超高效液相色谱法研究新人参二醇在大鼠尿液中的排泄

 目的 建立测定大鼠尿液中新人参二醇含量的UPLC-MS/MS分析方法,研究新人参二醇在大鼠尿液中的排泄情况。方法 尿液样品采用液-液萃取法进行提取,通过UPLC-MS/MS分析测定单剂量灌胃给予新人参二醇后大鼠尿液中原药的含量,计算尿液中原药的累积排泄量和平均排泄率。结果 新人参二醇在80~1 280 ng·mL^-1呈现良好的线性关系,质控样品的日内和日间精密度（RSD）均小于15%,方法回收率均高于80%;大鼠灌胃新人参二醇(100 mg·kg^-1)后,96 h内原药在尿中的累积排泄量占给药剂量百分比为0.023 3%。结论 新人参二醇几乎不以原型的形式从尿中排泄。     

柠檬苦素在大鼠体内的排泄途径分析

目的:考察柠檬苦素在大鼠体内的代谢途径,为阐明该药物的作用机制提供参考。方法:大鼠按80 mg·kg~(-1)灌胃给予柠檬苦素,收集胆汁、尿液和粪便,利用HPLC和LC-MS/MS测定大鼠胆汁、尿液和粪便中柠檬苦素的含量,计算其累积排泄量和累积排泄分数。结果:柠檬苦素在大鼠粪便、尿液和胆汁中的累积排泄分数合计约50%,只有近一半的药物以原型形式排泄出体外。原药从尿液和胆汁中的总排泄量1%,大部分以原型药物通过粪便排出。结论:柠檬苦素在大鼠体内的主要排泄途径为粪便,少量药物吸收进入血液后通过肝脏代谢,少量药物通过尿液排出体外。     

芎汤有效部位中阿魏酸在大鼠体内排泄动力学研究

目的考察大鼠灌服芎汤有效部位后,有效成分阿魏酸在大鼠体内排泄动力学规律。方法芎汤醇提液经分离制备的有效部位给SD大鼠灌胃给药后,按不同时间段收集大鼠的尿液和粪样,对其中阿魏酸进行HPLC测定,建立其尿液和粪样排泄代谢曲线,考察排泄特征。结果尿液和粪样中阿魏酸的半衰期分别为(3.37±1.2)h、(23.09±5.7)h;排泄速率常数分别为(0.21±0.002)h-1、(0.03±0.0005)h-1。结论阿魏酸在尿液和粪便中的累积排泄率为11.77%,说明小部分阿魏酸以原型药通过粪便和尿液排泄,大部分阿魏酸在大鼠体内转化为其他形式。该研究为阐明阿魏酸体内过程提供一定依据。     

UPLC-Q-TOF/MS分析头花蓼提取物在大鼠尿液中的代谢产物

目的:通过UPLC-Q-TOF/MS鉴别大鼠口服头花蓼提取物后尿液中的原型成分及代谢产物,以探索其体内代谢过程及直接作用物质。方法:流动相0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈溶液(B)梯度洗脱(0~10 min,95%~55%A;10~14min,55%~5%A;14~15 min,5%~0%A;15~16 min,0%~95%A),柱温45℃,流速0.3 m L·min-1,进样量2μL。以电喷雾质谱检测,扫描范围m/z 50~1 000,在负离子模式下扫描,通过比较空白尿液、给药尿液和两者的差异图谱确认灌胃后大鼠尿液中原型成分及其代谢产物。利用TOF/MS得到的准确相对分子质量,对尿液中头花蓼原型成分及代谢物进行鉴别。结果:鉴别出尿液中3个原型成分及15个代谢产物,推测头花蓼直接作用物质可能为原儿茶酸、槲皮素和没食子酸,或其经肝脏代谢的产物。结论:该方法可靠、有效,可用于口服头花蓼提取物后尿液中化学成分鉴别,为该药材后续的药效物质基础研究提供参考。     

中药满山红有效成分杜鹃素在大鼠体内的排泄动力学研究

目的:研究中药满山红有效成分杜鹃素在大鼠体内的排泄动力学特征。方法:杜鹃素单剂量灌胃给予大鼠后,采用HPLC测定给药后不同时间段大鼠排泄的尿液、粪便样品中杜鹃素含量,绘制其累积排泄速率时间曲线,阐明杜鹃素在大鼠体内的排泄特征。结果:杜鹃素经原型药的排出量为10%左右,48 h内由尿中排泄的累积排泄率为2.87%;由粪便中排泄的累积排泄率为7.32%。结论:灌胃给药后,少部分杜鹃素以原型药通过粪便和尿液排泄,大部分杜鹃素在大鼠体内转化为其他形式,该研究为阐明杜鹃素体内代谢过程提供一定依据。     

羟基红花黄色素A脂质载体及水溶液在大鼠体内的代谢、排泄、生物利用度研究

目的：研究不同的羟基红花黄色素A（HSYA）剂型对HSYA代谢、排泄、生物利用度的影响。方法：大鼠灌胃给予HSYA脂质制剂和水溶液,采用HPLC及LC-MS检测血浆、胆汁、粪便、尿液样品。结果：大鼠灌胃给予HSYA脂质制剂和水溶液后,在大鼠胆汁中均发现HSYA及其II相代谢产物;HSYA原药的质荷比为611,而两个II相代谢产物的质荷比分别为918和691,结合酶降解实验表明这两个代谢产物分别为HSYA的谷胱甘肽结合物和硫酸酯结合物。但是同水溶液相比,HSYA脂质制剂显著性降低了HSYA及其II相代谢产物从胆汁的排泄量。大鼠灌胃给予HSYA脂质制剂后,HSYA原药从胆汁、粪便、尿液中24h的累积排泄量分别为（0.05±0.03）%、（8.80±2.30）%、（37.99±17.50）%,其cmax、AUC0-8h分别为2.79μg·mL^-1、402.51μg·min·mL^-1;而大鼠灌胃给予HSYA水溶液后,HSYA原药从胆汁、粪便、尿液中24h的累积排泄量分别为（0.32±0.22）%、（44.66±8.00）%、（5.58±1.30）%,其cmax、AUC0-8h分别为0.08μg·mL^-1、10.73μg·min·mL^-1。结论：实验结果表明脂质制剂可能不会改变HSYA的代谢机制,但是显著性降低了HSYA从粪便和胆汁的排泄量,提高了其生物利用度。     

大鼠体内泻心汤蒽醌类成分尿排泄动力学研究

目的:研究泻心汤(大黄、黄连、黄芩)中蒽醌类成分在大鼠体内尿排泄动力学规律.方法:建立大鼠尿中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚高效液相色谱(HPLC-FLD)测定方法.大鼠灌胃给予泻心汤12 g/kg,药前及药后不同时间采集尿样,用HPLC-FLD法分析尿中蒽醌类成分,测定5种葸醌类成分经时变化,根据尿排泄量-时间数据计算排泄动力学参数.结果:大鼠灌胃给予泻心汤后,芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚均从肾脏经尿液排泄;排泄T1/2分别为:(3.46±1.18)h,(3.24±0.60)h,(4.69±1.99)h,(4.49±1.63)h,(5.65±1.74)h;48 h累积排泄量分别为:(11.28±4.30)μg,(116.73±17.46)μ斗g,(5.48 4-2.92)μg,(9.53±2.67)μg,(0.41±0.20)μg.结论:泻心汤中5种蒽醌类成分均可从尿中排泄,尿中排泄量占给药量均<10%.     

基于UPLC-MS分析大鼠口服线叶菊有效部位后血浆中3种有效成分的药代动力学

目的:建立高效液相色谱-质谱法(UPLC-MS)测定大鼠口服线叶菊有效部位后血浆中异荭草素、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷和东莨菪苷的含量,研究这3个指标性成分在大鼠体内的药代动力学行为。方法:采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈溶液(B)梯度洗脱(0~2 min,98%A;2~6 min,98%~30%A;6.0~7.6 min,30%~40%A;7.6~8.0 min,40%~2%A;8~10 min,2%A;10~12 min,2%~98%A),流速0.4 m L·min-1,柱温40℃;电喷雾离子源(ESI),多反应监测(MRM)模式。采用单次给药法,大鼠按1.0 g·kg-1灌胃给予线叶菊有效部位,通过负离子模式测定血浆中异荭草素、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷和东莨菪苷的含量。结果:各成分的线性关系良好(R20.997),各成分的提取回收率在80.87%~93.75%;日内、日间精密度RSD均15%。3种成分的达峰时间(tmax)分别为(32.40±4.16),(30.00±4.80),(20.10±5.10)min,药峰浓度(Cmax)分别为(31.80±5.46),(28.00±2.54),(20.33±1.17)μg·L~(-1),药时曲线下面积(AUC0-t)分别为(37.80±3.94),(48.83±3.05),(32.40±2.64)μg·min·L~(-1),消除半衰期(t1/2β)分别为(114.06±22.19),(126.12±19.38),(148.14±24.10)min。结论:建立的UPLC-MS精密、准确,能够同时测定生物样品中异荭草素等3种成分的血药浓度。这3种成分进入体内及吸收的速度较快,但吸收情况并不理想。     

洋川芎内酯I在大鼠尿液和胆汁中的排泄

目的:研究洋川芎内酯I在灌胃和静脉注射后在大鼠体尿液和胆汁中的排泄特征,为该成分的临床前研究和评价提供参考。方法:大鼠按剂量72 mg·kg^-1灌胃和尾静脉给与洋川芎内酯I溶液,收集不同时间段尿液和胆汁,采用高效液相色谱-紫外检测器法(HPLC-VWD)测定大鼠尿液和胆汁中洋川芎内酯I的含量,检测波长均为278 nm,流动相均为乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱。结果:灌胃和尾静脉给药48 h后累积经尿液排泄的原形药物量分别为(179.8±33.68),(264.8±87.28) μg,累积排泄率分别为(0.77±0.15)%和(1.35±0.26)%;给药36 h后累积经胆汁排泄的原形药物量依次为(359.4±75.66),(426.3±140.90) μg,累积排泄率分别为(1.22±0.49)%和(1.72±0.59)%。结论:洋川芎内酯I在大鼠尿液和胆汁内以原形药物的形式排出量较少,且排泄迅速。     

大鼠口服二苯乙烯苷及其β-环糊精包合物的排泄研究

目的:研究二苯乙烯苷(THSG)单体及其β-环糊精包合物对大鼠灌胃后经胆汁、粪和尿的排泄特征。方法:大鼠分别灌胃给予THSG单体及其β-环糊精包合物,24h内收集胆汁,72h内收集尿液和粪便,采用HPLC-UV测定生物样品中THSG含量。结果:HPLC-UV测定方法的专属性、标准曲线线性关系、样品回收率和日内、日间精准度均符合生物样品测定要求。THSG单体及其β-环糊精包合物对大鼠灌胃给药后,粪便以原型形式排泄分别占总药量的3.27%,0.61%,胆汁排泄分别为0.20%,0.18%,尿液中仅检出少量THSG。结论:β-环糊精包合物减少了THSG原型经粪便的排泄,但不改变THSG原型的胆汁和尿液排泄特征。     

HPLC测定远志碱水解8个成分含量

目的:建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定远志碱水解8个成分(对羟基苯甲酸、对羟基肉桂酸、芥子酸、阿魏酸、苯甲酸、3,4,5-三甲氧基肉桂酸、对甲氧基肉桂酸、细叶远志皂苷)含量的方法,并测定10批不同来源远志碱水解产物的含量。方法:采用YMC-Pack ODS-A(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.05%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~6 min,20%~22%A;6~8 min,22%A;8~10 min,22%~25%A;10~14 min,25%~28%A;14~30 min,28%~36%A;30~33 min,36%~38%A),流速为1 mL·min^-1,柱温为30℃,检测波长为210、310 nm。结果:远志碱水解8个成分在33 min内均达到基线分离,且8个成分线性范围良好(r>0.9992,n=6),平均回收率为94.74%~104.95%(RSD<2.75%,n=6);所测样品中8个成分含量分别为0.02%~0.09%、0.20%~0.41%、0.25%~0.70%、0.18%~0.39%、0.19%~0.40%、0.05%~0.68%、0.28%~0.36%、1.77%~4.07%,不同来源远志水解后各成分含量差异明显。结论:该方法准确性和重复性良好,可用于远志碱水解成分含量测定,为远志质量控制提供参考。     

20(S)-原人参二醇奥克梯隆型差向异构体大鼠排泄研究

20（S）-原人参二醇奥克梯隆型差向异构体为20（S）-原人参二醇的主要代谢产物,前期研究发现,该差向异构体在药效学和药动学方面均有一定的立体选择性。该文建立了HPLC-MS/MS测定大鼠尿液、粪便和胆汁中的24R-差向异构体和24S-差向异构体,考察口服灌胃给予大鼠24R-差向异构体或24S-差向异构体后,在尿液、粪便和胆汁中的排泄情况。结果显示,24R-差向异构体和24S-差向异构体在口服给药后48 h内粪便排泄累积量分别为给药剂量的17.69%,17.09%,基本不经尿排泄。口服给药后48 h内,24R-差向异构体和24S-差向异构体胆汁排泄累积量分别为给药剂量的8.01%,1.47%,前者是后者的5.4倍,具有明显的立体选择性。     

茅苍术水溶性成分的HPLC指纹图谱分析

目的:建立茅苍术水溶性成分的HPLC指纹图谱并测定苍术苷A含量,为该药材的质量控制与资源开发提供参考。方法:利用HPLC建立茅苍术的指纹图谱并测定苍术苷A含量,流动相乙腈(A)-0.25%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0~17min,2%~5%A;17~25 min,5%~12%A;25~35 min,12%A;35~50 min,12%~17%A;50~70 min,17%~34%A;70~80min,34%~40%A),检测波长221 nm,流速0.6 m L·min-1。采用外标法测定苍术苷A在10批茅苍术药材中含量。结果:建立了茅苍术水溶性成分的HPLC指纹图谱,检出共有峰18个,精密度、稳定性、重复性试验中各共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD均<3%。10批茅苍术水提物中苍术苷A含量较稳定,平均质量分数2.775 mg·g-1。结论:HPLC指纹图谱方法与苍术苷A的含量测定方法准确、稳定、简便,可有效控制茅苍术药材的内在质量。     

江南卷柏提取物脱脂工艺优选

目的: 优选江南卷柏提取物的石油醚脱脂工艺,为该植物的资源开发与利用提供参考. 方法: 以穗花杉双黄酮提取量和浸膏得率为评价指标,通过正交试验考察石油醚用量、提取时间和提取次数对脱脂工艺的影响.采用HPLC测定穗花杉双黄酮含量,流动相乙腈(A)-水(B)梯度洗脱(0~5 min,25%A;5~12 min,25%~35%A;12~17 min,35%~45%A;17~25 min,45%~50%A;25~40 min,50%~55%A;40~45 min,55%~70%A;45~50 min,70%~100%A;50~55 min,100%A;55~60 min,100%~25%A),检测波长330 nm. 结果: 最佳脱脂工艺为加6倍量石油醚回流提取2次,每次1 h;穗花杉双黄酮提取量72.77 mg,浸膏得率11.04%. 结论: 该脱脂工艺稳定可行,适用于江南卷柏提取物的纯化.     

人尿中磺化脱氢松香酸和铋的测定及尿药排泄特征研究

 目的 分别建立测定人尿中磺化脱氢松香酸(Ecabet)的液质联用法和铋(Bi)的氢化原子荧光法,考察二者在中国健康受试者尿液中的排泄特征。方法 尿液样品以甲醇沉淀并以乙酸酸化后进行液相色谱-质谱联用（LC-MS）分析测定磺化脱氢松香酸,采用Hanbon ODS-2色谱柱,流动相为甲醇-20 mmol·L^-1醋酸铵水溶液(55∶45),质谱采用电喷雾离子源四级杆质谱和负离子选择性离子检测;以氢化物-原子荧光光谱（HG-AFS）法测定尿样中铋,样品经硝酸和高氯酸湿法消化后稀释进样。10名受试者单次口服碱式依卡倍特铋干混悬剂800 mg,测定磺化脱氢松香酸和铋的尿药排泄参数。结果 磺化脱氢松香酸在20.44~30 660 ng·mL^-1内线性关系良好,平均回收率大于92.8%,铋在0.3~40 ng·mL^-1内线性关系良好,平均回收率大于92.0%。受试者服药后,磺化脱氢松香酸和铋在72 h后基本随尿排泄完全,受试者服药后0~2 h间,磺化脱氢松香酸和铋经尿排泄速率最大;平均累计排泄百分率分别为(0.9±0.6)%和(0.02±0.01)%。结论 这两种测定方法适用于人尿中磺化脱氢松香酸和铋的测定及其尿药排泄特征研究。     

经典名方圣愈汤的UPLC指纹图谱建立及多成分定量分析

目的:建立圣愈汤的超高效液相色谱法(UPLC)指纹图谱及其11个成分的定量分析方法.方法:采用UPLC-二极管阵列检测器(PDA)/蒸发光散射检测器(ELSD),根据化学成分极性不同使用不同的检测器,建立2种色谱条件,指纹图谱1选择ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),...     

聚乙二醇400对黄芩苷及其主代谢物胆汁排泄的影响

目的:考察药用辅料聚乙二醇400(PEG400)对黄芩苷及其主代谢物黄芩素6-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(B6G)胆汁排泄的影响,并分析其作用机制。方法:大鼠随机分为黄芩苷+水组与黄芩苷+PEG400组,利用10%水合氯醛(剂量4 mL·kg-1)腹腔注射诱导麻醉,制作大鼠胆管插管模型,待大鼠完全清醒后,以168 mg·kg-1剂量的黄芩苷分别给大鼠灌胃相应的黄芩苷水溶液和黄芩苷PEG400溶液,收集给药后0~12 h的胆汁,使用UPLC-MS/MS测定不同时间段药物经胆汁排泄的浓度,采用Thermo Hypersil GOLD C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.9μm),流动相乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0~9 min,90%~27%B;9~10 min,27%~90%B;10~12 min,90%B),流速0.3 mL·min^-1,柱温30℃,进样量5μL;质谱条件为电喷雾离子源(ESI),正离子检测模式。利用体外孵育法和酶联免疫吸附测定(ELISA)研究PEG400对尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT)1A8和UGT1A9活性及二者在大鼠肝脏中表达的影响。结果:与黄芩苷+水组相比,黄芩苷+PEG400组大鼠12 h内胆汁中黄芩苷及其主代谢物B6G的累积排泄量分别增加了1.8,2.1倍;PEG400分别使UGT1A8与UGT1A9的酶活性提高了2.0,1.5倍,使肝脏中UGT1A8与UGT1A9的质量分数提高了2.2,1.3倍。结论:PEG400可通过提高UGT1A8与UGT1A9的活性和表达来显著增加黄芩苷及其主代谢物B6G的胆汁排泄,且对B6G胆汁排泄的促进作用大于原形药物黄芩苷,可为PEG400的临床合理应用及黄芩苷等黄酮类药物新剂型的设计提供依据。     

利胆排石片与金钱草片中金钱草替以广金钱草或聚花过路黄后对大鼠尿液、胆汁排出量的影响研究

目的研究利胆排石片、金钱草片中金钱草替以广金钱草或聚花过路黄后对大鼠尿液、胆汁排出量的影响。方法以广金钱草、聚花过路黄替代利胆排石片、金钱草片中的金钱草,制备成相应的药物,给大鼠一次性灌胃给药,采用大鼠代谢笼法,分别记录给药后动物在1、2、3、4、5、6 h的尿液量及6 h内尿液总量;采用胆汁引流法,于动物一次性灌胃给药后,每30 min收集并记录1次胆汁排出量,连续收集3 h,采用t检验,比较各组间尿液与胆汁排出量的差异性。结果与空白组比较,各药物组在6 h内排出的尿液总量明显增加(P<0.01),但尿液明显增加的具体时间各异;与LDPS组比较,LDPS-G组、LDPS-JH组在6 h内尿液总量无明显变化,LDPS-G组尿液量第1 h明显减少(P<0.01),第5、6 h明显增加(P<0.05);与JQC组比较,GJQC组、JHGLH组在6 h内尿液总量无明显变化,GJQC组在第1 h尿液排出量明显增加、第5 h尿液排出量明显减少(P<0.01)。与空白组比较,各药物组在用药30 min后至3 h内的各时间段胆汁排出量都有明显增加(P<0.05或P<0.01);与LDPS组比较,LDPS-G组在给药后的第5、6个30 min胆汁排出量明显减少(P<0.05);与JQC组比较,JHGLH组在给药后30 min内胆汁排出量明显增加(P<0.05)。结论利胆排石片、金钱草片及其组方中金钱草替以广金钱草与聚花过路黄后都呈现出明显的利尿、利胆作用;以金钱草为君药,以防治胆石症为主要疗效的复方中,以广金钱草代替金钱草会降低其疗效,但是以防治尿石症为主要疗效的,用广金钱草替代后可能通过促进尿液的排出增强其疗效;广金钱草利尿作用显效较快,但维持时间较短;聚花过路黄利尿、利胆作用与金钱草类似,可以进一步在临床开展小范围的对照研究,为后期开发提供临床资料。     

RP-HPLC法同时测定忍冬不同变异类型花蕾中7种成分

目的建立RP-HPLC法同时测定金银花药材中酚酸类(绿原酸、咖啡酸)、环烯醚萜类(马钱苷)和黄酮类(芦丁、金丝桃苷、木犀草苷、槲皮素)7种主要成分,并测定不同变异类型花蕾中各成分,为金银花药材的多指标、多成分质量控制体系建立奠定基础。方法采用Aglient TC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相A为0.4%磷酸水溶液,流动相B为乙腈,梯度洗脱程序为0～18 min,A为87%;18～30 min,A为85%;30～43 min,A为85%～80%;43～48 min,A为80%;48～50 min,A为80%～70%;50～55 min,A为70%;55～65 min,A为70%～50%;检测波长为0～16 min,240 nm;16～40 min,323 nm;40～65 min,355 nm;体积流量1.0 mL/min,柱温为30℃。结果 7种成分均达到了基线分离,且各成分在线性范围内线性关系良好;7种成分的加样回收率变化范围为99.56%～102.12%。结论该方法准确、简便、可行,可以用于不同变异类型金银花花蕾7种活性成分的测定。