HLA表型与肿瘤逃逸

HLA Ⅰ类分子表达缺失是肿瘤细胞针对HLA分子具有向T细胞递呈免疫原性多肽这一作用而选择的一种逃逸机制。然而不同类型的肿瘤细胞或同一肿瘤在不同的发展阶段均呈现出不同的HLA Ⅰ类表达类型。目前 ,肿瘤组织及肿瘤细胞系中HLA Ⅰ类分子丢失的类型主要有 4种 :①HLA Ⅰ类分子全部丢失 ;②HLA单倍型丢失 ;③HLA单个座位丢失 ;④HLA等位基因丢失。此外 ,在肿瘤发展过程中非经典HLA Ⅰ类HLA E、 G及MHC类似物的异常表达可以抑制NK细胞对肿瘤细胞的溶解 ,则反映了肿瘤细胞针对NK细胞的免疫监视作用而选择的一种逃避机制。每一个荷瘤病人都是一个独特的整体 ,都将产生一个特殊的有助于逃逸的变异体 ,因此 ,检测HLA抗原在肿瘤细胞上的表达是一个新的指标 ,有助于制定未来的肿瘤生物治疗策略。     

HLA表型与肿瘤逃逸

HLA-Ⅰ类分子表达缺失是肿瘤细胞针对HLA分子具有向T细胞递呈免疫原性多肽这一作用而选择的一种逃逸机制,然而不同类型的肿瘤细胞或同一肿瘤在不同的发展阶段均呈现出不同的HLA-Ⅰ类表达类型。目前,肿瘤组织及肿瘤细胞系中ＨＬＡ－Ⅰ类分子丢失的类型主要有４种：（１）ＨＬＡ－Ⅰ类分子全部丢失;（２）ＨＬＡ单倍型丢失;（３）ＨＬＡ单个座位丢失;（４）ＨＬＡ等位基因丢失。此外,在肿瘤发展过程中非经典ＨＬＡ－Ⅰ类ＨＬＡ－Ｅ、－Ｇ及ＭＨＣ类似物的异常表达可以抑制ＮＫ细胞对肿瘤细胞的溶解,则反映了肿瘤细胞针对ＮＫ细胞的免疫监视作用而选择的一种逃避机制,每一个荷瘤病人都是一个独特的整体,都将产生一个特殊的有助于逃逸的变异体,因此,检测ＨＬＡ抗原在肿瘤细胞上的表达是一个新的指标,有助于制定未来的肿瘤生物治疗策略。     

Raji细胞逃逸NK细胞免疫杀伤机制的初步探讨

目的 探讨人B细胞淋巴瘤Raji细胞逃逸NK细胞免疫杀伤的机制.方法 以K562细胞作为对照,应用LDH释放法检测不同效靶比时同种异体NK细胞杀伤Raji细胞的活性.并分别用PCR方法和流式细胞仪检测K562和Raji细胞MICA/B、ULBP1-3、HLA基因型和分子的表达情况.效靶比20∶1时用单抗分别阻断K562和Raji细胞表面MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3和HLA-Ⅰ类分子,观察NK细胞对其杀伤活性的变化.结果 不同效靶比时NK细胞杀伤Raji细胞的活性明显低于杀伤K562细胞的活性,二者之间差异有统计学意义(P<0.05).K562细胞表达MICMB和ULBP1～3基因和分子,不表达HLA-Ⅰ类分子,Raji细胞表达ULBP1～3基因和HLA-Ⅰ类分子,不表达MICA/B和ULBP1～3分子.Raji细胞HLA基因型为A*3、3.B*71、71,Cw3、4.用单抗封闭MICMB和ULBP1～3分子后,NK细胞对K562细胞的杀伤活性明显降低,对Raji细胞的杀伤活性无明显改变.结论 Raji细胞逃逸NK细胞免疫杀伤机制和Raji细胞高表达HLA-Ⅰ类分子,不表达NKG2D的配体MI-CA/B和ULBPI～3有关.     

中国汉族群体KIR基因多样性的研究进展

人杀伤细胞免疫球蛋白样受体分子(killer cell immnoglobulin-like receptor,KIR)主要表达于NK细胞和部分T细胞表面.KIR分子的配体是表达于靶细胞上的某些HLA Ⅰ类分子,两者可形成配体/受体复合物.HLA-Ⅰ/KIR分子相互识别,通过传导活化或抑制信号调节NK细胞的杀伤功能,这是NK细胞参与适应性免疫应答的重要机制之一.在免疫应答过程中,HLA-Ⅰ/KIR分子的相互作用,可保护机体抵御各种各样病原体的侵袭.本文就我国汉族群体KIR基因多样性的研究进展作一综述.     

宫颈病变中抗原呈递元件成员蛋白和人类白细胞共同抗原Ⅰ类分子表达的关系

抗原呈递元件(APM)成员蛋白作为一组抗原呈递相关功能蛋白,在协助人类白细胞共同抗原(HLA)Ⅰ类分子组装、负载和提呈内源性抗原肽,介导抗病毒T细胞免疫中发挥着重要作用[1].其成员蛋白抗原处理相关转运体(TAP)负责将内源性抗原肽向内质网腔转运.TAP相关蛋白对HLA-Ⅰ类分子在内质网中的装配发挥关键作用[2].分子伴侣钙连接蛋白和钙网蛋白以及疏基二硫键氧化还原酶Erp57协助新合成的HLA-Ⅰ蛋白正确折叠和组装[3].人乳头状瘤病毒(HPV)是宫颈癌发生的始动因素,也可能通过协助肿瘤细胞影响HLA-Ⅰ基因表达调控.因此,探讨HPV感染引起宿主HLA-Ⅰ类分子表达缺失与APM成员表达情况有无关联,是揭示肿瘤的分子机制、疫苗治疗、建立肿瘤生物标志谱体系的关键.我们通过检测宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈癌组织中APM成员蛋白及HLA-Ⅰ类分子的表达情况,分析其与HPV16感染的相关性,从而探讨宫颈病变中HLA-Ⅰ类分子表达下调的机制.     

肿瘤细胞HLA分子的表达及IFN—γ的调控作用

目的 研究肿瘤细胞表达HLA分子及IFN－γ的调控作用。检测TIL细胞中T细胞亚群的变化,并与PBMC比较。方法 采用FACS检测细胞表达的CD抗原,采用ABC免疫组化染色检测肿瘤细胞HLA－Ⅰ,Ⅱ类分子的表达。以IFN－γ诱导建系的卵巢癌细胞表达HLA分子。结果 明细胞癌患者TIL细胞中的T细胞明显多于大肠癌患者。肿瘤患者PBMC中的T细胞数少于正常对照;肿瘤组织HLA－Ⅰ类抗原的表达明显低于正常组织,HLA－Ⅱ类抗原泊表达高于正常组织。与正常组织相比较,大肠癌患者比肾细胞癌患者HLAⅠ类抗原的表达更低。IFN－γ可诱导建系卵巢癌细胞表达HLA－Ⅰ类抗原,但不能诱导HLA－Ⅱ类抗原的表达。结论 肿瘤组织HLA表达的变化与肿瘤组织中TIL的数有关;IFN－γ能选择性地诱导卵巢癌细胞表达HLA－Ⅰ类分子,在抗肿瘤免疫中具有重要的意义。     

HLA-G结构与功能研究进展

胎盘组织外绒毛滋养层细胞不表达经典的HLAⅠ类分子 ,使这些细胞易感于NK细胞的攻击 ,但由于表达非经典的MHCⅠ类分子HLA G可以防止NK细胞识别这些细胞 ,HLA G至少是 3种NK细胞抑制受体的配体 ;表达HLA G的滋养层细胞可能递呈肽类给T细胞 ,转染膜结合型HLA G1, G2及可溶型HLA G分子的细胞能抑制同种T淋巴细胞的增殖反应及抗原特异性的CTL反应 ;以及HLA G基因的多态性程度是有限的 ,提示HLA G在母体对半异体的胎儿的免疫耐受中可能起一个重要的作用。     

次级淋巴组织趋化因子浓度梯度抑制肿瘤细胞免疫逃逸

目的探讨人次级淋巴组织趋化因子(SLC)浓度梯度对肿瘤细胞免疫逃逸的影响。方法根据SLC浓度梯度,实验分6组;流式细胞术检测肿瘤细胞HLA-Ⅰ类分子的表达、肿瘤细胞凋亡,Western blot检测肿瘤细胞胞内BCL-2表达,ELISA检测肿瘤细胞培养上清中生长转化因子β(TGF-β)水平。结果在一定浓度范围内,随SLC浓度增加,肿瘤细胞的HLA-Ⅰ类分子表达增高,肿瘤细胞凋亡增多;BCL-2表达增高,而肿瘤细胞TGF-β分泌水平降低。结论SLC具有抑制肿瘤细胞免疫逃逸的作用。     

HLA-G分子表达调控及其功能研究进展

HLA G分子是一种非经典HLA Ⅰ类抗原 ,相对于经典的Ⅰ类抗原 ,它的组织分布非常局限 ,具有有限的多态性。它的表达调控与经典Ⅰ类抗原存在着很大的差异 ,HLA G基因内经典Ⅰ类基因反式活化的3个主要元件增强子A、ISRE和SXY均发生变异 ,导致NF κB、IRF1、CⅡTA介导的反式激活途径对HLA G基因不能发挥作用。最早在母胎界面发现存在HLA G分子表达 ,它可以与NK细胞和CTL表面相应的杀伤细胞抑制性受体 (KIR)结合 ,从而抑制它们的杀伤作用 ,这可能是母胎耐受的重要机制。近来的研究表明HLA G分子还可表达于少数类型肿瘤细胞、一些受到感染的细胞和一些正常细胞。它的表达调控及其可能的功能是近来的研究热点。     

人卵巢癌细胞HLA分子与其相关基因表达的研究

目的：探讨人卵巢癌细胞中HLA分子及其相关基因的表达与IFN-γ诱导HLA分子表达的相互关系。方法：采用Western blot，免疫组化和流式细胞术，检测卵巢癌细胞中HLA分子表达，以RT-PCR技术，分子卵巢癌细胞TAP，LMP和MHCⅡ类分子反式激活蛋白（CⅡTA）基因表达。结果：被检测的11株卵巢癌细胞中，HLA-I类分子异常的表达率达为45%，而HLA-I类分子表达的异常与TAP1，TAP2，LMP2和LMP74种基因表达的异常有关，卵巢癌细胞或其他肿瘤细胞HLA-Ⅱ类分子的表达与CⅡTA基因的表达一致。组成性或诱导性表达CⅡTA基因的肿瘤细胞，经IFNγ作用后，其HLA-I，-Ⅱ类分子的表达增强；而诱导后仍不表达CⅡTA基因的肿瘤细胞，其HLA分子的表达无增强作用。结论：卵巢癌细胞中TAP和LMP基因表达的缺陷，是引起HLA-I类分子表达异常的重要因素。提示CⅡTA基因参与了调控肿瘤细胞HLA-Ⅰ，-Ⅱ类分子的表达。     

HLA-G与移植免疫

非经典HLA Ⅰ类分子(HLA-Ⅰb)HLA-G参与抗原递呈,通过相应受体调节NK细胞及T淋巴细胞功能,是一个 重要的免疫调节分子。HLA-G分子的免疫调节作用已从母胎免疫耐受扩展到肿瘤免疫、抗感染免疫和器官移植免疫等领域, 近年来在移植免疫方面取得了重要进展。     

HLA-G调控自然杀伤细胞免疫功能的研究进展

人白细胞抗原G(HLA-G)属于非经典的HLAⅠ类分子,正常情况下主要表达于母胎界面绒毛外滋养层细胞。一些肿瘤细胞系、肿瘤组织、感染的组织细胞及正常组织细胞也可检测到HLA-G的表达。自然杀伤(NK)细胞是重要的固有免疫细胞,在免疫应答与免疫调节过程中发挥重要作用。HLA-G参与免疫调控引发了越来越多的关注,其功能由最初的"母胎耐受"逐渐扩展到肿瘤免疫逃逸、器官移植耐受等多个方面,本文重点回顾了HLA-G参与调控NK细胞免疫功能的各种机制:通过与受体相互作用抑制NK细胞的杀伤作用、调节NK细胞表面受体及细胞因子的表达、通过胞啃作用(trogocytosis)广泛引发免疫抑制、引发NK细胞凋亡。     

强的松对小儿原发性肾病综合症患者PBMC HLA表达的调节作用

目的: 初步探讨糖皮质激素对外周血单个核细胞(PBMC)人类白细胞抗原(HLA)表达的调控作用.方法: 肾病综合征(NS)患儿PBMC体外经IFN-γ联合PHA 刺激诱导活化,用不同浓度强的松干预,采用流式细胞术检测其PBMC组成性、活化后和强的松处理后HLA-Ⅰ/Ⅱ类分子和HLA-DR7分子的表达量并与正常对照组进行分析比较.结果: (1)体外培养NS患儿及正常人PBMC组成性表达HLA-Ⅰ、Ⅱ类分子和HLA-DR7分子,且NS患儿高于正常人(尤以HLA-Ⅱ类分子突出,为正常人的11.78倍,P＜0.01);(2)体外经 IFN-γ联合PHA活化后HLA-Ⅰ/类分子和DR7分子表达增加(P＜0.01);(3)经不同浓度强的松处理后,HLA-Ⅰ/类分子和DR7分子比活化后表达减少(P＜0.01);(4)经不同浓度强的松预处理后,与活化组比较HLA-Ⅰ、Ⅱ类分子和HLA-DR7表达减少(P＜0.01),对NS患儿的抑制率要高于正常人,并且HLA-Ⅱ类分子表达的抑制作用表现出剂量依赖性(P＜0.01).结论: NS患儿体内存在异常活化的T细胞;糖皮质激素对IFN-γ诱导活化的PBMC HLA表达有抑制作用.     

黑色素瘤SK-MEL-19细胞系中TAP-1基因单核苷酸的缺失导致mRNA的迅速降解

T细胞功能失调和参与抗原递呈的分子表达异常使肿瘤细胞逃逸机体的免疫监视。大部分恶性肿瘤细胞 ,包括黑色素瘤 ,都存在HLA表达降低。了解T细胞功能失调和参与抗原递呈分子表达缺失的机制 ,可对肿瘤的基因治疗提供许多启示。细胞表面HLA I类分子的最适表达需要TAP、LMP、tapasin、HLA I类分子重链和 β2微球蛋白等的参与。在许多肿瘤中 ,上述基因的表达及其编码的蛋白功能异常。参与抗原递呈的分子表达异常可能是由于 :①抗原递呈基因转录抑制 ;②基因编码产物功能未激活 ;③错义突变 ;④蛋白与蛋白的相互作用。本实验拟研究TAP1…     

HLA-G分子表达调控及其功能研究进展

HLA—G分子是一种非经典HLA—Ⅰ类抗原，相对于经典的Ⅰ类抗原，它的组织分布非常局限，具有有限的多态性。它的表达调控与经典Ⅰ类抗原存在着很大的差异，HLA—G基因内经典Ⅰ类基因反式活化的3个主要元件增强子A、ISRE和SXY均发生变异，导致NF—κB、IRFl、CⅡTA介导的反式激活途径对HLA—G基因不能发挥作用。最早在母胎界面发现存在HLA—G分子表达，它可以与NK细胞和CTL表面相应的杀伤细胞抑制性受体(KIR)结合，从而抑制它们的杀伤作用，这可能是母胎耐受的重要机制。近来的研究表明HLA—G分子还可表达于少数类型肿瘤细胞、一些受到感染的细胞和一些正常细胞。它的表达调控及其可能的功能是近来的研究热点。     

073 HLA-G分子表达调控及其功能研究进展

HLA-G分子是一种非经典HLA-Ⅰ类抗原,相对于经典的Ⅰ类抗原,它的组织分布非常局限,具有有限的多态性.它的表达调控与经典Ⅰ类抗原存在着很大的差异,HLA-G基因内经典Ⅰ类基因反式活化的3个主要元件增强子A、ISRE和SXY均发生变异,导致NF-κB、IRF1、CⅡTA介导的反式激活途径对HLA-G基因不能发挥作用.最早在母胎界面发现存在HLA-G分子表达,它可以与NK细胞和CTL表面相应的杀伤细胞抑制性受体(KIR)结合,从而抑制它们的杀伤作用,这可能是母胎耐受的重要机制.近来的研究表明HLA-G分子还可表达于少数类型肿瘤细胞、一些受到感染的细胞和一些正常细胞.它的表达调控及其可能的功能是近来的研究热点.     

肿瘤抗原MAGE-A3研究进展

肿瘤抗原MAGE-A3为肿瘤共同抗原,广泛表达于多种组织类型的肿瘤细胞,而在正常组织细胞(除睾丸和胎盘外)却不表达.该抗原不仅能被HLAⅠ类分子呈递,而且能被HLAⅡ类分子呈递.MAGE-A3抗原已被广泛应用于肿瘤治疗性疫苗的研究.     

不同IL-15转染对NCI-H446 HLA-Ⅰ和HLA-Ⅱ表达及NK敏感性的影响

目的探讨不同形式IL-15基因转染对人小细胞肺癌细胞株NCI-H446细胞HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子表达及NK杀伤敏感性的影响。方法在本室已构建的3种细胞模型（转染IL-15成熟肽基因的NCI-H446／IL-15mp细胞、转染原型IL-15基因的NCI-H446／IL-15细胞和转染以IL-2信号肽替代IL-15信号肽的改型IL-15基因的NCI-H446／IL-2sp-IL-15mp细胞）基础上,以野生株细胞为对照,流式细胞分析仪（Fluorescence-activated cell Sorter,FACS）分析这3种细胞HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子表达,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定它们对NK杀伤的敏感性。结果野生株NCI-446细胞表面阳性表达HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子;转染IL-15成熟肽基因或改型IL-15基因后,这两种分子的表达均被抑制为阴性;转染原型IL-15基因后,这两种分子的表达均被显著上调。5名不同健康志愿者的外周血单个核细胞（PBMC）对野生株NCI-H446细胞的平均NK杀伤率最低,对NCI-H446／IL-15、NCI-H446／IL-15mp和NCI-H446／IL-2sp-IL-15mp细胞的平均NK杀伤率依次升高。结论转染不同形式IL-15基因对NCI-H446细胞的免疫生物学特性影响不同。转染IL-15成熟肽基因或改型IL-15基因,抑制NCI-H446细胞表面HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子表达;转染原型IL-15基因,上调这两种分子的表达;转染不同形式IL-15基因均可增强NCI-H446细胞对NK杀伤的敏感性,但程度不同;以改型IL-15者最高,IL-15成熟肽者次之,原型IL-15者最低。     

MICA基因研究进展及与疾病的关系

MICA基因在人类位于6p HLA-Ⅰ类基因区HLA-B位点着丝粒端的46kb左右,其组成、表达和产物与HLA-Ⅰ类基因不同。该基因包含6个外显子,编码的蛋白分子结构域与经典的Ⅰ类分子α链相似,包括3个胞外结构域:α1、α2和α3,加上跨膜区和胞质区,不含β2m。MICA大量表达于上皮细胞和纤维母细胞的表面,在T、B细胞表面不表达,但在大多数上皮性肿瘤细胞表面都有表达。MICA分子与其配体NKG2D受体结合后可以激活NK细胞、Vδ1γδT细胞等,参与天然免疫应答。现已发现MICA与某些肿瘤和免疫相关性疾病(如白塞氏病、1型糖尿病)存在关联,并且在肿瘤和某些疾病的发展中起着重要作用。     

黑色素瘤SK-MEL-19细胞系中TAP-1基因单核苷酸的缺失导致mRNA的迅速降解

T细胞功能失调和参与抗原递呈的分子表达异常使肿瘤细胞逃逸机体的免疫监视。大部分恶性肿瘤细胞，包括黑色素瘤，都存在HLA表达降低。了解T细胞功能失调和参与抗原递呈分子表达缺失的机制，可对肿瘤的基因治疗提供许多启示。细胞表面HLA-I类分子的最适表达需要TAP、LMP、tapasin、HLA-I类分子重链和β2微球蛋白等的参