急性白血病p53蛋白表达的临床意义

目的：检测p53蛋白在成人急性髓系白血病(AML)和急性淋巴细胞白血病(ALL)不同分组的表达率，分析p53蛋白阳性表达是否可以作为预测化疗耐药的指标。方法：急性白血病患者骨髓标本72例：初治组18例，完全缓解(CR)组38例，复发组16例。用流式细胞仪和单克隆抗体检测p53蛋白在骨髓标本中表达率。分析在不同分组之间表达率有无差异及阳性表达与诱导化疗CR率的关系。结果：1)p53蛋白总表达率为29．17％，初治组、CR组和复发组表达率分别为11．11％、21．05％和68．75％，复发组明显高于与初治组和CR组(P=0．0056，P=0．0085)，初治组和CR组表达无差别(P=0．37)。2)p53表达率在ALL55．6％)显著高于AML(20．37％)(P=0．01)。3)p53阳性组CR率(47．62％)显著低于阴性组CR率(74．51％)(P=0．028)。结论：p53表达率于复发组显著高于初治和CR组，ALL组显著高于AML组。P53蛋白高表达是对化疗耐药的指标之一。     

抑癌基因pten在骨髓增生异常综合征及急性髓系白血病的表达

为了研究pten基因在骨髓增生异常综合征（MDS）、急性髓系白血病（AML）患者中的表达及其意义，采用逆转录．聚合酶链反应（RT—PCR）和免疫印迹杂交（Western blot）方法检测Jurkat细胞株、35例MDS、45例AML及20例正常人骨髓有核细胞中pten mRNA及其蛋白的表达。结果表明：pten mRNA在阴性对照Jurkat细胞株不表达。MDS组的阳性表达率（77．1％）低于正常对照组（90．0％），但差异无统计学意义（P〉0．05）；AML组阳性表达率（60．0％）低于正常对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）；MDS—RAEB组阳性表达率（70．0％）低于MDS—RCMD组（86．7％），初发／复发AML组阳性表达率（53．3％）低于完全缓解AML组（73．3％），但差异均无统计学意义（p〉0．05）。对各组pten mRNA相对表达量分析发现，MDS及AML组均明显低于正常对照组（P〈0．005）；MDS-RAEB组低于MDS-RCMD组（P〈0．05）；初诊／复发的AML组明显低于完全缓解的AML组（P〈0．001）；MDS组与AML组相比，差异无统计学意义（p〉0．05）。PTEN蛋白表达阳性率在MDS组（65．7％）及AML组（54．8％）均低于正常对照组（90％）（P〈0．05）；MDS—RCMD组（80．O％）与MDS—RAEB组（55．0％）相比，阳性表达率均无统计学意义（P〉O．05），但初诊／复发的AML组（44．4％）与完全缓解的AML组（73．3％）相比，差异有统计学意义（p〈0．05）。结论：pten mRNA在MDS、AML中表达完全缺失并不多见，但表达强度较正常人明显减弱。PTEN蛋白在MDS、AML中阳性表达率低于正常人，且与mRNA表达水平不一致。pten基因的表达异常参与了MDS及AML的发病。     

白血病患者可溶性耐药相关钙结合蛋白基因的表达及其临床意义

目的：探讨白血病患者可溶性耐药相关钙结合蛋白（Sorcin)基因的表达及其与临床耐药和疗效的关系。方法：应用半定量RT－PCR检测95例急性白血病患者、27例非白血病患者和健康人的Sorcin基因表达水平，并分析了Sorcin基因表达的临床意义。结果：白血病患者Sorcin基因表达高于对照组，差异有显著性（P＜0．001）；急性髓系白血病（AML）复发难治组高于初诊组和完全缓解（CR）组；临床耐药组Sorcin基因表达显著高于非临床耐药性（P＜0．001）；Sorcin基因阳性表达的CR率为20．0％，Sorcin基因阴性表达的CR率为80．0％，差异有显著性（P＜0．001）；AML各亚型Sorcin基因过度表达存在差异，以M5的阳性表达率最高。结论：Sorcin基因过度表达与白血病患者临床耐药密切相关，是影响预后的重要因素，可作为检测临床耐药和判断预后的指标之一。     

儿童和成人急性淋巴细胞白血病中Ki-67和Bcl-2表达的临床意义

为了观察Ki-67和Bcl-2在儿童和成人ALL中的表达，探讨其与ALL免疫学分型和临床疗效的关系，用链霉菌抗生物素蛋白-碱性磷酸酶（SAP）免疫组织化学染色的方法，对18例儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）和43例成人声ALL患者的骨髓或外周血进行Ki-67抗原和Bcl-2蛋白的检测。结果表明：Ki-67抗原在儿童ALL中的表达略低于成人ALL，但差异无显著性（P〉0．05）；而Bcl-2蛋白在儿童ALL中的表达显著低于成人ALL（P〈0．05）；在儿童和成人ALL上各免疫表型中，T细胞、伴有髓系抗原标记的急性淋巴细胞白血病（My^＋ALL）的Ki-67阳性表达率显著高于成人（P〈0．05）；儿童和成人ALL的完全缓解率（CR）在Ki-67和Bcl-2两项同时低表达组中最高，仅一项低表达组中次之，两项均高表达组中最低。结论：对儿童和成人ALL患者进行增殖相关抗原Ki-67和抗凋亡蛋白Bcl-2的检测，能反映患者肿瘤细胞的增殖活性和凋亡抑制情况，硒-67和Bcl-2的表达与白血病ALL类型和临床疗效密切相关。     

急性白血病P-糖蛋白表达检测及临床意义

目的：检测P-糖蛋白(P-gp)在急性髓系白血病(AML)和急性淋巴细胞白血病(ALL)不同分组的表达率，分析阳性表达与诱导缓解率的相关性。方法：72例急性白血病患者骨髓标本：初治组18例，完全缓解(CR)组38例，复发组16例。用单克隆抗体和流式细胞仪检测72例患者骨髓单个核细胞P-gp表达率。分析P-gp表达在不同分组之间有无差异及阳性表达与诱导化疗CR率的关系。结果：1)P-gp总表达率34．72％，初治组、CR组和复发组分别是22．22％、23．68％和75％。复发组P-gp表达率明显高于初治组和CR组(P：0．0021，P=0．00041)；初治组与CR组之间无显著差异(P=0．90)。2)P-gp在ALL组和AML表达率分别是33．3Vo和35．70％，两组无显著差异(P=0．57)。3)P-gp表达阳性组与阴性组CR率分别是40．00％和80．85％，有显著差异(P=0．00046)。结论：1)P-gp表达率在复发组显著高于初治和CR组。2)P-gp表达率在ALL和ANLL无显著差异。3)P-gp表达阳性与CR率低相关，是AML和ALL化疗耐药的预测指标。     

老年急性髓系白血病诱导缓解化疗的疗效及预后分析

目的探讨老年急性髓系白血病（AML）诱导缓解化疗的疗效及预后。方法选择78例年龄65～88岁的AML患者,分为化疗组54例,姑息治疗组24例,收集两组临床资料并随访比较两组的预后。结果化疗组患者共有27例完全缓解（CR）,7例部分缓解（PR）,总有效率62．96％,而姑息治疗患者未有一例CR;化疗组早期病死率显著低于姑息治疗组,平均总生存时间、1年生存率显著高于姑息治疗组（P均〈0．05）,但2年生存率两组间比较无显著差异（P〉0．05）,两组生存曲线比较具有统计学差异（Log—rank）（x^2=4．589,P=0．031）;COX回归模型发现是否接受化疗与CCI评分〉2分是影响预后的独立因素。结论老年AML患者仍应选择化疗为主要治疗方案,以提升中位生存期和短期生存率。     

Bcl-2及FasL蛋白的表达与子宫内膜异位症发生发展的关系

目的 研究Bcl-2（B细胞淋巴瘤／白血病基因-2蛋白）和FasL（体内Fas蛋白的天然配体）基因与子宫内膜异位症（EMS）之间的关系。方法 采用免疫组化法（SP法）来检测Bcl-2与FasL在正常子宫内膜（19例），异位内膜（33例）及在位内膜（11例）中的表达。结果 ①正常内膜组：Bcl-2与FasL主要表达于细胞浆及细胞膜上，Bcl-2在增生期的表达显著高于分泌期（P〈0．05），FasL在增生期的表达显著低于分泌期（P〈0．05），即Bcl-2及FasL在正常子宫内膜细胞中的表达有明显周期性。②异位内膜组：Bcl-2及FasL的表达同样位于细胞浆或细胞膜，分泌期的表达与增生期相似（P〉0．05），因此在异位子宫内膜中的Bcl-2与FasL呈持续表达且丧失周期性，且二者在异位内膜中的表达显著高于正常内膜（P〈0．0001）。结论 以上结果提示具有抗凋亡活性的子宫内膜细胞逆流至盆腹腔后，因其高水平Bcl-2及FasL表达，得以逃避机体免疫清除系统的影响而在异位存活、种植，为子宫内膜异位症的发生创造了先决条件。     

EVI1 阳性急性髓细胞白血病临床及预后分析

目的分析EVIl（ectotropicviralintegrationsite1）基因在急性髓细胞白血病（AML）中的表达及意义。方法应用相对荧光定量PCR检测145例AML患者EVIl基因的表达,并观察其诱导缓解及生存情况。结果28例AML患者表达EV11基因,阳性表达率19．3％;AML各亚型间比较,M4、M5的EV11基因阳性率高于M1、M2（x2=16．47,P〈0．05）。EVIl阳性与阴性患者年龄、外周血白细胞、血红蛋白、血小板、骨髓原始幼稚细胞比例及完全缓解率等比较,差异均无统计学意义（P〉0．05）。但EV11阳性患者的1年内病死率明显高于EVIl阴性患者（x2=9．68,P〈0．05）。结论EVIl基因在AML的发病中起一定作用,可作为判断AML预后不良的一个指标。     

子宫颈癌患者新辅助化疗前后癌组织中mdr1、肺耐药蛋白mRNA及其蛋白的表达变化和意义

目的寻找预测子宫颈癌新辅助化疗效果的分子生物学指标。方法采用real time RT—PCR和免疫组织化学法检测40例子宫颈癌患者新辅助化疗前后癌组织中mdr1、肺耐药蛋白（LRP）mRNA及其编码蛋白P-gP、LRP表达水平。结果新辅助化疗前后子宫颈癌组织中mdr1的表达量分别为（45．800±0．636、62．381±0．743,t=-66．582,P〈0．01）;新辅助化疗前后子宫颈癌组织中LRP mRNA的表达量分别为（50．048±0．770、66．912±0．752,t=-78．604,P〈0．01）;新辅助化疗前后子宫颈癌组织中P-gP的阳性表达分别为40．0％（16／40）、70．0％（28／40）,x^2=7．273,P=0．007;新辅助化疗前后子宫颈癌组织中LRP的阳性表达分别为62．5％（25／40）、92．5％（37／40）,x^2=10．323,P=0．001,新辅助化疗后mdr1、LRPmRNA及其编码蛋白P-gP、LRP表达水平较化疗前明显升高,2组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。P-gP、LRP表达与患者年龄、肿瘤大小、临床分期、病理分级无关（P〉0．05）;P-gP蛋白的阳性与阴性患者其化疗有效率分别为6（37．5％）、17（70．8％）,2组比较差异有统计学意义（x^2=4．365,P〈0．05）。LRP蛋白的阳性与阴性患者其化疗有效率分别为12（48．0％）、13（86．7％）,2组比较差异有统计学意义（x^2=5．980,P〈0．05）;P-gP与LRP成正相关（x^2=4．177,r=0．323,P〈0．05）。结论P-gP、LRP表达状态有可能作为预测化疗效果的参考指标。     

CXC亚家族趋化因子受体-4在急性白血病中的表达及临床意义

目的探讨急性白血病（AL）细胞上CXC亚家族趋化因子受体-4（CXCR4）的表达及临床意义。方法采用四色流式细胞仪检测33例AL患者和7例正常对照者骨髓单个核细胞（BMMNC）表面CX—CR4的表达情况，并分析其与临床表现及疗效的关系。结果AL患者CXCR4的表达水平明显高于正常对照组（P〈0．01）；急性淋巴细胞白血病（ALL）的表达又高于急性髓细胞白血病（AML）（P〈0．01）。髓外浸润组CXCR4表达高于无髓外浸润组（P〈0．05）。CXCR4的高表达组髓外浸润发生率高于CXCR4低表达组（P〈0．05）。CXCR4的高表达且外周血白细胞（WBC）增高组髓外浸润的发生率最高，CXCR4低表达且WBC不增高髓外浸润组的发生率最低（P〈0．05）。化疗敏感组CXCR4的表达低于耐药组（P〈0．05）。结论AL患者的BMMNC存在着CXCR4的高表达，不同类型的AL患者CXCR4的表达存在差异，ALL表达高于AML。AL患者CXCR4高表达且WBC增高预示髓外浸润的可能性大。AL患者CXCR4的高表达预示白血病细胞对化疗不敏感，是判断预后的指标之一。     

急性髓系白血病TFPI-2基因表达及启动子甲基化的研究

本研究检测了组织因子途径抑制物-2（tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2）基因在急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）患者骨髓单个核细胞中的表达水平及其甲基化状态,探讨其与AML发生、发展及危险度分层的关系.分离33例初治、19例完全缓解、12例复发/难治AML患者及15例单纯缺铁性贫血患者（对照组）骨髓单个核细胞,采用实时定量PCR （RT-PCR）检测TFPI-2 mRNA在其中的表达水平,采用甲基化特异性PCR （MSP）检测启动子CpG岛甲基化状态.结果表明,初治组、完全缓解组及复发/难治组TFPI-2 mRNA表达水平均低于对照组（P＜0.05）,复发/难治组TFPI-2 mRNA表达水平明显低于初治组（P =0.006）,与完全缓解组相比,初治组TFPI-2 mRNA表达水平也显著降低（P=0.030）;64例AML患者TFPI-2基因启动子甲基化频率为64.63％ （42/64）,其中初治组、完全缓解组和复发/难治组患者中TFPI-2基因启动子甲基化频率分别为66.67％（22/33）、52.63％ （10/19）和83.33％ （10/12） （P＞ 0.05）;甲基化AML患者与非甲基化AML患者骨髓单个核细胞中TFPI-2 mRNA的相对表达量分别为0.165（0.005-2.099）和0.597（0.011-2.787） （P ＜0.05）,在对照组骨髓单个核细胞中未检测到TFPI-2基因启动子的甲基化;初治组经2个疗程化疗后,完全缓解组（CR）骨髓单个核细胞TFPI-2 mRNA表达量显著高于未完全缓解组（PR＋ NR） （P=0.031）.结论：在AML中TFPI-2基因表达下调或沉默与启动子甲基化有关,TFPI-2基因表达水平及启动子甲基化状态可以作为AML分层及病情进展的指标.     

周围型肺癌的螺旋CT征象及病理特征与MMP-2表达的相关性研究

研究MMP-2（基质蛋白酶-2）在肿瘤浸润和转移过程中的表达,并探讨其与周围型肺癌螺旋CT征象及病理学的关系。方法：收集周围型肺癌57例的螺旋CT影像学表现及病理、MMP-2免疫组织化学资料。结果：57例周围型肺癌中,MMP-2阳性表达35例,阳性率为61.40%,MMP-2的表达与病理类型无关（P〉0.05）,与病理分级显著相关（P〈0.05）。MMP-2在肿瘤直径〉3 cm的表达强度高于肿瘤直径≤3 cm者。与肺癌CT征象中深分叶征、棘突征、纵隔淋巴结转移相关（P〈0.05）,与毛刺征、胸膜凹陷征没有相关性（P〉0.05）。周围型肺癌的强化程度与MMP-2表达有一定的相关性（P〈0.05）。结论：MMP-2的异常表达与周围型肺癌的病理分级相关,提示MMP-2在肿瘤浸润和转移中起着重要促进作用;MMP-2异常表达与螺旋CT征象中肿瘤直径的大小、深分叶征、棘突征、纵隔淋巴结转移相关,是其形成的分子生物学基础。MMP-2的表达与螺旋CT征象相关,可以在蛋白表达上判断周围型肺癌的侵袭、转移和预后。     

房颤患者脑钠素、血管紧张素Ⅱ的变化及氯沙坦的干预作用

目的：探讨房颤患者脑钠素、血管紧张素Ⅱ的变化及氯沙坦在房颤中的治疗价值。方法：入选患者分为对照组（窦律）40例、永久性房颤组46例、阵发性房颤组40例。阵发性房颤组服用可达龙及氯沙坦,永久性房颤组服用氯沙坦及钙离子拮抗剂控制室率,分别检测各组治疗前后左心房内径及血清脑钠素、血管紧张素Ⅱ水平,进行对照分析。结果：（1）永久性房颤组血脑钠素（BNP）、肾素（PRA）、血管紧张素（ANG）Ⅱ水平及平均左心房内径（LAD）与对照组比较增加（P〈0.05）;阵发性房颤组血BNP、PRA、ANGⅡ与对照组比较升高（P〈0.05）,LAD与对照组比较有升高趋势,但无统计学意义（P〉0.05）。（2）房颤组血BNP水平与左房内径、血管紧张素Ⅱ浓度明显相关（r分别为0.362,0.294,P〈0.05）。（3）永久性房颤组和阵发性房颤组经氯沙坦干预后血BNP水平降低（P〈0.05）,而血浆PRA、ANGⅡ水平升高（P〈0.05）。（4）氯沙坦干预能提高窦律维持率（P〈0.05）,可降低47%的房颤复发危险（RR=0.45,95%可信区间0.260～0.749,P〈0.05）。结论：房颤患者血脑钠素水平的升高可能与房颤的心房重构有关,氯沙坦可能通过干预房颤的心房重构降低脑钠素水平并降低阵发性房颤的复发。     

Brn-3a和MDM-2在宫颈癌及癌前病变中的表达

目的：探讨Brn－3a和MDM－2在宫颈癌和癌前病变中的表达及其作为宫颈癌和癌前病变生物标志物的可行性和临床意义。方法：利用SP免疫组化法检测110例蜡块标本中Brn－3a和MDM－2的表达。结果：宫颈癌及癌前病变各组的Brn－3a表达阳性率均高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）;SCC组及CINIII组的MDM－2表达阳性率均高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）,SCC组与CINI组比较,差异有统计学意义（P〈O．05）。Brn－3a和MDM－2在各临床分期及组织学分级中的阳性表达无统计学差异（P〉0．05）;Brn－3a与MDM～2蛋白阳性表达之间无相关关系（P〉0．05）。结论：Brn－3a和MDM－2可作为宫颈癌前病变的生物标志物。     

SB203580对肠缺血再灌注大鼠p38 MAPK及细胞凋亡的影响

目的：探讨大鼠肠缺血再灌注（IR）时p38 MAPK特异性抑制剂SB203580对p38 MAPK、凋亡调控因子及凋亡细胞表达的影响。方法：Wistar大鼠30只随机分为对照组（C组）、缺血再灌注组（Ⅰ组）和SB203580组（S组）（n=10）,采用肠IR模型检测p38 MAPK、Bcl-2、Bax、TNF-及凋亡指数的水平。结果：Ⅰ组中p38 MAPK、凋亡调控因子及凋亡细胞的表达均显著高于C组（P〈0.05）,而S组中p38 MAPK、TNF-α及凋亡细胞的表达减少,Bcl-2/Bax比值增高（P〈0.05）。结论：SB203580抑制了小肠组织中p38 MAPK通路的活化,从而增加了Bcl-2的表达、减少了Bax和TNF-α的释放,在缓解细胞凋亡的过程中起到了重要的作用。     

子宫内膜息肉组织ERα、ERβ、PR及Bcl-2表达及意义

目的 探讨生育期妇女子宫内膜息肉组织中雌激素受体α（ERα）、雌激素受体β（ERβ）、孕激素受体（PR）及Bcl-2的表达及意义。方法 用免疫组织化学PV 6000法,检测110例子宫内膜息肉组织ERα、ERβ、PR及Bcl-2的表达,并采用Image Pro Plus 6.0图像分析软件进行分析。以45例正常子宫内膜作对照。结果 在增殖期,内膜息肉组织中ERα及ERβ的表达水平与正常子宫内膜比较差异无统计学意义（P〉0.05）,而PR的表达水平低于正常内膜（t=2.589,P〈0.05）,Bcl-2的表达水平高于正常内膜（t=2.716,P〈0.01）。在分泌期,内膜息肉组织中ER-α及Bcl-2表达水平高于正常子宫内膜,PR的表达水平低于正常子宫内膜,差异均有显著性（t=2.574、2.581、2.579,P〈0.05）,ERβ的表达水平与正常内膜比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 ERα、Bcl-2的高表达和PR相应的低表达可能是子宫内膜息肉形成的病因,ERα可能是在子宫内膜息肉形成过程中发挥主要作用的雌激素受体亚型。     

急性髓系白血病FANCG基因表达的研究

本研究探讨FANCG基因表达与成人散发性急性髓系白血病（AML）的相关性。采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法检测54例AML初诊患者、46例AML完全缓解（CR）患者及36例对照样本骨髓中单个核细胞FANCG基因表达的情况,以β-Actin基因作为内参,根据相对定量公式2^-△△C_T计算AML初诊患者与对照样本、AML初诊患者与AMLCR患者、AMLCR患者与对照样本FANCG基因表达差异的倍数。结果表明,AML初诊组FANCGmRNA的相对表达量为0．56±0．27,AMLCR组为0．75±0．54,对照组为0．85±0．45;AML初诊组FANCGmRNA的表达量较对照组和AMLCR组明显降低（P〈0．05）;AMLCR组FANCGmRNA的表达量与对照组比较无统计学差异。结论：FANCG基因在初诊AML患者中表达降低,AMLCR患者的FANCG基因表达与对照组无明显差异,提示FANCG基因可能与AML的发病有相关性,同时在判断AML的化疗疗效方面具有一定的临床参考价值。     

p16^INK4a在原发性系膜增生性肾小球肾炎的表达及意义

目的：探讨原发性系膜增生性肾小球肾炎（MsPGN）细胞周期素依赖蛋白激酶抑制剂p16^INK4a在肾小球和肾小管间质的表达分布及意义。方法：采用非生物素免疫组化二步法检测36例MsPGN患者活检肾组织肾小球和肾小管间质p16^INK4a的表达水平。结果：正常对照组肾小球见极少p16^INK4a表达,肾小管间质少许表达,MsPGN组肾小球和小管间质p16^INK4a表达升高,两组比较,具有显著统计学差异（P〈0.01）。36例病例中15例硬化、新月体形成组肾小球上高表达,而非硬化、非新月体形成组肾小球部分表达,组间相比具有显著差异（P〈0.01）,而小管间质表达无统计学差异（P〉0.05）。结论：MsPGN组p16^INK4a高表达,主要表达于硬化肾小球、新月体形成肾小球,p16^INK4a参与了MsPGN的细胞周期调控。     

大动脉弹性与冠状动脉病变严重程度关系探讨

目的：探讨大动脉弹性与冠心病严重程度的相关性。方法：武警总医院心血管内科病房因拟诊为冠心病者123例,按照冠状动脉造影结果分为冠脉正常组、1支病变组,2支病变组,多支病变组;造影前测定颈-桡脉搏波速度（CR-PW V）、颈-股脉搏波速度（CF-PW V）,作为评估大动脉弹性的指标。结果：（1）冠脉造影阳性者的CR-PW V、CF-PW V较冠脉造影正常者显著增高（P〈0.05）。CF-PW V在1支病变组[（11.56±1.99）m/s],2支病变组[（12.49±1.21）m/s],多支病变组[（14.14±3.18）m/s]组间相比均差异有显著性（P〈0.05）,CR-PW V随病变加重仅有较弱递增趋势（P〉0.05）。（2）预测冠心病的最佳指标是CF-PW V、年龄、性别、高脂血症、糖尿病。CR-PW V最终未进入回归模型。结论：（1）CF-PW V是冠心病的独立相关因素;（2）CF-PW V与冠状动脉病变严重程度呈正相关。