献   

13.
目的研究医院感染铜绿假单胞菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因型分布。方法用聚合酶链反应(PCR)对68株医院感染铜绿假单胞菌的SHV、TEM、CTX-M、OXA-10、VEB和PER等基因进行扩增和序列测定。结果68株医院感染铜绿假单胞菌中,检出26株产OXA-10群ESBLs,检出率为38.23%(26/68);其中1株既产OXA-10群ESBLs又产TEM型广谱β-内酰胺酶;其余基因型未检出。经序列测定为OXA-10-like基因和TEM-1基因。结论医院感染铜绿假单胞菌所产的ESBLs主要为OXA-10群,且为多重耐药菌株。  相似文献   

14.
目的:了解复旦大学附属华山医院临床分离产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌中SHV型β内酰胺酶的分布、流行情况以及分子生物学特点。方法:用SHV型β内酰胺酶基因的通用引物进行聚合酶链反应(PCR)检测;编码框以外设计引物、PCR扩增SHV型β内酰胺酶全编码基因并进行克隆表达、序列分析;对产SHV型β内酰胺酶的菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)检测。结果:58株产ESBLs大肠埃希菌中,只有3株细菌产生SHV型β内酰胺酶(5.2%),其中1株产生SHV—11(非ESBLs),另2株产生SHV—12(ESBLs);3株产SHV型β内酰胺酶菌株的PFGE谱型不同。结论:临床分离产ESBLs大肠埃希菌中,SHV型β内酰胺酶的基因型为SHV—11和SHV—12,SHV型ESBLs不是主要的ESBLs型别。未发现产SHV型β内酰胺酶菌株间克隆传播。  相似文献   

15.
目的了解我院临床分离的大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型和基因型分布情况。方法对88株大肠埃希菌进行耐药分析,并用筛选试验和确证试验确认产ESBLs菌株,对耐药基因进行聚合酶链反应(PCR)扩增分析,选部分产物测序。结果88株大肠埃希菌中共检出31株产ESBLs(35.2%)菌株。产ESBLs菌株对头孢他啶的敏感率为58.1%,对头孢噻肟和头孢曲松的敏感率均为3.2%。PCR结果显示,产ESBLs大肠埃希菌基因主要是CTX-M型(90.3%),其中以CTX-M-14、CTX-M-3型为主;TEM基因均为TEM-1型,SHV基因均为SHV-1型。结论我院产ESBLs大肠埃希菌检出率为35.2%,其耐药性明显高于非产ESBLs菌株;其基因均为CTX-M型,其中以CTX-M-14和CTX-M-3型为主;TEM-1型广谱酶广泛存在于产ESBLs的大肠埃希菌中,则SHV-1型少见。  相似文献   

16.
目的应用Cica-Beta-Test试剂盒快速筛查革兰阴性杆菌β内酰胺酶:超广谱β内酰胺酶(ESBILs)、金属β内酰胺酶(MBLs)和染色体介导头孢菌素酶(AmpC酶),为临床抗感染治疗提供耐药依据。方法收集2010年1月至2011年3月上海交通大学医学院附属仁济医院临床分离革兰阴性杆菌共110株,其中头孢噻肟和(或)头孢他啶不敏感大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌各20株,多重耐药鲍曼不动杆菌20株和阴沟肠杆菌30株。其中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌用美国CLSI推荐方法确证产ESBLs;对鲍曼不动杆菌用聚合酶链反应(PCR)法检测其MBLs和AmpC酶耐药基因;对阴沟肠杆菌用表型筛选法(三维试验法)检测其AmpC酶;对所有菌株应用Cica-Beta-Test试剂盒快速筛查ESBLs、MBLs和AmpC酶。根据检测结果对试剂盒进行评估。结果应用Cica-Beta-Test试剂盒检测110株临床分离菌未发现假阳性,确诊试验总符合率为92.0%(92/100),其中与PCR法比较检测MBLs和AmpC酶结果符合率为100%;与CLSI推荐ESBLs双纸片确诊试验比较,符合率为86.7%(52/60)。30株阴沟肠杆菌用AmpC酶表型筛选法比较符合率为86.7%(26/30)。结论 Cica-Beta-Test试剂盒可对各种革兰阴性杆菌产生的β内酰胺酶进行筛查及初步分型,简便、快速,灵敏度高,准确率高,尤其能对CLSI未推荐方法的耐药革兰阴性杆菌进行β内酰胺酶快速筛查意义更大。  相似文献   

17.
产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药性及基因型分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 了解本院超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因在大肠埃希菌中的分布类型及对常用抗菌药物耐药情况,为临床合理用药提供依据.方法 用确证法对54株产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌进行确证,用PCR的方法扩增ESBLs基因片段,用K-B纸片扩散法检测对抗菌药物的敏感性.结果 125株大肠埃希菌中,ESBLs阳性率为43.2%.对青霉素类和第一、二代头孢菌素的耐药率为100%,对头孢噻肟、头孢哌酮和头孢曲松的耐药率在95%以上,对头孢他啶的耐药率为31.5%;对环丙沙星和复方新诺明的耐药率分别为79.6%和83.3%;对β-内酰胺类/酶抑制剂复合制剂仍保持较高的敏感性;未发现耐亚胺培南菌株.含耐药基因型CTX-M 型49株、TEM型33株、SHV型1株,同时含有两种基因型达29株.结论 产ESBLs大肠埃希菌对18种抗菌药物的耐药情况明显高于非产ESBLs大肠埃希菌.基因型主要为CTX-M,其次为TEM,同时含有两种基因型达29株.明确产ESBLs病原菌的基因型及耐药性对临床抗感染治疗及感染控制有较大意义.  相似文献   

18.
目的分析引起下呼吸道感染产超广谱β-内酰胺酶(ESBk)鲍曼不动杆菌的耐药情况及其β-内酰胺酶(BLA)耐药基因类型.方法采用微量稀释法测定临床分离的35株鲍曼不动杆菌对21种抗菌药物的敏感性、三维试验法检测ESBLs采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析BLA基因型.结果 29株(82.9%)ESBLs阳性,其中14株(40.0%)合并产AmpC酶.所有菌株均对亚胺培南、美洛培南、头孢哌酮/舒巴坦和多粘菌素E敏感,其余抗生素的耐药率在40.0~100.0%之间.35株TEM型扩增全部阳性,任选2株测序结果均为TEM-1型.有15株菌株扩增到SHV型BLA基因,经测序13株为SHV-12型ESBLs,另2株(HZ01株和HZ29株)为2种新发现的SHV型BLA,分别被命名为SHV-48和SHV-56.结论临床分离的引起下呼吸道感染鲍曼不动杆产ESBLs比例很高,多重耐药状况极其严重,至少存在4种不同类型的β内酰胺酶基因,基因型分别为TEM-1、SHV-12、SHV-48和SHV-56.  相似文献   

19.
产超广谱β-内酰胺酶表型及基因型特征的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的分析大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌临床分离株中超广谱β内酰胺酶(ESBL)的基因型分布情况。方法用表型确证试验确定临床标本中产ESBL的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别用TEM、SHV和CTX-M通用引物进行聚合酶链反应(PCR)扩增,鉴定其基因型。结果 66%的菌株为TEM基因型,14%的菌株为SHV基因型,10%的菌株为CTX-M型。结论大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌临床分离株中超广谱β内酰胺酶(ESBL)的基因型分布以TEM基因型为主,部分菌株为SHV、CTX-M型。同一菌株内可以产生2种不同基因型的超广谱β-内酰胺酶。  相似文献   

20.
绿脓假单胞菌超广谱β内酰胺酶基因型分布   总被引:30,自引:4,他引:30  
目的:检测绿脓假单胞菌(PA)超广谱β内酰胺酶(ESBLs)基因型分布。方法:采集本院2001年3月--12月临床分离PA株,用三维试验法进行表型检测。对表型阳性菌株,用碱裂解法提取质粒,聚合酶链反应(PCR)方法检测质粒的酶基因型别,检测较常见的SHV、PER及OXA-2型,对阳性株进行测序。结果:126株中,43株产ESBLs(34.1%)表型阳性。耐药酶基因型分别为PER-1型有14株,占32.6%;未检出SHV和OXA-2型阳性株。结论:我院产ESBLs的PA临床分离株耐药质粒携带的酶基因主要检出了PER型。  相似文献   

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