基于p38 MAPK/NF-κB通路探索荆防合剂治疗甲型H1N1流感的作用机制北大核心CSCD

目的:基于p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路研究荆防合剂治疗甲型流感的分子机制。方法:将36只Balb/c雌鼠随机分为正常对照组、模型对照组、磷酸奥司他韦0.026 g/kg组、荆防合剂3.9、7.8、15.6 g/kg组,每组6只,适应性饲养3 d后进行造模处理,模型对照组和各给药组滴鼻流感病毒,正常对照组滴鼻等体积的生理盐水。小鼠于感染后第7 d摘取眼球血,测定肺指数,用苏木精-伊红染色(HE)法观察肺部病变情况;用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、IL-4、IL-10含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肺组织病毒载量及p38 MAPK/NF-κB信号通路相关基因表达,蛋白免疫印迹技术(Western blot)检测肺组织中蛋白表达。结果:造模后,与正常对照组相比,模型对照组肺指数显著增大,肺病毒载量的相对表达量显著升高(P<0.01),血清IFN-γ、IL-2、IL-10含量显著升高,IL-4含量显著降低(P<0.01),肺组织p38 Mapk、Nfkb p65、Ikba mRNA及蛋白表达显著上调(P<0.01);与模型对照组相比,给药后,HE染色显示肺组织病理状况得以改善,荆防合剂可明显降低血清IFN-γ、IL-2、IL-6含量(P<0.05或P<0.01),升高IL-4含量(P<0.01),Real-time PCR和Western blot结果显示荆防合剂可通过下调肺组织p38 MAPK/NF-κB信号通路相关基因或蛋白表达从而发挥抗甲型流感作用。结论:荆防合剂对感染甲型流感小鼠具有保护作用,可能与调控p38 MAPK/NF-κB信号通路,发挥抗炎及免疫调节等作用有关。     

三子养亲汤、桃红四物汤单用及联用治疗哮喘大鼠作用的比较

目的 比较三子养亲汤、桃红四物汤单用及联用对哮喘大鼠的作用效果。方法 SD大鼠以卵清白蛋白(OVA)致敏激发复制模型,并予药物进行干预。采用ELISA法检测肺泡灌洗液(BALF)中γ干扰素(IFN-γ)、白介素4(IL-4)含量,并用Western Blot法检测肺组织中磷酸化p38蛋白激酶(p38 MAPK)的表达水平。结果 与正常对照组比较,模型组大鼠BALF中IL-4含量明显升高(P ＜ 0.01),IFN-γ含量明显降低(P ＜ 0.01),IFN-γ/IL-4比值下降(P ＜ 0.01);与模型组比较,各药物组IL-4水平下降、IFN-γ水平提高,IFN-γ/IL-4比值升高,差异均有统计学意义(P ＜ 0.05,P ＜ 0.01);化痰活血方组与三子养亲汤及桃红四物汤组比较,差异均有统计学意义(P ＜ 0.05,P ＜ 0.01)。模型组大鼠肺组织磷酸化p38 MAPK表达较正常对照组明显增加(P ＜ 0.01),各药物组磷酸化p38 MAPK表达下降,且化痰活血方组与三子养亲汤组、桃红四物汤组比较,差异均有统计学意义(P ＜ 0.05,P ＜ 0.01)。结论 三子养亲汤、桃红四物汤联用组成的化痰活血方对哮喘大鼠的治疗作用优于单用,可能与抑制p38 MAPK磷酸化,调节Th1/Th2平衡有关。     

小檗碱通过抑制Th1恢复IFN-γ/IL-4平衡减轻迟发型超敏反应

目的:观察小檗碱对卵清蛋白(ovalbumin,OVA)诱导的迟发型超敏反应(delayed type hypersensitivity,DTH)模型小鼠的作用并探讨其机制。方法:32只小鼠随机分为对照组、DTH组、小檗碱组、DTH+小檗碱组,制备DTH模型给予小檗碱处理;测量小鼠足垫肿胀厚度,苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)法观察炎性细胞浸润,酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测足垫组织匀浆中γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-4(interleukin-4,IL-4)的表达,制备脾脏单个核细胞,刀豆蛋白(concanavalin A,Con A)实验观察IFN-γ水平,卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏实验检测上清IFN-γ、IL-4表达。结果:小檗碱处理明显降低小鼠足垫肿胀程度,减少炎症细胞浸润,抑制足垫组织中IFN-γ、TNF-α炎性因子释放,并减少脾脏组织中IFN-γ的分泌,抑制Th1反应,恢复IFN-γ/IL-4平衡(P<0.01,P<0.001),差异均有统计学意义。结论:小檗碱通过抑制Th1反应,恢复IFN-γ/IL-4平衡发挥对迟发型超敏反应的抑制作用。     

补肾解毒方调控IL-12、IFN-γ水平对辐射后小鼠免疫防护作用研究

目的:探讨补肾解毒方对辐射后小鼠血清白细胞介素-12(IL-12)、干扰素-γ(IFN-γ)分泌水平的影响。方法:将90只小鼠随机分为空白组、辐射组、氨磷汀组、补肾解毒方防治结合组和补肾解毒方预防组,每组18只,并建立各组小鼠模型。在实验开始后第11天,除空白组外所有小鼠均接受一次性4Gy 60Coγ射线全身辐照,并于辐射后第1天、第7天、第14天每组随机抽取6只进行眼球取血,分离血清,应用ELISA法检测血清中IL-12、IFN-γ水平。结果:辐射后第1天,氨磷汀组IL-12水平高于辐射组(P<0.05),各组间IFN-γ水平无差异;辐射后第7天,防治组IL-12水平高于辐射组(P<0.05),防治组IFN-γ水平高于辐射组与氨磷汀组(P<0.01,P<0.05),预防组IFN-γ水平高于辐射组(P<0.05),空白组IFN-γ水平高于辐射组和氨磷汀组(P<0.05);辐射后第14天,各组IL-12、IFN-γ水平均无差异。结论:辐射后补肾解毒方可通过提高分泌血清中IL-12和IFN-γ的水平,起到增强辐射后小鼠免疫系统防护作用。     

当归水煎液对刀豆蛋白A诱导急性肝损伤小鼠的保护作用

目的:研究当归水煎液对刀豆蛋白A(concanavalin A,Con A)诱导小鼠急性肝损伤的保护作用。方法:6~8周龄C57BL/6雄性小鼠,采用目内眦静脉注射Con A方法制备急性肝损伤小鼠致死模型,同时给予当归水煎液口服灌胃,观察小鼠生存率;制备急性肝损伤非致死模型,10 h后检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平并进行病理染色,3h、10 h后采用流式CBA(Cytometric Bead Array,CBA)方法,检测血清细胞因子水平,造模3 h后采用实时定量PCR检测肝脏诱导型一氧化氮合成酶(i NOS)mRNA表达水平,造模6 h后检测脾脏IFN-γmRNA表达水平。结果:与Con A模型组比较,给予当归水煎液治疗后生存率显著升高,肝组织病理损伤减轻,血清ALT、AST水平降低。当归水煎液治疗后血清炎性细胞因子IL-12、IL-6和IFN-γ降低,肝脏i NOS mRNA表达水平降低,但对脾脏IFN-γmRNA表达水平无明显作用。结论:当归水煎液对Con A诱导急性肝损伤小鼠具有抗炎和保肝作用。     

不同穴位针刺对进行性力竭游泳大鼠免疫平衡的保护作用

目的:观察"足三里"或"血海"穴位针刺对大强度运动大鼠免疫失衡的干预作用,探讨不同穴位的相对特异性。方法:32只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、血海组与足三里组,每组8只。其中模型、血海、足三里组进行为期13 d的递增负荷游泳训练,血海、足三里组每日训练结束20 min后进行20 min的穴位针刺干预。各组大鼠实验结束后8 h取股动脉血与脾脏,采用ELISA法测定血清干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-4(IL-4)含量,用电子天平称重脾脏。结果:与模型组比较,血海组、足三里组第1次力竭游泳时间延长(P<0.01,P<0.05)。与正常组相比,模型组脾脏指数及血清IFN-γ、IFN-γ/IL-4水平均降低(P<0.01,P<0.05);与模型组相比,血海组与足三里组血清IL-4含量降低(P<0.05,P<0.01),足三里组IFN-γ、IFN-γ/IL-4水平升高(P<0.05,P<0.01);足三里组血清IFN-γ含量高于血海组(P<0.05)。结论:针刺"足三里"能延长进行性力竭游泳大鼠的力竭时间,上调血清IFN-γ含量和IFN-γ/IL-4比例,这可能与其纠正大强度运动所导致的Th1/Th2失衡有关;针刺"足三里"的效果比"血海"明显。     

益肝胶囊对免疫性肝损伤小鼠保护作用及细胞因子表达的影响

目的:研究益肝胶囊对免疫性肝损伤小鼠的保护作用,并探讨其可能的药理学机制。方法:采用刀豆蛋白A(Con A)建立小鼠免疫性肝损伤模型,灌胃给予不同浓度的益肝胶囊14 d后,取材检测肝脏指数和脾脏指数;生化法检测血清中天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性;HE染色观察肝组织病理学变化;ELISA法检测血清中细胞因子IL-6、TNF-α和IFN-γ水平。结果:益肝胶囊能明显降低肝损伤模型组小鼠肝指数和脾指数,降低血清中AST和ALT活性,减少肝组织中炎细胞浸润和肝细胞坏死,抑制IL-6、TNF-α和IFN-γ表达。结论:益肝胶囊可能通过抑制炎性细胞因子IL-6、TNF-α和IFN-γ水平,从而对Con A所致免疫性肝损伤小鼠起到保护作用。     

补中益气汤对脾虚型复发性口腔溃疡小鼠IL-2 IFN-γ表达的影响

目的：通过观察实验小鼠口腔溃疡情况及检测外周血血清中IL-2、IFN-γ水平,来评价补中益气汤对实验性脾虚型复发性口腔溃疡小鼠的治疗效果,探讨其作用机制,从而进一步为临床应用提供理论依据。方法：①先用限制饮食和过度劳倦法建立小鼠脾虚模型,然后用抗代谢化疗药甲氨喋呤腹腔注射,3种方法联合应用复制小鼠脾虚型口腔溃疡模型;②检测各组小鼠外周血中IL-2、IFN-γ水平。并取正常及有损伤的口腔黏膜组织,做病理检查;③再将剩余模型小鼠随机分为补中益气汤治疗组和生理盐水对照组,观察每组小鼠一般症状体征及口腔溃疡变化情况,检测IL-2、IFN-γ含量。结果：模型小鼠口腔黏膜可见黏膜有上皮层坏死、脱落,表面覆盖大量中性粒细胞和纤维性渗出物,黏膜伴见炎症细胞浸润;模型组血清IL-2、IFN-γ含量水平显著下降（P〈0.01）;补中益气汤治疗组一般情况恢复快,口腔溃疡愈合快,复发少,IL-2、IFN-γ水平显著升高。结论：①补中益气汤可以显著改善脾虚症状,促进溃疡愈合,减轻症状,减少溃疡复发;②补中益气汤可以升高IL-2、IFN-γ,增强机体免疫功能;③脾虚型复发性口腔溃疡的发生与免疫功能下降有着重要的关系。     

加味四逆汤抗免疫性肝损伤的作用机制

目的:研究加味四逆汤保护免疫性肝损伤和T淋巴细胞在其中的作用。方法:将健康雌性NIH小鼠50只,随机分为5组:正常对照组、刀豆蛋白A(Con A)模型组、联苯双酯组(LB,150 mg·kg-1)、加味四逆汤高、低剂量(120,240 mg·kg-1)组。所有的小鼠均经尾静脉注射Con A(18 mg·kg-1)来建立急性免疫性肝损伤动物模型,在造模成功12 h后摘取小鼠眼球采血。通过流式细胞术测定全血中CD4+,CD8+T细胞亚群,并以酶联免疫(ELISA)法测定血清中天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)的活性和肿瘤坏死因子-α(TNF-α),γ-干扰素(IFN-γ)和白介素-10的水平。结果:模型组小鼠血清ALT,AST活性和TNF-α,IFN-γ水平明显高于正常组(P<0.01),全血中CD4+,CD8+比率较正常对照组明显下降(P<0.05);与模型组比较,加味四逆汤高、低剂量组均能降低Con A介导的肝损伤小鼠血清中AST,ALT的活性(P<0.05),剂量组间差异无统计学意义;且能明显降低模型组血清中已升高的炎性细胞因子IFN-γ,TNF-α的含量(P<0.05,P<0.01),而提高肝损伤中已经降低的抗炎因子IL-10的活性和T细胞亚群CD4+,CD8+的比率(P<0.05)。结论:加味四逆汤对免疫性肝损伤具有保护作用,其作用机制可能通过调整T细胞亚群的活性、减少炎性细胞因子和增加抗炎细胞因子的释放有关。     

中药泻火养阴散对Graves’病患者 Th1/Th2细胞因子平衡的影响

目的:观察中药泻火养阴散对Graves’病(GD)患者外周血Th1/Th2细胞因子平衡的影响。方法:50例初发GD患者随机分为2组:单用他巴唑治疗组25例(A组),泻火养阴散联用他巴唑治疗组25例(B组);另设正常对照组20例(C组)。采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测GD患者治疗前后及正常人外周血γ干扰素(IFN-γ)和白介素-4(IL-4)水平。以IFN-γ/IL-4作为反映Th1/Th2细胞因子的指标。结果:初发GD患者与正常组比较,血清IFN-γ,IL-4水平及IFN-γ/IL-4均显著升高(P<0.01);治疗后GD患者与治疗前比较,血清IFN-γ水平降低(P<0.01),血清IL-4水平降低(P<0.05);IFN-γ/IL-4比值降低(P<0.01);与A组治疗后比较,B组治疗后血清中IFN-γ水平(7.87±1.62)vs(8.96±1.87)ng.L-1及IFN-γ/IL-4更低,差异有显著性意义(P<0.01)。结论:中药泻火养阴散可使Graves’病患者血清中IFN-γ水平(1.53±0.11)vs(1.61±0.18)ng.L-1降低,IFN-γ/IL4比值降低,通过调节Th1和Th2类细胞因子的表达来调整Th1/Th2平衡,改善GD患者的免疫失衡状态。     

金银花、连翘对大肠杆菌感染模型小鼠血清Th1/Th2细胞因子的调节作用

目的探讨金银花、连翘对大肠杆菌感染小鼠的保护作用机制。方法将雌性昆明种小白鼠随机分为金银花组和连翘组,每组再分为正常组、中药组、模型组和治疗组4个亚组进行处理,观察小鼠的临床状态,双抗体夹心法酶联免疫吸附实验(Elisa)检测血清γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-10(IL-10)的表达水平。结果金银花(0.01 kg/L)、连翘(0.01 kg/L)水煎液对小鼠大肠杆菌的感染有保护作用。与正常组及中药组比较,模型组与治疗组小鼠血清IFN-γ、IL-4表达及IFN-γ/IL-4、IFN-γ/IL-10比值均显著升高(P均<0.01);金银花治疗组较模型组IL-10表达显著升高(P<0.05),IFN-γ表达与IFN-γ/IL-4比值有升高趋势,IL-4表达和IFN-γ/IL-10比值有下降趋势;连翘治疗组较模型组IFN-γ和IL-4表达以及IFN-γ/IL-10比值有下降趋势,IL-10表达和IFN-γ/IL-4比值有升高趋势,但均无显著性差异(P>0.05)。结论感染模型小鼠辅助性T淋巴细胞1型/2型(Th1/Th2)细胞因子分泌亢进,Th1/Th2平衡有向Th1型漂移的特点。金银花、连翘水煎液均能有效保护感染模型小鼠,其调节小鼠的免疫功能可能与调节Th1/Th2平衡相关。     

双黄连口服液对3型鼠肝炎病毒致急性肝衰竭模型C57BL/6J裸小鼠的保护作用机制研究

目的观察双黄连口服液对3型鼠肝炎病毒(MHV-3)致裸小鼠急性肝衰竭(ALF)模型的影响,探讨其可能作用机制。方法将32只C57BL/6J裸小鼠随机分为正常组、急性肝衰竭组、双黄连低剂量组和双黄连高剂量组,每组8只。除正常组外,其余组均采用腹腔注射MHV-3建立急性肝衰竭模型。建模成功后,双黄连低剂量组和双黄连高剂量组分别给予0.25 mL/(10 g·d)和0.5 mL/(10 g·d)双黄连口服液灌胃,正常组、急性肝衰竭组分别给予等体积生理盐水灌胃,均1次/d,连续灌胃28 d。取静脉血检测天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷氨酰转移酶(GGT)、总胆红素(TBil)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、胆汁酸(TBA)水平,取肝脏组织检测干扰素-γ(IFN-γ)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-9(IL-9)表达水平。结果急性肝衰竭组小鼠血清AST、GGT、TBil、ALT、TBA水平和肝组织中IFN-γ、TNF-α、TGF-β1、IL-1β、IL-6、IL-9表达水平均显著高于正常组(P均<0.05);双黄连高剂量组和双黄连低剂量组小鼠血清AST、GGT、TBil、ALT、TBA水平和肝组织中IFN-γ、TNF-α、TGF-β1、IL-1β、IL-6、IL-9表达水平均显著低于急性肝衰竭组(P均<0.05),且双黄连高剂量组各指标水平均显著低于双黄连低剂量组(P均<0.05)。结论双黄连口服液对MHV-3致C57BL/6J裸小鼠急性肝衰竭具有保护作用,主要体现在改善肝功能并抑制细胞因子合成、减轻炎症性肝损伤方面。     

吴茱萸碱对结肠炎大鼠炎性树突状细胞的调控作用

目的探讨吴茱萸碱(Evodiamine,Evo)对溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)大鼠炎性树突状细胞(Inflammatory dendritic cells,infDCs)的调控作用。方法将SD大鼠随机分为6组,即正常组、模型组、Evo高剂量组(40 mg·kg^-1)、Evo中剂量组(20 mg·kg^-1)、Evo低剂量组(10 mg·kg^-1)及美沙拉嗪组(150 mg·kg^-1),每组8只。除正常组外其余各组采用三硝基苯磺酸(TNBS)-乙醇复合法进行造模。造模24 h后按照相应剂量灌胃给药,连续给药7 d。给药结束后,称定大鼠体质量,处死并分离结肠组织,测量长度,称定质量,计算结肠质量指数;采用HE染色进行结肠组织病理学观察;分离派氏淋巴结和肠系膜淋巴结,采用流式细胞术检测CD11c^+CD103^+E-cadherin+T细胞数量;ELISA法测定大鼠结肠组织匀浆中干扰素-γ(IFN-γ)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)及白细胞介素-2(IL-2)水平。结果与正常组比较,模型组大鼠的体质量及结肠长度均明显降低或缩短(P<0.01),结肠质量、结肠质量指数明显升高(P<0.05,P<0.01);结肠组织CD11c^+CD103^+E-cadherin+T细胞数量显著增加(P<0.01);IL-6、ICAM-1水平明显升高(P<0.05),IFN-γ水平明显降低(P<0.05)。与模型组比较,各给药组的结肠质量、结肠质量指数均明显降低(P<0.05),Evo高剂量组的大鼠体质量明显升高(P<0.05),Evo高、低剂量组的大鼠结肠长度明显增加(P<0.05);各给药组的大鼠结肠组织CD11c^+CD103^+E-cadherin+T细胞数量显著降低(P<0.05,P<0.01),IL-10水平明显升高(P<0.05,P<0.01),ICAM-1、IL-2明显降低(P<0.05,P<0.01);Evo高、中剂量组的IL-6明显降低(P<0.05,P<0.01);Evo中、低剂量组的IFN-γ水平明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论吴茱萸碱可能通过降低infDCs细胞数量,下调IL-2、ICAM-1、IL-6表达,上调IL-10、IFN-γ表达,从而发挥治疗UC的作用。     

隐丹参酮通过抑制p38 MAPK/NF-κB通路改善哮喘气道炎症

目的探究隐丹参酮(CTS)对哮喘小鼠气道炎症的影响,并探讨其可能的作用机制。方法将50只雌性BALB/c小鼠随机分为5组:生理盐水对照组(Control)、OVA哮喘组(OVA)、CTS低剂量组(CTS 50)、CTS高剂量组(CTS 100)、地塞米松阳性对照组(DEX),每组10只。建立卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)诱导的哮喘小鼠模型,分别用50 mg·kg^-1、100 mg·kg^-1 CTS及10 mg·kg^-1地塞米松腹腔注射处理各组小鼠,对照组用等量生理盐水代替。末次激发24 h后处死小鼠,取支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺脏。以Diff-Quick染色对小鼠BALF中炎症细胞进行分类计数;ELISA法检测小鼠BALF中IL-4、IL-5、IL-13含量;小鼠肺石蜡包埋,切片,行HE和PAS染色,观察小鼠肺组织的病理学改变;Western Blot观察核因子(NF)-κB p65表达水平,以及IkB-α、p38 MAPK磷酸化水平。结果 CTS显著减少哮喘小鼠BALF中炎症细胞数量,并降低小鼠BALF中IL-4、IL-5、IL-13含量(P<0.05);CTS显著抑制肺组织中炎症细胞浸润、杯状细胞增生及黏液分泌;CTS抑制NF-κB p65活化并抑制IkB-α、p38 MAPK磷酸化(P<0.05)。结论 CTS可抑制哮喘小鼠气道炎症,其机制可能与抑制p38 MAPK/NF-κB信号通路有关。     

清肺通络方对小儿支原体肺炎细胞因子的干预及疗效观察

[目的]观察清肺通络方对小儿支原体肺炎(MP)的疗效及对血清干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-4(IL-4)、白介素-17(IL-17)的影响。[方法]选取支原体肺炎患儿135例,随机分为对照组和治疗组,观察两组的疗效,治疗前后血清IFN-γI、L-4I、L-17的变化。[结果]治疗组总有效率为94.67%,明显高于单纯西药对照组(P<0.05)。肺炎支原体肺炎患儿较正常儿童血清IFN-γI、L-4I、L-17均升高I,L-4I、L-17的差异有统计学意义(P<0.01,)IFN-γ升高无统计学意义。治疗组治疗前后血清IL-4I、L-17含量显著降低(P<0.01)I,FN-γ降低无统计学意义;对照组治疗前后差异无统计学意义。[结论]清肺通络方联合阿奇霉素治疗MPP疗效可靠,其机制可能与调节免疫紊乱有关。     

不同灸量悬灸“大椎”穴对哮喘大鼠细胞免疫学机制的影响

目的:通过观察悬灸"大椎"穴不同灸量对哮喘大鼠血清白细胞介素4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)、免疫球蛋白E(IgE)含量的影响,探讨艾灸治疗哮喘的细胞免疫调节机制以及最佳灸量。方法:SD雄性大鼠60只,随机分为空白对照组、哮喘模型组、治疗组1(悬灸15min)、治疗组2(悬灸30min)、治疗组3(悬灸60min)、治疗组4(悬灸120min)。哮喘模型采用腹腔注射致敏混悬剂并雾化吸入卵蛋白的方法制造。悬灸大鼠"大椎"穴,每日1次,共治疗7d。运用酶联免疫双抗体夹心法测定大鼠血清IL-4、IFN-γ、IgE含量,计算IFN-γ/IL-4比值。结果:模型组血清中IL-4、IFN-γ、IgE含量较空白组显著升高(P<0.01)。经过艾灸治疗后,各治疗组IL-4、IgE含量较模型组显著降低(P<0.01,P<0.05),IFN-γ/IL-4的比值显著升高(P<0.05,P<0.01);治疗组4IFN-γ含量较模型组显著升高(P<0.05)。治疗组2与治疗组1相比,IL-4、IgE含量显著降低(P<0.05),IFN-γ/IL-4显著升高(P<0.01);治疗组3与治疗组2相比,IL-4、IgE含量显著降低(P<0.01,P<0.05),IFN-γ/IL-4显著升高(P<0.01);治疗组4与治疗组3比较,各指标的变化不明显(P>0.05)。结论:悬灸"大椎"穴通过抑制血清IL-4的分泌,减轻IgE的炎性反应,提高IFN-γ/IL-4水平,从而改善哮喘细胞免疫机制;随着灸量的增加,对哮喘大鼠细胞免疫机制的改善作用也在增加,以艾灸1h效果最佳。     

三氧化二砷对MRL/lpr狼疮鼠淋巴细胞亚群和细胞因子表达的影响

 目的探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)对MRL/lpr狼疮鼠淋巴细胞亚群和细胞因子表达的影响。方法MRL/lpr狼疮鼠随机分为ATO组(0.4mg·kg^-1·d^-1,ip)、环磷酰胺(CTX)组(50mg·kg^-1每周1次,ip)和生理盐水(NS)组(按体重取量,ip),给药2个月。取脾脏制成脾细胞悬液,加入佛波醇酯(PMA)和ionomycin活化,同时加monensin抑制蛋白转运,于37℃,5%CO₂培养4h后,用四色流式细胞术测脾脏CD3⁺(T)细胞和CD3⁺CD4⁺(Th)细胞的百分率以及CD3⁺CD4⁺(Th)细胞内细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-12的水平;分离血清,用ELISA法测血清中抗ds-DNA抗体、IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-12的浓度。结果①给药后,ATO组小鼠血清的抗ds-DNA抗体水平较给药前明显下降(P<0.01),而NS对照组则明显升高(P<0.05)。②ATO组CD3⁺细胞和CD3⁺CD4⁺百分率均显著低于NS组(P<0.01);③ATO组的血清IFN-γ和IL-12浓度均低于NS组(前者P<0.01,后者P=0.018);④ATO组Th细胞内IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-12表达均显著低于NS组(P<0.01)。结论三氧化二砷能显著降低MRL/lpr狼疮鼠血清抗ds-DNA抗体的水平,抑制T细胞和Th细胞增生和活化功能,降低IFN-γ和IL-12的血清水平和Th细胞内IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-12的水平。     

麻黄细辛附子汤对肾阳虚外感小鼠及正常小鼠的效-毒作用研究

目的研究麻黄细辛附子汤(MXF)干预肾阳虚外感小鼠的药效作用及其对正常小鼠的毒性作用差异,并考察其效-毒作用机制。方法BABL/C雄性小鼠随机分为正常组、正常毒性低、中、高剂量组;肾阳虚外感模型组;肾阳虚外感低、中、高剂量组,连续灌胃给药6 d,记录体重、肛温等药理指标并观察小鼠的一般体征,检测生化指标、炎症因子。结果药效实验中,与正常组小鼠相比,肾阳虚外感模型组小鼠生化指标肌酸激酶(CK)、肌酸激酶-同工酶(CK-MB)、羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)、乳酸盐脱氢酶(LDH)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素(urea)含量明显升高(P<0.05),炎症因子白介素-6(IL-6)、单核细胞去化蛋白(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-10(IL-10)、干扰素-γ(INF-γ)以及白介素12(IL-12p70)含量升高明显(P<0.05)。经给药治疗后,各给药组CK、ALT、urea等生化指标含量较模型组有所回调,各给药组IL-6、IL-10、IFN-γ等炎症因子含量较模型组有不同程度的回调;毒性研究中,各给药组生化指标CK、urea、半胱氨酸(CYS-C)的含量较正常组显著升高(P<0.05),炎症因子白介素-10(IL-10)含量明显上升、白介素-12(IL-12p70)含量明显下降(P<0.05)。结论经MXF给药治疗后,肾阳虚外感给药组小鼠的一些生化指标均有不同程度的回调,MXF可通过调节IL-6、IL-10、IFN-γ、MCP-1、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等炎症因子改善机体的炎症反应;而正常小鼠给予不同剂量的MXF后心脏、肝脏和肾脏功能出现失调,机体通过细胞转移、打破免疫应答的平衡,从而使正常小鼠出现炎症反应。     

荣肝合剂对慢性免疫性肝损伤小鼠的保护作用

目的探讨荣肝合剂对刀豆蛋白A（ConA）介导的慢性免疫性肝损伤小鼠的保护作用及其机制。方法 HBV转基因小鼠69只,随机分为正常对照组10只（尾静脉注射PBS）和ConA造模组59只,采用ConA尾静脉注射造模制作慢性免疫性肝损伤模型。造模结束后,将所有ConA造模组小鼠随机分为模型组、荣肝合剂组、茵陈组、茵陈蒿汤组及联苯双酯组;正常对照组与模型组给予蒸馏水灌胃,各给药组小鼠每日灌胃给予相应的药物,各组均干预28天。末次灌胃给药后24h处死动物,取血或组织标本检测丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TBiL）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、干扰素γ（INF-γ）、白介素-4（IL-4）、白介素-10（IL-10）等指标。结果模型组各指标与正常对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）。与模型组比较：荣肝合剂组、联苯双酯组小鼠ALT、AST、TBiL水平显著降低（P〈0.01）;荣肝合剂组、茵陈蒿汤组和联苯双酯组肝组织中SOD水平均明显提高（P〈0.01）,荣肝合剂组、茵陈组肝组织中MDA水平明显降低（P〈0.05）;荣肝合剂组肝组织TNF-α和IFN-γ水平降低,IL-4、IL-10水平升高（P〈0.05,P〈0.01）。同时,荣肝合剂组降ALT、AST作用优于茵陈组、茵陈蒿汤组（P〈0.05）;提高SOD水平较茵陈组、茵陈蒿汤组、联苯双酯组显著（P〈0.01）;降低IFN-γ表达较茵陈组与联苯双酯组显著（P〈0.05,P〈0.01）。结论荣肝合剂对刀豆蛋白所致HBV转基因小鼠慢性免疫性肝损伤具有保护作用,其保护作用是通过调节肝细胞膜脂质过氧化反应水平（抑制MDA、提高SOD）和改变Th1/Th2因子平衡（降低TNF-α、IFN-γ的表达,提高IL-10、IL-4表达）而起作用的。