银杏内酯A、B对高胆固醇诱导的PC12细胞胆固醇代谢的影响

[目的] 基于体外血脑屏障(BBB)环境, 观察高胆固醇环境下PC12细胞胆固醇的代谢情况及银杏内酯A、B对其的影响。[方法] 利用Transwell装置共培养星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞建立体外BBB, 并与PC12细胞共培养。在Transwell 内皮细胞侧添加40 μmol/L胆固醇, 并分别给予30 μmol/L 银杏内酯A和25 μmol/L 银杏内酯B进行干预。干预结束后, 采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术, 检测胆固醇代谢关键酶低密度脂蛋白受体相关蛋白-1(LRP-1)、胆固醇酰基转移酶(ACAT)、ATP结合盒转运子A1(ABCA1)及胆固醇24S-羟化酶基因(CYP46)在mRNA水平的表达。[结果] 高胆固醇环境下, LRP-1表达下调(P<0.01), ACAT 及ABCA1表达上调(P<0.05), CYP46的表达有上调趋势;药物干预后, 除LRP-1有不同程度的升高(P<0.05), 其余各指标均无明显变化。[结论] GKA、B对高胆固醇环境下PC12细胞胆固醇代谢关键酶LRP-1的表达有一定影响。     

银杏叶提取物EGB761对高胆固醇血症家兔血脑屏障通透性的影响*

[目的]观察银杏叶提取物EGB761对高胆陶醇血症家兔血脑屏障是否具有保护作用。【方法】以2％高胆阎醇饲料喂养雄性新西兰大白兔,建立高胆固醇血症家兔模型。模型建立后,用50mg／（kg&#183;d）EGB761灌胃3周作为EGB761组,以5mg／（kg&#183;d）辛伐他汀灌胃3周作为阳性药辛伐他汀组。干预结束后,耳缘静脉给予25g／L伊文思蓝（EB）,3h后麻醉,生理盐水心脏灌流后取材,通过比色法测定皮质、海马和嗅球EB含量。[结果]银杏叶提取物EGB761可以降低海马和嗅球EB含量,与模型组相比分别为P〈0．01、P〈0．05;与阳性药辛伐他汀疗效相比差异无显著性,P〉0．05。【结论】银杏叶提取物EGB761能够降低由高胆同醇血症导致的血脑屏障通透性。     

穿心莲内酯对HepG2细胞ACAT活性和基因表达的影响

目的探讨穿心莲内酯(andrographolide,AP)在Hep G2细胞中对胆固醇酰基转移酶(ACAT)活性和基因表达的影响。方法使用MTT法确定穿心莲内酯对Hep G2细胞生长无明显抑制的剂量。在此无毒剂量下展开实验,分别使用高效液相色谱法、荧光检测法和RT-q PCR技术测定细胞胆固醇含量、ACAT酶活性以及ACAT基因表达。结果 AP(质量浓度分别为40、80μg/m L)可以显著降低游离胆固醇(FC)和酯化胆固醇(CE)含量,明显抑制ACAT酶活性和ACAT2 mRNA表达。结论穿心莲内酯具有一定的抗动脉粥样硬化作用,其机制可能是通过下调肝脏中ACAT2 mRNA表达来降低ACAT活性。     

银杏叶提取物EGB761对高胆固醇血症家兔动脉粥样硬化的防治作用

目的:观察银杏叶提取物EGB761对高胆固醇血症家兔动脉粥样硬化斑块的影响.方法:首先建立高胆固醇血症家兔模型,然后用EGB761灌胃三周,剂量为50 mg/kg/d.以辛伐他汀作为阳性对照药,剂量为5 mg/kg/d.观察动脉粥样硬化斑块的形态学变化.结果:通过内眼和镜下形态学观察发现:银杏叶提取物EGB761可以有效改变高胆固醇血症家兔动脉粥样硬化斑块的组织学形态.结论:银杏叶提取物EGB761对高胆固醇血症家兔动脉粥样硬化具有防治作用.     

茶叶多糖对卵磷脂胆固醇酰基转移酶活性的影响

卵磷脂胆固醇酰基转移酶(EC 2.3.1.43)简称LCAT是由肝脏微粒体合成后分泌进入血液的,其主要作用是将卵磷脂C_2位上脂酰基转移至游离胆固醇(FC)分子的3位羟基上,生成胆固醇酯(CE)和溶血卵磷脂。     

卵磷脂胆固醇酰基转移酶对实验性高脂血症大鼠血清中高密度脂蛋白胆固醇和游离胆固醇分布的影响

用纯化的人血清卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)给实验性高脂血症大鼠腹腔注射,发现注射后大鼠血清中高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平明显升高,游离胆固醇(FC)水平明显下降,HDL-C/FC和HDL-C/总胆固醇(TC)比值明显升高,FC/TC比值明显下降。对LCAT可能具有防治动脉粥样硬化的作用进行了讨论。     

卵磷脂胆固醇酰基转移酶的研究进展

卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)是人体血浆脂蛋白代谢过程中起关键作用的一种酶,对维持胆固醇稳态、调节胆固醇在血液循环中的转运及胆固醇在外周组织中的清除有十分重要的作用。它能催化血浆中高密度脂蛋白(HDL)游离胆固醇的酯化,参与胆固醇逆向转运,在HDL的成熟代谢及动脉粥样硬化发生、发展过程中起重要作用,因此,对LCAT的深入探讨和研究,有利于心血管疾病的防治。     

卵磷脂胆固醇酰基转移酶缺陷症LCATG179R突变的初步研究

 目的 研究1个新近发现的卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)突变型LCATG179R对其编码蛋白正常功能的影响。方法 构建LCAT cDNA野生型和突变型表达载体,通过在HEK293细胞中瞬时表达,测定细胞合成的LCAT的活性,并通过实时定量PCR测定内质网应激相关基因的表达情况。结果 成功构建载体,野生型LCAT酶活力明显高于突变型LCATG179R,且表达突变型LCATG179R的细胞的内质网应激相关基因表达量明显升高。结论 LCAT突变型G179R会导致该酶的活力降低,可能与该突变型蛋白的异常结构有关。携带此种基因突变的患者有患LCAT缺陷症的可能。     

银杏叶提取物EGB761对高胆固醇血症家兔血脑屏障通透性的影响

[目的]观察银杏叶提取物EGB761对高胆陶醇血症家兔血脑屏障是否具有保护作用。【方法】以2％高胆阎醇饲料喂养雄性新西兰大白兔，建立高胆固醇血症家兔模型。模型建立后，用50mg／（kg·d）EGB761灌胃3周作为EGB761组，以5mg／（kg·d）辛伐他汀灌胃3周作为阳性药辛伐他汀组。干预结束后，耳缘静脉给予25g／L伊文思蓝（EB），3h后麻醉，生理盐水心脏灌流后取材，通过比色法测定皮质、海马和嗅球EB含量。[结果]银杏叶提取物EGB761可以降低海马和嗅球EB含量，与模型组相比分别为P〈0．01、P〈0．05；与阳性药辛伐他汀疗效相比差异无显著性，P〉0．05。【结论】银杏叶提取物EGB761能够降低由高胆同醇血症导致的血脑屏障通透性。     

PMA促进人单核细胞分化及ACAT1基因表达

目的研究人单核细胞系在佛波酯（PMA）作用下分化为巨噬细胞的过程中酰基CoA：胆固醇酰基转移酶1（ACAT1）活性的改变及其机制。方法体外培养人THP-1单核细胞系，PMA作用使其分化为巨噬细胞。以放射性同位素标记底物法检测ACAT1活性．用Western blot法和RT—PCR法分别检测ACAT1蛋白和mRNA。结果PMA使THP-1单核细胞的形态和生长状态巨噬细胞化．在此过程中ACAT1 mRNA和蛋白明显增加（P〈0．01），酶活性升高（P〈0．05）。结论PMA可促进单核细胞分化为巨噬细胞，上调ACAT1基因的表达，促进酶活性提高。     

酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶在结肠癌中的表达及临床意义

目的研究酰基辅酶A- 胆固醇酰基转移酶1（ACAT1）和酰基辅酶A- 胆固醇酰基转移酶2（ACAT2）在结肠癌中的表达及临床意义。方法收集60 例结肠癌患者的结肠癌组织、癌旁组织和正常肠道黏膜组织,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、免疫组织化学法分别检测3 组组织中ACAT1 和ACAT2 的基因和蛋白表达水平,采用SPSS 20.0 软件分析其表达量与结肠癌患者临床病理因素之间的关系。结果结肠癌组织中ACAT1 和ACAT2 在基因和蛋白水平的表达量与癌旁组织和正常肠道黏膜比较,差异有统计学意义（P <0.05）,结肠癌组织高于另外两组。ACAT1 和ACAT2 的基因表达与患者的年龄、Duke 分期、组织分化程度相关,且二者在结肠癌组织中的表达相关（P <0.05）。结论ACAT1 和ACAT2 在结肠癌组织中呈高表达,且与患者的部分临床病理特征相关,对临床上早期诊断结肠癌有一定的参考价值。     

卵磷脂胆固醇酰基转移酶活性的简易测定法

用两酶(胆固醇氧化酶和辣根过氧物酶)系统测定血清在37℃保温40min后游离胆固醇的减少量,以表示卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)的活性(胆固醇酯化量每小时nmol/ml血清)。操作简便、准确、重复性好(CV<3％)。我们应用此法测定了四氧嘧啶性糖尿病大鼠和正常大鼠血清LCAT的活性分别为82.72±6.3和52.80±3.3(±SE),前者显著高于后者(p<0.001),与文献报道一致。     

人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶2研究进展

酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶(ACAT)是细胞内惟一合成胆固醇酯的酶,在细胞和生物体胆固醇代谢平衡中起着重要作用。在哺乳动物细胞中存在两种基因编码的ACAT(ACAT1和ACAT2)。ACAT2选择性地在肝脏及小肠细胞中表达,参与胆固醇的吸收和载脂蛋白的装配。本文主要介绍ACAT2的生理功能和病理作用,概述ACAT2的研究进展。     

野马追总黄酮对实验性高脂血症大鼠脂代谢的影响

目的 探讨野马追总黄酮对实验性高脂血症大鼠脂代谢的影响及其降脂机制.方法 将60只SD大鼠随机分为空白对照组,高脂模型组,阳性药物(辛伐他汀片)对照组,野马追大、中、小剂量组,除空白对照组外,各组灌服高脂乳剂同时给予相应的药物60 d,观察野马追总黄酮对大鼠血脂水平,游离胆同醇(FCH)、游离脂肪酸(FFA)、脂蛋白脂酶(LPL)、肝脂酶(HL)、卵磷脂胆同醇酰基转移酶(LCAT)活性以及肝脏低密度脂蛋白受体(LDLR)基因表达的影响.结果 野马追总黄酮能显著降低高脂模型大鼠血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)水平,升高高密度脂蛋白.胆固醇(HDL-C)水平,提高LCAT、LPL和HL活性;RT-PCR实验显示高脂模型大鼠肝脏LDLR mR-NA表达降低,野马追总黄酮能显著上调高脂血症大鼠肝脏LDLR mRNA水平.结论 野马追总黄酮可能通过促进外周组织细胞中的胆固醇向肝脏转运,激活脂代谢相关酶的活性,促进肝脏LDLR mRNA的表达来调节脂质代谢紊乱.     

慢性肾炎常见证型的血清卵磷脂胆固醇酰基转移酶及高密度脂蛋白含量分析

目的探讨慢性肾小球肾炎 (CGN)患者常见中医证型的血清卵磷脂胆固醇酰基转移酶 (LCAT)活性水平与高密度脂蛋白亚组分 (HDL亚组分 )含量及意义。方法选择CGN患者 95例 ,中医证型分为肺肾气虚 1 6例 ,脾肾阳虚 2 7例 ,肝肾阴虚 3 2例 ,气阴两虚 2 0例。正常对照组 3 0例 ,采用改良Sperry自身底物法检测LCAT活性。结果CGN 4个不同中医证型中LCAT活性及HDL亚组分含量与正常对照组比较有非常显著性意义 (P <0 .0 5 ) ,且各证型之间LCAT活性水平均有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论LCAT活性水平可作为CGN肺肾气虚、气阴两虚、肝肾阴虚、脾肾阳虚型辨证诊断的参考指标。     

胆固醇酯与动脉粥样硬化

研究人员在90年代初便发现胆固醇是动脉粥样硬化斑块的一种成分。该发现促使人们认识到高胆固醇血症在动脉粥样硬化发生过程中起重要作用。在哺乳动物中,胆固醇以一种甾醇或脂肪酸酯形式存在(胆固醇通过一种酯与任何长链脂肪酸结合而连接在一起)。在动脉斑块中蓄积的大多数胆固醇都是以酯的形式存在,并且是通过产生斑块的细胞(如巨噬细胞)从渗入的血浆脂蛋白中衍生出来的。经过长期研究后,研究人员分离出完成细胞内胆固醇酯化作用的这种酶(即酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶,ACAT),随后导致酰基转移酶ACAT家族的发现,其中包括ACAT-1、ACAT-2和一种甘油三酯合成酶,即二酰基甘油酰基转移酶(diacylglyc-erol acyktransferass,GDAT)。ACAT-1和ACAT-2与卵磷脂:卵磷脂-胆固醇酰基转移酶(LCAT)结合     

Visfatin诱导THP-1源性泡沫细胞形成的机制研究

目的观察内脂素(visfatin)对人单核细胞株(THP-1)源性巨噬细胞胆固醇代谢相关基因ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)和酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)表达的影响,探讨visfatin诱导THP-1源性泡沫细胞形成的机制。方法 THP-1单核细胞诱导分化为巨噬细胞,随机分组,给予不同浓度和不同作用时间的visfatin进行干预,分别运用油红O染色观察细胞质脂滴变化,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和蛋白免疫印迹(Western blot)法检测各组细胞ABCA1及ACAT1 mRNA和蛋白表达,酶荧光学法检测细胞内总胆固醇(TC)和游离胆固醇(FC)含量,TC与FC之差为胆固醇酯(CE)含量。结果与对照组比较,visfatin干预组细胞质脂滴明显增多,细胞内FC和CE含量增加(均P<0.05),CE与TC的比值明显增加(>50%),ABCA1 mRNA和蛋白表达水平降低(均P<0.05),ACAT1 mRNA和蛋白表达水平升高(均P<0.05)。相关分析显示,visfatin呈浓度和时间依赖性下调ABCA1 mRNA和蛋白的表达,上调ACAT1 mRNA和蛋白的表达。结论 visfatin下调巨噬细胞ABCA1的表达,上调ACAT1的表达,使细胞内FC流出减少,CE合成增加,从而诱导THP-1源性泡沫细胞的形成,这可能为visfatin致动脉粥样硬化发病机制的研究提供一个新的理论依据。     

银杏叶提取物EGB761对AS家兔PON-1和ox-LDL的影响

[目的]观察银杏叶提取物EGB761对动脉粥样硬化家兔对氧磷酶-1(PON-1)和氧化低密度脂蛋白(oxLDL)的影响。[方法]将24只日本大耳白兔随机分为正常组、模型组、EGB761组(n=8)。正常组给予普通饮食,模型组和EGB761组高脂饮食10周。EGB761组从第7周起给予EGB761 50 mg/(kg·d)灌胃4周,正常组和模型组给予等量生理盐水。采用酶免疫吸附法(ELISA法)和生化法检测PON-1的活性和含量,ELISA法检测ox-LDL的含量。[结果]模型组PON-1活性和含量明显降低(P0.05),ox-LDL的含量明显升高,银杏叶提取物组PON-1活性和含量明显升高,ox-LDL明显降低(P0.05)。[结论]银杏叶提取物EGB761降低ox-LDL、抗动脉粥样梗化(AS)的机制可能与其上调PON-1活性和含量有关。     

红丝线草提取物对高血压并发高脂血症模型大鼠调脂作用的研究

目的:观察红丝线草提取物对肾性高血压并发高脂血症大鼠( RHHR)血清脂质、一氧化氮( NO)、总抗氧化能力( T- AOC)及卵磷脂胆固醇酰基转移酶( LCAT)活性的影响。方法:采用双肾双夹结合高脂乳剂灌胃法复制RHHR模型。大鼠造模后,连续5周灌胃给予红丝线草提取物,并于给药第5周末处死大鼠,取血测血清脂质、总抗氧化能力及卵磷脂胆固醇酰基转移酶活性。结果:红丝线草提取物高、低剂量和辛伐他汀均可明显降低RHHR血清中的总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇,同时明显升高血清高密度脂蛋白胆固醇水平;红丝线草提取物高、低剂量明显提高血清NO含量、总抗氧能力和LCAT的活性。结论:红丝线草提取物对RHHR具有明显的调脂作用,其作用与提高血清LCAT活性、NO含量和总抗氧化能力有关     

载脂蛋白A-I多态性研究

用DEAE-52离子交换层析分离到载脂蛋白的A-I(apo A-I)的多态性。方法简便快速,制备量大。SDS-PAGE证实为纯apoA-I,分子量约28000。此多态性中apoA-I_1apoA-I_2、apoA-I_3是卵磷脂-胆固醇酰基转移酶(LCAT)的激活剂,apoA-I4则是LCAT的抑制剂。对其中的apoA-I_2进行氨基酸组成分析,发现不含半胱和异亮氨酸。apoA-I多态性的免疫电泳结果表明,各多态性与apoA-I_2抗体有免疫沉淀反应,说明多态性抗原部位相同。