探讨维生素C在体外对人宫颈癌HeLa细胞的增殖和凋亡的影响

目的探讨维生素C在体外对人宫颈癌HeLa细胞的增殖和凋亡的影响，以促进维生素C在肿瘤治疗上的应用。方法倒置显微镜下观察其形态学改变；MTT法检测维生素C对HeLa细胞增殖的影响；流式细胞仪分析细胞周期和凋亡率；琼脂糖凝胶电泳分析凋亡过程中细胞基因组DNA的变化。结果维生索C以浓度和时间依赖的方式阻滞HeLa细胞于G0／G1期，抑制其生长并诱导凋亡。结论维生素C可抑制HeLa细胞生长，使细胞阻滞于G0／G1期并诱导细胞凋亡．其原因可能是HPVE6蛋白的表达上调而恢复了P53的功能。     

维生素C增加人宫颈癌Hela细胞株对顺铂敏感性的研究

目的研究维生素C与顺铂合用对人宫颈癌Hela细胞株增殖的影响。方法用MTT比色法检测细胞生长抑制作用,流式细胞术测定各组细胞周期分布和凋亡率。结果维生素C和顺铂均可抑制Hela细胞生长,将肿瘤细胞阻滞在G0/G1期并诱导细胞凋亡。两药联合作用时表现出协同作用,细胞生长抑制率显著提高,凋亡率明显增加。结论维生素C可与顺铂协同抑制人宫颈癌Hela细胞的增殖,其协同作用的机制可能与诱导细胞凋亡有关。     

维生素C增加入宫颈癌Hela细胞株对顺铂敏感性的研究

目的研究维生素C与顺铂合用对人宫颈癌Hela细胞株增殖的影响。方法用MTT比色法检测细胞生长抑制作用，流式细胞术测定各组细胞周期分布和凋亡率。结果维生素C和顺铂均可抑制Hela细胞生长，将肿瘤细胞阻滞在G0／G1期并诱导细胞凋亡。两药联合作用时表现出协同作用，细胞生长抑制率显著提高，凋亡率明显增加。结论维生素C可与顺铂协同抑制人宫颈癌Hela细胞的增殖，其协同作用的机制可能与诱导细胞凋亡有关。     

甲地孕酮与三苯氧胺联合应用对乳腺癌MCF-7细胞生长和凋亡的影响

目的:探讨小剂量甲地孕酮(MA)和三苯氧胺(TAM)联合应用对乳腺癌细胞MCF-7生长和凋亡的影响.方法:分别或联合应用TAM、MA作用于MCF-7细胞,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法分析细胞生长和抑制作用,应用流式细胞技术测定细胞周期和凋亡率.结果:TAM可抑制MCF-7细胞生长,阻滞细胞周期于G0/G1期,并可诱导细胞凋亡;小剂量的MA对MCF-7细胞生长与凋亡无明显影响,G0/G1.期细胞增多;两者联合应用时,细胞的生长抑制作用加强,凋亡率上升.结论:TAM对MCF-7细胞具有抑制生长和诱导凋亡作用.加用小剂量的MA后,其抑制生长和凋亡诱导作用加强,两者联合应用具有协同作用.     

G0/G1期异时相Cyclin B1的表达对细胞凋亡的影响

目的 研究G0/G1期异时相细胞周期素B1(Cyclin B1)的大量表达对细胞凋亡的影响.方法 首先构建了四环素可诱导表达Cyclin B1的单克隆细胞株,其次,筛选出能最大程度阻滞细胞于G0/G1期的胸腺嘧啶核苷(Thymidine)浓度,最后,在阻滞的时间内加入四环素诱导Cyclin B1表达,并用免疫印迹和流式细胞仪检测证实后,用膜联蛋白/碘化丙啶(Annexin Ⅴ/PI)双染法和API法检测细胞凋亡.结果 终浓度为5 mmol/L的胸腺嘧啶核苷能阻滞单克隆细胞株在G0/G1期,并至少维持48 h;在细胞同步化期间加四环素诱导后,Cyclin B1表达增加,并且G0/G1期特异性细胞凋亡增加.结论 G0/G1期异时相Cyclin B1的表达能诱导细胞凋亡.     

茶多酚抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖及其机制的研究

目的：探讨茶多酚对人宫颈癌HeLa细胞增殖的影响及其机制。方法：MTr比色法检测茶多酚对HeLa细胞体外增殖的抑制作用;流式细胞仪检测茶多酚对HeLa细胞周期及凋亡率的影响;分光光度法检测Caspase-9的活性。结果：茶多酚对HeLa细胞的生长抑制作用随药物浓度增加而逐渐增加：流式细胞仪分析显示随着茶多酚浓度的增加,S期细胞增多,C1期细胞减少,细胞阻滞在S期,茶多酚诱导HeLa细胞凋亡,且凋亡率呈浓度依赖性：Caspase-9分光光度法检测到不同浓度的茶多酚组与对照组比较,Caspase-9的活性明显升高,且活化程度呈浓度依赖性。结论：茶多酚对HeLa细胞的生长有明显抑制作用并诱导HeLa细胞凋亡,其作用机制可能是通过活化Caspases从而诱导细胞凋亡。     

白杨素对人鼻咽癌细胞CNE-2增殖的抑制作用

探讨白杨素对人鼻咽癌细胞CNE-2增殖的抑制作用及机制。采用CCK-8法检测细胞存活率,Hochest 33258染色检测细胞形态变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期的变化,caspase-3活性检测试剂盒检测caspase-3的活性。结果表明白杨素对CNE-2细胞的生长具有较强的抑制作用,并具有明显的量-效关系;白杨素可诱导CNE-2细胞凋亡,使G0/G1期细胞明显增多,S期明显减少,使细胞周期被阻滞于G0/G1期;白杨素可升高CNE-2细胞caspase-3的活性。白杨素对CNE-2细胞生长有明显的抑制作用,其机制可能与白杨素诱导的细胞周期阻滞和细胞凋亡有关。     

鬼臼毒素衍生物OAMDP诱导HeLa细胞凋亡

鬼臼毒素衍生物OAMDP对人宫颈癌HeLa细胞显示了细胞增殖抑制活性,并呈现一定的时间和剂量的依赖性,对其作用机制进行初步研究。Hoechst 33258染色荧光显微镜观察发现OAMDP能诱导HeLa细胞核形态学改变,部分细胞呈现典型的凋亡形态学特征;Annexin Ⅴ-FITC/PI荧光双染流式细胞术检测亦证实OAMDP可以诱导HeLa细胞发生凋亡;Rhodamine123染色线粒体膜电位检测发现OAMDP会引起HeLa细胞线粒体膜电位的下降。Western Blot分析显示OAMDP上调HeLa细胞凋亡相关蛋白Bax,下调Bcl-2的表达。此外OAMDP能使HeLa细胞阻滞于S期。总之,OAMDP能够诱导HeLa细胞凋亡和S期阻滞,可能成为一种新型的抗肿瘤药物。     

氯化镧经Caspase-3途径诱导子宫颈癌细胞凋亡

目的探讨氯化镧体外诱导人子宫颈癌细胞凋亡的作用和分子机制,为探索稀土化合物的药用价值提供理论依据。方法采用形态学观察、四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定氯化镧对HeLa细胞的抑制率;流式细胞术分析细胞周期和细胞凋亡率,蛋白质印迹技术分析Caspase-3蛋白表达的改变,并以分光光度法测定其活性。结果形态学分析和MTT法显示氯化镧能够抑制HeLa细胞生长并诱导其凋亡(P<0.05),其作用呈明显的量效关系。细胞周期实验结果说明,氯化镧可令细胞大多阻滞于G1期,并呈一定的浓度依赖性;氯化镧诱导细胞凋亡亦有剂量依赖性,在5μmol/L剂量下,细胞开始凋亡,随着药物浓度的增加,凋亡率不断增高,各浓度与对照组相比差异都具有统计学意义(P<0.01)。蛋白质印迹实验显示氯化镧亦可上调活化的Caspase-3蛋白表达水平及活性且呈浓度依赖性。结论一定浓度的氯化镧可抑制人子宫颈癌HeLa细胞的增殖并通过激活Caspase途径诱导HeLa细胞凋亡。     

8-硝基白杨素诱导HL-60细胞生长抑制和凋亡

目的:研究8-硝基白杨素(8-nitrochyrsin,NOChR)对HL-60细胞生长和凋亡的影响。方法:MTT法检测HL-60细胞增殖活性;台盼蓝染色细胞计数法测定细胞存活率,绘制细胞生长曲线;PI染色流式细胞术分析细胞周期和凋亡率。结果:NOChR呈浓度依赖性对HL-60细胞增殖具有抑制作用;NOChR显著抑制HL-60细胞生长;PI染色流式细胞术结果表明以浓度依赖方式诱导HL-60细胞凋亡,且使细胞周期阻滞于G1期。结论:NOChR具有诱导HL-60细胞凋亡的作用,其机制可能与细胞周期G1期阻滞相关。     

苯丁酸钠对体外培养人宫颈癌Hela细胞增殖抑制作用

目的：探讨苯丁酸钠（SPB）在体外诱导人宫颈癌Hela细胞生长抑制、分化和细胞周期阻滞。方法：培养Hela细胞,应用MTT比色法观察苯丁酸钠对Hela细胞的生长抑制作用,倒置相差显微镜观察细胞形态改变,流式细胞术分析细胞周期。结果：苯丁酸钠可明显抑制Hela细胞的生长,呈时间-剂量依赖性,并出现典型的细胞形态学改变;苯丁酸钠诱导Hela细胞阻滞于G0／G1期,s期细胞数减少。结论：苯丁酸钠在体外抑制人宫颈癌Hela细胞的增殖,使阻滞于G0／G1期。这可能是苯丁酸钠抗宫颈癌作用的重要机制之一。     

赖氨匹林对宫颈癌Hela细胞增殖及凋亡的影响

目的研究赖氨匹林(aspisol)对人宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡和周期的影响。方法取处于对数生长期的Hela细胞,实验分为4组:阴性对照组只加等体积的低糖DMEM培养液Hela细胞;实验组加入不同浓度的aspisol,使其终浓度分别为1 mmol/L、5 mmol/L、10 mmol/L。采用描计细胞生长曲线法检测细胞增殖状态;HE染色、AO/EB方法进行凋亡细胞形态学的观察。Annexin V-FITC/PI双染检测赖氨匹林对Hela细胞作用24 h后细胞凋亡情况;流式细胞术分析赖氨匹林对Hela细胞作用24 h后细胞周期的变化。结果与对照组比较,aspisol(1,5,10 mmol/L)可呈时间、浓度依赖性抑制Hela细胞的增殖;HE染色光镜下见Aspisol组细胞密度减小,细胞变圆,胞核染色变浅。赖氨匹林(1,5,10mmol/L)作用24 h后诱导Hela细胞的早期凋亡率分别为(5.73±0.87)%、(19.11±2.86)%、(33.72±5.06)%,与对照组(0.46±0.69)%比较,差异有统计学意义(P<0.01),并呈浓度依赖性。细胞周期检测显示赖氨匹林对Hela细胞有G0/G1期阻滞作用。结论 aspisol对宫颈癌Hela细胞有抑制增殖、诱导其凋亡和改变其细胞周期分布,阻滞Hela细胞于G0/G1期。     

玉竹提取物B对Hela细胞凋亡的影响

目的 观察中药玉竹提取物B(EB—PAOA)是否能引起人宫颈癌Hela细胞的凋亡。方法 将体外培养的人宫颈癌Hela细胞与不同浓度的EB—PAOA共育，通过倒置显微镜和透射电镜进行形态学观察，确认凋亡细胞；通过流式细胞仪检测凋亡率和细胞周期的分布。结果 经过EB—PAOA处理后，在倒置显微镜和透射电镜下可观察到EB—PAOA引起的典型的凋亡形态学变化；流式细胞仪测定显示经EB—PAOA处理后的Hela细胞凋亡率呈时间-剂量依赖性，G0／G1期细胞减少，S期细胞减少，G2／M期细胞增多。结论 EB—PAOA能够诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡，EB—PAOA抑制Hela细胞生长的机制之一是诱导该细胞凋亡。     

蝙蝠葛活性成分对Hela细胞株的抑制增殖作用

[目的]探讨蝙蝠葛活性成分对体外培养的人宫颈癌Hela细胞株的抑制增殖作用.[方法]应用MTT法检测蝙蝠葛活性成分对体外培养的人宫颈癌Hela细胞株增殖抑制作用及其细胞毒活性;分别采用倒置显微镜、吖啶橙(AO)/溴化乙锭(EB)染色观察Hela细胞处理前后的形态学变化;采用流式细胞仪检测Hela细胞株的细胞周期分布相;应用免疫细胞化学法检测增殖细胞核抗原Ki-67、细胞周期蛋白CyclinD1及候选抑癌基因Syk的表达情况.[结果]MTT比色法观察结果表明,蝙蝠葛活性成分对人宫颈癌Hela细胞株有明显的抑制增殖作用,且呈现明显的质量浓度和时间依赖性.倒置显微镜、AO/EB染色观察见,蝙蝠葛活性成分处理的Hela细胞出现一系列典型的凋亡细胞特征.流式细胞仪检测结果显示,蝙蝠葛活性成分作用后加药组出现G0/G1期细胞比例显著增加(P<0.01),而S期和G2/M期细胞比例则明显下降(P<0.01),将细胞阻滞在G0/G1期;免疫细胞化学观察结果表明,蝙蝠葛活性成分作用后加药组Syk表达增加,Ki-67和CyclinD1蛋白表达降低,与对照组相比较差异均有统计学意义(P<0.01).[结论]蝙蝠葛活性成分对人宫颈癌Hela细胞株有明显的生长抑制作用,并可导致G0/G1期阻滞.G0/G1细胞周期阻滞可能是蝙蝠葛活性成分抗肿瘤作用的机制之一.     

维生素C联合顺铂与单药顺铂对Hela细胞生长状况影响的比较

目的 探讨维生素C(VC)和顺铂(DDP)联合应用对人宫颈癌Hela细胞株的体外抑制作用.方法 将VC、DDP单独或联合应用于Hela细胞,用MTT法检测细胞增殖的抑制率,并于用药后应用激光共聚焦显微镜观察细胞形态学变化.结果 不同浓度的顺铂对细胞生长均有抑制作用,随药物浓度的增加,抑制作用加强.VC和DDP联合应用后...     

下调MCT1表达抑制宫颈癌Hela细胞增殖并促进其凋亡

［摘要］ 目的探讨下调单羧酸转运蛋白1(monocarboxylate transporter 1,MCT1)表达对宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响及其机制。 方法将体外培养的Hela细胞分为未转染组、阴性对照组和MCT1-siRNA组,Western blot检测Hela细胞中MCT1、Bcl-2和Bax蛋白表达水平,MTT法检测Hela细胞增殖活力,流式细胞仪检测Hela细胞周期分布和凋亡率。 结果与未转染组比较,阴性对照组Hela细胞中MCT1、Bcl-2、Bax蛋白表达水平和细胞增殖、周期分布以及细胞凋亡率差异均无统计学意义（P＞0.05）,MCT1-siRNA组细胞中MCT1和Bcl-2蛋白表达水平、细胞增殖活力和细胞在S期所占百分比均明显降低,Bax蛋白表达水平、细胞在G0/G1期所占百分比和细胞凋亡率均明显升高（P＜0.05）。 结论下调MCT1表达可通过诱导细胞周期阻滞抑制Hela细胞增殖,并通过上调Bax和下调Bcl-2蛋白表达促进Hela细胞凋亡。     

苯丁酸钠和全反式维甲酸对宫颈癌细胞株Hela的影响

目的研究组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)抑制剂苯丁酸钠(Sodium 4-Phenylbutyrate,SPB)和全反式维甲酸(all transretinoic acid,ATRA)单独及联合运用对宫颈癌细胞株Hela生长及侵袭能力的影响,探讨苯丁酸钠和全反式维甲酸联用的效果。方法体外培养宫颈癌细胞株Hela细胞,根据处理因素不同分为4组,A组:对照组,PBS液(1ml)处理组;B组:1μmol/L ATRA单药处理组;C组:1 mmol/L SPB单药处理组;D组1μmol/L ATRA+1 mmol/LSPB处理组。应用细胞生长曲线、四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、细胞克隆形成试验观察细胞生长的抑制作用;采用流式细胞术测定细胞周期分布的变化;用Transwell小室法检测药物处理前后细胞侵袭力的变化。结果与对照组、单用药组相比,ATRA和SPB联用时宫颈癌细胞株Hela细胞的生长速度明显减慢,克隆形成抑制率达80.37%(P<0.05),细胞周期被阻滞在G0/G1期,S期细胞数减少;药物处理后宫颈癌细胞株Hela的侵袭能力降低,和对照组、单用药组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论组蛋白去乙酰化酶抑制剂苯丁酸钠和全反式维甲酸联用时有明显的增效作用。     

下调SUZ12抑制人宫颈癌细胞的增殖及作用机制

目的 探讨下调SUZ12表达对人宫颈癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法 通过RNAi（RNA干扰技术）下调SUZ12和Cdc25C蛋白的表达,通过慢病毒转染法对Hela细胞构建Cdc25C蛋白过表达及其对照细胞株,并用含嘌呤霉素培养基进行为期14 d的筛选,荧光拍照检测绿色荧光蛋白以及Western Blot法进行验证;MTT法检测下调SUZ12和Cdc25C蛋白对细胞增殖的影响;Western Blot法检测下调SUZ12表达后蛋白表达量的改变。结果 MTT结果显示,siSUZ12组中Hela及SiHa的增殖率远低于对照组,细胞增殖明显受到抑制,Hela的生存率为（60.65±7.64）%（P<0.01）, SiHa的生存率为（73.81±9.30）%（P<0.01）。时效研究结果显示,转染siSUZ12后,Hela细胞在转染第2天后开始出现抑制,其中第5天最为明显,生存率为（56.13±7.78）%（P<0.01）;SiHa细胞在转染第1天后开始出现抑制,其中第5天最为明显,生存率为（70.50±3.15）%（P<0.01）。细胞周期结果显示,Hela细胞在siSUZ12作用48 h后,G₀/G₁期的比例明显增加（P<0.05）,细胞发生G₁/S期阻滞。SiHa细胞在siSUZ12作用60 h后,G₂/M期细胞数比例显著升高（P<0.01),细胞发生G₂/M期阻滞。Western Blot结果显示,下调SUZ12表达后,细胞内Cdc25C的表达明显被抑制。阻断Cdc25C的表达后能显著拮抗siSUZ12对Hela、SiHa细胞的抑制作用,而过表达Cdc25C能降低siSUZ12对细胞的抑制作用。结论 下调SUZ12能通过干扰Cdc25C的表达,产生抑制人宫颈癌细胞增殖的作用。