Merkel细胞和Merkel细胞瘤

Merkel细胞(MC)又名触觉细胞,1875年由Merkel最早描述。广泛分布于人和哺乳动物表皮基底层,与神经纤维终支相连,形成MC-神经轴突复合体。由Merkel细胞或其前体细胞发生的肿瘤称之Merkel细胞瘤。现就有关文献综述如下。 1 Merkel细胞     

细胞凋亡

70年代初．病理学家Kerr等在结扎了门静脉的大鼠肝组织切片中．经光镜、电镜观察．发现一忡和坏死完全不同的细胞死亡方式．Kerr就将细胞的这种死亡方式命名为调七（APOPTOSIS），以和坏死相区别．[1]此后．有关凋亡的研究曾长期被忽视．直至90年代初才逐渐受到人们的重视．并由此而形成了新的研究热点。1细胞凋亡的概念和形态特点细胞死亡是细胞生命周期的重要组成部分。机体内细胞数目是细胞增殖和细胞死亡动态平衡的结果．细胞死亡可分为细胞坏死和细胞调亡两类．细胞坏死是由于某些外界因素，如局部贫血、缺氧、高温、化学损伤等有…     

滋养细胞肿瘤的细胞滋养细胞形态定量研究

用全自动图象分析仪对滋养细胞肿瘤的细胞滋养细胞进行形态定量测量。结果表明葡萄胎和绒毛膜癌的细胞滋养细胞为异常增生所形成。葡萄胎Ⅰ至Ⅲ级到绒毛膜癌之间不存在“连续谱系”的逐渐变化，提示葡萄胎与绒毛膜癌间很可能不存在内在因果关系，即细胞滋养细胞的增生程度与细胞良恶性关系较小。以葡萄胎细胞滋养细胞的增生程度作为评估其将来恶变机会的价值较小。     

人LAK细胞的细胞化学活性与其细胞毒性关系的探讨

对诱导１ｄ、３ｄ、５ｄ ＬＡＫ细胞作ＡＮＡＥ、ＡＣＰ、ＰＯＸ及ＰＡＳ细胞化学染色，同时采用ＬＤＨ释放法对ＬＡＫ细胞的细胞毒性进行了检测。结果显示，随诱导天数的延长，ＬＡＫ细胞胞质中ＡＮＡＥ、ＡＣＰ和ＰＡＳ的反应物逐渐增多、增强、阳性率也逐渐增高，不同天数组间有显著性差异。ＰＯＸ均为阴性反应。细胞毒性试验证实，随诱导天数的延长ＬＡＸ细胞杀伤活性逐渐增强。这表明ＬＡＫ细胞的细胞化学活性与其细胞毒性密切     

HIV感染T细胞的细胞程序死亡

<正>AIDS是HIV感染CD4~+细胞,由于感染机体CD4~+T细胞的破坏导致机体免疫机能丧失的一种致死性疾病。未感染HIV者中外周血中CD4~+T细胞数为约500千/mm~3,感染HIV后,经过10年左右成为0,作为AIDS的最基本的病理变化,这种CD4~+T细胞消失的机制(见下表)。所列的多种可能性。     

朗格汉斯细胞

皮肤不仅是构成机体抵御外界生物、物理及化学等因素对机体损害的第一道防线,同时它是人体一个重要的免疫器官,积极参与免疫反应,使机体有一个稳定的内环境。朗格汉斯细胞是在1868年由德国医学学生朗格汉斯(Langerhans P.)用氯化金染色法在皮肤表皮内首先发现的,以后即命名为     

NK/LAK细胞对人口腔癌耐细胞药株杀伤活性的观察

目的明确免疫活性细胞对肿瘤细胞的杀伤活性是否与肿瘤的耐药性相关。方法采用连续形态学观察及MTT比色法,研究淋巴因子激活的杀伤(LAK)细胞及自然杀伤(NK)细胞,对人口腔癌耐药细胞株KBV200耐药性逆转前后及亲本敏感株KB的杀伤活性。(1)在肿瘤细胞与LAK细胞共育后3 h内连续在倒置显微镜下观察LAK细胞对上述3者的杀瘤效应;(2)采用MTT比色法检测NK及LAK对3株细胞的杀伤率。结果与KB细胞组相比,在KBV200和KBV200 维拉帕米组,LAK细胞出现在靶细胞周围的时间早、数量多,伸出伪足的LAK细胞比率高,出现集落样细胞团块时间亦早。NK、LAK细胞对KBV200细胞株耐药性逆转前后的杀伤率均明显高于敏感株KB(P<0.05),而对耐药株耐药性逆转前后的杀伤率无统计学差异(P>0.05);LAK对各株的杀伤活力均明显强于NK细胞(P<0.05)。结论免疫活性细胞对KBV200细胞株有较强的杀伤作用,逆转耐药性不降低免疫活性细胞杀伤活力,提示细胞过继免疫治疗可能成为控制化疗耐药病人病情发展的一个有效手段。     

蛋白激酶C活性、亚细胞分布与KBV200细胞多药耐药性的相关研究

OBJECTIVE: To investigate the relationship between protein kinase C (PKC) and multidrug resistance (MDR) in cancer cell line KBV200. METHODS: MTT assay was used to evaluate the IC50 of vincristine (VCR) and adriamycin (ADR) in KB cell line and its VCR-resistant derivative KBV200 cells. PKC activities in the 2 cell lines were assayed by measuring the incorporation of (32)P from [gamma-(32)P] ATP into the peptide substrates. RESULTS: The IC50 values of VCR and ADR in KBV200 cells was 64.03 and 18.8 folds greater than those in KB cells. PKC activities of the membrane and cytosol fraction in KBV200 cells were increased compared with that in KB cells, with the total PKC activity 1.12-fold higher. Phorbol-12-myristate-13 -acetate increased PKC activity of the membrane fraction and IC50 values of KBV200 cells, while staurosporine worked to the opposite effects. CONCLUSION: PKC may contribute to MDR mechanism in KBV200 cells.     

热疗促进HSP70表达对免疫效应细胞杀伤肿瘤的影响

目的: 探讨热疗通过促进乳腺癌药物敏感细胞株与多药耐药细胞株表达热休克蛋白(HSP)70,提高免疫效应细胞对靶细胞的杀伤活性.为开展基于热疗的细胞免疫治疗提供实验依据.方法: 采用IFNγ、CD3单抗、IL-1和IL-2等细胞因子诱导并扩增免疫效应细胞.分别给予乳腺癌药物敏感株MCF7和耐受株MCF7/ADR非致死温度热冲击42 ℃ 1 h,继续培养4 h,24 h,48 h后收获细胞,用流式细胞术检测靶细胞上HSP70的表达.用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定靶细胞增殖活性以及免疫效应细胞对靶细胞的杀伤活性.结果: HSP70在两种靶细胞上的表达有差异,加热前MCF7/ADR细胞HSP70表达明显高于MCF7,加热后4 h,HSP70在MCF7/ADR表达提高了6倍,在MCF7表达提高了22倍,超过了耐药株.药物敏感株MCF7增殖的热抑制率低于耐药株MCF7/ADR.热冲击前免疫效应细胞对MCF7细胞的杀伤活性低于MCF7/ADR细胞.热冲击后免疫效应细胞对MCF7的杀伤活性提高了86.23%,超过了对MCF7/ADR的杀伤活性(提高了30.32%).结论: 热疗明显提高HSP70在乳腺癌药物敏感与耐受细胞系上的表达,增加了免疫效应细胞对这两种靶细胞的杀伤活性.HSP70在乳腺癌药物敏感与耐受细胞系上的差异性表达对免疫效应细胞的杀伤活性有影响.     

Correlation of protein kinase C isoform expression with multidrug resistance in KBV200 cells.]

OBJECTIVE: To investigate the association of protein kinase C (PKC) isoforms and multidrug resistance (MDR) mechanism in KBV200 cells. METHODS: Western blotting was utilized to examine the expression and subcellular distribution of PKC isoforms were measured in KBV200 cells with MDR and drug-sensitive KB cells, and the fluorescence intensity of PKC isoforms was detected by flow cytometry (FCM). RESULTS: KBV200 cells possessed higher PKC activities, with increased percentage of membrane fraction. As compared with parental KB cells, the expression of PKCalpha was significantly increased in KBV200 cells, while PKCbeta and epsilon expressions remained unchanged, and PKCgamma and zeta failed to be detected. Fluorescence intensity of PKCalpha in KBV200 cells was increased. CONCLUSION: PKC might contribute to MDR phenotype in KBV200 cells, and of the isoforms so far detected, PKCalpha might play an important role in MDR phenotype.     

蛋白激酶C活性、表达及亚细胞分布与KBV200细胞多药耐药相关性的研究

目的研究多药耐药肿瘤细胞PKC活性、PKC亚型的表达和亚细胞分布与KBV200细胞多药耐药的关系。方法MTT法检测敏感株KB和耐药株KBV200细胞的耐药性；印掺入法测定PKC的活性；Western blot法检测KBV200及其亲本KB细胞株PKC亚型的表达和亚细胞分布。结果长春新碱（VCK）和阿霉素（ADK）对KBV200细胞的IC50值分别高于KB细胞（P〈0．01）；耐药指数（RI）分别为65．03和19．8。KBV200细胞的膜组分、浆组分的PKC活性均较KB细胞高,KBV200细胞的总PKC活性是KB细胞的2．12倍。Western blot结果发现KBV200和KB细胞膜组分及浆组分均有PKCq的表达，且KBV200细胞的表达较KB明显增强。PMA可升高KBV200细胞的PKC总活性和膜组分PKC活性，降低浆组分PKC活性、表达（P〈0．01）；PMA可升高VCR、ADK对KBV200细胞的IC50值（P〈0．01）。SP可降低PKC活性；SP预孵育使PKCα膜组分和浆组分的表达均降低，可降低VCR、ADK对KBV200细胞的IC50值（P〈0．01）。结论KBV200细胞的PKC活性、表达、亚细胞分布与KB细胞有明显差别，这种差别可能与KBV200耐药性的变化密切相关，在PKC亚型中，PKCα的表达明显高于其他亚型，且高于亲本株，提示KBV200细胞中PKCα与多药耐药相关。     

LAK细胞对白血病多药耐药细胞的杀伤作用

目的:研究淋巴因子激活的杀伤(LAK) 细胞对白血病多药耐药细胞的杀伤效应。方法:采用改良的四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测LAK细胞对白血病多药耐药细胞株K562/VCR的杀伤率,并与敏感株K562 相比较。结果:LAK 细胞对K562/VCR 细胞的杀伤率明显高于对K562 细胞的杀伤率,并且当效靶比为40∶1 时,这种杀伤率最高。结论:LAK细胞在体外对白血病多药耐药细胞株具有显著的杀伤作用,提示临床上用LAK细胞治疗多药耐药的白血病是可行的     

Determination of IL-2 and cytotoxicity of killer cells in MTT colorimetry

Summary The activity of interleukine 2 (IL-2) in culture supernatants of lymphokine-activated killer (LAK) cells and tumor infiltrating lymphocytes (TIL) as well as cytotoxicity of LAK cells on cultured leukemic cells were determined by MTT colorimetry. The results showed that higher activity of IL-2 in culture supernatant of LAK and TIL cells was found it could be used to support the culture of IL-2 dependent cell lines. The significant cytotoxicity of LAK cells on leukemic cell lines could be found in vitro, and it was consistent with the ratio of effector cells to target cells. The number of living leukemic cells is consistently related with the concentration of formazan metabolite of MTT. It suggested that the numbers of living cells and cytotoxicity of LAK cells could be estimated by determination of formazan metabolite OD value.     

常用抗肿瘤药物对KBV200耐药细胞株增殖抑制作用及苦参碱的耐药逆转研究

目的探讨5种常用抗肿瘤药长春新碱、阿霉素、平阳霉素、顺铂、环磷酰胺对KBV200耐药细胞株的增殖抑制作用及苦参碱的耐药逆转作用.方法以喉癌KBV200耐药细胞株为研究对象,采用MTT法观察5种抗肿瘤药物对其增殖抑制作用;并采用MTT法观察苦参碱对KBV200耐药细胞株的耐药逆转作用.结果长春新碱、平阳霉素、环磷酰胺对KBV200耐药细胞株的增殖抑制作用差,而阿霉素和顺铂对KBV200耐药细胞株的抑制作用好;当苦参碱浓度大于200 μg/ml时对KBV200耐药细胞株具有直接抑制作用;苦参碱逆转KBV200耐药细胞株对长春新碱、阿霉素耐药的作用较强,逆转KBV200耐药细胞株对平阳霉素、顺铂、环磷酰胺的耐药作用较弱.结论 KBV200耐药细胞株对长春新碱、平阳霉素、环磷酰胺3种药物有不同程度耐药;苦参碱能逆转KBV200耐药细胞株对长春新碱、阿霉素的耐药.     

KBv200细胞株耐药逆转前后HLA、B7抗原的表达

目的 探讨肿瘤多药抗性细胞的免疫逃避机制。方法 利用特异性切割mdr1的核酶为工具,以表达Mdr1的耐药细胞株KBv200为靶细胞,采用脂质体转染技术,将含核酶的质粒pHβApr-1neo/5mR3及空载体pHβApr-1neo导入KBv200及其亲本KB细胞内,运用Northern-blotting、免疫组化方法观察核酶对mdr1 mRNA及P-gp的影响,运用流式细胞仪技术检测各种不同细胞亚株HLA-Ⅰ、HLA-Ⅱ、B7-1、B7-2的表达。 结果 含核酶的质粒pHβApr-1neo/5mR3及空载体pHβApr-1neo可以在KB、KBv200细胞中稳定表达,核酶可以特异性地切割mdr1,导致KBv200/5mR3的mdr1 mRNA含量下降,P 糖蛋白（P-gp）表达减低,各种不同细胞亚株均表达较强的HLA-Ⅰ类抗原,而HLA-Ⅱ、B7-1、B7-2的表达较低。各亚株HLA-Ⅰ表达无明显差异,但HLA-Ⅱ、B7-1、B7-2的表达变化较大,KB的HLA-Ⅱ、B7-1、B7-2的表达较KBv200强,经化疗药物作用后KB的HLA-Ⅱ、B7-2进一步表达增强,核酶逆转后,KBv200/5mR3 HLA-Ⅱ、B7-1、B7-2的表达趋于接近KB水平。 结论 mdr1-核酶在细胞内具有一定的逆转肿瘤多药抗性的生物学效应;多药耐药细胞和敏感株细胞有着不同的免疫逃避特点,与敏感株相比,KBv200较易逃避机体的免疫反应。