信号通路抑制剂对两株子宫内膜癌细胞生物学行为的影响

目的 观察体外表皮生长因子受体(EGFR)信号通路抑制剂RG-14260(RG)单独及RG-14260联合mTOR信号通路抑制剂雷帕霉素Rapamycin(RA)对两株子宫内膜癌细胞(PTEN缺失的Ishikawa细胞和PTEN表达完整的HEC-1A细胞)生物学行为的影响.方法 采用细胞形态学观察和细胞克隆形成法检测抑制剂对细胞增殖的影响;流式细胞仪检测细胞凋亡及周期分布;Transwell法检测细胞体外侵袭力的改变.结果 RG、RA均可明显增加Ishikawa细胞G1期细胞比例,降低S期细胞比例(P＜0.05),RG、RA合用G1期细胞比例增加更明显(P＜0.05),S期细胞比例下降更明显(P＜0.01);RG、RA单用或联合使用均可诱导Ishikawa细胞凋亡,降低Ishikawa细胞存活率和侵袭力;RG、RA对HEC-1A细胞不敏感,经RG、RA单独或联合作用后各组HEC-1A细胞凋亡率、细胞存活率、侵袭力与相应处理的Ishikawa组细胞比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 PTEN基因缺失使相应信号通路抑制剂作用的子宫内膜癌细胞生物学行为明显改变,对相关信号通路抑制剂的敏感性增加.     

mTOR信号通路在神经胶质瘤干细胞样细胞中激活的意义研究

目的 分选神经胶质瘤C6细胞中的侧群(SP)细胞,探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)蛋白对神经胶质瘤SP细胞的影响.方法 Hoechst33342染色流式细胞仪分选SP细胞,另取非侧群(NSP)细胞作为对照.荧光定量-PCR和Western blot分别检测mTOR基因和蛋白的表达.化学合成的双链SiRNA沉默mTOR基因的表达.结果 SP和NSP细胞中mTOR基因的2-△Ct值分别为(0.623±0.087)和(0.289±0.046),两者之间差异有显著性(P＜0.01),mTOR蛋白的表达在SP细胞也显著高于NSP细胞.化学合成的靶向SiRNA可以显著下调mTOR的表达(P＜0.01).SiRNA下调mTOR表达后,SP细胞在C6细胞中的比例从5.67±1.46％减少到1.33±0.26％(P ＜0.01).结论 神经胶质瘤SP细胞高表达mTOR,下调mTOR的表达可以减少SP细胞的比例.     

Akt/mTOR信号通路与口腔鳞状细胞癌的研究进展

近年来随着对肿瘤研究的深入,人们逐渐认识到Akt／mTOR信号通路在肿瘤发生、发展中起重要作用。研究表明,Akt／mTOR信号通路的异常在多种常见肿瘤如肝癌、肺癌、前列腺癌、子宫内膜癌以及El腔鳞状细胞癌等病变组织中发挥作用日益增强,将来可能会成为肿瘤治疗新靶点。本文就Akt／mTOR信号通路与口腔鳞状细胞癌的研究进展作一综述。     

mTOR信号通路在卵巢型子宫内膜异位症中的表达及临床意义

目的：探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）信号通路蛋白在卵巢型子宫内膜异位组织中的表达及其临床意义。方法：利用RT—PCR、蛋白质免疫印迹法、免疫组织化学法检测2011年1月～2013年6月就诊我院的卵巢型子宫内膜异位症患者40例和正常增生期子宫内膜40例组织中mTOR及下游分子p70S6激酶（p70S6K）和4E—BP1的表达。结果：mTOR及下游分子p70S6K和4E—BP1在卵巢型子宫内膜异位组织中mRNA及蛋白的表达均低于正常子宫内膜组织。mTOR蛋白在卵巢型子宫内膜异位组织中为阳性表达,高于正常子宫内膜组织,且与痛经、月经异常、不孕无明显相关性,而与囊肿大小、异位内膜浸润深度及盆腔浸润情况关系显著。结论：mTOR信号通路与卵巢型子宫内膜异位症的发生、发展关系密切,mTOR蛋白失活可能是卵巢子宫内膜异位的显著标志,检测mTOR蛋白表达对卵巢子宫内膜异位的诊断具有一定意义。     

mTOR信号通路与学习记忆

哺乳类动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)是一种重要的信号转导分子,能够控制多种生物酶的产生和活化。mTOR通过上游和下游信号转导通路,调制细胞生长增殖、基因的翻译和转录,影响神经突触的生长和突触可塑性的形成,与记忆形成和巩固有着密切关系。     

SB203580与雷帕霉素联合对人子宫内膜癌Ishikawa细胞的体外抗肿瘤作用

目的 观察体外P38MAPK信号通路抑制剂SB203580单独及SB203580联合mTOR(哺乳动物雷帕霉素靶蛋白)信号通路抑制剂雷帕霉素(Rapamycin)对Ishikawa细胞生长、细胞凋亡以及细胞侵袭能力的作用.方法 一定浓度梯度的SB203580单独或联合运用雷帕霉素,MTT(四甲基偶氮唑蓝)法检测细胞抑制牵、软琼脂克隆形成实验检测肿瘤细胞体外成瘤性、流式细胞仪检测细胞凋亡、Transwell法检测Ishikawa细胞体外侵袭力的改变.结果 SB203580对Ishikawa细胞有抑制生长、降低体外成瘤性、诱导凋亡和降低细胞侵袭能力的作用;在相同条件下,SB203580与雷帕霉素联合的抗肿瘤作用要明显优于SB203580单用.结论 SB203580与雷帕霉素可协同抑制人子宫内膜癌细胞Ishikawa的生长、诱导细胞凋亡,并同时抑制Ishikawa细胞的侵袭性,具有良好抗肿瘤前景.     

雷帕霉素抑制mTOR信号通路对EC9706细胞生长及凋亡的影响

目的:检测食管鳞状细胞癌组织中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的活性及雷帕霉素(rapa)对食管鳞状细胞癌细胞系EC9706细胞生长及凋亡的影响.方法:采用免疫组织化学SP法检测50例食管鳞状细胞癌组织及15例正常食管组织中mTOR蛋白的表达.分别用不同浓度(20、50和100 nmol/L)的rapa处理食管鳞状细胞癌EC9706细胞系,以未处理组作为阴性对照,采用流式细胞术测定细胞周期和凋亡率.结果:食管鳞状细胞癌组织中mTOR蛋白的阳性表达率为64.0%(32/50),高于正常组织的13.3%(2/15)(χ2=11.873,P=0.001).与对照组比较,rapa可使细胞停滞于G0/G1期(F=102.609,P=0.001),且明显促进细胞凋亡(F=916.882,P=0.001).结论:mTOR信号通路在食管鳞状细胞癌中被显著激活,rapa能抑制食管鳞状细胞癌细胞生长并诱导细胞凋亡.     

内质网应激与mTOR信号通路在消化系统肿瘤中的研究进展

内质网应激(ERS)是由于饥饿、离子失衡等多种原因导致细胞内质网功能障碍而引发的一系列自我调节反应,通过介导代谢改变维持细胞内稳态.哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路也是参与调节细胞代谢的重要通路之一,并对自噬激活有负调节作用.ERS与mTOR信号通路在调控细胞内代谢过程中相互影响对方信号传导,进而可改变消化系...     

mTOR信号通路与大肠癌演进相关性的研究进展

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路是由一系列蛋白分子组成的细胞内最重要的信号传导途径之一,其结构复杂,具体功能尚未明了.近年来,随着对大肠癌发病机制研究的深入,人们逐渐认识到mTOR信号通路在大肠癌发生发展中起重要作用,mTOR通路的过度激活可促进大肠癌的恶性表型与转移.因此,了解mTOR信号通路在大肠癌演进过程中的作用对指导临床大肠癌的诊疗大有裨益.     

雷帕霉素靶蛋白信号通路的组成及对树突状细胞功能的调节

雷帕霉素靶蛋白（mTOR）是一种进化保守的丝氨酸／苏氨酸激酶,在细胞对生长因子,氨基酸及能量变化等外界信息反应的过程中起到重要作用。树突状细胞（DCs）是专职抗原递呈细胞,可以启动特异性免疫应答。近年来,mTOR对DCs分化、功能调节的研究逐渐增多。有些研究认为,mTOR对DCs的作用是激活性或促进性的．但在另外一些研究中,这种作用是抑制性的。所以,本文对近年来关于mTOR通路对DCs的调节作用作一综述。     

The Expression of Mammalian Target of Rapamycin in Ishikawa and HEC-1A Cells

The activation of mammalian target of rapamycin （mTOR） signaling pathway in endometrial carcinoma cells Ishikawa and HEC-1A was investigated. The expression of mTOR was detected by confocal fluorescence microscopy in Ishikawa and HEC-1A cells. The mRNA levels of PTEN and mTOR, the downstream substrate S6K1 and 4E-BP1 protein were assayed by RT-PCR and Western blot, respectively. The expression of PTEN in Ishikawa cells was deficient, but intact in HEC-1A cells respectively （P〈0.01）. There was mTOR expression in both Ishikawa and HEC-1A cells and the phosporylated substrate levels in Ishikawa cells were higher than those in HEC-1A cells （P〈0.05）. mTOR signaling pathway is activated in two endometrial carcinoma cell strains and the status of activation is related with PTEN expression of the cells. The activation level of mTOR is higher in PTEN-deficient endometrial carcinoma cells than that in PTEN-intact endometrial carcinoma cells.     

子宫内膜癌中PTEN突变研究

目的:研究抑癌基因PTEN在子宫内膜癌中的表达,探讨其临床意义。方法:采用免疫组化法,检测对正常子宫内膜、子宫内膜增生过长、子宫内膜不典型增生各20例,子宫内膜癌50例及子宫内膜癌旁组织50例中PTEN的表达情况。结果:PTEN在正常子宫内膜、子宫内膜增生过长、子宫内膜不典型增生、子宫内膜癌旁组织及子宫内膜癌中表达缺失率逐渐上升,P<0.05,差异有统计学意义。表达缺失率与组织学类型、组织学分级有关,P<0.05,与子宫内膜腺癌肌层浸润深度、临床分期、淋巴结转移无关,P>0.05。结论:PTEN表达缺失是早期诊断子宫内膜腺癌的较好的生物标志,参与子宫内膜腺癌的发生、发展。     

胃癌组织中mTOR的表达及其临床意义

目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应和蛋白印迹检测30例胃癌组织及正常胃黏膜上皮组织中mTOR mRNA及蛋白的表达,并分析其表达与胃癌临床病理学特征的关系。结果 mTOR mRNA在胃癌组织中的阳性表达率和表达水平均显著高于正常胃黏膜上皮组织(P<0.05),且mTOR mRNA的表达随分化程度的降低而显著增高(P<0.05),有淋巴结转移者较无淋巴结转移者显著增高(P<0.05)。mTOR蛋白在胃癌组织中的阳性表达率及相对表达值均显著高于正常胃黏膜上皮组织(P<0.05),并且其在胃癌组织中的表达值随分化程度的降低而增高(P<0.05),有淋巴结转移者较无淋巴结转移者mTOR蛋白的表达值显著增高(P<0.05)。结论 mTOR的表达可能与胃癌的发生发展有关,其对判断胃癌的生物学行为具有一定的意义。     

NES1在人子宫内膜腺上皮细胞及子宫内膜癌Ishikawa细胞中的表达

目的：研究正常上皮细胞特异性-1基因（normal epithelial cell specific-1,NES1）在人正常子宫内膜腺上皮细胞和子宫内膜癌细胞Ishikawa中的表达。方法：原代培养人子宫内膜腺上皮细胞,用免疫荧光定量PCR及Western blot的方法检测NES1在子宫内膜腺上皮细胞和Ishikawa细胞中的表达。结果：成功培养人子宫内膜腺上皮细胞;NES1在正常人子宫内膜腺上皮细胞中表达,表达定位在细胞质。NES1在Ishikawa细胞中表达较在子宫内膜腺上皮细胞中明显降低（P〈0.05）。结论：NES1基因表达缺失可能是子宫内膜癌的发生机制。     

PTEN蛋白在子宫内膜癌中的表达及其意义

摘要：目的探讨PTEN蛋白在子宫内膜癌发生发展中的可能机制。方法收集子宫内膜癌50例、子宫内膜增生症25例和正常子宫内膜组织30例,采用免疫组化、Westernblot方法检测子宫内膜中的PTEN蛋白表达,研究其与子宫内膜癌进展的相关性。结果与正常子宫内膜组织和子宫内膜增生症的子宫内膜相比,子宫内膜癌中的PTEN蛋白表达率明显降低（P=0．042,0．017）,I期、Ⅱ期、Ⅲ期子宫内膜癌的PIEN蛋白阳性表达率差异均无统计学意义（P〈O．05）,高分化、中分化、低分化的PTEN蛋白阳性表达率差异亦无统计学意义（P〉0．05）。结论PTEN蛋白在子宫内膜癌表达率降低,提示PTEN基因可能具有抑制子宫内膜过度增生及癌变发生的作用。     

来曲唑对人子宫内膜癌细胞作用的研究

目的：探讨第3代芳香化酶抑制剂来曲唑（letrazole）对子宫内膜癌细胞生长的抑制作用。方法：体外培养人子宫内膜癌细胞株RL-952，培养液中加入来曲唑和（或）丙酸睾酮、醋酸甲地孕酮（MA），用计数法分析细胞的生长，用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡细胞，并对药物处理过的细胞进行苏木精．伊红（H-E）染色、光镜下观察细胞形态和凋亡细胞。结果：来曲唑联合丙酸睾酮、MA对RL-952子宫内膜癌细胞周期有影响，使G0／G1期的细胞增加，S期、G2／M期细胞减少；单用丙酸睾酮或来曲唑对RL-952子宫内膜癌细胞周期均无明显影响。结论：芳香化酶抑制剂来曲唑可抑制丙酸睾酮所致RL-952子宫内膜癌细胞株的增殖。     

罗哌卡因诱导子宫内膜癌生长阻滞和氧化损伤

目的 研究罗哌卡因对子宫内膜癌生长阻滞和氧化损伤的影响。方法 选择子宫内膜癌HEC-1B和Ishikawa细胞进行研究。采用CCK8法检测HEC-1B和Ishikawa细胞活性,最终选择1 mM的罗哌卡因处理HEC-1B和Ishikawa 细胞。克隆形成试验,流式细胞术,Transwell试验和微管形成试验分别检测细胞增殖,凋亡,侵袭及微管形成结节数;采用Western Blot检测E-cadherin、Vimentin和VEGF蛋白表达量。试剂盒检测HEC-1B和Ishikawa细胞中ROS、8-OHdG、ATP和线粒体超氧化物的表达量。结果 罗哌卡因能抑制HEC-1B和Ishikawa细胞增殖,侵袭及微管形成,并促进细胞凋亡。同时罗哌卡因能抑制 Vimentin和VEGF蛋白的表达量,促进E-cadherin蛋白的表达量。另外,HEC-1B和Ishikawa细胞中ROS、8-OHdG 和线粒体超氧化物的表达水平显著增加,ATP的表达水平显著降低。结论 罗哌卡因抑制HEC1B和Ishikawa 细胞增殖,侵袭及微管形成,并促进细胞凋亡和氧化损伤。     

子宫内膜癌的综合治疗及疗效探讨

目的 探讨子宫内膜癌综合治疗的疗效和价值。方法 回顾性分析１９９０年１月至１９９５年１２月在本院作手术和综合治疗的８５例子宫内膜癌的临床和病理资料，其中单纯手术治疗１７例，综合治疗６８例。基本手术范围为全子宫＋双附件切除术，以高危组织学图像（如子宫内膜腺癌Ⅲ级、含透明细胞癌、腺鳞癌、浆液性乳头状腺癌、深肌层浸润等）为依据，辅以术前、术后放疗，选择性追加化疗，对所有病例进行追踪随访。结果 生命表统计     

小檗碱体外抗子宫内膜癌HEC-1A细胞的作用研究

目的研究小檗碱体外对非激素依赖型人子宫内膜癌HEC-1A细胞增殖、迁移、周期、凋亡的影响。方法 MTT法检测小檗碱对人子宫内膜癌HEC-1A[中分化腺癌,雌激素受体(ER)弱阳性,孕激素受体(PR)阴性]细胞株的抑制作用;倒置显微镜观察细胞形态变化;将实验组分成50、25、12.5 mg/L高、中、低剂量组。Transwell法测定细胞体外迁移能力,流式细胞仪观察细胞周期分布,Annexin V-FITC/PI双染检测HEC-1A细胞凋亡。结果小檗碱可显著抑制HEC-1A细胞生长,在100、50、25、12.5、6.25 mg/L浓度范围内呈剂量依赖性(P0.05)。小檗碱能明显改变细胞形态,小檗碱作用于子宫内膜癌HEC-1A细胞后,倒置显微镜下可见部分细胞体积改变,细胞内出现空泡,结构破坏,裂解成碎片,贴壁细胞减少,并散在排列。抑制子宫内膜癌HEC-1A细胞体外迁移的能力,高剂量组效果更佳,迁移细胞数明显减少。小檗碱低剂量组可以将HEC-1A细胞阻滞于G0/G1期。小檗碱作用24 h能提高HEC-1A细胞总凋亡率、早期凋亡率及晚期凋亡率,早期凋亡率更明显。结论小檗碱能够抑制非激素依赖型子宫内膜癌HEC-1A细胞株的增殖、迁移,并且促进HEC-1A细胞凋亡,低剂量小檗碱能将细胞阻滞在G0/G1期。     

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路上的miRNA调控

 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(the mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路在细胞增殖、凋亡、细胞周期进程和代谢中发挥重要作用。人类肿瘤中常常发生mTOR信号通路的异常,使得mTOR通路成为抗肿瘤治疗的主要靶点。近年来研究发现miRNA(微小RNA,microRNA)参与多种生物学过程的调控。miRNA可以通过直接或间接作用调控mTOR通路,使得mTOR信号也成为miRNA抗肿瘤治疗的潜在靶点。