G带人类中期染色体扫描电镜样品制作方法的改进

用光镜(LM)技术和扫描电镜(SEM)技术连续处理和观察同—G带人类中期染色体标本,从而对G带染色体的亚微结构进行深入研究,国外已有报道。但其制作的G带染色体标本在SEM下观察。结构显     

人体外周血淋巴细胞的培养与染色体标本制作方法的探讨

目的 探讨一种一般实验室能够开展的方便稳定的染色体制作方法。方法 用１６４０培养基在３７℃恒温培养箱中无菌培养人体外周血淋巴细胞７２ｈ,在细胞进行到分裂高峰的中期加入秋水仙素终止液,经过低渗、固定、玻片处理、滴片、Ｇ显带技术等一系列过程,制作出染色体标本。结果 制作出较多优良的分裂相及清晰可辩的染色体。结论 本法在一般实验室条件下即可制作出人体外周血染色体。     

高浓度秋水仙素直接制备孕早期绒毛膜染色体

本文提出一种孕早期绒毛直接制备染色体的改进方法。用高浓度秋水仙素(40μg/ml)不经培养,直接低渗,可制备出分裂相多、分散好、G显带较满意的染色体标本,可供核型分析。     

高分辨染色体G显带制备技术的改良方法

目的探讨一种简便、能提高分裂相数目的高分辨G显带染色体标本制备改良方法。方法应用低浓度秋水仙胺长时间处理制备高分辨染色体G显带标本与常规方法进行比较。结果实验组获取的细胞分裂相数目比例明显多于对照组(P<0.01)。结论改良后的高分辨染色体G显带制备方法简便、效果突出,具有一定的实际应用与推广价值。     

牛带绦虫染色体标本制作的实验研究

目的探讨绦虫染色体标本制作的影响因素。方法采用RPMI-1640培养液加秋水仙素体外培养—低渗处理—空气干燥技术,观察1640培养液不同液量、培养时间、秋水仙素不同剂量及不同的低渗液在标本制作过程中的效应。结果牛带绦虫成节生殖细胞有丝分裂指数在培养4h最高;培养液量以每节片6ml的1640培养液最好;秋水仙素剂量以0.1mg/ml为适宜,有良好的促进有丝分裂的作用;低渗液处理以0.075M氯化钾为佳,染色体清晰、分散程度好。结论以0.1mg/ml秋水仙素的1640培养液(6ml每节片)在37℃连续培养牛带绦虫生殖细胞4h,然后用0.075M氯化钾低渗空气干燥技术制作的染色体标本,效果最佳。     

热蒸汽—双氧水法制备人类G显带染色体的研究

目的探索一种能改善染色体分裂相分散程度、缩短G显带染色体标本制备时间的方法。方法将外周血样本进行常规细胞培养后,采用热蒸汽—双氧水法制备G显带染色体标本,与常规G显带染色体标本制备法作比较。结果实验组获取的细胞分裂相分散优良比例明显多于对照组(P<0.01),制备时间短于常规法。结论改良后的人类染色体G显带制备方法简便、效果突出,具有一定的实际应用与推广价值。     

脆性部位研究方法的新技术

在脆性部位的细胞遗传学分析中,经Giemsa常规染色标本并确认脆性部位表达后,往往需要脱去Giemsa染液及镜油,以进行原位显带,确认表达的染色体。以往为去除标本上的镜油,常规采用二甲苯处理玻片,并经多次不同浓度乙醇处理。这种脱色方法步骤较多,而重要的是不能保证显带的成功和染色体显带标本的质量。我们在工作实践中摸索出一种十分简便的、脱色后原位显带(尤其适用于G显带)方法,现简述如下:     

高分辨染色体制备及显带方法的改良效果分析

目的寻找简单实用的高分辨染色体制备及显带方法。方法比较常规制片和秋水仙素与低渗同时处理的方法对提高染色体高分辨的作用,以及常规显带与改良胰蛋白酶磷酸（PBS）显带方法对染色体核型分析结果的影响。结果采用秋水仙素与低渗同时处理进行常规染色体制备,结果显示在5000个分裂相中对照组大于400条带的为482个,占9.64%,实验组为1655个,占33.1%,明显高于对照组（P〈0.01）;用PBS法进行染色体显带,各条带之间能明显区分,便于染色体核型分析。结论秋水仙素与低渗同时处理可使染色体加长,高分辨染色体出现率明显增高,用PBS法进行染色体显带,操作简单,可明显缩短显带时间。     

90例不孕不育患者的染色体分析

自1999年—2 0 0 2年,对我院妇科及不育门诊就诊患者,经过遗传咨询的筛选,然后进行外周血培养细胞的染色体检查,采用G显带技术处理,对90例进行了核型分析,现报告如下。资料与方法1　对象　受检查者主要为妇科和不育门诊转来可疑为染色体疾病患者,男4 3人,女4 7人,以习惯性流产及不育症为主;其次为曾分娩畸形儿的双亲及性异常。2　方法　取患者外周血培养淋巴细胞,按常规方法制备染色体标本及G显带染色后核型分析,每例计数2 0个～30个中期分裂相,核型分析4个以上,异常者则计数5 0个～10 0个中期分裂相,并加核型分析。结　　果受检90例中,74…     

1168例遗传咨询门诊病人的染色体分析

我室从1973年4月25日至1982年5月27日在遗传咨询病人中选择1200人作了染色体检查,有1168人获得了成功,占受检病人的97.3%。所用的标本有外周血、胎儿羊水、皮肤、条索状性腺、睾丸、精索等活检组织块。按我室常规进行细胞培养及 G 显带处理,必要时采用 C 带、Q 带、N 带、姊妹染色单体互换(SCE)技术、X 染色体迟复制(Lx)技术、G_(11)技术、高分辨 G 显带染色体技术以及 X、Y 小体检查技术等。     

骨髓染色体同步化技术方法改良

应用改良的骨髓染色体同步化技术,对78例急非淋、慢粒、慢粒急变及骨髓增生异常综合征者进行骨髓染色体分析,显带成功率63％。加大秋水仙素浓度缩短作用时间,低渗时间适当,能获得分散较好,结构紧密的有丝分裂相,显带理想。特征性染色雄异常与继发性染色体的出现对白血病的诊断、分型、治疗及预后估计均有重要价值。     

临床检验中影响外周血淋巴细胞培养的因素分析

目的:观察与分析影响外周血染色体标本制备的细胞培养环节的主要因素。方法:以规模化生产的淋巴细胞培养液为材料,观察秋水仙素浓度与处理时间、外周血用量、培养时间等对淋巴细胞培养及染色体标本制备的影响。结果:秋水仙素浓度与处理时间、外周血用量等对全血淋巴细胞的培养和染色体形态观察的效果有显著的影响。结论:5ml培养液中,加入0.2～0.4ml外周血培养68～69h、以0.064μg/ml秋水仙素处理3h,可获得高分裂相与高分辨率染色体的淋巴细胞。     

骨髓染色体R显带标本制备技术改良

目的 探讨如何制作出更多、更好的染色体中期分裂相,增加异常染色体的检出,提高疾病诊断效率.方法 在常规技术的基础上对秋水仙素作用的时间、离心的转速和时间及固定液成份的配比等具体方法进行技术改良.结果 通过改良技术获得的染色体中期分裂相数量更多而且染色体分散好,颜色亮丽,带纹清晰.结论 通过技术改良可以制作出数量多、易分...     

同步化技术在白血病骨髓染色体研究中的应用

采用同步化处理技术进行白血病骨髓染色体研究,结果染色体较长,显带清晰。在41例急性非淋巴细胞白血病中显带成功率92.7％。本技术同一份标本可用于显示G带、荧光R带和Giemsa R带,易于检出更多的异常和确定精细的断裂点。     

小鼠精原干细胞染色体G带显示及其影响因素研究

目的:探索精原干细胞染色体G带显示技术及其影响因素,为如何鉴定培养状态下干细胞的染色体核型提供实验参考.方法:培养昆明系小白鼠精原干细胞,待细胞生长到15～20天时,吸出克隆细胞团,吹打分散后滴加秋水仙素处理4～6小时.收集细胞悬液,再经低渗处理后滴片染色制成.结果:正常小鼠精原干细胞染色体呈粒状、棒状,核型为20对,40条.结论:小鼠精原干细胞染色体受到细胞所处的分裂时期、低渗处理的效果、滴片时细胞的分散程度及胰酶浓度及消化时间等因素的影响.     

卵巢癌实体瘤染色体畸变分析

目的：观察卵巢癌实体瘤组织中染色体畸变，探索卵巢癌细胞遗传学特异性。方法：卵巢癌患者肿瘤组织，经秋水仙素37℃作用2h，两次低渗获得中期分裂相，G显带观察。结果：19例卵巢癌标本中染色体畸变常涉及的染色体有1，2，3，5，6，7，11，14，17，20，21，X等染色体和多种畸变形式。结论：小样本卵巢癌实体瘤组织中，染色体畸变常发生在一些特定染色体，但同时呈较高的不一致性。     

果子狸染色体Giemsa带分析

本文以果子狸外周血淋巴细胞离体培养,制备染色体标本,分析染色体G带带型,结果显示每对染色体的G带带型特征及分布情况,可识别同源染色体对,达到准确地配对。     

采用盲吸法对孕早期绒毛组织制备染色体的研究

绒毛滋养叶细胞有较高的自发分裂趋势,而且与胎儿的遗传基础是一致的。本文通过盲吸法取得孕早期绒毛组织直接制备染色体,供产前诊断分析。实践证明,本方法稳定可靠、简便易行。通过一系列实验,获得了良好的显带技术。在短期培养的绒毛标本中还建立了染色体高分辨显带方法。     

一种同时显示SCE与G带的方法

本文介绍一种同时显示姊妹染色单体互换(SCE)与 G 带的方法。一、细胞培养与染色体制备 培养基采用 RPMI1640,加入20%小牛血清及适量双抗。人外周血培养24小时后加入 BrdU10微克/毫升,避光继续培养48小时。培养终止前6～7小时用含胸腺嘧啶核苷(10微克/毫升)的培养液替换含 BrdU 的培养液,4～5小时后加入秋水仙素0.8μg/ml,按我室常规方法收获细胞,制片。二、胰酶处理 将标本置0.0025%胰酶(pH7.0)中处理5～10分钟,自来水冲洗后用1.5%Giemsa 染4～6分钟。     

人类染色体病实验室诊断技术

目的检测人类染色体数目异常和结构异常导致的染色体病或遗传病.方法人类染色体诊断技术的G显带.外周血肝素抗凝2mL.37℃恒温培养72h,加入浓度为20μg/mL的秋水仙素,常规收获制片显带众数分析.结果发现大Y(大于或等于18号染色体)和女性易性癖为正常核型.结论人类染色体病实验室诊断技术在临床上具备诊断和排除染色体数目异常和结构异常导致的遗传病,并且可作为产前诊断和提高人口素质的重要诊断技术.