长链非编码RNA MEG3对胃癌细胞增殖的影响研究

目的:探讨长链非编码RNA MEG3在胃癌组织及细胞系中的表达水平,以及过表达MEG3对胃癌细胞增殖能力的影响,并探索其可能的作用机制。方法:用定量PCR（qRT-PCR）技术检测胃癌组织及细胞系中MEG3的表达水平;通过转染pCDNA-MEG3上调MEG3的表达水平,并通过qRT-PCR检测转染效率。用MTT和克隆形成实验检测上调MEG3的水平对BGC-823细胞和MGC-803细胞的增殖能力的影响,用Western blot实验检测这两种细胞中上调MEG3的水平对p53蛋白的表达水平的影响。结果:相比正常胃组织及细胞,在胃癌组织和细胞中MEG3的表达出现显著下调,SGC7901、MGC-803和BGC-823细胞中MEG3的表达水平分别是正常胃上皮细胞GES-1中的73.6 %、42.0 %和27.1 % （p<0.05）。BGC-823细胞和MGC-803细胞中转染pCDNA-MEG3能显著上调MEG3的表达,MEG3的表达水平分别为对照组的252倍和311倍（p<0.05）;MTT和克隆形成实验显示,上调MEG3的表达能降低BGC-823细胞和MGC-803细胞的增殖能力。Western blot实验显示,转染了pCDNA-MEG3的MGC-803和BGC-823细胞中p53的表达相较对照组中显著增加。结论:胃癌组织及细胞中MEG3的表达下调,且这可能通过抑制p53蛋白的激活从而促进胃癌细胞增殖,影响胃癌的发生和发展。     

长链非编码RNA UCA1 在胃癌组织中的表达及其效应分析

目的 分析胃癌组织特征长链非编码RNA（lncRNA）表达谱,并探讨长链非编码RNA UCA1 在胃癌中的表达及效 应。方法 采用基因芯片检测6 例胃癌患者的肿瘤组织及癌旁正常组织LncRNA表达水平,分析胃癌组织特征lncRNA 表达谱,进一步通过定量PCR 检测40 例胃癌及其对应的癌旁正常组织中UCA1的表达并分析淋巴结转移、肿块大小、细胞分化程度及病理分期等临床病理特征的关系。在此基础上,利用siRNA 下调AGS 胃癌细胞内UCA1 表达水平,利用CCK-8 试剂盒检测UCA1干预对胃癌细胞增殖能力的影响。结果 LncRNA 基因芯片检测到胃癌组织1 021条差异＞2倍的lncRNA（P＜0.05）,定量PCR 验证明显差异表达的UCA1在胃癌组织中的表达显著高于正常组织（P＜0.01）。此外,临床病理相关分析显示,UCA1表达水平还与胃癌的细胞分化程度及病理分期相关。分化低的胃癌组织中UCA1表达水平明显高于中、高分化的胃癌组织（P＜0.05）;病理分期Ⅲ/Ⅳ期胃癌组织的UCA1 表达水平明显高于Ⅰ/Ⅱ期的标本（P＜0.05）。此外,下调UCA1 胃癌细胞表达可明显抑制细胞增殖。结论 异常表达的lncRNA 参与了胃癌的发生、发展,其中肿瘤组织上调表达的UCA1是胃癌重要的促癌基因。     

p53调控的长链非编码RNA在癌症发生发展中的研究现状

<正>经典的分子生物学中心法则认为,遗传信息是从DNA转录到mRNA,再从mRNA翻译到蛋白质[1]。在此过程中蛋白质是基因功能的执行者,RNA在蛋白质的合成过程中扮演着不可或缺的作用。随着研究的深入,我们认识到中心法则事实上并不能涵盖和解释所有的生物学现象。深度测序技术的迅猛发展,尤其是在“人类DNA元件百科全书计划”完成之后发现,     

长链非编码RNA MEG3在肿瘤中的作用及机制

MEG3是一种印记基因,位于人类染色体14q32.3的DLK1-MEG3位点,属于长链非编码RNA,在肿瘤组织中表达异常,可通过不同的机制参与肿瘤的发生发展。本文就MEG3在肿瘤中的作用及其机制做一综述。     

长链非编码RNA DNM3OS在胃癌中的研究

目的 本研究旨在探讨DNM3OS对胃癌细胞的作用及其对胃癌患者预后预测的作用。方法 选取2012年1月~2016年1月在笔者医院接受手术的胃癌患者,提取总RNA,检测DNM3OS的水平,随访患者预后。同时培养胃癌细胞AGS和MKN45细胞系,采用DNM3OS干扰RNA沉默DNM3OS,通过Tunel方法检测胃癌细胞的凋亡水平,通过MTT实验检测细胞活性;采用免疫印迹法检测信号通路。结果 与癌旁组织比较,DNM3OS在胃癌组织中的表达显著上调(P＜0.05),且DNM3OS高表达患者肿瘤浸润深度,淋巴结转移和TNM分级与DNM3OS低表达患者比较,差异有统计学意义(P＜0.05);DNM3OS高表达患者病死率明显高于DNM3OS低表达患者(P＜0.05)。在胃癌细胞AGS和MKN45细胞系中沉默DNM3OS后,DNM3OS沉默组细胞活性较对照组明显降低(P＜0.05),细胞凋亡较对照组明显增加(P＜0.05);免疫印迹法结果显示,DNM3OS沉默组细胞Akt的活化较对照组明显降低(P＜0.05)。结论 DNM3OS的表达与胃癌患者预后明显相关,其通过增加Akt的活化促进胃癌细胞的生存。     

长链非编码RNA AL139147.1在胃癌中的表达及对MKN-45胃癌细胞生长的影响

目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)AL139147.1在胃癌中的表达及其对胃癌细胞增殖和生长周期的影响.方法:利用癌症基因组图谱(TCGA)和基因型—组织表达数据库(GTEx)中的高通量测序数据,对AL139147.1表达及其与临床资料的相关性进行分析.按照AL13914...     

胃液长链非编码RNARMRP的检测及其临床价值分析

目的检测长链非编码RNA（lncRNA）线粒体RNA处理核糖核酸内切酶RNA组份（RMRP）在不同患者胃液中的水平及其变化规律,结合临床病理因素探讨胃液RMRP作为胃癌筛查标志物的临床价值。方法以胃液GAPDH为参照,采用qRT-PCR法检测并比较45例正常或轻度胃炎患者胃液、30例胃溃疡患者胃液、16例慢性萎缩性胃炎患者胃液和39例胃癌患者胃液中RMRP水平及其变化规律,结合临床病理因素探讨胃液RMRP水平与胃癌的相关性,构建ROC曲线确定胃液RMRP作为胃癌筛查标志物的灵敏度与特异度,通过联合检测胃液RMRP、血清癌胚抗原（CEA）和胃液CEA在早期胃癌和进展期胃癌中的阳性率探讨胃液RMRP的临床价值。结果相对于正常或轻度胃炎患者,胃溃疡患者胃液RMRP水平无明显变化（P＞0.05）,而慢性萎缩性胃炎患者胃液RMRP水平明显降低,胃癌患者胃液RMRP水平显著升高（均P＜0.01）。胃癌患者胃液RMRP水平与患者年龄、幽门螺杆菌感染情况均有关（均P＜0.05）。ROC曲线显示胃液RMRP的灵敏度和特异度分别为0.56和0.75。胃液RMRP联合血清或胃液CEA筛查胃癌的效果明显优于传统肿瘤标志物血清CEA水平（均P＜0.05）。结论胃液lncRNARMRP是潜在的胃癌筛查标志物,为临床诊治胃癌研究提供了新的思路。     

胃癌中lncRNA HOXA-AS2的表达及其对胃癌细胞生物学行为的影响

目的 分析lncRNA HOXA-AS2在胃癌组织中的表达水平及其对胃癌恶性生物学的影响。方法 采用qPCR方法检测胃癌组织和胃癌细胞系中lncRNA HOXA-AS2的表达水平;通过生物信息分析在线网站Kaplan-Meier Plotter 分析lncRNA HOXA-AS2对胃癌患者预后的影响;分析lncRNA HOXA-AS2表达水平与胃癌患者临床病理特征之间的关系;构建干扰lncRNA HOXA-AS2表达的细胞株,利用CCK-8、克隆形成实验、划痕实验、Transwell实验、分析下调lncRNA HOXA-AS2对胃癌细胞增殖能力,迁移能力,侵袭能力的影响。结果 与癌旁组织比较,胃癌组织中lncRNA HOXA-AS2的表达水平显著上调;与人正常胃黏膜细胞GES比较,胃癌细胞系中lncRNA HOXA-AS2的表达水平显著升高(P＜0.05);生存分析表明,lncRNA HOXA-AS2的高表达与胃癌患者的不良预后相关;lncRNA HOXA-AS2的表达水平与胃癌分期,淋巴结转移和分化程度相关(P＜0.05);转染siRNA的胃癌细胞中lncRNA HOXA-AS2的表达水平显著下降(P＜0.05),其细胞增殖、迁移和侵袭能力也显著下降(P＜0.05)。结论 lncRNA HOXA-AS2在胃癌中发挥癌基因的作用且与预后相关,下调lncRNA HOXA-AS2的表达可抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭能力。     

长链非编码RNA BANCR对非小细胞肺癌增殖和侵袭的影响

目的:探讨长链非编码RNA BANCR在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织及细胞系中的表达水平,以及BANCR对NSCLC细胞增殖和侵袭的影响?方法:用定量PCR技术检测NSCLC组织及细胞系中BANCR的表达水平;通过转染pcDNA-BANCR上调BANCR的表达水平,并通过qPCR检测转染效率?用Transwell实验检测上调BANCR的水平对SPC-A1细胞和A549细胞增殖和侵袭能力的影响,Western blot检测这2种细胞中上调BANCR的水平对上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)标志物上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达水平的影响?结果:相比正常肺组织及细胞,在NSCLC组织和细胞中BANCR的表达出现显著下调?MTT实验显示,上调BANCR的表达能降低SPCA1细胞和A549细胞的增殖和侵袭能力?BANCR过表达能通过上调E-cadherin表达并下调Vimentin表达,影响EMT?结论:BANCR可通过影响EMT,抑制NSCLC细胞的增殖和侵袭?     

P^53蛋白在42例胃癌的表达与分析

应用免疫化技术检测了４２例胃癌标本Ｐ＾５３蛋白的异常表达。结果显示：Ｐ＾５３蛋白表达的阳性率为３３．３３％（１４／４２），癌旁粘膜及癌间质Ｐ＾５３蛋白表达为阴性。     

长链非编码RNA CCAT2在肝癌中的作用及其机制

目的 探讨长链非编码RNA CCAT2(LncRNA CCAT2)在肝癌中的作用及机制.方法 选取我院2013年1-6月60例肝癌及其癌旁组织,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测其组织中CCAT2的表达,同时培养正常肝细胞L02和人源性肝癌细胞系HepG、H2P、SMMC和HLE细胞,采用qRT-PCR检测细胞中CCAT2的表达,采用siRNA干扰细胞CCAT2表达后,在24、48、72、96 h用CCK-8检测SMMC和HLE细胞增殖;Transwell实验分析细胞迁移和侵袭情况;采用流式细胞仪分析CCAT2对SMMC和HLE细胞周期分布和凋亡的影响;Western blot检测P53、Bcl-2、Caspase-8蛋白的表达.结果 在肝癌组织和肝癌细胞中,CCAT2的表达显著升高(P均＜0.05),CCAT2高表达的患者预后和生存率均较低(P均＜0.05).肝癌细胞中低表达的CCAT2能显著抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭(P均＜0.05).肝癌细胞中低表达的CCAT2也能使肝癌细胞周期停留在Go/G1期并促进细胞凋亡(P均＜0.05).采用siRNA干扰细胞CCAT2表达后,肝癌细胞中P53和Caspase-8蛋白的表达显著升高(P均＜0.05),Bcl-2蛋白的表达显著降低(P＜0.05).结论 CCAT2在肝癌组织和细胞系中高表达,siRNA干扰CCAT2表达后能够抑制细胞增殖、迁移、侵袭以及促进肝癌细胞的凋亡,其机制可能通过升高P53和Caspase-8蛋白的表达和降低Bcl-2蛋白的表达有关.     

长链非编码RNA-FENDRR在膀胱癌组织中的表达及临床意义

目的:探究长链非编码RNA-FENDRR在膀胱癌组织中的表达情况及其与膀胱癌患者临床预后的关系。方法:收集50例（对）膀胱癌组织,用qRT-PCR检测FENDRR的表达量;同样在T24、5637、EJ和 253J-BV 等4种膀胱癌细胞系中验证其表达水平。用χ2检验分析FENDRR和患者临床特征的相关性,用Kaplan-Meier生存曲线分析不同表达组患者的生存状况,用Log-rank检验两组患者的肿瘤特异性生存 率差异。结果:LncRNA-FENDRR在膀胱癌组织中明显下调（t=7.222,P＜0.000 1）,细胞系中验证结果一致,其中膀胱癌细胞系5637中表达量最低（P＜0.000 1）。相关性分析发现FENDRR表达水平与患 者浸润深度有关（χ2=4.612,P＜0.05）。生存分析发现,lncRNA-FENDRR低表达组患者的肿瘤特异性生存率显著低于高表达组（HR=3.17,95%CI:1.37～7.32,P<0.05）。结论:LncRNA-FENDRR在膀胱 癌组织中显著下调,其低表达与膀胱癌患者的不良预后有关。     

长链非编码RNA C6orf176两个转录本在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的：探讨长链非编码RNA C6orf176两个转录本C6orf176-TV1和C6orf176-TV2在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及临床意义。方法：采用实时荧光定量PCR技术检测57例NSCLC组织及配对癌旁组织中C6orf176-TV1与C6orf176-TV2的表达水平,并分析其与临床病理特征的关系。结果：NSCLC组织中C6orf176-TV1表达下调42例,表达上调15例,其表达与肿瘤分化程度有关(P<0.05),与性别、年龄、吸烟史、病理类型、TNM分期均无关。C6orf176-TV1表达诊断癌组织与癌旁组织的受试者工作特征(receiver operator characteristic,ROC)曲线下面积(area under curve,AUC)为0.708(95% CI：0.615~0.802),灵敏度和特异度分别为51%和88%。NSCLC组织中C6orf176-TV2表达下调39例,表达上调的18例,其表达与肿瘤分化程度有关(P<0.05),与性别、年龄、吸烟史、病理类型、TNM分期均无关。C6orf176-TV2表达诊断癌组织与配对癌旁组织的ROC的AUC为0.64(95% CI: 0.531~0.749),灵敏度和特异度分别为49%和75%。57例标本中C6orf176-TV1与C6orf176-TV2同时上调或下调的标本有53对,其相关系数为0.99。结论：C6orf176-TV1与 C6orf176-TV2在NSCLC组织中均表达下调,其与肺癌肿瘤细胞分化程度相关,可作为NSCLC的诊断指标。     

生长抑素2型受体mRNA在人胃上皮永生细胞及肿瘤细胞株中的表达

目的 了解多种癌细胞上是否较广泛表达生长抑素 2型受体,同时了解 p53突变与否对生长抑素 2型受体的表达有无影响。方法 用 RT-PCR和克隆的人生长抑素 2型受体 cDNA为探针检测人胃上皮永生细胞、人胃癌细胞、胰腺癌细胞、结肠癌细胞、膀胱癌细胞共 10株细胞上该受体 mRNA的表达。结果 发现除 1株胰腺癌细胞外,其余 9个细胞株均表达生长抑素 2型受体。一株胃癌细胞分别转染了野生型和突变型的 p53基因,也同样表达生长抑素 2型受体。 结论 提示生长抑素 2型受体在癌细胞的表达有较大的普遍性,在胃癌细胞中生长抑素 2型受体的表达与 p53是否突变可能无关。     

米托蒽醌对大鼠胃癌基因PCNA、Caspase-3和p53基因表达的影响

目的研究米托蒽醌对胃癌大鼠病变胃黏膜增殖细胞核抗原(PCNA)、Caspase-3和p53基因表达的影响。方法制作N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱发的大鼠胃癌模型,实验分为空白对照组(N组)、模型对照组(M组)、小剂量米托蒽醌干预组(ML组)及大剂量米托蒽醌干预组(MH组),每组25只动物。免疫组织化学S-P法检测胃癌组织中PCNA的表达,分光光度计法检测Caspase-3活性,Real-Time PCR和Western blotting检测p53基因和蛋白的表达情况。结果 N组PCNA表达阴性,ML组和MH组的PCNA阳性率显著低于M组(P<0.01,P<0.05)。M组和MH组的Caspase-3活性均显著低于N组(P<0.01,P<0.05);但ML组和MH组的Caspase-3活性又显著高于M组(P<0.01,P<0.05)。M组的p53基因表达明显高于N组(P<0.01);ML组和MH组的p53基因表达逐渐降低(P<0.01,P<0.05),但仍高于N组。p53蛋白的表达量在M组、ML组和MH组中依次下降。结论米托蒽醌可能通过改变基因的表达达到治疗胃癌的效果,对抑制或逆转癌症的发展具...