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1.
目的:观察内毒素(LPS)于不同时点刺激人牙周膜细胞对TLR2和TLR4表达的影响,探讨TLR2和TLR4在牙周病中的免疫学作用。方法:选取于体外培养的生长良好的第4代人牙周膜细胞,观察组使用LPS分别于0h、4h、8h、12h、24h对其进行刺激,并对TLR2和TLR4在牙周膜细胞中的表达情况进行检测和免疫组化评分;以未采用LPS刺激的人牙周膜细胞作为对照组,比较两组的检测和评分情况。结果:对照组TLR2和TLR4表达呈弱阳性,而采用LPS刺激后,随着时间的延长其染色液随之增强,各时点比较均有显著性差异(P〈0.05);同时各时点的TLR2和TLR4免疫组化评分与对照组比较均有显著性差异(P〈0.05)。结论:在内毒素刺激下,TLR2和TLR4在牙周膜细胞中的表达也随之增多,在牙周免疫反应中牙周膜细胞发挥了一定作用。 相似文献
2.
彭冲 《中药新药与临床药理》2016,27(4)
摘要:目的 探讨青藤碱(sinomenine, SIN)对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)刺激的大鼠成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes , FLS)增殖及α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7 nicotinic acetylcholine receptors, α7nAChR)、Toll样受体2(toll-like receptor 2, TLR2)和Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)表达的影响。 方法 组织块法分离培养原代FLS,流式细胞术检测FLS表面标志物CD90。FLS设对照组、TNF-α组、SIN组(剂量分别为100,200,400μmol·L-1),SIN组给予SIN干预30min后,TNF-α组、SIN组均给予20ng·mL-1 TNF-α刺激24h,采用MTT法检测各组 FLS增殖,酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞上清白细胞介素-6(interleukin-6, IL-6)分泌量,RT-PCR检测α7nAChR、TLR2和TLR4 mRNA表达、Western bolt检测α7nAChR、TLR2和TLR4蛋白表达。 结果 TNF-α刺激FLS后,细胞明显增殖,分泌IL-6明显增加,α7nAChR、TLR2和TLR4 mRNA及蛋白表达增加,SIN(200,400μmol·L-1)能抑制FLS增殖,抑制IL-6分泌,并且下调α7nAChR、TLR2和TLR4 mRNA及蛋白表达。 结论 FLS增殖与α7nAChR、TLR2和TLR4表达相关,且SIN能抑制FLS增殖,并下调α7nAChR、TLR2和TLR4表达。 相似文献
3.
目的:观察加味黑布膏对大鼠耳廓复合痤疮模型组织Toll样受体(TLR)2、TLR4表达水平的影响,初步探讨其治疗轻度增生性痤疮瘢痕的作用机制。方法:抽取10只大鼠为空白组,剩余大鼠参照Kligman法建立大鼠耳廓复合痤疮模型后随机被分为加味黑布膏低、中、高剂量组,阳性对照组和模型组,治疗21d后,观察治疗前后皮损变化、大鼠耳廓造模区域组织病理变化,并以RT-PCR及Western Blot测定大鼠耳廓造模区域组织TLR2、TLR4的表达水平。结果:加味黑布膏高剂量组皮损已基本接近空白组,其余各治疗组皮损均有不同程度的改善,其中加味黑布膏高剂量组皮肤角质层接近空白组;RT-PCR及Western Blot检测:模型组耳廓组织TLR2、TLR4的表达显著高于空白组(P<0.01);除加味黑布膏低剂量组外,其他3组耳廓组织TLR2、TLR4的表达均低于模型组(P<0.05);加味黑布膏高剂量组优于阳性对照组(P<0.05)。结论:加味黑布膏对轻度增生性痤疮瘢痕有较好的治疗作用,其有效性可能与降低局部组织TLR2、TLR4的表达水平有关。 相似文献
4.
目的:探讨慢性胆脂瘤型中耳炎的MSCT诊断和评价价值。方法:2009年8月到2014年5月选择58例慢性胆脂瘤型中耳炎患者作为研究对象,选择GE Light speed 16排螺旋CT机进行影像学特征的观察与判断。结果:慢性胆脂瘤型中耳炎的MSCT特征主要包括乙状窦骨板破坏;鼓室天盖骨质吸收、变薄或中断;外侧半规管及面神经管侵蚀破坏;鼓室外侧壁盾板破坏等。经过与术中病理判断,MSCT在盾板、鼓窦、乙状窦骨板等部位破坏诊断符合率均为100%;对面神经管及半规管骨壁的破坏诊断符合率都在95.5%以上。结论:慢性胆脂瘤型中耳炎的MSCT影像学特征明显,具有很好的诊断价值,对于手术进路选择和方案制定具有重要意义。 相似文献
5.
目的:使用益气解表代表方参苏饮(《太平惠民和剂局方》)及其拆方的含药血清对炎症16HBE进行干预,从中探讨TLR4在hBD-2mRNA表达中的作用。方法:传代培养16HBE细胞后将其分为5组,用LPS建立细胞炎症模型,加入TLR4抑制剂Anti-Human CD284后分别将培养液替换为含有提前制备的参苏饮及其拆方含药血清培养液,在给药后不同时间点(1/2h,1h,3h,5h,8h)分别取出相应组别细胞培养板,提取细胞总RNA,使用real time PCR检测16HBE炎症模型中以上时间点NF-κBp65 mRNA、hBD-2 mRNA表达量。结果:与空白组比较,模型组NF-κBp65 mRNA相对表达量在1h、5h显著升高(P0.05),而hBD-2 mRNA相对表达量仅在1h显著升高(P0.05)。与模型组比较,参苏饮全方组NF-κBp65 mRNA、hBD-2 mRNA相对表达量仅在5h显著升高(P0.05);益气解表组NF-κBp65 mRNA、hBD-2 mRNA相对表达量仅在3h显著升高(P0.05)。结论:Anti-Human CD284阻断TLR4后,参苏饮诱导炎症16HBE表达NF-κBp65 mRNA、hBD-2mRNA明显受抑,表明参苏饮上调NF-κBp65 mRNA、hBD-2 mRNA需要TLR4参与。 相似文献
6.
目的:通过观察松针对呼吸道合胞病毒感染小鼠肺组织Toll样受体3(TLR3)及Toll样受体4(TLR4)蛋白表达的影响,探讨其治疗呼吸道合胞病毒感染的可能免疫调节机制。方法:采用美国癌症研究所(Institute of Cancer Research)培育的ICR小鼠60只随机分为6组:正常对照组、模型组、利巴韦林组、松针高剂量组、中剂量组呼、低剂量组,呼吸道合胞病毒滴鼻后给药,观察肺组织TLR3及TLR4蛋白的表达。结果:松针高剂量组可降低小鼠肺组织TLR3及TLR4蛋白的表达,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:松针可抑制呼吸道合胞病毒感染小鼠肺组织中TLR3及TLR4蛋白的表达,可能为其免疫调节作用的机制之一。 相似文献
7.
目的:探讨耳内镜下治疗外耳道胆脂瘤的临床疗效。方法:自2003年5月至2009年5月,对来我院治疗的临床诊断均为外耳道胆脂瘤32例患者,在耳内镜下进行手术,对结果进行分析以评价其临床疗效。结果:患者经耳内镜下手术切除胆脂瘤后,耳道后壁形成肉芽组织及真菌感染均得到及时处理,1个月内全部干耳,术后术腔愈合良好,复查外耳道敞开,鼓膜标志清楚完整。随访1—6年,治愈24例,占75%;好转7例,占21.88%;1年后复发1例,占3.12%,经再次治疗后无复发,总有效率96.88%.术后对患者进行听力测试,全部患者听力恢复正常。结论:在耳内镜下治疗外耳道胆脂瘤,视野清晰,操作简单,手术成功率高,不良反应少,复发率低,值得临床推广应用 相似文献
8.
目的 采用急性脑缺血后引起心肌损伤模拟“脑损及心”病理过程,以Toll样受体(TLR)2/TLR4为切入点,探讨脑缺血状态下脑心通胶囊干预“脑损及心”的作用机制。方法 将C57BL/6雄性小鼠随机分为假手术组、模型组、脑心通胶囊组和金纳多组。采用大脑中动脉闭塞法(MCAO)建立小鼠脑缺血模型。通过对小鼠神经行为学评分、脑梗死面积、神经元损伤、细胞凋亡、离子钙结合适配器分子1(Iba-1)阳性小胶质细胞比率及血清中氨基端前脑钠素(NT-proBNP)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)及乳酸脱氢酶(LDH)进行分析,评价脑心通胶囊对小鼠脑缺血后心脑损伤的药效作用。通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠大脑和心脏中TLR2/TLR4蛋白的表达水平。结果 与假手术组比较,模型组小鼠脑梗死面积与神经行为学评分,细胞凋亡率、Iba-1阳性小胶质细胞比率、血清中NT-proBNP、CK-MB及LDH含量显著上升(P<0.01)。与模型组比较,脑心通胶囊能够显著降低小鼠脑梗死面积与神经行为学评分,细胞凋亡率、Iba-1阳性小胶质细胞比率(P<0.01)及血清中NT-proBNP与CK-MB含量(P<0.05)。Western blot结果表明,在脑缺血状态下,脑心通能够明显降低小鼠大脑组织中TLR2(P<0.05)及心脏组织中TLR2与TLR4的表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论 脑缺血后会引起心肌损伤,反映“脑损及心”的病理过程,脑心通胶囊可显著改善脑缺血后脑损伤和心肌损伤,实现“脑心同治”,而TLR2/4是脑心通胶囊干预“脑损及心”的作用途径之一。 相似文献
9.
目的为了研究地黄萜类化合物生物合成途径的功能基因,从地黄中克隆了一条新的地黄GGPPS基因(RgGGPPS2),进行生物信息学分析,原核表达、纯化以及基因表达模式分析。方法根据地黄转录组数据中RgGGPPS2基因的序列信息,设计特异性引物,克隆了RgGGPPS2基因的开放阅读框(ORF)序列,构建pET32a-RgGGPPS2原核表达载体,用IPTG在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达RgGGPPS2重组蛋白,荧光定量PCR检测RgGGPPS2基因的组织特异性表达。结果 RgGGPPS2基因的ORF为867 bp,编码289个氨基酸。生物信息学分析结果发现RgGGPPS2蛋白含有2个富含天冬氨酸的基序FARM(first aspartate-rich motif)和SARM(second aspartate-rich motif),RgGGPPS2与芝麻、长春花等双子叶植物中GGPPS蛋白的同源性较高。通过构建pET-32a-RgGGPPS2原核表达载体在大肠杆菌中成功表达RgGGPPS2重组蛋白,利用Ni2+亲和色谱得到了纯化的RgGGPPS2重组蛋白。荧光定量PCR结果显示RgGGPPS2基因在根中表达量最高,其次是叶,茎中最低。结论克隆了RgGGPPS2基因,获得了纯化的RgGGPPS2重组蛋白,为研究RgGGPPS2基因在地黄萜类化合物生物合成途径中的功能奠定了基础。 相似文献
10.
黄芩苷对模式识别受体TLR2/4-NOD2的作用及其成药性意义 总被引:1,自引:1,他引:0
激活模式识别受体可以引起下游信号通路启动,炎性因子表达,最终引起免疫炎性反应。无论是外源性病原微生物,还是内源性组织成分均可以配体方式不同程度上激活这种模式识别受体,引起机体免疫炎性反应。因此,抑制相关受体进而在一定程度上抑制这种免疫炎性反应,对于避免疾病过程中组织损伤具有重要的意义。黄芩苷能够特异性的抑制疾病过程中TLR2/4-NOD2的表达,抑制下游炎性因子IL-1β,IL-6和TNF-α的表达,可以减轻疾病过程中组织细胞的损伤。并且这种作用具有组织的非特异性。在成药性方面具有重要的理论和实际意义。此外,本文还从药物代谢和毒性等方面进一步探讨了其成药性。 相似文献
11.
目的:观察芍药汤对溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠结肠组织PIK3CA、丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(AKT)、Toll样受体2(TLR2)基因表达的影响,探讨其作用机制。方法:60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、柳氮磺胺吡啶(SASP)组和芍药汤低、中、高剂量组,除空白组外,其余各组大鼠采用食物诱导联合2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)结合乙醇复合法复制湿热蕴结型UC大鼠模型。从造模后第2天开始各组分别灌胃相应药物或生理盐水,每日1次,连续21d。末次给药24h后取结肠组织,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和蛋白免疫印迹(Western blot)法检测PIK3CA、AKT、TLR2的mRNA和蛋白表达。结果:模型组大鼠结肠组织PIK3CA、AKT、TLR2的mRNA和蛋白表达均明显高于空白组(P<0.01);与模型组比较,SASP组PIK3CA、AKT、TLR2 mRNA和蛋白表达均显著下调(P<0.01),芍药汤各剂量组上述指标也有不同程度的降低,尤以高剂量组最为明显(P<0.01),表现出一定的剂量依赖性;芍药汤高剂量组大鼠结肠组织PIK3CA、AKT、TLR2的mRNA和蛋白表达与SASP组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:芍药汤对TNBS诱导的UC模型大鼠的治疗机制可能与其抑制TLR2、PIK3CA、AKT基因表达有关。 相似文献
12.
目的:探讨儿童胆脂瘤型中耳炎的临床特点及其治疗与护理方法。方法:对本院2005年12月—2009年10月所收治的胆脂瘤型中耳炎患儿37例进行临床治疗及护理,并将临床资料进行回顾性分析。结果:37例患儿经治疗均痊愈出院,术中术后均无并发症发生。出院后通过对其中34例患儿平均1.5年的随访发现,有1例出现胆脂瘤复发。术后6个月对34例患者进行听力复查,听力改善30例占总数的88.2%。结论:儿童胆脂瘤型中耳炎的临床治疗方式应根据患儿的具体状况而定,同时应临床加强术前分析、完善手术操作及术后随诊。对患儿可采用开放式乳突根治+鼓室成型术治疗,而对术前检查存在咽鼓管功能障碍患儿则应尽量避免完壁式手术。 相似文献
13.
《中华中医药学刊》2015,(5)
目的:探讨穿心莲内酯(andrographolide,AND)对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤大鼠TLR4(Toll-like receptor 4)、CD14、髓样分化蛋白-2(MD2)mRNA表达的影响。方法:SD大鼠36只,随机分6组:对照组、LPS组;穿心莲内酯组,每组再分为4 h、8 h两个亚组。向气管内滴注脂多糖(LPS)(10 mg/kg)建立大鼠急性肺损伤模型,穿心莲内酯组LPS滴注后立即予穿心莲内酯注射液尾静脉注射干预,分别于LPS处理后4 h、8 h取血和肺组织,测定各组大鼠动脉血氧分压(Pa O2),测肺湿干比重(wet weight/dry weight,W/D);测定肺组织TLR4、CD14、MD2 mRNA表达的变化;观察各组大鼠肺组织的病理改变。结果:LPS组大鼠Pa O2呈进行性降低;肺体质量指数明显增加;肺组织TLR4、CD14、MD2 mRNA表达明显增加;肺组织病理示肺内中性粒细胞大量浸润,伴出血、透明膜形成;穿心莲内酯组的各项指标均较LPS损伤组减轻。结论:穿心莲内酯能降低LPS诱导急性肺损伤大鼠TLR4、CD14、MD2 mRNA的表达,减轻肺组织的病理损害。 相似文献
14.
目的:观察喜树碱对小鼠骨髓中性粒细胞X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)、Toll样受体4(TLR4)、CXC趋化因子受体2(CXCR2)mRNA的表达和细胞凋亡的影响。方法:使用percoll不连续密度梯度离心法分离纯化小鼠骨髓中性粒细胞,对得到的中性粒细胞使用不同浓度的喜树碱加药处理1h。使用荧光定量PCR检测喜树碱对小鼠骨髓中性粒细胞XIAP、TLR4、CXCR2 mRNA表达的影响;采用Annexin V-FITC/PI染色法,使用流式细胞仪检测喜树碱对小鼠骨髓中性粒细胞凋亡的影响。结果:与空白组相比,喜树碱作用1h后,小鼠骨髓中性粒细胞XIAP、TLR4、CXCR2 mRNA表达水平下降,其中喜树碱浓度为2μmol/L和20μmol/L时,上述指标表达水平明显下降(P0.001);与空白组相比,喜树碱作用1h后,小鼠骨髓中性粒细胞凋亡比例略有升高。结论:喜树碱因其具有的拓扑异构酶I毒性诱导骨髓造血干细胞凋亡而导致中性粒细胞数量减少,同时还可能通过抑制骨髓中性粒细胞的迁移和诱导其凋亡,减少进入血液前往炎症和肿瘤部位的中性粒细胞数量。 相似文献
15.
目的:研究槐定碱及TLR4/MD-2阻断剂对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞TLR4-NF-κB-TNF-α通路的影响,探讨其抗内毒素的药理机制。方法:培养RAW264.7巨噬细胞,分为5组:空白对照组,LPS模型组,槐定碱+LPS组,TLR4/MD-2阻断剂+LPS组,TLR4/MD-2阻断剂+槐定碱+LPS组,各组分别于处理完毕后120 min时收集细胞及细胞培养液。West-ern blot检测TLR4蛋白表达,免疫细胞化学检测NF-κB蛋白的分布与表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测NF-κB,TNF-αmRNA表达,放射免疫分析法检测细胞培养液中TNF-α含量。结果:与LPS模型组比较,槐定碱+LPS组TLR4蛋白,NF-κBmRNA与NF-κB入核率,TNF-αmRNA及培养液中TNF-α含量均显著降低(P<0.01);TLR4/MD-2阻断剂+LPS组与TLR4/MD-2阻断剂+槐定碱+LPS组NF-κB mRNA及NF-κB入核率,TNF-αmRNA及培养液中TNF-α含量均低于LPS模型组(P<0.01),接近空白对照组,但2组之间上述各值的差异均无统计学意义。结论:TLR4/MD-2可能是槐定碱作用的靶位之一,槐定碱抑制TLR4-NF-κB-TNF-α通路活化可能是其抗内毒素机制之一。 相似文献
16.
目的 探讨TLR2对IFN-γ牵和IL-8分泌的影响,及其在抗皮肤癣菌感染中的作用.方法 对经TLR2抗体处理前后的角质形成细胞应用红色毛癣菌悬液进行刺激,并对不同时间点,细胞清液中IFN-γ牵与IL-8浓度进行检测(ELISA检测),同时设置对照组(阴性),并对经TLR2抗体处理前后的IFN-γ牵与IL-8的变化进行比较分析.结果 人角质形成细胞受到癣菌刺激后,IFN-γ牵与IL-8浓度于4h、16h均有显著升高(P均〈0.05).对TLR2采用抗体进行中和处理发现,IL-8 的浓度于各个时间点与中和前比较均显著降低(P均〈0.05),IFN-γ牵浓度在各时间点上与中和前比较显著降低,但在16h时间点降低不明显(P〉0.05).结论 人角质形成细胞受到癣菌刺激后,对IFN-γ牵与IL-8的分泌有明显促进作用;在其整个分泌过程中,TLR2起到了较明显的调节作用. 相似文献
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目的:观察苦参素对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠脊髓中Toll样受体-4(TLR4)和血清中髓样分化蛋白-2(MD-2)表达的影响,探讨苦参素对EAE大鼠的防治机制。方法:用豚鼠全脊髓匀浆和完全弗氏佐剂制成的抗原乳剂复制EAE模型,将50只大鼠随机分为正常组、模型组、苦参素高、中、低剂量组(250、200、150 mg/kg),连续给药16天,同期模型组和正常组腹腔注射等量生理盐水,观察记录大鼠体重变化,神经功能学评分,苏木素-伊红(HE)和变色酸2R-亮绿(C-2R-BG)染色观察病理改变、RT-PCR法检测脊髓中TLR4的表达、ELISA法测定EAE大鼠血清中MD-2含量的变化。结果:苦参素起效剂量为41.67mg/kg,半数致死量为353.5mg/kg,苦参素150、200、250mg/kg能延迟大鼠EAE的发病时间,明显降低EAE大鼠的神经功能学评分,减轻EAE大鼠中枢神经系统炎症浸润和髓鞘脱失,下调脊髓中TLR4的表达,降低血清中MD-2的含量,且高中低三剂量组间的差异有统计学意义。结论:苦参素对EAE大鼠有防治作用,其作用机制可能与下调大鼠脊髓中TLR4和血清中和MD-2的表达有关。 相似文献
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目的探讨大黄素改善非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠模型肝脏脂质沉积的机制。方法大鼠随机分为正常对照组,NAFLD模型组,大黄素低、中、高(20,40,80 mg·kg~(-1))剂量组,每组8只。采用高脂诱导的方法建立NAFLD大鼠模型,采用HE染色法检测肝脏病理变化,酶联免疫法检测血清TNF-α、IL-1含量,实时定量PCR法和免疫组化染色法检测TLR4信号的表达。结果 NAFLD组大鼠呈现典型的肝细胞脂滴空泡,部分肝细胞有单核细胞浸润,与正常对照组比较,血清TNF-α、IL-1增高(P0.05),肝脏TLR4、My D88、TRAF-6的基因表达增高(P0.05)。与NAFLD模型组比较,大黄素各剂量组对NAFLD大鼠肝脏脂滴空泡均有显著改善,抑制血清TNF-α、IL-1分泌(P0.05),并抑制肝脏TLR4的表达(P0.05),大黄素中、高剂量组抑制肝脏My D88和TRAF-6的表达(P0.05)。结论大黄素改善NAFLD模型肝脏脂质沉积的机制与抑制肝脏TLR4信号有关。 相似文献
19.
目的:探讨Galectin-3在卵巢上皮性肿瘤中的表达。方法:采用免疫组织化学EnVisionTM二步法检测Galectin-3(半乳糖凝集素-3)在卵巢上皮性肿瘤中的表达。结果:Galectin-3在卵巢囊腺癌中的阳性表达明显高于嚢腺瘤和交界性嚢腺瘤(P<0.05)。结论:Galectin-3在卵巢囊腺癌中显示出高表达。 相似文献
20.
目的:探讨耳内窥镜在外耳道疾病治疗中的作用。方法:2006~2009年本组48例(55耳)外耳道胆脂瘤患者,在耳内镜下采用剥、钩、钳夹、吸的方法清理胆脂瘤病变。结果:43例(48耳)均经一次手术彻底清除病变,5例(7耳)一周后再次治疗彻底清除病变,听力明显改善。随访半年,无复发。结论:耳内窥镜手术具有微创、视野清晰、简便等优点。 相似文献