野西瓜总皂苷诱导人肝癌细胞HepG-2凋亡的初步研究

[目的]探讨野西瓜总皂苷(CsS)对人肝癌HepG-2细胞的杀伤作用和诱导凋亡的作用.[方法]四甲基偶氮唑蓝(MTr)法研究CSS对HepG一2细胞的杀伤作用;荧光显微镜观察细胞凋亡形态;碘化吡啶(PI)单染经流式细胞仪检测CSS对HepG-2细胞周期及凋亡的影响.[结果]CSS对HepC-2细胞的生长增殖具有抑制作用;经CSS作用后.HepG-2细胞在出现特征性凋亡形态特征,并出现了G1期阻滞,G2期比例下降,高剂量组出现了G2期消失的现象,50 mg/L剂量作用48 h,凋亡细胞比率高达66.652%.[结论]CSS对人肝癌HepG-2有明显的杀伤和诱导凋亡作用,并出现细胞周期的改变.     

翻白草诱导人肝癌细胞HepG-2凋亡的研究(英文)

目的:研究翻白草乙醇提取物对人肝癌细胞HepG-2体外增殖的抑制作用及凋亡的诱导作用。方法:用不同浓度的翻白草乙醇提取物对人肝癌细胞HepG-2,MTT法测定对细胞生长的抑制率,用琼脂糖凝胶电泳观察DNA梯状条带和DAPI染色观察凋亡小体,再用Western blot法检测对caspase-3和PARP蛋白表达的影响。结果:翻白草乙醇提取物对人肝癌细胞HepG-2有较强的浓度依赖性抑制作用,诱导细胞出现明显的形态学改变,琼脂糖凝胶电泳出现典型的DNA梯状条带,Western blot分析结果发现,翻白草乙醇提取物促进caspase-3活化而引发下游PARP裂解,进而诱导人肝癌细胞HepG-2细胞走向自体凋亡的途径。结论:翻白草乙醇提取物可能通过抑制人肝癌细胞HepG-2的增殖及诱导其凋亡而产生抗肿瘤作用。     

硒酸酯多糖诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的实验研究

目的:探索硒酸酯多糖(KSC)在体外对人肝癌细胞HepG-2的作用。方法:以KSC为实验药物,通过MTT法检测细胞活力,荧光显微镜观察凋亡细胞形态,流式细胞仪分析凋亡峰及细胞周期等,研究其对HepG-2细胞的诱导凋亡作用。结果:随着作用时间及药物浓度的增加,KSC对HepG-2细胞生长的抑制作用就越明显。120mg.L-1KSC作用72 h,细胞生长抑制率达69.31%,IC50为43.92 mg.L-1。形态学观察可见早期和晚期凋亡细胞及凋亡小体,细胞周期主要受阻于S期。结论:KSC可在体外诱导人肝癌细胞凋亡。     

杨梅树皮素诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡机制的研究

目的:探讨杨梅树皮素(myricetin,MYR)对人肝癌HeptG-2抑制生长和诱导凋亡作用及其机制.方法:MTT法研究MYR对人肝癌HepG-2的抑制生长;荧光染色和电子透射电镜观察HepG-2细胞形态;流式细胞仪研究MYR对HepG-2细胞周期的影响及诱导凋亡作用,罗丹明123单染观察MYR对线粒体膜电位的改变;caspase 3,9试剂盒检测MYR对人肝癌HepG-2细胞内caspase3,9活性的影响.结果:MYR对人肝癌HepG-2细胞生长具有明显的抑制作用,并具有剂量依赖性,IC_(50)为58.6617 mg·L~(-1);MYR作用72 h后,HepG-2细胞呈现典型细胞凋亡特征,细胞周期阻滞于G_2/M期,凋亡率最高为64.73%.同时线粒体膜电位明显下降,caspase3,9活性增加.结论:MYR对人肝癌HepG-2细胞有明显的抑制生长和诱导凋亡作用,其机制可能与线粒体凋亡途径有关.     

黄芩苷诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡及对相关蛋白表达的影响

目的 研究黄芩苷诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡及对相关蛋白表达的影响.方法 采用体外细胞培养方法,应用MTT法检测黄芩苷诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡作用;通过免疫细胞化学(S-P法)检测凋亡相关基因bcl-2、bax、P53蛋白表达的改变.结果 MTT结果表明,黄芩苷在体外对人肝癌HepG-2细胞有明显的诱导细胞凋亡作用,且这种抑制作用呈现浓度和时间依赖性.免疫细胞化学(S-P法)检测凋亡相关基因Bcl-2、P53蛋白表达明显减少、Bax表达明显增加;Bcl-2/Bax比例明显降低.结论 黄芩苷对人肝癌HepG-2细胞具有较强的诱导凋亡的作用,其作用机制可能与下调P53基因表达和降低Bcl-2/Bax比例有关.     

人参总皂苷诱导K562细胞凋亡的实验研究

目的：研究人参总皂苷诱导白血病细胞凋亡及其机制，为进一步开发人参总皂苷提供实验依据。方法：采用细胞体外培养，图像分析技术、流式细胞术、形态学观察与免疫细胞化学等方法，研究人参总皂苷诱导K562细胞凋亡。结果：人参总皂苷对K562细胞有增殖抑制作用，并可诱导K562细胞凋亡明显增加，同时K562细胞癌基因产物C－MYC，BCL－2表达明显降低。结论：人参总皂苷能诱导K562细胞凋亡，其机制可能与调控癌基因产物的表达有关。     

人参皂苷诱导直肠癌细胞凋亡的临床观察

目的：观察人参皂苷对直肠癌细胞凋亡的影响。方法：经病理诊断为直肠癌的患者50例，随机分为两组。治疗组35例，对照组15例。治疗组术前每天用84．5％的人参皂苷40－60ml，保留灌肠4－6h ,连续用药6－8天。对照组用等量生理盐水同样方法灌肠。用药后手术切除肿瘤，术中取新鲜标本，送电镜检查。结果：治疗组用药后，25例便频、便血、肛坠感减轻，占71．4％，7例不全梗阻患者随痛全部减轻；电镜观察23例发现凋亡癌细胞，占65．7％。对照组无上述改变。结论：人参皂苷可诱导直肠癌细胞凋亡。     

人参皂苷CK抑制人结肠癌SW480细胞增殖的机制研究

目的研究人参皂苷CK对人结肠癌SW480细胞增殖及凋亡的影响,并进一步探讨其作用机制。方法采用CCK-8法检测细胞活力;通过流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡、活性氧(ROS)水平和线粒体膜电位(MMP)变化;Hoechst染色检测细胞凋亡;蛋白免疫印迹法检测细胞色素C(CytC)释放以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和cleaved Caspase-3等的表达。结果人参皂苷CK对SW480细胞的增殖有显著抑制作用。人参皂苷CK诱导SW480细胞周期阻滞于G0/G1期,促进细胞发生早期凋亡。人参皂苷CK可以显著增加细胞内ROS水平,降低MMP水平;人参皂苷CK促进Bax和cleaved Caspase-3的表达,抑制Bcl-2的表达。此外,人参皂苷CK使SW480细胞内CytC大量释放。结论人参皂苷CK对SW480细胞的增殖具有显著的抑制作用,其作用机制可能是通过促进线粒体超氧化物升高,导致胞内ROS水平显著增加和MMP显著下降,进而导致CytC释放,上调Bax的表达,下调Bcl-2的表达,最终导致细胞发生凋亡。     

人参皂苷Rh2对人膀胱癌细胞T24增殖和凋亡的影响

目的:探讨20(S)-人参皂苷-Rh2(GS-Rh2)对人膀胱癌T24细胞增殖和凋亡的影响及其可能的机制。方法:采用MTT法检测GS-Rh2对T24细胞增殖抑制率;光学显微镜观察GS-Rh2作用前后细胞形态变化;流式细胞仪检测GS-Rh2对T24细胞凋亡和细胞周期分布影响;RT-PCR检测mRNA表达。结果:GS-Rh2在5 mg/L～21.97mg/L浓度范围内,对T24细胞增殖无明显抑制作用;21.97 mg/L～160mg/L浓度范围内,GS-Rh2对人膀胱癌T24细胞的生长有抑制作用,呈量-效关系,IC50为37mg/L。T24细胞经GS-Rh2(40mg/L)作用后光镜下呈死亡形态改变;细胞增殖指数(PI)由42.534%下降至31.03%;早期凋亡细胞数明显增加;p53和myc mRNA表达下降。结论:GS-Rh2能显著抑制人膀胱癌T24细胞增殖、诱导T24细胞凋亡,其机制可能与GS-Rh2下调P53和myc mRNA表达,阻滞细胞进入S/G2期等有关。     

大蒜素抗人肝癌HepG-2细胞的实验研究

目的:研究大蒜素对人肝癌细胞HepG-2生长的影响,探讨其抗人肝癌HepG-2细胞作用以及相关机制。方法:选用人肝癌HepG-2细胞为研究对象。通过倒置显微镜及hoechst染色荧光显微镜观察大蒜素作用后细胞形态的变化。MTT法检测不同浓度大蒜素作用后细胞增殖活性改变并计算抑制率(IR)。流式细胞术(FCM)检测大蒜素对细胞周期及凋亡率的影响。免疫细胞化学染色了解大蒜素作用后HepG-2细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的变化。结果:大蒜素作用24 h后人肝癌HepG-2细胞形态发生改变,表现为细胞缩小变圆,突起消失,分部稀疏,细胞核浓缩,边缘化,且随着大蒜素浓度增加,上述改变逐步明显。Hoechst染色荧光倒置显微镜观察对照组细胞核呈均匀一致的荧光,而实验组可观察到细胞凋亡形态变化,表现为细胞核固缩,染色质凝聚,边缘化,部分碎裂,呈致密的颗粒状强荧光。MTT法检测结果显示不同浓度的大蒜素(12.5μg/mL、25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL)在不同时间(24 h、48 h、72 h)作用于HepG-2细胞后细胞增殖活性受到抑制,与阴性对照组及阳性对照组相比大部分组别差异有统计学意义。流式细胞仪检测结果提示与阴性对照组相比大蒜素组G0-G1期比例明显增加,细胞凋亡率明显上升。免疫细胞化学染色表明大蒜素作用后细胞Bax表达水平上升,Bcl-2/Bax比例下降,Caspase-3表达上升。结论:大蒜素对人肝癌HepG-2细胞的增殖有抑制作用,并能诱导HepG-2细胞凋亡。在一定范围内随着大蒜素浓度的增高,时间的延长,细胞增殖活性逐步降低,凋亡率逐步上升,呈时间-剂量依赖性。大蒜素抑制肝癌细胞增值诱导其凋亡与G0-G1期阻滞有关,经大蒜素作用后G0-G1期细胞比例明显高于对照组,其分子机制涉及上调Bax、Caspase-3表达。     

消癌平注射液联合奥沙利铂诱导肝癌HepG-2细胞凋亡及其相关机制的研究

目的观察消癌平注射液(XAP)单药联合奥沙利铂(OXA)影响肝癌HepG-2细胞凋亡及其相关机制。方法荧光染色法分别观察XAP、OXA及两药联合对肝癌HepG-2细胞凋亡的影响。流式细胞技术检测上述药物促进HepG-2细胞凋亡和细胞周期阻滞情况。免疫组化法观察凋亡相关Survivin蛋白表达情况。结果荧光染色表明,XAP、OXA及两药联合作用48h后,均不同程度引起HepG-2细胞凋亡,凋亡率分别是5.33%、11.67%、23.33%,均明显高于对照组(<0.05或<0.01),且XAP+OXA组凋亡率明显高于XAP组、OXA组(<0.01)。流式细胞技术结果显示,XAP、OXA及两药联合作用于HepG-2细胞48h后,凋亡率分别是16.7%、15.9%、22.6%,均明显高于对照组的9.6%(<0.05),XAP+OXA组明显高于XAP组、OXA组(<0.05);此外,XAP组将HepG-2细胞阻滞于G0/G1期,XAP+OXA组阻滞于S期。免疫组化提示Survivin在对照组着色强,各药物组弱于对照组(<0.01),且XAP+OXA组弱于XAP...     

人参皂苷肠道代谢物诱导人肝癌BEL-7402细胞凋亡

目的探讨一种新的人参稀有皂苷20-O-(β-D-吡喃葡萄糖)-20(S)-原人参二醇皂苷(IH-901)对人肝癌BEL-7402细胞的增殖抑制效果和诱导凋亡作用。方法以0、6.25、12.5、25、50、75、100μmol/L的IH-901作用于体外培养的BEL-7402细胞,通过MTT法检测IH-901对细胞生长的抑制作用,相差显微镜观察细胞形态变化,AO/EB的荧光核染色观察凋亡细胞形态,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡。结果MTT实验显示IH-901抑制BEL-7402细胞的生长,呈时间及浓度依赖的方式;显微镜下观察到典型的凋亡形态变化和生化特征:细胞固缩,核染色质凝聚,出现凋亡小体;AO/EB的荧光核染色后,观察到典型的凋亡细胞;流式细胞仪可以检测到凋亡峰,且细胞被阻滞在G0/G1期。结论IH-901能通过诱导细胞凋亡的方式有效地抑制人肝癌BEL-7402细胞的生长,稀有人参皂苷IH-901可能成为一种潜在的抗肝癌药物。     

人参皂苷Rg3联合紫杉醇协同诱导胃癌细胞凋亡的研究

目的:探讨人参皂苷Rg3联合紫杉醇是否具有协同诱导胃癌细胞凋亡的作用。方法:将人胃癌BGC—823细胞裸鼠移植瘤动物模型,随机分为4组(每组10只):人参皂苷Rg3组(GS-Rg3:10mg.kg-1.d-1灌胃),紫杉醇组(紫杉醇10 mg/kg腹腔内注入,每周2次),联合组(人参皂苷Rg3+紫杉醇,用法同上),对照组(生理盐水组)。连续用药三周。用药结束后脱颈处死裸鼠,统计各组抑瘤率;流式细胞仪检测移植瘤细胞凋亡率,RT-PCR测定凋亡关键因子Caspase-3水平,电镜观察肿瘤细胞凋亡状态。结果:联合组(人参皂苷Rg3+紫杉醇)抑瘤率明显大于人参皂苷Rg3组和紫杉醇组(P<0.01);联合组肿瘤细胞凋亡率明显大于紫杉醇及人参皂苷Rg3组(P<0.01),联合组Caspase-3水平最高,与紫杉醇组、人参皂苷Rg3组比较有显著差异(P<0.05和P<0.01)。结论:人参皂苷Rg3联合紫杉醇能协同诱导胃癌细胞凋亡,抑制肿瘤的生长。     

人参皂苷Rg3诱导小鼠肝癌细胞凋亡及抑制肿瘤血管内皮生长因子生成的研究

目的观察人参皂苷Rg3对小鼠肝癌细胞凋亡的诱导作用,及肿瘤血管内皮生长因子(VEGF)的变化,探讨Rg3抗肿瘤生长及抑制转移的机制。方法以Hca-F25//6A3-F(F)接种于615近交系小鼠,建立肝癌转移动物模型,分为5组:Rg3预防组(接种肿瘤前给Rg3)、Rg3治疗组(Rg3)、阳性对照组(PDD)、联合治疗组(Rg3 PDD)和阴性对照组(生理盐水),通过电镜及流式细胞仪分析肿瘤细胞的凋亡,并应用免疫组化方法检测VEGF的表达。结果人参皂苷Rg3预防组及治疗组电镜下可见较多细胞凋亡小体的形成;顺铂治疗组的形态改变以细胞破坏为主,凋亡的细胞较少;联合治疗组细胞的凋亡和坏死程度相当。流式细胞学检测分析结果为:Rg3预防组、治疗组及联合治疗组细胞凋亡的特征峰(5/5),而顺铂治疗组为(1/5),阴性对照组未见。应用Rg3各组均较未用药组VEGF表达减少。结论人参皂苷Rg3抗肿瘤生长及抑制转移的机制与诱导细胞凋亡、降低肿瘤血管生成有关。     

人参皂苷Rb1抑制长春新碱诱导的骨髓基质细胞凋亡

目的:探讨人参皂苷Rb1抑制长春新碱诱导的小鼠骨髓基质细胞凋亡的作用。方法:研究分为正常对照组、长春新碱组、长春新碱凋亡诱导组,不同浓度人参皂苷Rb1(1.0、5.0、10.0、15.0μg/ml)抗长春新碱(5.0μg/ml)对骨髓基质细胞的生长抑制和凋亡组;采用MTT法测定骨髓基质细胞增殖,采用Annexin V/PI双染流式细胞术及Hoechst 33342荧光染色法测定细胞凋亡。结果:人参皂苷Rb1在5.0¹5.0μg/ml浓度范围内显著地降低了长春新碱对骨髓基质细胞的生长抑制;人参皂苷Rb1在5.015.0μg/ml浓度范围内显著地降低了长春新碱对骨髓基质细胞的生长抑制;人参皂苷Rb1在5.0¹5.0μg/ml浓度范围内显著地阻断长春新碱对骨髓基质细胞的生长抑制。人参皂苷Rb1抗长春新碱诱导的骨髓基质细胞凋亡具有浓度依赖性。结论:人参皂苷Rb1能够抑制长春新碱诱导的骨髓基质细胞凋亡。     

人参皂苷单体Rh_2促使人脑胶质瘤U251细胞凋亡的实验研究

目的:观察人参皂苷单体Rh2(GS-Rh2)诱导人脑胶质瘤U251细胞的凋亡作用,进而探讨其对端粒酶活性的影响和人端粒酶逆转录酶(hTERT)表达的机制。方法:人脑胶质瘤U251细胞经GS-Rh2处理后,采用MTT法检测细胞抑制率,免疫荧光技术观察凋亡小体,流式细胞仪经Annexin V-FITC/PI双染法观察细胞凋亡,TRAP-ELISA法检测端粒酶活性改变,通过RT-PCR技术检测hTERT基因的表达。结果:GS-Rh2对U251细胞具有抑制作用,呈明显的剂量依赖关系,免疫荧光技术观察到凋亡小体的出现,流式细胞仪检测GS-Rh2引起U251细胞凋亡并与药物浓度存在依赖关系,TRAP-ELISA法发现GS-Rh2可以降低端粒酶活性且呈剂量和时间依赖关系,RT-PCR证实GS-Rh2可降低hTERT基因的表达。结论:人参皂苷单体Rh2能够诱导人脑胶质瘤U25l细胞发生凋亡,并抑制和降低细胞端粒酶活性,经过RT-PCR证实GS-Rh2作用于胶质瘤的分子生物学机制可能与抑制胶质瘤细胞hTERT基因有关,进而诱导细胞发生凋亡。     

人参皂苷Rg3通过干预细胞周期和诱导凋亡影响人食管癌Eca9706细胞生长

目的:研究人参皂苷Rg3对人食管癌细胞生长的抑制作用及其机制。方法:MTT法检测人参皂苷Rg3对人食管癌细胞Eca9706增殖的抑制,用流式细胞仪分别检测细胞周期和凋亡情况。结果:在25²00μg/ml范围内,不同浓度人参皂苷Rg3能抑制Eca9706细胞增殖,且呈剂量依赖性。53μg/ml、86μg/ml、141μg/ml人参皂苷作用Eca9706细胞48h,细胞周期在S期的比例明显增多,细胞凋亡率明显增加。结论:人参皂苷Rg3可能通过干预细胞周期和凋亡对食管癌Eca9706细胞增殖起抑制作用。     

重楼皂苷Ⅱ通过线粒体与内质网应激途径诱导骨肉瘤细胞凋亡的研究

目的 探讨重楼皂苷Ⅱ(polyphyllinⅡ,PPⅡ)对骨肉瘤(osteosarcoma, OS)细胞凋亡的影响及作用机制。方法 选取OS的U2OS和HOS细胞株作为研究对象。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测PPⅡ对细胞活力的影响;克隆形成实验检测PPⅡ对细胞克隆形成能力的影响;5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)渗入实验检测PPⅡ对细胞DNA合成的影响;膜联蛋白V-异硫氰基荧光素/碘化丙啶(annexin V-FITC/PI)双染法检测PPⅡ对细胞凋亡率的影响;JC-1荧光探针检测PPⅡ对线粒体膜电位变化的影响;Western blot法检测PPⅡ对B淋巴细胞瘤2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein, Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase 3,Caspase 3)、Caspase 7、Caspase 9、切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved cysteinyl aspartate specific p...     

大黄素诱导人肾上皮HK-2细胞凋亡及内质网应激的介导作用

目的 研究大黄素诱导人肾小管上皮HK-2细胞凋亡的作用及其机制是否与内质网应激有关.方法 不同浓度大黄素处理HK-2细胞不同时间.MTT法检测细胞存活率,实时荧光定量PCR (RT-PCR)检测葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、转录激活因子3(ATF3)和X盒结合蛋白1(XBP1)的基因表达,Western blotting 法检测caspase-3、GRP78、CHOP、真核生物启动因子2α (eIF2α)的蛋白表达.结果 大黄素以浓度相关方式降低HK-2细胞存活率,诱导caspase-3剪切.RT-PCR检测表明,大黄素能诱导内质网相关基因GRP78、CHOP、ATF3基因表达,Westernblottinh检测结果进一步证实大黄素能诱导GRP78、CHOP的蛋白表达.大黄素还明显诱导eIF2α磷酸化和XBP1 mRNA剪切.在大黄素给药之前给予内质网应激干扰药4-苯基丁酸和salubrinal,能增加HK-2细胞的存活率.结论 大黄素能诱导HK-2凋亡,内质网应激参与了大黄素诱导HK-2细胞凋亡的作用.     

人参皂苷Rg3诱导膀胱癌细胞系EJ的凋亡作用

目的：探讨Rg3抑制膀胱癌细胞的作用及其诱导凋亡的机制。方法：用一定质量浓度的Rg3 处理膀胱癌细胞系EJ细胞,MTT法检测细胞增殖活力和抑制率50%的时候药物的浓度(IC₅₀)；Hoechst33258荧光染色观察凋亡细胞的形态；流式细胞仪分析细胞周期及细胞凋亡率；免疫细胞化学观察caspase-3的表达变化；琼脂糖凝胶电泳测定DNA梯状带。结果：Rg3抑制EJ细胞生长,呈浓度依赖关系,Rg3处理细胞48 h的IC₅₀为125.5 mg·L^-1；经150 mg·L^-1Rg3处理细胞24 h和48 h后,观察到典型的凋亡细胞形态,即染色质凝集、核片段化、凋亡小体、核内致密的颗粒状荧光及caspase-3的表达增加；并呈时效依赖关系；用75 mg·L^-1Rg3处理细胞24,48,150 mg·L^-1的Rg3处理细胞48 h后,Rg3诱导了细胞凋亡和调节细胞周期,S期和G₂/M期的细胞比率增加,G₀/G₁的细胞比率下降；凋亡率从对照组的(1.05±0.17)%分别上升到(8.41±0.98)%,(18.57±2.20)% 和(33.98±1.64)%,琼脂糖凝胶电泳检测出典型的DNA梯形条带,其效应随药物浓度的增加和作用时间的延长而增强。结论：Rg3可通过诱导EJ细胞凋亡而发挥其抑制细胞增殖的作用。