硫酸脱氢表雄酮对MIN6细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌的影响

目的探讨硫酸脱氢表雄酮(DHEAS)对胰岛β细胞株MIN6葡萄糖刺激的胰岛素分泌的影响。方法以葡萄糖刺激浓度为2.8mmol/L和16.7mmol/L的对数生长期MIN6细胞作为实验对象,分别以1、5、10μmol/LDHEAS干预10min和24h(不同浓度DHEAS组),以5μmol/LDHEAS或与10μmol/L糖皮质激素受体阻断剂RU486联合干预24h(DHEAS和DHEAS+RU486组),设立空白对照组。ELISA法测定细胞培养上清液中胰岛素分泌量,Real-TimePCR检测细胞胰岛素mRNA表达。结果干预后10min和24h时点,5μmol/L和10μmol/LDHEAS组MIN6细胞培养上清液中的胰岛素分泌量均显著高于空白对照组(P<0.05);干预后24h时点,DHEAS+RU486组与DHEAS组MIN6细胞培养上清液中胰岛素分泌量比较差异无统计学意义(P>0.05),但均显著高于空白对照组(P<0.05)。干预后24h时点,5μmol/L和10μmol/LDHEAS组MIN6细胞胰岛素mRNA表达均显著高于空白对照组(P<0.05)。结论 DHEAS对MIN6细胞葡萄糖刺激的胰岛素...     

硫酸脱氢表雄酮刺激MIN6细胞胰岛素分泌的机制研究

目的 初步探讨硫酸脱氢表雄酮(DHEAS)促进MIN6细胞胰岛素分泌的机制.方法 选用小鼠胰岛B细胞株MIN6作为实验对象,在葡萄糖浓度为2.8 mmol/L和16.7 mmol/L的条件下,分别以0.1、1、5、10、50μmol/L的DHEAS干预10 min和24h,采用ELISA法测定细胞培养上清液中胰岛素的含量,应用相关试剂盒检测细胞内三磷酸腺苷(ATP)和二磷酸腺苷(ADP)的生物发光水平及比率(ATP/ADP);采用Real-Time PCR法检测不同浓度DHEAS干预24 h的细胞内葡萄糖激酶(GCK) mRNA的表达.结果 两种葡萄糖浓度条件下,以5、10、50 μmol/L DHEAS干预10 min和24 h的MIN6的细胞培养上清液中胰岛素含量和细胞内ATP/ADP比率显著高于空白对照组(P＜0.05).与空白对照组比较,1、5、10、50 μmol/L DHEAS干预24 h的MIN6细胞内GCK mRNA表达显著上调(p＜0.05).结论 DHEAS可能通过增加ATP/ADP的比率,促进MIN6细胞胰岛素的分泌;干预24 h的效应可能与上调GCK mRNA的表达、促进葡萄糖酵解有关.     

脱氢表雄酮硫酸酯治疗男性骨质疏松症的临床观察

目的　观察脱氢表雄酮硫酸酯治疗男性骨质疏松症的疗效、安全性。方法　随机单盲对照观察脱氢表雄酮硫酸酯 (DHEAS)服用六个月前后骨密度 (BMD)、血生化指标、骨吸收指标和骨形成指标 ,副作用等方面的变化。结果　治疗后治疗组脱氢表雄酮硫酸酯 (DHEAS)、类胰岛素生长因子 Ⅰ (IGF Ⅰ )较治疗前分别提高 (93 75±16 1) %、(17 71± 4 2 ) % ,较对照组明显提高 (P <0 0 1)。腰 2、腰 3、腰 4的骨密度 (BMD)较治疗前分别提高(2 6 5± 0 6 2 ) %、(2 70± 0 4 8) %、(3 10± 0 4 1) % ,腰 2 - 4较治疗前提高 (2 82± 0 37) % ,股骨颈的BND较治疗前提高 (2 32± 0 32 ) %。腰 2、腰 3、腰 4、腰 2 4、股骨颈的BMD上升幅度较大与对照组差别有显著性 (P <0 0 5 ,0 0 1)。游离睾丸酮 (FT)、雌二醇 (E2 )、前列特异抗原 (PSA)则无明显影响。结论　脱氢表雄酮硫酸酯治疗男性骨质疏松症的疗效安全可靠 ,无不良反应。     

脱氢表雄酮硫酸酯治疗男性骨质疏松症的临床观察

目的　观察脱氢表雄酮硫酸酯治疗男性骨质疏松症的疗效、安全性. 方法　随机单盲对照观察脱氢表雄酮硫酸酯(DHEAS)服用六个月前后骨密度（BMD）、血生化指标、骨吸收指标和骨形成指标,副作用等方面的变化.结果　治疗后治疗组脱氢表雄酮硫酸酯(DHEAS)、类胰岛素生长因子-Ⅰ（IGF-Ⅰ）较治疗前分别提高（93.75±16.1）%、(17.71±4.2)%,较对照组明显提高（P<0.01）.腰2、腰3、腰4的骨密度（BMD）较治疗前分别提高（2.65±0.62）%、（2.70±0.48）%、（3.10±0.41）%,腰2-4较治疗前提高（2.82±0.37）%,股骨颈的BND较治疗前提高（2.32±0.32）%.腰2、腰3、腰4、腰2-4、股骨颈的BMD上升幅度较大与对照组差别有显著性（P<0.05 ,0.01）.游离睾丸酮（FT）、雌二醇（E2）、前列特异抗原（PSA）则无明显影响. 结论　脱氢表雄酮硫酸酯治疗男性骨质疏松症的疗效安全可靠,无不良反应.     

脱氢表雄酮对体外培养Burkit淋巴瘤细胞抗氧化能力影响的研究

目的：观察脱氢表雄酮（DHEA）对体外培养的Burkit淋巴瘤（Raji）细胞抗氧化能力的影响。方法：用一定浓度的DHEA作用于体外培养的Raji细胞，同时观察Raji在加用吩嗪硫酸甲酯（PMS）作用前后细胞内葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G-6-PD）、谷光甘肽过氧化物酶（GPX）、谷光甘肽还原酶（GR）活性及还原型谷胱甘肽（GSH）浓度的变化，并与未加DHEA作用的Raji细胞作对照。结果：DHEA浓度≥5．0μmol/L时能明显抑制Raji细胞G-6-PD活性，而对GPX、GR及GSH无明显影响；在氧化压力下（PMS作用）经DHEA处理后Raji细胞G-6-PD、GPX、GR活性无明显升高，细胞内GSH浓度显著降低（P〈0．01），并明显低于未经DHEA处理的Raji细胞（P〈0．05）。结论：一定浓度的DHEA能抑制Raji细胞G-6-PD活性，并降低其氧化应激能力。     

磷脂酶Cβ1过表达对葡萄糖刺激胰岛素分泌的影响

目的 观察过表达磷脂酶Cβ1(phospholipaae C β1,PLCβ1)对葡萄糖刺激胰岛素分泌(glucose-stimulated insulin secretion,GSIS)的影响.方法 ①设定葡萄糖浓度梯度:10、20、40、80、100 mmol/L,分别刺激INS-1细胞40 min,检测细胞培养上清液中胰岛素含量,确定最适的葡萄糖刺激浓度;设定时间梯度:20、40、60、80、120 min,以最适葡萄糖浓度刺激,检测胰岛素含量,确定最适的刺激时间.②以最适葡萄糖浓度刺激INS-1细胞适当时间后,RT-PCR检测PLCβ1表达变化.③构建PLCβ1真核表达载体(PCMV-HA-PLCβ1),转染INS-1细胞,Western blot检测INS-1细胞中PLCβ1蛋白的表达.④收集转染后INS-1细胞培养上清液,检测胰岛素含量.结果 用40 mmol/L葡萄糖刺激60 min,INS-1细胞的胰岛素分泌量最大;RT-PCR观察刺激后PLCβ1表达显著升高;过表达PLCβ1的INS-1细胞培养上清液中胰岛素含量为(1.906±0.080)ng/ml,较转染PCMV-HA载体的对照组(0.740±0.091)ng/ml显著升高(P<0.01).结论 过表达PLCβ1显著增加INS-1细胞的胰岛素分泌,提示PLCβ1可能参与GSIS信息传递.     

血清脱氢表雄酮水平与女性性早熟关系的探讨

目的:探讨血清脱氢表雄酮与女性性早熟之间的关系.方法:60例特发性中枢性早熟(ICPP)女童,62例单纯乳房早发育(PT )女童及31例与年龄匹配的青春前期健康女童,采用ELISA法测定血清脱氢表雄酮(DHEA) 及硫酸脱氢表雄酮(DHEAS)浓度,并对ICPP儿童进行达菲林治疗前、后的对比研究,随访其子宫、卵巢、骨龄及血清DHEA、DHEAS的变化.结果:①ICPP组血清Log(D HEA)、Log(DHEAS)为(0.81±0.36)μg/L,(2.31±0.31)μg/L,PT组为(0.72 ±0.30)μg/L,(2.31±0.28)μg/L,对照组为(0.32±0.26)μg/L(2.16±0.2 7)μg/L,三组比较差异有显著性意义(P<0.05);ICPP组与PT组两组之间比较差异无显著意义(P>0.05);TannerⅢ期的DHEA、DHEAS明显高于TannerⅡ期的DHEA、DHEA S,P<0.0 5.②经双变量相关分析,Log(DHEA)与身高、骨龄、子宫容积、卵巢容积呈正相关,与Lo g(LH峰值)、Log(FSH峰值)、体质指数(BMI)无相关性; Log(DHEAS)与身高、骨龄、卵巢容积呈正相关,与Log(LH峰值)、Log(FSH峰值)、子宫容积、BMI无相关性.③达菲林治疗3个月时,血清Log(DHEA)、Log(DHEAS)较治疗前明显下降 (P<0.05).治疗12个月时,血清Log(DHEA)、Log(DHEAS)与治疗前比较,差异无显著意义(P>0. 05),但子宫容积、卵巢容积、骨龄与年龄的比值治疗前、后比较差异有显著意义(P 均<0.05).结论:①性早熟女童血清DHEA和DHEAS水平增高,并随着Tanne r期的进展而升高;②血清DHEA和DHEAS水平随下丘脑-垂体-性腺轴的抑制,其浓度会有暂时性下降;③血清DHEA与性早熟女童生长加速、骨龄进展有关.     

男性2型糖尿病患者硫酸脱氢表雄酮与视网膜病变的关系

目的:探讨男性2型糖尿病(T2DM)患者血清硫酸脱氢表雄酮(DHEA-S)与糖尿病视网膜病变(DR)的关系。方法:应用1:1配对病例对照研究,男性T2DM合并DR患者12例为病例组(DR组),按年龄配对选择同期男性T2DM无DR者12例为对照组(NDR组),一对内年龄相差不超过1岁。测定两组血清DHEA-S、血脂血糖、体脂及血压等指标并进行分析。结果:NDR组及DR组血清DHEA-S分别为(1 689±435)ng/ml及(1 627±630)ng/ml,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:DHEA-S可能未参与男性T2DM患者DR的发生。     

微量水溶性维生素对胰岛素分泌的影响

目的研究各种微量水溶性维生素对胰岛素分泌的影响。方法每种水溶性维生素和混合的B族维生素配制成浓度为0、0、05、0．25、0．5和1μmol／L的不同维生素溶液,将维生素溶液添加于含葡萄糖0、8．3和16．7mmol／L的大鼠胰岛培养液中,孵化90min后测定胰岛素分泌量。结果维生素B1和维生素B6在0．25～1μmol／L浓度范嘲内埘秧岛索分泌没有影响;生物素和泛酸在16．7mmol／L的葡萄糖浓度条件下能刺激胰岛素的分泌;炯酸在16．7mmlol／L葡萄糖浓度条件下对胰岛素分泌有刺激作用,在8．3mmol／L葡萄糖浓度条件下则抑制胰岛素的分泌;叶酸、维生素C、维生素B2以及混合B族维生素在16．7mmol／L葡萄糖浓度条件下抑制胰岛素的分泌。结论水溶性维生素对胰岛素分泌的作用各不相同,胰岛素分泌量依赖于葡萄糖和维牛素的浓度。糖尿病患者应该注意食物中水溶性维生素的摄入。     

男性精神分裂症患者血清皮质醇、硫酸脱氢表雄酮水平与精神症状的相关性

目的 研究男性精神分裂症患者血清皮质醇和硫酸脱氢表雄酮水平（DHEA-S）与精神症状的相关性。方法 研究共纳入男性精神分裂症患者120例与年龄匹配的健康自愿者110例,对患者的临床基本信息（包括发病年龄、病史、阳性和阴性症状评分及非典型抗精神药物使用情况）进行收集;对患者治疗前后血清中皮质醇、DHEA-S水平进行检测,并计算了两者之间的比值;分析皮质醇、DHEA-S水平及比值与精神症状的相关性;并与健康自愿者对应指标进行对比分析。结果 治疗前患者血清中皮质醇、DHEA-S水平及比值显著高于正常对照组（P<0.01）;治疗后患者血清中皮质醇、DHEA-S水平显著低于治疗前,差异有统计学意义（P<0.01）,治疗前后比值差异无统计学意义（P>0.05）;相关性分析发现血清中皮质醇、DHEA-S水平及比值与阴性症状评分呈正相关。结论 皮质醇和DHEA-S水平紊乱可能是导致精神分裂症发病的原因,其水平可以作为疾病诊断和治疗有效性监测的生物学标志物。     

中国人葡萄糖兴奋胰岛素分泌的特点

目的 探讨中国人不同糖耐量状态下的葡萄糖兴奋胰岛素分泌的特点。方法 634例受试者分成两类亚组：1、以体块指数（BMI）25为切割点,分为正常体重组（NW）与超重/肥胖组（OW/OB）,并按空腹血糖水平的不同各分为7个亚组。2、根据BMI和糖耐量,把所有受试者分为以下6个亚组;正常体重、正常糖耐量组（NW-NGT）、正常体重-空腹血糖减损/糖耐量减退组（NW-IFG/IGT）、正常体重-糖尿病组（NW-DM）、超重/肥胖-正常糖耐量组（OW/OB-DM）。以口服葡萄糖耐量试验（OGTT）0-120min的平均胰岛素水平评价葡萄糖兴奋的胰岛素分汔功能,采用稳态模式评估法（HOMA）评价胰岛素抵抗（HOMA-IR）。结果 1、中国人空腹血糖与总体胰岛素分泌呈倒U字型曲线,正常体重者中总体胰岛素分泌高峰的空腹血糖值为5.9mmol/L;2、超重/肥胖伴正常糖耐量的个体总体胰岛素分泌最高;3、超重/肥胖个体伴IGT时,总体胰岛素分泌减退及胰岛素抵抗指数的持续升高。结论 1、中国人空腹血糖与总体胰岛同素分泌最高;3、超重/肥胖个体伴IGT时,总体胰岛素分泌减退,并伴胰岛素抵抗指数升高;4、超重/肥胖伴糖尿病时,同时存在进行性的总体胰岛素分泌功能的减退及胰岛素抵抗指数的持续升高。结论 1、中国人空腹血糖与总体胰岛素分泌呈倒U了型曲线,高峰较白种人前移,总体胰岛素分泌达峰值的空腹血糖水平比白种人低;2、中历人超重/肥胖个体中,NGT、IGT及DM三个亚组的总体胰岛同素分泌依次减退并伴有胰岛素抵抗的逐渐增强。     

骨形态发生蛋白7对胰岛素分泌的影响及机制研究

目的探讨骨形态发生蛋白7(bone morphorgenetic protein 7,BMP7)对胰岛细胞胰岛素分泌的影响。方法Western blot检测小鼠胰岛细胞株MIN6中3种BMP7的Ⅰ型受体BMPR1A、BMPR1B、ACVR1A的表达情况。将MIN6细胞分为4组:PBS对照组,重组人BMP7(rhBMP7)低、中、高剂量组(rhBMP7终浓度分别为10、50、100 ng/ml),每组设5个复孔。ELISA检测各组细胞培养基中的胰岛素分泌情况。激光共聚焦显微镜检测细胞内钙离子浓度变化。结果BMPR1A、BMPR1B、ACVR1A均表达于MIN6细胞。PBS对照组及rhBMP7低、中、高剂量组的胰岛素浓度分别为(0.42±0.11)、(0.63±0.22)、(0.82±0.19)、(1.24±0.26)ng/(ml.μg)。与对照组相比,rhBMP7低、中、高剂量组的胰岛素分泌均明显增加(P<0.05)。PBS对照组及rhBMP7低、中、高剂量组的细胞内钙离子浓度增加分别为(3.5±2.1)%、(4.2±2.3)%、(5.1±3.5)%、(4.9±2.7)%,4组间差异不显著(P>0.05)。结论 BMP7可显著促进胰岛细胞的胰岛素分泌,其作用机制可能是调控非钙离子浓度依赖的胞吐环节。     

S-雌马酚改善高糖培养条件下INS-1细胞胰岛素分泌功能的研究

目的 研究大豆甙元活性代谢产物S-雌马酚(S-equol,S-Eq)对高糖培养条件下大鼠胰岛素瘤(INS-1)细胞胰岛素分泌功能的影响.方法 采用26.2 mmol/L葡萄糖(高糖组,H)及葡萄糖分别与不同浓度S-Eq(0.1、1、10、100 μmol/L S-Eq+H组)干预INS-1细胞24 h,另设未干预的INS-1细胞为对照组(C).采用CCK-8检测细胞活力,ELISA法测定葡萄糖刺激胰岛素分泌(GSIS)功能,TUNEL法联合Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡,Real-time PCR和Western blot分别检测前胰岛素原(preproinsulin,PPI)、葡萄糖转运蛋白2(glucose transporter 2,Glut2)、线粒体阴离子载体解偶联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2) mRNA及蛋白表达.结果 S-Eq能显著增加高糖培养条件下INS-1细胞活力(P＜0.05),其中1μmol/L S-Eq效果最为明显.GSIS检测发现,与对照组比较,高糖处理后INS-1细胞胰岛素分泌显著降低,而S-Eq能显著增加高糖处理的INS-1细胞的胰岛素分泌(P＜0.05).同时,0.1、1、10 μmol/L S-Eq均能明显减少高糖培养条件下INS-1细胞凋亡,上调PPI mRNA、Glut2 mRNA和Glut2蛋白表达,而显著抑制UCP2 mRNA及其蛋白的表达(P＜0.05).结论 S-Eq可有效改善高糖培养条件下INS-1细胞胰岛素分泌功能,可能与抑制细胞凋亡,调节Glut2和UCP2表达有关.     

MIN6细胞中亲磷酸酯酶A1基因表达与胰岛素分泌关系的初步研究

目的 研究亲磷酸酯酶A1(PA-PLA1)基因在小鼠分泌胰岛素细胞株MIN6中的表达及其与胰岛素分泌的关系.方法 对MIN6细胞进行不同浓度和不同时间的葡萄糖刺激胰岛素分泌的实验,酶联免疫吸附法测定细胞上清液中胰岛素分泌量,实时荧光定量PCR检测相应条件下PA-PLA1 mRNA的表达水平,线性相关分析PA-PLA1 mRNA表达水平与胰岛素分泌的相关性.结果 在一定葡萄糖浓度范围内,PA-PLA1mRNA水平随着葡萄糖浓度的升高和刺激时间的延长而升高,并与细胞胰岛素分泌量呈明显的正相关.不同葡萄糖浓度和不同刺激时间的PA-PLA1 mRNA水平与胰岛素水平的相关系数r分别为0.89(P＜0.01)和0.98(P ＜0.01).结论 小鼠分泌胰岛素细胞株MIN6中PA-PLA1基因的表达与胰岛素分泌之间具有高度的正相关性.     

地骨皮、黄芪对胰岛素释放的作用

目的 :探讨地骨皮、黄芪对胰岛释放胰岛素的作用。方法 :取Wistar新生大鼠胰腺剪碎约 0 5mm ,随机分为三组 ,3 7℃CO2 培养箱培养 ,收集的培养液作胰岛素放免检测。结果 :地骨皮组胰岛素分泌最旺盛 ,与对照组有显著性差异 (P <0 .0 0 1) ;黄芪组胰岛素分泌较高 ,但与对照组无显著差异 (P >0 .2 )。结论 :黄芪和地骨皮对胰岛B细胞分泌胰岛素均有促进作用。地骨皮的促进作用强于黄芪     

IL-6促进胰岛细胞胰岛素分泌在PCOS发病机制中的作用

目的 探讨IL-6在多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)高胰岛素血症和胰岛素抵抗中的作用。方法 在体外培养的大鼠胰岛细胞培养液中加入10、100和1000pg/ml IL-6,于培养24、48、72h后,采用放射免疫法检测IL-6对胰岛细胞胰岛素分泌的影响。结果 培育48h时,1000pg/ml IL-6板孔中的胰岛素浓度高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);培育72h时,100、1000pg/ml IL-6板孔中的胰岛素浓度均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 IL-6在体外具有刺激胰岛细胞分泌胰岛素的作用,这可能与PCOS患者常出现高胰岛素血症、胰岛素抵抗现象有关。