ILK反义寡核苷酸对人上皮性卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用

目的 探讨整合素连接激酶(integrin linked kinase,ILK)反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASODN)对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用.方法 将人卵巢癌H0-8910细胞株接种于裸鼠皮下,建立人卵巢癌裸鼠模型,并将裸鼠随机分为对照组和治疗组,每次腹腔注射治疗后称量裸鼠体重、肿瘤体积及重量,并计算抑瘤率.同时,分别用脂质体和脂质体-ILK-ASODN转染H0-8910细胞,用WST-1法检测转染后两组细胞体外的增殖情况,用流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 治疗组裸鼠肿瘤体积及重量增长速度受到明显抑制,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01).转染了ILK-ASODN的治疗组细胞增殖受到显著抑制,凋亡率明显增高,与对照组比较差异均具有极显著意义(P＜0.01).结论 ILK-ASODN在体外能抑制细胞生长、促进细胞凋亡;在体内能明显地抑制肿瘤生长,对人卵巢癌裸鼠移植瘤具有一定的治疗作用.     

HIF-1α反义寡核苷酸治疗人胃癌裸鼠移植瘤的实验研究

目的 研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)反义寡核苷酸对人胃癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用.方法 用人胃癌细胞株SCG-7901建立胃癌裸鼠皮下移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分为反义寡核苷酸(ASOND)组、正义寡核苷酸(SOND)组和对照组,瘤体内分别注射阳离子脂质体包裹的HIF-1α ASOND、HIF-1α SOND和空白阳离子脂质体.观察各组动物的肿瘤生长曲线,测瘤重计算抑瘤率,光学显微镜下观察肿瘤细胞形态学变化,免疫组化方法 检测各组肿瘤组织HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)和微血管密度(MVD)的表达.结果 ASOND组裸鼠的肿瘤生长受到明显抑制,ASOND组瘤重与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);ASOND组、SOND组抑瘤率分别为47.94%、16.88%,差异有统计学意义(P＜0.01);ASOND组肿瘤组织中HIF-1α、VEGF和MVD的表达低于SOND组和对照组(P＜0.01).结论 肿瘤原位注射HIF-1α反义寡核苷酸治疗胃癌裸鼠皮下移植瘤能降低HIF-1α的表达,继而减少VEGF的生成和新生血管的形成,抑制肿瘤的生长.     

VEGF反义寡核苷酸对裸鼠膀胱癌移植瘤的抑制作用研究

目的:观察以脂质体为载体介导血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)反义寡核苷酸(Antisense oligonucteotides,ASODN)转染对裸鼠膀胱癌移植瘤的抑制作用.方法:建立人膀胱癌裸鼠皮下移植瘤模型,以脂质体为载体介导VEGFASODN进行转染.观察裸鼠移植瘤生长情况,免疫组化sP法测Ki67、CD34、VEGF的表达,计算微血管密度、细胞增殖指数,TUNEL法测细胞凋亡指数.结果:反义组与正义组的抑瘤率分别为71.08%和7.19%,反义组VEGF的表达、微血管密度、细胞增殖和凋亡指数与正义组及对照组相比均有明显差异,正义组与对照组之间各检测指标差异无显著性.结论:VEGF反义寡核苷酸能够抑制人膀胱癌裸鼠皮下移植瘤的生长和微血管的生成,可能成为El后膀胱癌基因治疗的重要方向.     

生存素反义寡核苷酸对人胃癌细胞移植瘤作用及原理探讨

目的探讨生存素反义寡核苷酸对人胃癌细胞移植瘤的作用及原理.方法建立人胃癌细胞皮下移植瘤裸鼠模型,随机分为5组:空白对照组、正义链(SODN)对照组和100、200、400nmol/L 3种浓度的反义链(ASODN)组.注射相应试剂2d、4d、8d、12d、16d、20d后测定移植瘤体积,计算抑瘤率和肿瘤缩小率,并采用免疫组化二步法检测各组移植瘤中转录激活因子STAT-3蛋白的表达水平.结果空白对照组及SODN对照组在肿瘤体积、抑瘤率及肿瘤缩小率等方面的差异无统计学意义(P>0.05);ASODN组的肿瘤体积随着浓度和时间的增加而减小,肿瘤缩小率则提高,抑瘤率明显高于对照组,呈时间和剂量依赖性,差异具有统计学意义(P<0.05);400nmol/L ASODN组的抑瘤率最大达到94%.ASODN组皮下肿瘤中STAT-3表达水平明显高于对照组,且呈浓度依赖性,差异具有统计学意义(P<0.05).结论生存素反义寡核苷酸能够抑制人胃癌细胞移植瘤的生长,且能够通过负反馈调节,增加转录激活因子STAT-3的表达,为胃癌的治疗提供新治疗思路.     

顺铂及拓扑替康对卵巢癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的 :了解顺铂 (DDP)、拓扑替康 (TPT)单独及联合应用对卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。方法 :裸鼠右侧背部皮下接种人卵巢癌SKOV3细胞 ,2 1d后分 4组治疗 ,每组 6只动物。对照组 ,腹腔注射无菌生理盐水 ;DDP组 ,腹腔注射DDP 3mg·kg-1 ;TPT组 ,腹腔注射TPT 5mg·kg-1 ;DDP +TPT组 ,腹腔注射DDP 3mg·kg-1 ,6h后腹腔注射TPT 5mg·kg-1 ;上述药物均每 4d注射 1次 ,共注射 4次 ,于实验第 39d处死裸鼠。治疗期间观察并记录各组裸鼠皮下移植瘤的生长情况 ,计算肿瘤体积、肿瘤生长抑制率 ,绘制肿瘤生长曲线。结果 :各治疗组治疗后肿瘤体积和抑瘤率与对照组相比差异均具有统计学意义 (P <0 .0 5 )。与DDP及TPT组比较 ,DDP +TPT联合用药组肿瘤体积明显减小 (P <0 .0 0 1 ) ,抑瘤率明显增高 (P <0 .0 0 1 )。结论 :DDP与TPT联合用药比 2药单独应用抑制肿瘤生长的作用更强 ,二者具有协同抗癌作用     

恶性肿瘤

051083沙立度胺对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤血管生成的影响李文…∥中华妇产科杂志.—2005,40(3).—186～189探讨沙立度胺对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长及血管生成的影响。方法:建立15只人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分成3组:(1)Thd组:腹腔内注射Thd(200mg·kg-1·d-1,浓度为62.5mg/L);(2)Thd+环磷酰胺(CTX)组:按上述Thd剂量,加入浓度为100mg/L的CTX(100mg·kg-1·d-1),腹腔内注射;(3)生理盐水组:腹腔内注射0.2ml生理盐水。观察各组裸鼠皮下移植瘤生长情况、裸鼠体重的变化,并采用RT-PCR、酶联免疫吸附法、及Picture二步免疫组化…     

重组凋亡素对人卵巢癌裸鼠移植瘤生长抑制作用的影响

目的 观察凋亡素(VP3)基因真核表达质粒对人卵巢癌裸鼠异种移植瘤生长的抑制作用.方法 建立人卵巢癌(COC1)细胞裸鼠异种移植瘤模型.实验裸鼠分为四组:高剂量实验组(pcDNA-VP3质粒DNA,瘤内注射,100μg/只);低剂量实验组(pcDNA-VP3质粒DNA,瘤内注射,50μg/只);空载体对照组[pcDNA3.1(+)质粒DNA,瘤内注射,100μg/只];脂质体对照组(脂质体,瘤内注射,0.2mL/只).每3d测量皮下移植瘤长、宽径,按标准公式V=L×W2X0.52计算移植瘤体积.12天后处死裸鼠,称取瘤重.使用TUNEL法观察凋亡素对皮下移植瘤细胞凋亡程度的影响.结果 pcDNA9·vP3高剂量组和低剂量组卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长明显受抑制.高剂量组和低剂量组肿瘤生长抑制率分别为76%和52%;瘤重抑制率分别为71.9%和49.5%(P<0.05).TUNEL实验结果表明凋亡素在体内以凋亡方式诱导肿瘤细胞死亡.结论 重组凋亡素基因真核表达质粒具有抑制人卵巢癌裸鼠异种移植瘤生长作用.凋亡素在瘤组织中以诱导凋亡方式抑制卵巢癌裸鼠异种移植瘤生长.     

MMP-2反义寡核苷酸对膀胱癌荷瘤裸鼠的治疗作用

目的 探讨基质金属蛋白酶2(MMP-2)反义寡核苷酸对人膀胱癌裸鼠异体移植瘤生长的抑制作用.方法 制备膀胱癌裸鼠移植瘤模型18只,随机分为3组:MMP-2反义寡核苷酸(ASODN)治疗组、MMP-2正义寡核苷酸(SODN)治疗组及对照组,每组6只.待瘤结节直径≥5mm后,分别在肿瘤细胞接种部位周围及中心皮下注射反义寡核苷酸/阳离子脂质体复合物、正义寡核苷酸/阳离子脂质体复合物和生理盐水.每周2次,连续4周,断颈处死裸鼠,计算肿瘤体积,称量瘤重.常规切片,HE染色,观察组织学形态并进行病理学评估.结果 与对照组瘤重(7.49±0.53)g比较,ASODN组瘤重(4.18±0.53)g明显降低( P<0.01);ASODN组、正义寡核苷酸(SODN)组抑瘤率分别为44.19%、8.41%( P<0.01); ASODN组瘤体病理学特征改善.结论 MMP-2反义寡核苷酸能抑制裸鼠体内移植瘤生长,通过反义寡核苷酸下调MMP-2的表达,有效逆转肿瘤的恶性表型,为膀胱癌的基因治疗提供了实验依据.     

β1整合素反义寡核苷酸联合顺铂治疗人卵巢癌裸鼠移植瘤的研究

目的：探讨以β1整合素反义寡核苷酸（ASODN）治疗人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的可行性.方法：常规体外培养SKOV3细胞,采用皮下注射法建立移植瘤裸鼠动物模型.32只荷瘤鼠随机分为ASODN组（A组）、ASODN联合顺铂（DDP）组（A＋D组）、DDP组和0.9％氯化钠注射液对照组（NS组）,每组8只,分组给药.以脂质体包裹的β1整合素ASODN直接移植瘤内注射,观察肿瘤生长情况,测瘤体积并计算抑瘤率.采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫组织化学方法分别检测β1整合素mRNA的表达.结果：A组肿瘤体积和抑瘤率分别为（316.10 ±21.77） mm3和48.15％,与NS组比较抑瘤率较高,肿瘤生长缓慢（P＜0.01）.而A＋D组肿瘤体积和抑瘤率分别为（178.70±40.67） mm3和70.37％,与DDP组、A组及NS组差异均有统计学意义（P ＜0.05 ～P＜0.01）.RT-PCR和免疫组织化学检测,A组和A＋D组肿瘤组织中β1整合素mRNA的表达均明显下调（P＜0.01）.结论：单用β1整合素ASDON或联用DDP均可有效抑制人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤组织的生长,可能与其特异性下调β1整合素基因表达有关.特异性靶向β1整合素ASODN可用于卵巢癌的辅助治疗.     

Apoptin对人膀胱癌裸鼠皮下移植瘤的抑瘤作用研究

目的探讨Apoptin质粒对人膀胱癌裸鼠皮下移植瘤的抑瘤作用。方法皮下注射T24细胞,建立裸鼠移植瘤模型,于肿瘤直径0.5cm大小时,多点注射脂质体包裹质粒pApoptin-EGFP,设立空质粒组、生理盐水组作为对照组,观察裸鼠肿瘤生长情况;5周后处死,绘制肿瘤生长曲线,计算抑瘤率,肿瘤组织石蜡包埋,常规切片,TUNEL法检测移植瘤凋亡情况。结果成功建立移植瘤模型,注射脂质体包裹pApoptin-EGFP质粒能明显抑制移植瘤生长;TUNEL检测凋亡率为(23.24±6.12)%,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论Apoptin通过诱导凋亡能明显抑制人膀胱癌裸鼠皮下移植瘤生长。     

MicroRNA-16抑制人卵巢癌在裸鼠皮下移植瘤生长的研究

目的:探讨microRNA-16(miRNA-16)转染对人卵巢癌细胞株SKOV-3在裸鼠皮下移植瘤形成的抑制作用。方法:将成熟miRNA-16双链模拟物及其阴性对照序列转染人卵巢癌SKOV-3细胞株,然后分别接种于裸鼠皮下,观察两组肿瘤出现时间及肿瘤体积变化,接种20d后取出肿瘤组织称重,计算抑瘤率。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测肿瘤组织中Bcl-2mRNA表达,并进行免疫组化检测两组肿瘤组织中Bcl-2蛋白表达。结果:miRNA-16转染组肿瘤生长相对延缓,种瘤20d后miRNA-16转染组移植瘤重量明显小于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05),抑瘤率达38.46%;PCR结果显示miRNA-16转染组Bcl-2 mRNA表达量与阴性对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);移植瘤组织免疫组化分析两组Bcl-2蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:miRNA-16对人上皮性卵巢癌裸鼠移植瘤生长有抑制作用,可能成为卵巢癌基因治疗的新靶点。     

Genistein对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响

目的　观察PTK抑制剂Genistein对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法　对 3 0例裸鼠建立人卵巢癌皮下移植瘤模型 ,共分为 5组 :对照组 (含 0 0 4%DMSO的生理盐水 ) 0 2mg kg ,Genistein治疗组 0 4mg kgGenistein治疗组 (皮下注射 ) ,Cisplatin( 4mg kg ,静脉推注 )治疗组 ,Genistein与Cisplatin联合治疗组。观察不同药物治疗后第 7、14、2 1、2 8d各组裸鼠皮下移植瘤生长情况及裸鼠体重的变化 ,并进行病理组织学检查。结果　 0 .4mg kgGenistein皮下注射 ,对SKOV3裸鼠移植瘤的生长有明显抑制作用 ,与对照组相比 ,瘤体重量降低 ,肿瘤体积减小 ,坏死面积显著增加 ,但对裸鼠体重无明显影响。应用 0 4mg kgGenistein与 4mg kgCisplatin(静脉推注 )联合处理SKOV3裸鼠移植瘤有增强抑制作用。结论　Genistein具有抑制人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的作用 ;Genistein与化疗药物联合应用可增强抑瘤作用     

大葱提取物对人胃癌移植瘤生长的抑制作用

目的观察大葱提取物大葱油对人胃MCC-803细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。方法建立人胃癌MGC-803细胞裸鼠皮下移植瘤模型,实验组腹腔注射lOmg／ml大葱油注射液0．5ml／次,对照组腹腔注射20mg／ml吐温-800．5ml／次,观察各组移植瘤生长情况,计算肿瘤生长抑制率及DNA图像分析DNA指数及平均DNA质量。结果肿瘤生长抑制率为36．07％。实验组肿瘤DNA指数和平均DNA质量下降。结论大葱提取物大葱油对人胃癌移植瘤生长具有抑制作用,抑制肿瘤细胞DNA指数及平均DNA质量可能是其抗肿瘤的机制。     

溶血磷脂酸诱导人卵巢上皮癌裸鼠腹腔移植瘤生长研究

目的 观察溶血磷脂酸(LPA)对卵巢上皮性癌裸鼠腹腔移植瘤生长及转移的作用.方法 建立人卵巢上皮性癌腹腔移植瘤模型,16只裸鼠随机分为2组即对照组和LPA处理组,将6×106个未经处理的卵巢上皮癌细胞株SKOV3和用LPA刺激后的SKOV3细胞分别注入2组裸鼠腹腔,待裸鼠自然死亡后,观察移植瘤大小、重量、腹腔转移灶的数目及腹腔脏器转移情况.结果 两组成瘤率均为100%,但LPA组移植瘤生长速度、重量和腹腔转移灶数目均高于对照组(P＜0.01).结论 LPA具有促进卵巢癌细胞在腹腔内增生和浸润转移的作用.     

葡萄籽原花青素对人卵巢癌裸鼠移植瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨葡萄籽来源的原花青素对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤增殖和凋亡的影响和机制.方法 建立24只人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,分成3组(n=8):原花青素高浓度组(200 ms/kg)、原花青素低浓度组(100 mg/kg)、空白对照组.观察各组裸鼠皮下移植瘤生长情况,HE染色观察肿瘤细胞形态,流式细胞分析细胞凋亡,RT-PCR,Westernblot检测肿瘤细胞Bax,Caspase-3在RNA及蛋白水平的表达情况.结果 原花青素处理组皮下移植瘤抑瘤率分别为34.303%、28.594%,与对照组相比差异具有显著性(P<0.05);治疗组肿瘤细胞出现明显的凋亡形态学变化,流式细胞检测治疗组肿瘤细胞凋亡率分别为67.965%,24.650%;原花青素还可以明显增高Bax、Caspase-3 RNA和蛋白的表达,且呈浓度依赖性.结论 葡萄籽原花青素对卵巢癌皮下移植瘤生长有抑制作用,并促进其凋亡,其作用可能通过增强Bax、Caspase-3的表达而实现.     

cyclinD1在卵巢癌裸鼠移植瘤组织中的表达及意义

目的探讨细胞周期蛋白D1(cyclinD1)在上皮性卵巢癌裸鼠移植瘤组织中的表达及意义。方法构建人上皮性卵巢癌3AO裸鼠皮下移植瘤模型;设阴性对照组及早、中、晚期3个肿瘤组,应用免疫组化方法及流式细胞术(FCM)检测正常组织及移植瘤卵巢癌组织中cyclinD1的表达。结果 3AO卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型平均成瘤率91.7%。正常组织cyclinD1表达阴性或弱阳性,而卵巢癌组织中cyclinD1呈过表达(54.63%)。早、中、晚期卵巢癌组织中cyclinD1阳性表达率分别是35.00%、55.60%和73.30%,肿瘤细胞凋亡率分别是7.97%、3.45%及1.83%,Mean值分别是23.15、37.31、63.28。结论 cyclinD1在卵巢癌组织中呈过表达,且其表达与移植瘤生长增殖呈正相关,cyclinD1的表达与卵巢癌发生发展关系密切。     

增殖细胞核抗原反义寡核苷酸对裸鼠肝癌生长的影响

目的 探讨增殖细胞核抗原（PCNA）反义寡核苷酸对裸鼠人肝癌生长的抑制作用。方法 接种传代培养的人肝癌细胞于裸鼠皮下,接种后24h内局部注射PCNA反义寡核苷酸进行治疗。观察裸鼠的体重变化、瘤体大小,计算抑瘤率。HE染色观察肝癌组织结构和细胞形态改变。结果 PCNA反义寡核苷酸治疗组裸鼠肝癌的生长受到抑制,抑瘤率为72．8％。瘤重、肿瘤体积明显小于正义寡核苷酸治疗组及对照组。镜下见PCNA反义寡核苷酸治疗组肝癌细胞部分细胞形态呈梭形,核分裂相较少见,细胞的异型性较小。结论 PCNA反义寡核苷酸能显著抑制裸鼠肝癌的生长。     

双氢青蒿素对卵巢癌细胞株H0-8910的作用及Akt表达的影响

目的观察双氢青蒿素（DHA）对卵巢癌细胞株H0-8910裸鼠皮下移植瘤的作及p-Akt表达,探讨其机制。方法将H0-8910细胞注入裸鼠,建立裸鼠移植瘤模型,观察干预后各组移植瘤抑瘤率,免疫组化检测p-Akt的活性变化。结果①病理学观察见细胞有局灶性坏死,细胞变大,胞质疏松,核深染,可见核固缩、核溶解、核碎裂,染色质成团状。②DHA对裸鼠移植瘤生长具有明显的抑制作用,并具有浓度依赖性。③免疫组化检测p-Akt活性发现随着双氢青蒿素剂量的增加p-Akt表达减弱。结论双氢青蒿素对人卵巢癌细胞株HO-8910裸鼠皮下移植瘤有明显的抑制作用,其机制与下调p-Akt的表达可能有关。     

CD147反义核酸对卵巢癌细胞生物学行为的影响

目的：研究经CD147反义RNA表达质粒载体转染建株的卵巢癌细胞系8910的生物学行为变化。方法：用CD147反义RNA表达质粒PCDNAasCD147转染人卵巢癌细胞系8910，克隆经筛选、鉴定后进行凝胶酶谱实验、肿瘤细胞侵袭力实验及动物实验。结果：CD147反义核酸转染的8910与空载体转染组相比，刺激成纤维细胞产生基质金属蛋白酶的能力下降，细胞侵袭力下降，荷瘤裸鼠成瘤力下降（P＜0．01）。结论：CD147反义核酸能抑制卵巢癌的转移和成瘤，因而有可能成为卵巢癌的治疗的药物靶点。