基于TGF-β/Smad信号通路研究芒果苷对肝纤维化大鼠的作用机制

目的基于TGF-β/Smad信号通路研究芒果苷对肝纤维化大鼠的作用机制。方法健康SD大鼠40只随机分为5组,包括空白组、模型组、芒果苷低剂量组、芒果苷中剂量组及芒果苷高剂量组。除空白组外,其余组采用四氯化碳诱导肝纤维化大鼠模型,造模成功后,芒果苷低、中、高剂量组分别以15mg/kg、30mg/kg、60mg/kg芒果苷生理盐水溶液灌胃,空白组、模型组等量生理盐水灌胃,1次/d,连续6周,待最后一次给药72h后眼眶取血并处死动物,采样。HE、Masson染色观察肝组织病理学改变; ELISA检测血清TGF-β1、HA、HYP、SOD水平;免疫组化检测肝脏组织Collagen I、α-SMA、Smad2、TGF-β的表达; RT-PCR检测肝脏组织中Smad2、TGF-β、MCP-1 m RNA表达。结果 HE和Masson染色结果显示芒果苷高剂量组可明显减轻肝脏组织病理损伤;与模型组相比,仅芒果苷高剂量组能明显降低TGF-β1、HA、HYP、Collagen I、α-SMA、Smad2、TGF-β、MCP-1水平,明显升高SOD水平,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论芒果苷具...     

中药肝心宁对CCl4诱导的肝纤维化大鼠TGF-β1/Smad信号通路的影响

目的：研究中药肝心宁对CCl4诱导的大鼠肝纤维化肝脏TGF-β1及Smad-3表达的影响,探讨其抗纤维化的作用机制。方法：采用四氯化碳皮下注射并饲以高脂低蛋白饲料和30%酒精诱导大鼠肝纤维化模型,68只雄性SD大鼠随机分成5组：正常组（11只）、模型组（15只）、阳性对照组（14只）、肝心宁高剂量组（14只）和肝心宁低剂量组（14只）,6周末处死所有动物,行HE染色,光镜下观察肝组织肝纤维化程度,并采用RT-PCR半定量方法,检测大鼠肝组织TGF-β1 mRNA、Smad-3mRNA的表达水平。结果：与正常对照组相比,模型组TGF-β1 mRNA、Smad-3 mRNA表达明显增强。经肝心宁治疗后大鼠肝脏TGF-β1表达比模型组减弱,肝心宁同时下调Smad3的表达。另外,肝心宁组大鼠肝脏病理变化显著改善。结论：肝心宁可下调TGF-β1 mRNA、Smad-3 mRNA蛋白的表达,从而抑制或减轻肝纤维化的形成。     

中药软肝饮对CCl4诱导的肝纤维化大鼠TGF-1/Smad信号通路的影响

[目的]研究中药软肝饮对CCl4诱导的大鼠肝纤维化肝脏TGF-1及Smad3,Smad7表达的影响,探讨其抗纤维化的作用机制。[方法]Wistar大鼠40只,随机分成正常对照组,模型对照组,软肝饮治疗组,鳖甲软肝片对照组,采用CCl4背部皮下注射构建肝纤维化模型,行HE和VG染色,光镜下观察肝组织肝纤维化程度。同时免疫组化SABC方法检测各组TGF-1、Smad3和Smad7的表达。[结果]与正常对照组相比,模型组TGF-1、Smad3表达明显增强,Smad7表达明显下降。经软肝饮治疗后大鼠肝脏TGF-1表达比模型组减弱。软肝饮同时下调Smad3的表达,上调Smad7的表达。另外,软肝饮组大鼠肝脏病理变化显著改善。[结论]肝炎平对大鼠肝纤维化肝脏TGF-1/Smad信号通路有明显的影响,能抑制CCl4诱导的大鼠肝纤维化,其作用机制可能为抑制TGF-1表达,下调Smad3及上调Smad7的表达。     

肝纤维化形成过程中HSC的PDGF和TGF-β信号通路研究进展

近年来,有些学者通过对肝纤维化发生机理的研究发现,肝星状细胞（HSC）的激活是肝纤维化发生的中心环节,血小板衍生生长因子（PDGF）能刺激成纤维细胞、神经胶质细胞、血管内皮细胞和平滑肌细胞的分裂增殖转化。生长因子-β（TGF-β）是一组新近发现的调节细胞生长和分化的超家族,这一家族除TGF-β外,还有活化素、抑制素等。现就肝纤维化形成过程中HSC的PDGF和TGF-β的信号通路研究进展综述如下。     

肝组织及血清中的AngⅡ、TGF-β1在慢乙肝肝纤维化中的作用研究

目的探讨肝组织及血清中AngⅡ、TGF-β1的表达与不同程度慢乙肝患者肝纤维化的关系。方法选取2015年1月~2016年12月在本院住院的丙氨酸氨基转移酶(ALT)1~2倍升高的慢性HBV感染患者50例,均行肝穿刺活检术。根据Metavir评分系统进行组织学活动度(histologic activity,A)和纤维化分期(fibrosis,F)评分,将其分为轻度纤维化组(A2F2)及显著纤维化组(≥A2F2),用ELISA法测定血清中AngⅡ、TGF-β1的水平,用免疫组化法测定肝组织的AngⅡ、TGF-β1水平。行肝功能、HBV DNA定量和肝纤维化指标检查。并对上述检查结果进行分析,初步了解血清AngⅡ、TGF-β1在轻度慢乙肝患者肝纤维化情况评估中的意义。结果严重纤维化程度高的慢乙肝患者,其血清及肝脏AngⅡ和TGF-β1水平也相应明显升高。结论 AngⅡ和TGF-β1在乙肝患者体内可能参与了肝纤维化进程,可作为乙肝患者肝纤维化程度的判定指标,为后续抗纤维化治疗提供新的思路。     

水飞蓟宾对硫代乙酰胺诱导的肝纤维化大鼠TGF-β1/Smad3信号通路的调节作用

目的 探讨水飞蓟宾对硫代乙酰胺(TAA)诱导的肝纤维化大鼠肝组织的保护作用及对TGF-β1/Smad3信号通路的调节作用.方法 45只大鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组及水飞蓟宾组,每组15只.除对照组外,其余大鼠使用硫代乙酰胺建立肝纤维化大鼠模型,水飞蓟宾组大鼠按照75.6 mg/kg的剂量给予水飞蓟宾灌胃,对照...     

加味茵芍散对肝纤维化家兔TGF-β/Smad信号通路的影响

[目的]从加味茵芍散对TGF-β/Smad信号通路影响的角度探讨该方对肝纤维化病变的作用。[方法]按0.1 ml/kg的用量腹腔注射CCl4诱导复制家兔肝纤维化模型,50只家兔随机分成模型对照组,秋水仙碱组,加味茵芍散高、中、低剂量组5组,每组10只,通过肝脏病理取材确定肝纤维化病变,同时采用实时定量逆转录-聚合酶链反应法检测TGF-β1mRNA、Smad3mRNA、Smad7mRNA等指标。[结果]与模型组相比,秋水仙碱组和加味茵芍散高、中、低剂量组家兔肝组织TGF-β1mRNA表达明显减弱,差异有统计学意义(P<0.05);加味茵芍散各剂量组、秋水仙碱组与模型组相比家兔肝组织Smad3mRNA的表达量显著性降低(P<0.05);加味茵芍散各剂量组、秋水仙碱组与模型组相比,Smad7mRNA的表达量显著升高(P<0.05)。[结论]加味茵芍散能减轻肝细胞变性,减少胶原的合成与分泌,减轻纤维组织增生,可以下调TGF-β1mRNA、Smad3mRNA的表达,提高Smad7 mRNA的表达。该方对CCl4诱导家兔肝纤维化模型具有一定保护作用,可以延缓肝纤维化的进展,其作用机制可能与调节TGF-β/Smad信号通路有关。     

小柴胡汤通过TGF-β1/Smad通路改善大鼠肝纤维化

目的研究小柴胡汤通过转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad通路改善大鼠肝纤维化的作用及机制。方法雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、中药组、中药+SRI组,采用四氯化碳皮下注射的方式建立大鼠肝纤维化模型,给与小柴胡汤灌胃及Smad2/3激活剂SRI-011381腹腔注射干预。比较各组大鼠肝脏病理改变、血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、白蛋白(ALB)、透明质酸(HA)、层粘蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)含量,以及肝脏中TGF-β1、Smad2、Smad3表达的差异。结果与对照组比较,模型组大鼠出现了典型的肝纤维化病理改变,血清中ALB的含量降低,血清中ALT、AST、HA、LN、PCⅢ的含量及肝脏中TGF-β1、Smad2、Smad3的表达水平增加;与模型组比较,中药组大鼠肝纤维化的病理改变减轻,血清中ALB的含量增加,血清中ALT、AST、HA、LN、PCⅢ的含量及肝脏中TGF-β1、Smad2、Smad3的表达水平降低;与中药组比较,中药+SRI组大鼠肝纤维化的病理改变加重,血清中ALB的含量降低,血清中ALT、AST、HA、LN、PCⅢ的含量及肝脏中TGF-β1、Smad2、Smad3的表达水平增加。结论小柴胡汤能够改善大鼠的肝纤维化,抑制TGF-β1/Smad通路是介导这一改善作用可能的分子机制。     

小柴胡汤通过TGF-β1/Smad通路改善大鼠肝纤维化

目的 研究小柴胡汤通过转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad通路改善大鼠肝纤维化的作用及机制.方法 雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、中药组、中药+SRI组,采用四氯化碳皮下注射的方式建立大鼠肝纤维化模型,给与小柴胡汤灌胃及Smad2/3激活剂SRI-011381腹腔注射干预.比较各组大鼠肝脏病理改变、血清天门...     

胆管阻塞性肝纤维化大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的表达及其意义

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)在胆管阻塞性肝纤维化大鼠中的表达,以及水飞蓟素对TRAIL表达的影响。方法雄性SD大鼠60只,随机分为纤维化模型组(模型组)、假手术组、水飞蓟素治疗组(治疗组)。采用胆总管结扎制备肝纤维化大鼠模型。造模4周后,采用酶联免疫吸附法检测大鼠血清中TRAIL的水平;放射免疫法检测大鼠血清中透明质酸(HA)、层粘蛋白(LN)及Ⅲ型前胶原(PCⅢ)的水平;免疫组化检测大鼠肝组织中TRAIL的表达。结果模型组大鼠血清TRAIL水平显著高于假手术组和治疗组(P<0.05),血清TRAIL水平与肝组织中TRAIL表达一致;血清TRAIL水平与血清HA、LN、PCⅢ水平呈正相关。结论 TRAIL可能在大鼠肝纤维化的发生发展过程中起促进作用;水飞蓟素可能通过抑制大鼠肝纤维化组织中TRAIL的表达来减轻肝纤维化程度。     

逍遥散对肝纤维化模型大鼠肝功能、肝纤维化指标的影响

目的:观察逍遥散对肝纤维化模型大鼠的肝功能、肝纤维化指标的影响。方法:选取清洁级成年Wistar大鼠80只,采用随机数字表法分为空白组(等量生理盐水)、模型组(等量生理盐水)、阳性对照组(秋水仙碱)、逍遥散低剂量组(1 g·mL~(-1)的逍遥散溶液,按照8 g·kg~(-1)灌胃)、逍遥散高剂量组(1 g·mL~(-1)的逍遥散溶液,按照16 g·kg~(-1)灌胃),均连续给药8周。结果:干预8周后,逍遥散高剂量组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)水平均低于阳性对照组和逍遥散低剂量组(P<0.05),白蛋白(albumin,ALB)高于阳性对照组和逍遥散低剂量组(P<0.05)。逍遥散高剂量组的血清透明质酸(hyaluronic acid,HA)、层黏蛋白(laminin,LN)、Ⅲ型前胶原(precollagen typeⅢ,PCⅢ)、Ⅳ型胶原(collagen typeⅣ,Ⅳ-C)水平低于阳性对照组和逍遥散低剂量组(P<0.05)。逍遥散高剂量组的转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、血小板衍生生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)蛋白表达水平低于阳性对照组和逍遥散低剂量组(P<0.05)。结论:逍遥散能显著改善肝纤维化模型大鼠肝功能(降低ALT、AST水平)和血清肝纤维化指标(降低HA、LN、PCⅢ及Ⅳ-C水平),降低肝组织中TGF-β1及PDGF蛋白表达水平。     

Study on the Anti-Liver Fibrosis Effect of Benefit Liver Granule (益肝冲剂) and Its Mechanism in Rats

Ｉｎｒｅｃｅｎｔｙｅａｒｓ，ｓｔｕｄｉｅｓｏｎＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎａｌｈｅｒｂｓｉｎ ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇａｎｄｔｒｅａｔｉｎｇｌｉｖｅｒｆｉｂｒｏｓｉｓｈａｖｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｅｄ，ｂｕｔｆｅｗｄｅａｌｗｉｔｈｉｔｓｍｅｃｈａｎｉｓｍ．Ｔｒａ     

甘草酸二胺抗大鼠肾间质纤维化作用及其机制

目的探讨甘草酸二胺对肾间质纤维化的影响及其与TGF-β1／Smad2通路的关系。方法以Wistar大鼠单侧输尿管梗阻（UUO）为模型，在不同的时间点（7、14、28d）处死动物，以Masson染色观察甘草酸二胺治疗前后梗阻侧。肾小管的损害、肾间质纤维化指数；以免疫组化染色观察肾小管间质中转化生长因β1（TGF—β1）、Smad2信号蛋白及纤维连接蛋白（FN）等的表达情况；结果①随着梗阻时间的延长，肾小管损害、肾间质纤维化程度逐渐加重，呈时间依赖性（P〈0．01）；TGF—β1、Smad2、FN蛋白呈时间依赖性上调（P〈0．01），均显著高于假手术组（P〈0．01）；TGF—β1与Smad2、Smad2与FN、TGF—β1与FN蛋白之间均呈显著正相关（r=0．987，r=0．992，r=0．981，均P〈0．01）。②甘草酸二胺能改善UUO所致的肾间质纤维化程度（P〈0．01），下调肾脏组织TGF—β1、Smad2、FN蛋白的表达（P〈0．01）。结论甘草酸二胺能减轻UUO所致的。肾间质纤维化损伤，其作用机制可能是通过抑制TGF-β1／Smads通路的激活，减少肾间质纤维连接蛋白的沉积，减轻肾间质的纤维化。     

胆总管结石患者再次手术中腹腔镜的应用价值及对肝功能的影响

目的探讨胆总管结石患者再次手术中腹腔镜的应用价值以及对肝功能的影响。方法选取2013年9月至2014年8月谷城县中医院接诊的再次手术的胆总管结石患者90例,按照随机数字表法分为观察组和对照组,各45例。观察组采用腹腔镜胆总管切开取石手术,对照组采用常规手术,对比观察两组患者手术情况、肝功能相关指标的变化以及术后病情复发率情况。结果术后,两组胆总管结石患者的丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)均有所上升,但观察组显著低于对照组[(131±10)U/L比(142±8)U/L,(137±9)U/L比(145±12)U/L);白蛋白(ALB)有所下降;但观察组高于对照组[(39±5)g/L比(35±4)g/L],差异有统计学意义(P<0.05);术后,观察组Ig A、Ig G以及Ig M指标水均有明显下降,但观察组显著高于对照组[(1.73±0.14)g/L比(1.47±0.12)g/L,(7.8±2.1)g/L比(5.8±1.0)g/L,(1.05±0.19)g/L比(0.98±0.11)g/L],差异有统计学意义(P<0.05);观察组手术时间、住院时间显著短于对照组[(112±10)min比(118±16)min、(6±2)d比(14±3)d];观察组术中出血量显著低于对照组[(36±5)m L比(89±2)m L],差异有统计学意义(P<0.05);观察组结石残留发生率和复发率显著低于对照组[11.11%(5/40)比40.00%(18/40);2.22%(1/40)比13.33%(6/40)],差异有统计学意义(P<0.05)。结论腹腔镜是治疗胆总管结石患者的有效措施,能降低结石残留率,对肝功能以及免疫功能影响小,病情复发率低,值得临床推广。     

骨髓间充质干细胞移植抗大鼠肝纤维化的作用及机制

目的：探讨骨髓间充质干细胞（ MSCs ）移植对大鼠肝纤维化模型的作用与机制。方法分离大鼠MSCs培养传代至第4代。采用大鼠腹腔注射四氯化碳制造肝纤维模型。将造模成功SD大鼠60只,随机分为3组,每组20只：（1）对照组：鼠尾静脉注射等量的生理盐水;（2） MSCs 组：鼠尾静脉注射MSCs 悬液;（3）诱导组：鼠尾静脉注射经肝细胞生长因子（HGF）诱导14 d后的MSCs悬液。于移植后第1周、2周、3周、4周分别处死大鼠5只,检测大鼠血清透明质酸（ HA）、层黏蛋白（ LN）、Ⅳ型胶原水平;光镜下观察肝组织纤维化程度;分别用PCR法及Western检测大鼠肝脏Col-Ⅰ、RhoA、Cdc42、Rac1 mRNA基因及其蛋白质表达水平。结果（1）诱导组与MSCs组的纤维化程度评分随着时间延长逐渐下降,且在第4周诱导组评分明显低于MSCs组（ P＜0．05）。（2）移植3周后各组血清HA、LN、Ⅳ型胶原含量均显著下降,4周时诱导组和MSCs组各指标含量明显低于对照组,并且诱导组低于MSCs组（ P＜0．05）。（3） MSCs移植后诱导组、MSCs组大鼠肝脏组织Col-Ⅰ、RhoA、Cdc42、Rac1 mRNA和蛋白表达均随时间延长而下降,移植4周时诱导组各项指标明显低于MSCs组和对照组（ P＜0．05）。结论 MSCs移植可抑制肝纤维化大鼠肝组织中HA、LN、Ⅳ型胶原的分泌,并可下调肝纤维化大鼠肝组织Rho信号通路相关因子RhoA,Cdc42,Rac1 mRNA及蛋白表达。 HGF诱导MSCs后抗大鼠肝纤维化作用显著增强。     

软肝颗粒抗免疫性肝纤维化作用机制研究

[目的]探讨软肝颗粒抗肝纤维化、肝硬化形成的作用机理。[方法]以秋水仙碱为阳性对照组,观察软肝颗粒高、低剂量组对免疫性肝纤维化大鼠血清转化生长因子β1(TGF β1),羟脯氨酶(Hyp),Ⅰ、Ⅲ型胶原,肝功能及肝脏病理变化的影响。[结果]软肝颗粒和秋水仙碱均能降低牛血清白蛋白(BAS)肝纤维化大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(AKP)水平,提高血清总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)水平,与模型组比较有非常显著性差异(P<0.01),其中高剂量组降ALT能力优于秋水仙碱组(P<0.05);软肝颗粒和秋水仙碱能降低血清Ⅰ、Ⅲ型胶原,TGF β1水平和肝组织羟脯氨酸含量,与模型组比较有非常显著性差异(均P<0.01),其中高剂量组作用分别优于低剂量组和秋水仙碱组(P<0.05或P<0.01),低剂量组与秋水仙碱组比较无显著性差异(P>0.05);肝组织病理改善高剂量组优于秋水仙碱组。[结论]软肝颗粒能改善肝组织病理变化,恢复肝功能,降低血清TGF β1和Ⅰ、Ⅲ型胶原水平及Hyp含量,抑制肝纤维化、肝硬化的形成。     

大鼠肝移植术后Jagged1基因在胆管中的表达变化及意义

目的 探讨Jagged 1基因在大鼠肝移植术后损伤胆管中的表达及意义.方法 100只健康雄性SD大鼠随机分为3组,A组(24只)为未手术组,B组(24只)为假手术组,C组(供、受体各26只)采用改良"二袖套"法建立大鼠肝移植模型.分别于术后1、7、14和28 d采集静脉血检测总胆红素、γ-GT、ALT,并同时处死大鼠取肝组织,苏木精-伊红染色观察移植后肝组织的病理改变,免疫组化、RT-PCR及Western blot检测Jagged 1基因的表达.结果 生化检测及苏木精-伊红染色显示大鼠肝移植术后胆管损伤淤胆明显(P＜0.05),术后14 d以胆管细胞增生为主,术后28 d出现部分胆管细胞的破坏、消失.免疫组化显示,未手术组及假手术组肝组织中Jagged 1染色为弱阳性,肝移植组中Jagged 1染色为强阳性,且主要表达于胆管细胞中(P＜0.05);RT-PCR、Western blot检测发现Jagged 1基因及蛋白在肝移植术后肝组织中呈逐渐升高的强表达,而未手术组和假手术组Jagged 1表达无明显改变(P＜0.05).结论 大鼠肝移植术后随胆管损伤加重,胆管中的Jagged 1基因表达显著升高,该基因可能参与了移植术后的胆管损伤过程.     

肝纤维化大鼠模型研究进展

肝纤维化是肝脏对各种原因所致肝损伤的创伤愈合反应,表现为肝内结缔组织增生与沉积,是慢性肝病重要的病理特征,也是进一步向肝硬化发展的重要环节.制备出标准而理想的动物模型是疾病研究的基础,选择与各种原因所致人类慢性肝病相似的肝纤维化动物模型不仅是研究肝纤维化发病机制的重要基础,也是临床评价肝纤维化诊断和治疗方法的有效手段.大鼠是肝纤维化造模的常用实验动物,本文讨论了几种肝纤维化大鼠模型的建立方法、致病机制、肝脏病理变化,每种模型的优缺点及主要用途等.     

胆管阻塞性肝纤维化模型在新生幼犬中的尝试

目的尝试采用新生幼犬制作胆管阻塞性肝纤维化动物模型。方法对新生杂种幼犬进行胆总管双重结扎(胆管结扎组,n=22)或双重结扎并加以切断(胆管切断组,n=22),建立胆管阻塞性肝纤维化模型。观察手术后2、4、6周相关指标的变化情况。结果术后次日所有幼犬均出现尿色深黄,排便陶土样。术后2周时病理组织学观察可见汇管区纤维组织轻度增生;随着梗阻时间延长,局部纤维间隔形成,纤维间隔逐渐向小叶内伸展,局部具有特征性的胆栓形成;最终肝小叶结构破坏,假小叶形成。术后2周,胆管结扎组46%(6/13)的动物出现胆管再通现象,而胆管切断组21%(3/14)的动物出现胆管再通现象,两组比较有显著差异(P<0.001)。结论对幼犬进行单纯胆总管结扎或胆总管结扎后切断都可成功制作出胆管阻塞性肝纤维化模型,但后者成功率更高;幼犬胆管阻塞后形成肝纤维化比较快,自发逆转率低。