人类囊胚玻璃化冷冻研究进展

1985年Rail和Fahy首次应用玻璃化法冷冻保存小鼠胚胎以来，玻璃化冷冻技术以其简单、有效、经济受到关注。在人类辅助生殖技术中，囊胚的培养和移植对于提高妊娠率、减少多胎妊娠的发生具有重要意义．因此需要将剩余囊胚有效冷冻保存，玻璃化法可望成为有效冷冻保存多余囊胚的新技术。在玻璃化冷冻技术中．不同的冷冻装置、冷冻保护剂的类型和浓度、解冻方法的不同、囊胚冷冻前的不同处理。都是影响囊胚冷冻后复苏的关键因素。     

玻璃化冷冻人类早期胚胎的研究进展

人类胚胎已经成功冷冻保存并在辅助生殖技术(ART)中起重要作用,目前多采用慢速冷冻-快速复温方法冷冻保存人早期胚胎,并取得较高的胚胎存活率,但此法需要昂贵的仪器、耗时,并且对于囊胚冷冻效果差.近年发展的玻璃化冷冻因其简单、快速、不需要昂贵仪器等优点越来越受到重视.就玻璃化冷冻在人类早期胚胎冷冻保存中的应用及其影响因素作一综述.     

玻璃化冷冻人类早期胚胎的研究进展

人类胚胎已经成功冷冻保存并在辅助生殖技术(ART)中起重要作用,目前多采用慢速冷冻-快速复温方法冷冻保存人早期胚胎,并取得较高的胚胎存活率,但此法需要昂贵的仪器、耗时,并且对于囊胚冷冻效果差。近年发展的玻璃化冷冻因其简单、快速、不需要昂贵仪器等优点越来越受到重视。就玻璃化冷冻在人类早期胚胎冷冻保存中的应用及其影响因素作一综述。     

人类成熟卵母细胞玻璃化冷冻研究

目的:研究人类成熟卵母细胞玻璃化的方法和冷冻液,探讨人类卵母细胞玻璃化冷冻保存的方法及临床应用价值.方法:运用cryoleaf进行人类成熟卵母细胞玻璃化冷冻保存,复苏后行胞浆内单精子注射一胚胎移植或培养至囊胚形成,观察复苏后卵母细胞受精及发育能力.根据冷冻方法分为程序化冷冻组和玻璃化冷冻组,又将玻璃化冷冻组分为自配液冷冻组和成品液冷冻组,比较各组存活率、受精率、卵裂率及囊胚形成率.结果:程序化冷冻组和玻璃化冷冻组间存活率、卵裂率、囊胚形成率均无显著性差异(P＞0.05),但是受精率存在显著性差异(P＜0.05);程序化组与自配液组、成品液组间存活率、卵裂率均无显著性差异(P＞0.05),但受精率存在显著性差异(P＜0.05).成品液组与自配液组、程序化组间囊胚形成率存在显著性差异(P＜0.05).程序化组移植4例,获得临床妊娠并分娩1例,玻璃化组移植7例.获得1例生化妊娠.结论:程序化冷冻与玻璃化冷冻法均可应用于人类成熟卵母细胞,冻融后卵母细胞具备正常受精能力及卵裂能力.玻璃化冻存人类卵母细胞具有更大发展趋势.     

玻璃化冷冻人类早期胚胎的研究进展

人类胚胎已经成功冷冻保存并在辅助生殖技术（ART）中起重要作用，目前多采用慢速冷冻-快速复温方法冷冻保存人早期胚胎，并取得较高的胚胎存活率，但此法需要昂贵的仪器、耗时，并且对于囊胚冷冻效果差。近年发展的玻璃化冷冻因其简单、快速、不需要昂贵仪器等优点越来越受到重视。就玻璃化冷冻在人类早期胚胎冷冻保存中的应用及其影响因素作一综述。     

超高速玻璃化冷冻人类囊胚获得妊娠成功

随着体外培养体系的不断优化，增加了人类胚胎的囊胚形成率。囊胚期移植不仅提高妊娠率，而且减少移植胚胎数，最大限度的降低多胎妊娠的风险。因此有效的冷冻保存多余囊胚具有很高的临床应用价值。但是常规慢速及常规玻璃化冷冻人囊胚结果并不理想，目前采用冷冻环加上-205℃液氮的超高速玻璃化冷冻牛囊胚，实验结果令人满意。此研究以小鼠及人类囊胚为研究对象，进一步应用于临床，旨在评估此种超高速玻璃化冻融人囊胚的发育潜能。     

Hemi-straw玻璃化与程序化冷冻小鼠不同发育阶段胚胎的效果

目的:探讨半细管(Hem i-straw)玻璃化方法与程序化方法冷冻不同发育阶段小鼠胚胎的效果。方法:采用慢速程序化方法与玻璃化方法冷冻小鼠原核期胚胎、卵裂期及早期囊胚期胚胎。解冻后观察存活率、囊胚形成率。结果:采用玻璃化方法冷冻小鼠卵裂期与早期囊胚期胚胎的存活率为92.7%与95.5%,显著高于玻璃化冷冻原核期胚胎的存活率79.8%与程序化冷冻的各组(均P<0.01)。程序化冷冻早期囊胚的存活率仅为50.2%,显著低于其他组(均P<0.01)。经培养后囊胚的形成率比较,程序化冷冻组内无显著性差异(P>0.05),但均显著低于玻璃化冷冻组(均P<0.01)。玻璃化冷冻卵裂期与早期囊胚组的囊胚形成率高达90.1%与92.2%,显著高于原核期胚胎玻璃化冷冻组69.5%(均P<0.01)。结论:胚胎行冷冻保存时,玻璃化冷冻效果较程序化冷冻好,且选择早期囊胚可获最佳冷冻效果。     

人类成熟卵母细胞玻璃化冷冻研究

目的:研究人类成熟卵母细胞玻璃化的方法和冷冻液,探讨人类卵母细胞玻璃化冷冻保存的方法及临床应用价值。方法:运用cryoleaf进行人类成熟卵母细胞玻璃化冷冻保存,复苏后行胞浆内单精子注射-胚胎移植或培养至囊胚形成,观察复苏后卵母细胞受精及发育能力。根据冷冻方法分为程序化冷冻组和玻璃化冷冻组,又将玻璃化冷冻组分为自配液冷冻组和成品液冷冻组,比较各组存活率、受精率、卵裂率及囊胚形成率。结果:程序化冷冻组和玻璃化冷冻组间存活率、卵裂率、囊胚形成率均无显著性差异(P>0.05),但是受精率存在显著性差异(P<0.05);程序化组与自配液组、成品液组间存活率、卵裂率均无显著性差异(P>0.05),但受精率存在显著性差异(P<0.05)。成品液组与自配液组、程序化组间囊胚形成率存在显著性差异(P<0.05)。程序化组移植4例,获得临床妊娠并分娩1例,玻璃化组移植7例,获得1例生化妊娠。结论:程序化冷冻与玻璃化冷冻法均可应用于人类成熟卵母细胞,冻融后卵母细胞具备正常受精能力及卵裂能力。玻璃化冻存人类卵母细胞具有更大发展趋势。     

人类卵母细胞玻璃化冷冻的研究进展

玻璃化冷冻技术已逐渐成为辅助生育技术中重要的应用技术之一，玻璃化冷冻可避免冻融过程中细胞内冰晶的形成，降低细胞损伤，在人类配子、胚胎的冷冻保存中取得了不少进展。近十几年来，玻璃化冷冻技术已成功应用于成熟卵母细胞、未成熟卵母细胞等方面的冷冻保存并取得成功。该技术操作简单、迅速快捷，正逐渐成为人类辅助生殖技术中重要的应用技术之一。本文综述了玻璃化冷冻技术在保存人类不同发育阶段卵细胞方面的研究进展。     

囊胚玻璃化冷冻对子代发育行为和生殖能力评价

目的 通过观察囊胚玻璃化冷冻对复苏移植后小鼠的生长发育、神经功能、行为学和生殖能力的影响,评估该技术的长期安全性. 方法 通过促排卵收集性成熟期前C57BL/6雌鼠囊胚,玻璃化冷冻,复苏移植到ICR代孕鼠.仔鼠出生后,观察产仔数和有无外观畸形,记录新生鼠不同时期的生理指标;以正常C57BL/6小鼠为对照,通过转轮、水迷宫和社交试验检测小鼠的运动协调、学习记忆和社交习性;8周龄后检测生殖力. 结果 囊胚玻璃化冷冻鼠发育指标和行为学各项测试结果与对照小鼠对比差异没有统计学意义;囊胚冷冻雄鼠的生殖力(37.5％)和每胎产仔数[(6.7±2.5)只]与对照组[35.0％,(6.5±1.9)只]差异没有统计学意义. 结论 囊胚玻璃化冷冻出生的小鼠在生长发育、行为学特征和生殖力等方面和对照鼠无明显差异,表明小鼠囊胚玻璃化冷冻技术是安全和可靠的.     

玻璃化冷冻法保存人类囊胚的临床应用

目的:探讨玻璃化冷冻法保存人类囊胚的临床应用效果。方法:回顾性分析在某医院生殖中心行玻璃化冷冻解冻囊胚患者共12个周期的结局。结果:玻璃化冷冻解冻共21枚胚胎,存活21枚(存活率100%),共解冻12个周期,均有胚胎移植,获得临床妊娠5例(妊娠率41.67%),着床率23.81%(5/21)。结论:玻璃化冷冻法是保存人类囊胚的一种有效方法。     

囊胚玻璃化冷冻的研究进展

随着序贯培养液的出现,囊胚移植被认为是提高胚胎种植率、降低多胎妊娠率的有效方法,因此囊胚冷冻愈显重要.囊胚的玻璃化冷冻因其简化了冷冻过程;避免细胞内冰晶形成所引起的一系列物理及化学损伤;并且在冷冻过程中可迅速通过临界温度区,减轻了胚胎冷冻中常见的冻伤现象,使存活率提高等优点,近几年得到逐步发展.现对囊胚玻璃化冷冻(vitrification)的原理、要领、现状及应用前景进行综述.     

卵巢组织玻璃化冷冻研究进展

卵巢组织冷冻是保存女性生殖功能的重要方法之一.近20年来,玻璃化冷冻法作为一种新兴的生物冷冻保存方法,在冷冻人类及动物的卵巢组织中取得了很大进步.相对于传统的程序化冷冻,玻璃化冷冻方法较简单,耗资少.然而,玻璃化冷冻法方案尚无与程序化冷冻方案一样的统一标准.综述国内外新型的玻璃化冷冻方法的研究进展,探讨如何选择合适的冷冻方法.     

一例囊胚玻璃化冷冻复苏移植术的护理体会

较低的胚胎种植率和较高的多胎妊娠率一直是辅助生殖技术未能很好解决的问题,单个囊胚移植将是今后辅助生殖技术的发展趋势。囊胚玻璃化冷冻法解决了传统的程序冷冻法对囊胚造成伤害的问题。2005年我院对一例不孕症患者行囊胚玻璃化冷冻复苏术获得成功,现将护理体会报告如下。1资料与方法1·1一般资料患者29岁,原发不孕5年,双侧输卵管梗阻,多囊卵巢综合症(PCOs),排卵障碍;男方精液正常。于2004年11月行试管婴儿手术失败,2005年9月17日行冷冻囊胚复苏移植术。1·2方法囊胚首先在20%自身血清的PBS中洗两次,再移入含10%乙二醇(EG)和10%二甲…     

中低强度激光人工皱缩在扩张期囊胚玻璃化冷冻复苏中的应用研究

目的通过中低强度激光人工皱缩囊胚腔联合快速玻璃化冷冻在囊胚冻融周期中的应用,为囊胚冷冻复苏周期提供稳定的技术基础。方法选取2015年9月-2017年3月在该院常规体外受精培养至第3天移植和或冷冻后剩余的可利用胚胎在三气培养系统中进行囊胚培养,参照Gardner囊胚评分标准,将发育至第5天或第6天的4CB以上的囊胚分成试验组和对照组。试验组采用中低强度激光打孔,使囊胚腔皱缩后行玻璃化冷冻,对照组直接行玻璃化冷冻。分析177例解冻囊胚周期,比较解冻囊胚周期两种方法冷冻复苏的复苏率、临床妊娠率、种植率、多胎妊娠率及流产率等。结果试验组解冻囊胚复苏率高于对照组,流产率、多胎率低于对照组,但差异无统计学意义(P0.05);试验组临床妊娠率、胚胎着床率显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.01);单囊胚移植多胎率显著低于双囊胚移植(P0.05)。结论应用中低强度激光人工皱缩囊胚腔联合玻璃化冷冻技术,能够提高囊胚冻融周期的胚胎复苏率、妊娠率、着床率,降低流产率、多胎率。     

人卵巢组织冷冻保存及应用研究进展

卵巢组织冷冻保存可保留年轻的恶性肿瘤和卵巢早衰患者的生殖内分泌功能.目前常用的冷冻方案包括程序化慢速冷冻和玻璃化冷冻.程序化慢速冷冻技术较成熟,已在多领域广泛应用;玻璃化冷冻是近十多年新发展起来的冷冻技术,有研究报道,其冷冻效果优于前者.冻融后卵巢组织主要用于移植和体外培养.卵巢组织自体移植已用于临床,并有成功分娩的报道;体外培养技术尚不成熟,仍处于研究阶段.文献人卵巢组织冷冻保存及其应用的研究进展.     

囊胚玻璃化冷冻的研究进展

随着序贯培养液的出现，囊胚移植被认为是提高胚胎种植率、降低多胎妊娠率的有效方法．因此囊胚冷冻愈显重要。囊胚的玻璃化冷冻因其简化了冷冻过程；避免细胞内冰晶形成所引起的一系列物理及化学损伤：并且在冷冻过程中可迅速通过临界温度区，减轻了胚胎冷冻中常见的冻伤现象，使存活率提高等优点，近几年得到逐步发展。现对囊胚玻璃化冷冻（vitrification）的原理、要领、现状及应用前景进行综述。     

卵巢玻璃化冷冻研究进展

玻璃化冷冻技术近年来在卵巢功能低温保存中已取得了可喜成绩,尤其是在卵细胞的冷冻保存中显示出其优越性.玻璃化技术可明显减少细胞内冰晶的形成,最大限度的降低细胞的损伤,但该技术尚不完善,卵细胞与卵巢组织的冷冻仍未达到令人满意的效果,很多问题还有待进一步的深入研究,如冷冻保护剂种类、浓度、程序、载体等.     

玻璃化冷冻保存人类早期胚胎的临床初步应用

目的：探讨玻璃化冷冻保存人类早期胚胎的临床应用效果。方法：对22例患者应用玻璃化冷冻保存技术冻存的82枚4～16细胞期的早期胚胎进行了解冻和移植。结果：82枚冷冻胚胎经解冻,存活65枚,存活胚胎均予移植,种植10枚,种植率为15.38%（10/65）,共进行了25个冷冻胚胎移植周期,获得8例妊娠,妊娠率32%（8/25）。结论：玻璃化冷冻保存技术是一种冷冻保存人类早期胚胎的有效方法,临床应用效果良好。     

人类卵巢组织冷冻与移植的研究进展

女性的卵巢功能可因外界各种刺激、疾病、衰老等而逐渐衰竭.在卵巢功能尚未完全丧失之前,冷冻保存与移植卵巢组织,是患者日后恢复内分泌及生育功能的一个新选择.该项技术适用于因疾病本身或疾病治疗过程中可能引起卵巢功能衰竭的患者.目前卵巢组织冷冻方案有慢速冷冻法、快速冷冻法和玻璃化冷冻法.移植方案可分为自体移植和异体移植,也可分为原位移植和异位移植.结合近年关于人类卵巢组织冷冻、移植的研究进展综述.