不同血管活性药物对兔脓毒症休克肝损伤的保护作用

目的:评价不同血管活性药物对兔脓毒症休克肝损伤的保护作用。方法:采用盲肠结扎穿孔(cecalligation and puncture,CLP)联合静脉注入内毒素制备脓毒症休克模型。将56只新西兰大白兔随机分为4组:造模组(B组,n=14),以1 ml.kg-1.min-1速率输注林格液进行液体复苏;多巴胺组(C组,n=14),以1 ml.kg-1.min-1速率输注林格液进行液体复苏,持续输注多巴胺3～15μg.kg-1.min-1;去甲肾上腺素组(D组,n=14),以1 ml.kg-1.min-1速率输注林格液进行液体复苏,持续输注去甲肾上腺素0.05～0.5μg.kg-1.min-1;对照组(A组,n=14),动物仅接受剖腹探查术。各组分为3、6 h两个时相点各7只,留取血标本后离心测定各时相点丙氨酸氨基转移酶(ALT)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β),并留取肝脏标本作光镜检查。结果:B、C、D组血中ALT、TNF-α和IL-β值在各时相点均明显高于A组(P<0.05);C、D组血清ALT、TNF-α和IL-β值在3、6 h均低于B组,差异有统计学意义(P<0.05);C组3 h血清指标与D组比较差异无统计学意义(P>0.05),而6 h明显高于D组(P<0.05);形态学观察发现C、D组各时相点肝损伤明显轻于B组。结论:脓毒症休克时肝损伤严重,去甲肾上腺素和多巴胺均可以有效缓解脓毒症休克引起的肝损伤,随着感染时间的延长,应用去甲肾上腺素的效果优于多巴胺。     

卡氏肺孢子虫肺炎支气管肺泡灌洗液中表面活性蛋白A和D的变化

目的为进一步明确表面活性蛋白与卡氏肺孢子虫肺炎(PCP)的关系及肾上腺皮质激素对表面活性蛋白的影响.方法通过每周两次皮下注射25mg醋酸可的松8-12周建立PCP及细菌性肺炎大模型.收集支气管肺泡灌洗液(BALF),计数BALF中有核细胞数并分类,用免疫印迹法检测表面活性蛋白A(SP-A)及表面活性蛋白D(SP-D).将大分为免疫抑制组(共三组)及正常对照组.Ⅰ组:正常对照(n=6),为健康SD大;Ⅱ组:阴性对照(n=6),为注射醋酸可的松8周以上无肺部感染的大;Ⅲ组:细菌性肺炎(n=11),为注射醋酸可的松8周以上出现细菌性肺炎而未分离到其它病原体的大;Ⅳ组:PCP(n=14),为注射醋酸可的松8-12周出现PCP而未分离到其它病原体的大.结果阴性对照组BALF中细胞总数低于正常对照组(P＜0.001).PCP组BALF中细胞总数及多形核细胞(PMNs)百分数高于阴性对照组(P＜0.01),但低于细菌性肺炎组.PCP组BALF中SP-A浓度(45.1±22.1μg/ml)显著高于阴性对照组(16.2±9.9μg/ml,P＜0.05)及细菌性肺炎组(6.2±5.6μg/ml,P＜0.001).我们也发现PCP组中SP-D相对含量(24 249±4780灰度值)显著高于阴性对照组(13 384±2887,P＜0.001)及细菌性肺炎组(11 989±2750灰度值,P＜0.001).PCP中重度组SP-A、SP-D高于PCP轻度组(分别P＜0.01,P＜0.001).阴性对照组SP-A、SP-D高于正常对照组,但无统计学差别.结论卡氏肺孢子虫特异性刺激引起BALF中SP-A、SP-D浓度增加,SP-A、SP-D增加与肺内富含卡氏肺孢子虫有关,而与肾上腺皮质激素的应用无关.     

肺炎支原体肺炎患儿血清及支气管肺泡灌洗液中SP-A、SP-D和KL-6含量变化及意义

目的:探讨肺表面活性蛋白A、D(SP-A、SP-D)和KL-6在肺炎支原体肺炎(MPP)血清和支气管肺泡灌洗液(BALF)中变化及意义。方法:采用自身对照方法,根据肺CT影像结果对32例单侧肺实变MPP患儿血清、患侧和健侧BALF中SP-A、SP-D与KL-6进行检测和统计分析。结果:32例MPP患儿患侧BALF中SP-A、SP-D和KL-6含量分别为243(90~468)、187(43~333)和148(47~426);健侧分别为104(37~257)、56(25~131)和35(12~147);血清中分别为35(25~69)、33(9~149)和24(15~62)。血清中KL-6与患侧和健侧BALF中KL-6的相关系数分别是-0.534和-0.378。结论 :CAP患儿血清中SP-A、SP-D和KL-6水平变化与肺组织感染具相关性,血清中KL-6可能比SP-A、SP-D更为敏感。     

“邵氏五针法”为主治疗过敏性鼻炎

目的:观察"邵氏五针法"为主治疗过敏性鼻炎的临床疗效及对患者血清中表面活性蛋白A(surfactant protein-A,SP-A)、表面活性蛋白D(surfactant protein-D,SP-D)含量的影响。方法:将符合纳入标准的60例过敏性鼻炎患者随机分为两组,观察组30例,实际完成28例,选用"邵氏五针法"为主治疗;对照组30例,实际完成28例,选用常规针刺治疗。两组均每日治疗1次,每次留针30 min,每10 min行针1次,10次为1个疗程,疗程间休息3 d,共治疗20次。观察两组患者的临床疗效,同时用酶联免疫吸附法(ELISA)测定两组患者血清中SP-A、SP-D的含量。结果:观察组显效14例(50.0%),有效14例(50.0%);对照组显效5例(17.9%),有效23例(82.1%)。两组疗效比较,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者治疗后血清中SP-A、SP-D的含量较治疗前均下降,差异有统计学意义(P<0.05),两组治疗后比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:"邵氏五针法"为主治疗过敏性鼻炎临床疗效显著,并可影响体内SP-A、SP-D的含量。     

肺表面活性蛋白A,D在内毒素急性肺损伤时变化的研究

目的 探索急性肺损伤(ALI)时肺组织表面活性蛋白A,D(SP-A、SP-D)随时间变化的规律.方法 110只SD幼鼠被随机分为正常对照组和ALI组(每组分6个亚组).腹腔内注射脂多糖(LPS)建立ALI模型,正常对照组注射等量生理盐水.LPS及生理盐水注射后6,12,24,36,48和72 h每亚组各处死8只大鼠.用Western blot方法测定肺组织SP-A和SP-D的相对含量.结果 与正常对照组相比,ALI时肺组织SP-A、SP-D的变化在最初的12 h内无明显变化(P＞0.05) .SP-A从24 h至48 h上升(P＜0.01),于36 h达最高值(6.94±0.80,P＜0.01),72 h下降至最低点(3.87±0.50,P＜0.01). SP-D 48 h达最低点(0.92±0.11,P＜0.01).结论 肺组织SP-A、SP-D在LPS诱导的ALI中的变化呈时间依赖性.SP-D的变化与病情变化关系更为密切,SP-D最低时,临床表现也最重;SP-A的代偿能力大于SP-D.     

稳定期COPD患者支气管肺泡灌洗液中表面活性蛋白D水平及意义

目的 探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者支气管肺泡灌洗液中表面活性蛋白D(SP-D)水平和意义.方法 便利选取2013年5月—2015年5月期间重庆市第七人民医院收治的稳定期COPD患者62例作为观察组,采用ELISA法测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中的SP-D水平,另选取62例疑诊肺部疾病但肺部检查并没有出现异常的患者作为对照A组以及62例肺炎患者作为对照B组,分别用同样方法进行BALF中的SP-D水平测定,然后分析观察组及对照组患者的肺功能指标,包括FEV1%、FEV1/FVC,以及血清CRP的水平及与吸烟指数的关系.结果 观察组的SP-D水平比对照A组及对照B组明显偏低(P<0.05);观察组患者的BALF中SP-D水平与肺功能指标FEV1%、FEV1/FVC均呈现正相关性,相应指数分别为r=0.1911、0.7646.而与血清中的CRP水平以及吸烟指数呈现负相关性,相应指数为r=-0.9366;r=-0.798.对照A组以及对照B组SP-D水平与肺功能、血清中的CRP水平及吸烟指数均表现为负相关性,相应指数分别为r=-0.5837、-0.9388;r=-0.8903、-08388.结论 SP-D可能参与了COPD的炎症发病机制,可作为对COPD严重程度进行监测和评估的生物标记物.     

角质细胞生长因子对高氧暴露下新生大鼠SP-A表达的影响

目的研究角质细胞生长因子(KGF)对高氧暴露下新生大鼠肺组织SP-A表达的影响。方法将生后3d的54只SD大鼠随机分为三组。A组:空气组,B组:高氧组,C组:KGF干预组。B、C组大鼠持续暴露于95%氧气中,C组于吸氧同时于背部皮下注射htKGF1mg/kg/d,连用3d后改为0.5mg/kg/d直至实验结束。A组和B组给予等量生理盐水。A组大鼠呼吸空气。于高氧暴露后3d、7d、14d取肺组织,采用免疫组化方法观察肺组织中SP-A表达的变化。结果B组高氧暴露3d时SP-A表达强度较A组增强(P0.05);高氧暴露7d时SP-A表达强度与A组相比较,差异无统计学意义(P0.05),高氧暴露14d时SP-A表达强度较A组和KGF组减弱,差异有统计学意义(P0.01)。SP-A在C组与A组在3d、7d、14d的表达无显著性差异。结论长时间暴露于高氧环境,使肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)受损,SP-A分泌随之减少,导致PS功能丧失,阻碍肺发育,KGF促进AECⅡ增殖和分化,增加肺表面活性物质合成与分泌,对胎肺的发育和分化具有重要作用。     

表面活性蛋白-A和表面活性蛋白-D在人正常肾组织的表达与分布

目的:研究表面活性蛋白-A(SP-A)和表面活性蛋白-D(SP-D)在人正常肾组织的表达及表达部位。方法:收集5例正常的人肾组织,培养人肾小管上皮细胞(HK-2),同时收集5例正常的人肺组织作为对照。应用免疫组化技术检测SP-A和SP-D蛋白在人正常肾组织的表达部位;应用RT-PCR检测SP-A和SP-D mRNA在正常肾组织和HK-2细胞中的表达。结果:免疫组化方法检测到SP-A和SP-D主要表达在皮质部的近曲和远曲小管;RT-PCR结果显示,在人的正常肾组织和HK-2细胞中存在SP-A和SP-D mRNA表达。结论:与肺组织有相同内胚层来源的肾组织可表达SP-A和SP-D。     

腹部不同刺激强度手术对大鼠肺肿瘤坏死因子α和肺表面活性物质相关蛋白A表达的影响

目的：探讨腹部不同强度的手术刺激对肺部的影响。方法：将100只SD雄性大鼠随机分为5组,每组 20只。分别为麻醉对照组(A组),腹部皮肤2 cm切口组(B组),腹部皮肤+肌肉2 cm切口组(C组),腹部皮肤+肌肉+ 腹膜2 cm切口组(D组),腹部皮肤+肌肉+腹膜2 cm切口+腹腔探查2 min+牵拉肠管组(E组)。经大鼠尾静脉注射丙泊 酚10 mg/kg诱导,术中静脉泵注丙泊酚35~45 mg/(kg.h),维持麻醉深度在适度镇静而无明显镇痛作用的水平。根据 术后取标本的时间不同每组各分为6 h,1 d,3 d,7 d组4个亚组,每亚组5只。按分组取大鼠肺组织,采用免疫组织 化学方法测定各组大鼠肺组织肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和肺表面活性物质相关蛋白A(surfactant protein-A,SP-A)的表达水平,并进行比较分析。结果：术后6 h,3 d,7 d,5组大鼠肺组织TNF-α的表达差异无统计学 意义(P>0.05)。术后1 d,D和E组大鼠肺组织TNF-α的表达明显高于A组(P<0.05)。术后1和3 d大鼠肺组织TNF-α的表达 E组>D组>C组>B组,B~E组各组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。术后6 h,3 d,7 d,5组大鼠肺组织SP-A的表达 比较,差异无统计学意义(P>0.05)。术后1 d,D和E组大鼠肺组织SP-A的表达明显高于A组(P<0.05),D和E组组间比 较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论：腹部手术刺激强度增加对大鼠术后肺部影响增大,腹腔内手术对术后肺部的 影响比非腹腔内手术大,但尚处于代偿范围内。     

Genotypes and polymorphisms of mutant CCR5-△32,CCR2-64I and SDF1-3’A HIV- 1 resistance alleles in indigenous Han Chinese

Objective To understand the interaction between surfactant proteins and pneumocys tis carinii pneumonia (PCP), and the impact of corticosteriods on surfactant proteins.Methods We established rat models of PCP and bacterial pneumonia induced by subcutaneous injection of 25mg cortisone acetate. At 8-12 wk, the bronchoalveolar lavage f luid (BALF) of rats was collected. Total nucleated cells of BALF were counted a nd differentiated, and the concentrations of surfactant protein A (SP- A) and su rfactant protein D (SP- D) were measured by immunoblotting assay. The rats were divided into three immunosuppressive groups and a normal control group. Group Ⅰ, normal control (n=6), consisted of healthy SD rats; group Ⅱ, negative cont rol (n=6), consisted of rats with cortisone acetate injection for over 8 wk with out lung infection; group Ⅲ, bacterial pneumonia (n=11), rats were injected wit h cortisone acetate over 8 wk that resulted in bacterial pneumonia without other pathogens isolated; and group Ⅳ, PCP (n=14), rats with injected cortisone acet ate for 8-12 wk and developed PCP without other pathogens isolated. Results Our results indicated that the total cell count in BALF in the negative control group was lower than that in the normal control group (P&lt;0.001). During P CP infection, the total cell count and the percentage of polymorphonuclearcytes (PMNs) in BALF were signi ficantly increased (P&lt;0.01), but were lower than those in the bacterial pne umonia group. The concentration of SP- A of BALF in PCP (45.1±22.1 μg/ml) was significantly increased in comparison with that in the negative control ( 16.2±9.9 μg/ml, P&lt;0.05) and bacterial pneumonia groups (6.2±5.6 μ g/ml, P&lt;0.001). We also found that the relative content of SP - D was signi ficantly higher in PCP (24 249±4780 grey values) than that in the negative control (13 384±2887 grey values, P&lt;0.001) and that in bacterial pne u monia (11 989±2750 grey values, P&lt;0.001). SP- A and SP- D were a lso higher in the moderate to heavy group of PCP than those seen in the mild group (P&lt;0.01, P&lt;0.001). SP- A and SP- D were higher in the negative contr ol group than those in the normal control group, but there was no significant di fference between the 2 groups. Conclusion These results suggest that the concentrations of SP- A and SP- D in BALF are inc reased by pneumocystis carinii specific stimulation, but the alteration is n ot related to the corticosteriod usage.     

慢性阻塞性肺疾病患者血清中肺泡表面活性蛋白D水平变化的研究

目的 探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血清中肺泡表面活性蛋白D(SP-D)的水平变化及其临床意义.方法检测29例COPD急性加重期、26例COPD稳定期及19例健康人血清SP-D水平,比较各组间的差异;并采用多元线性回归分析影响SP-D水平可能的因素,探讨SP-D与肺功能之间的相关性.结果COPD急性加重期患者血...     

吸入异氟烷对大鼠肺表面活性蛋白A(SP-A)基因表达的影响

目的 观察大鼠吸入1.5%异氟烷不同时间后肺表面活性蛋白-A(SP-A)的含量及其基因表达的改变情况.方法 雄性Wister大鼠40只,随机分为5组,每组8只.正常对照组(Con),异氟烷2h组、4h组和8h组分别为吸入40%O2 1.5%异氟醚2、4和8h组;停药2h组(10h组)吸入40%O2 1.5%异氟醚8h后再吸入40%O2 2h.各组于实验结束后取出大鼠迅速处死,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中表面活性蛋白A(SP-A)的含量(Western Blot法);肺组织内SP-A含量(Western Blot法)以及Sp-AmRNA的表达(RT-PCR法).结果 吸入异氟烷2h组BALF中SPA的含量与对照组比较无明显变化,4h、8h组均较对照组显著下降(P<0.01),10h组未见明显恢复(P<0.01).肺组织内Sp-A的含量在2h组无明显改变,但4h、8h组明显下降(P<0.01),10h组有所恢复,但仍低于对照组(P<0.05).吸入异氟烷的各组Sp-AmRNA的表达均有降低趋势(P<0.05),停药2h后(10h)明显恢复.结论 吸入1.5%异氟烷2h以上可降低肺组织Sp-A的基因表达,继而SP-A的合成与分泌减少;但停止吸入2h后,Sp-A基因表达可恢复至正常水平,而其合成与分泌功能仍未能完全恢复.     

放射性肺损伤小型猪肺表面活性物质相关蛋白A、DmRNA的表达

目的：通过建立巴马小型猪放射性肺损伤模型,探讨肺组织在放射损伤后的不同时间点病理和表面活性物质相关蛋白A、D（pulmonarysurfactant—associatedproteinAandD,SP—A,SP—D）mRNA表达的变化。方法：健康雄性巴马小型猪30只随机分为空白对照组（空白组）和单纯照射组（单照组）,行。。C07射线右胸野照射,单照组单次照射剂量为15Gy,空白组为0Gy。于照射后4,8,12周取右肺组织行HE染色,实时荧光定量PCR法（qPCR）检测肺组织中SP—AmRNA和SP—DmRNA的表达量。结果：HE染色结果表明照射4周后,肺泡中有炎性细胞渗出,间质水肿,第8周,肺泡壁增厚,肺泡结构破坏,第12周,肺组织实变,肺间质出现胶原纤维;qPCR检测结果发现单照组肺组织SP—AmRNA和SP-DmRNA的表达量与空白组各时间点相比都明显降低（P〈0．01）,单照组各时间点SP—AmRNA和SP—DmRNA的表达量均随时间的推移进行性降低（P〈0．01）,以第4周下降最明显。结论：SP—A、SP—D参与了放射性肺损伤的发生、发展过程,可为放射性肺损伤的发病机制及早期预测提供一定的实验依据。     

防纤汤对放射性肺炎大鼠的影响及作用机制

目的 研究防纤汤对放射性肺炎大鼠肺部组织病理、肺表面活性物质结合蛋白和炎症因子的影响,探讨防纤汤治疗放射性肺炎的疗效和作用机制。 方法 将90只SPF级雄性SD大鼠随机分空白组、模型组和3个治疗组(低剂量组、中剂量组和高剂量组),利用6 mV X射线对治疗组、模型组大鼠全胸照射,总剂量20 Gy,进行放射性肺炎大鼠造模处理,治疗组予灌胃防纤汤,模型组及空白组予灌胃等量生理盐水。照射后第1天灌胃用药直至照射后6周,照射后第2、4、8周每组随机取6只大鼠取材,在HE染色光镜下观察肺组织病理形态学变化,免疫组化法检测白细胞介素-3(IL-3)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-7(IL-7)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)、C 反应蛋白(CRP)、肺表面活性物质结合蛋白(SP-A、SP-D)水平,并作相关性分析。 结果 与模型组相比,治疗组大鼠肺组织充血及水肿较轻或无,炎症细胞浸润性少或无,间质内存在较少或无胶原纤维增生。与空白组比较,模型组、治疗组IL-3、IL-6、IL-7、TNF-α、TGF-β、CRP水平均明显升高(中剂量治疗4周,P值分别为0.012、0.033、0.027、0.018、0.024、0.009),SP-A、SP-D水平均明显降低(中剂量治疗4周,P值分别为0.004、0.005);与模型组比较,治疗组IL-3、IL-6、IL-7、TNF-α、TGF-β、CRP水平均明显降低(P<0.05),SP-A、SP-D水平均明显升高(P<0.05)。相关性结果分析发现,IL-6与SP-A、SP-D呈强负相关性,IL-3、IL-7与SP-A、SP-D呈负相关性,TNF-α、TGF-β与SP-A、SP-D呈弱正相关性。不同剂量的治疗组对大鼠肺组织病理和所检测的体液因子的影响具有剂量相关性。 结论 防纤汤改善放射性肺损伤炎性程度的疗效明确。SP-A、SP-D的变化与IL-3、IL-6、IL-7、TNF-α、TGF-β具有相关性,推测防纤汤的作用机制是通过上调SP-A、SP-D水平,抑制炎症因子IL-3、IL-6、IL-7的释放。     

慢性阻塞性肺疾病大鼠血清及肺组织中肺表面活性蛋白D的水平变化及意义

目的通过测定肺表面活性蛋白D（SP-D）在慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠肺组织及血清中的含量变化,探讨SP-D与COPD发病的关系。方法采用烟熏加气管内注入内毒素脂多糖（LPS）的方法建立大鼠COPD模型。将雄性SD大鼠随机分为对照组、内毒素组和COPD组,每组10只。HE染色观察大鼠肺、支气管的病理改变,定量检测肺平均内衬间隔（MLI）及平均肺泡数（MAN）以评估肺气肿程度。酶联免疫吸附实验（ELISA）检测大鼠血清SP-D含量。Western-blot及免疫组化方法检测大鼠肺组织SP-D含量变化。结果 COPD组大鼠肺、支气管的HE染色下病理变化符合COPD的典型病理改变。COPD组大鼠MLI较对照组明显增宽[（80±5）μm/个比（49±2）μm/个,P〈0.05],MAN较对照组明显减少[（274±13）个/mm2比（406±12）个/mm2,P〈0.01）;内毒素组MLI、MAN与对照组比较无显著差异（P〉0.05）。对照组、内毒素组和COPD组大鼠血清SP-D含量分别为（42.14±2.52）ng/mL、（49.59±2.81）ng/mL和（53.21±4.17）ng/mL,肺组织SP-D含量分别为0.39±0.01、0.56±0.01和0.63±0.01。内毒素组及COPD组大鼠血清和肺组织中SP-D含量均较对照组明显升高（P〈0.05）,而COPD组又显著高于内毒素组（P〈0.05）。3组血清SP-D水平与肺组织中SP-D含量均呈正相关（r值分别为0.93、0.94和0.93,P〈0.01）。结论 COPD组大鼠血清及肺组织中SP-D含量明显升高,并且血清及肺组织中SP-D水平呈显著正相关。COPD大鼠血清及肺组织中SP-D水平的研究为将SP-D作为COPD的生物标记物提供一定依据。     

不同血管活性药对脓毒性休克患者血流动力学和乳酸清除率的作用

目的比较应用多巴胺与去甲肾上腺素联用多巴酚丁胺对脓毒性休克(SS)患者血流动力学和乳酸清除率(LCR)的影响。方法35例SS患者经过充足的液体复苏使肺动脉楔压维持在12～15mmHg,随机分A组(17例)和B组(18例)。测定并计算A、B组治疗前、治疗后6、12、24h各个时间点的血流动力学指标包括外周血管阻力指数、心脏指数、平均动脉压和LCR。结果用药后两组同一时间点,B组12、24h的平均动脉压(>80.5mmHg为达标)、外周血管阻力指数、心脏指数明显高于A组(P<0.05),A组的24h乳酸清除率比B组水平高(P<0.01),两组差异有统计学意义。结论去甲肾上腺素加多巴酚丁胺治疗SS能更好地维持血流动力学稳定和提升血压,提高LCR。