血管外膜源一氧化氮对内皮素—1诱导的血管平滑肌增殖的影响

目的 观察血管外膜生成的一氧化氮（NO）对内皮素－1（ET－1）诱导的血管平滑肌（VSM）增殖的影响，以探讨血管外膜源NO对血管结构重塑调节的意义。方法 取大鼠胸主动脉，去除内皮，分以下几组进行组织孵育10h：（1）完整外膜血管组；（2）单纯中膜组；（3）中膜与剥离的外膜共育组；（4）中膜与服L－N－硝基精氨酸（L-NNA)预处理的外膜共育组。每例胸主动脉剪为二段，分两个亚组：ET（10^-7mol/L)组和对照组。^3H-胸腺嘧啶（^3H-TdR)掺入法检测各组VSM的细胞增殖。另取大鼠腹主动脉外膜，用10^-8和10^-7mol/L ET-1刺激4h。Griess法测血管外膜生成的亚硝酸（NO2-)含量，^3H-L－精氨酸（^3H-L-Arg)标记的同位素法测定外膜一氧化氮合酶（NOS）活性。结果 （1）各ET亚组^3H-TdR掺入比相应对照组分别增加48．8％－71．9％。（2）在10^-7mol/L ET-1刺激下，完整外膜组及中膜＋外膜组的^3H-TdR掺入分别比单纯中膜组低21．3％和24．5％。中膜＋L－NNA预处理的外膜组^3H-TdR掺入分别比中膜＋外膜组及完整外膜组高30．8％和25．4％，而与单纯中膜组差异无显著性。（3）与对照组相比，10^-8和10^-7mol/L 的ET－1使外膜NOS活性分别增加124％和177％；使外膜生成的NO2－含量分别增加88％和225％。结论 实验结果表明：血管外膜生成的NO可抑制ET－1刺激的VSM的增殖，其抑制作用为ET－1激活的血管外膜NOS／NO途径所分导。提示血管外膜源NO可能参与心血管疾病过程中血管重塑的调节。     

阿魏酸钠抑制内皮素-1介导高血压病血管平滑肌细胞增殖的研究

目的研究阿魏酸钠(SF)对高血压痛患者血管平滑肌细胞(VSMC)在体外培养条件下内皮素-1(ET-1)介导增殖的影响.方法采用体外培养的VSMC,选用3～8代VSMC分为:ET-1组;SF组;ET-1与SF组.在ET-1组中加入6个不同浓度的SF(0,20,40,80,100,120μg/ml),培养24h后用苔酚蓝法(MTT)和氚-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法测定细胞含量及其培养液中一氧化氮(NO).结果SF可使细胞MTT含量和3H-TdR掺入量明显减少,ET-1可使细胞MTT含量和3H-TdR掺入量明显增加.同时,SF可使ET-1所致的细胞MTT含量增加和3H-TdR掺入量增加明显减少,并随SF含量增加而NO升高.结论SF可抑制VSMC增殖,SF抑制ET-1诱导VSMC增殖,并呈剂量依赖型.其作用可能与通过拮抗ET-1、增高NO活性有关.     

尾加压素Ⅱ对大鼠胸主动脉及肠系膜动脉各部分产生一氧化氮的影响

目的取离体大鼠胸主动脉和肠系膜动脉,将UⅡ与血管各层(内、中、外膜)组织共同孵育,观察UⅡ对NOS活性及NO生成的影响,以探讨UⅡ的血管活性效应的机理.材料与方法分离雄性SD大鼠胸主动脉和肠系膜动脉,将胸主动脉各层分离,上述组织分别加入不同浓度尾加压素Ⅱ在37 ℃、通以95%O2～5%CO2气体条件下进行血管组织孵育,孵育时间为2小时和4小时.测定孵育液中亚硝酸盐含量及组织中一氧化氮合酶活性.取最适浓度及最佳时间点,孵育血管后进行诱导型一氧化氮合酶免疫组织化学染色进行表达定位.结果尾加压素Ⅱ(10-9、10-8 mol/L)可以引起胸主动脉外膜一氧化氮生成增加,一氧化氮合酶活性增强,P<0.05,免疫组化证实血管外膜诱导型一氧化氮合酶表达呈强阳性,孵育2小时和4小时没有显著性差异,P>0.05;10-10～10-8 mol/L浓度尾加压素Ⅱ可以浓度依赖性、时间依赖性刺激肠系膜动脉一氧化氮生成,免疫组化证实诱导型一氧化氮合酶在血管外膜和中膜表达增加,但NOS活性没有明显变化.结论 UⅡ可以刺激胸主动脉和肠系膜动脉血管外膜产生NO.UⅡ对胸主动脉及肠系膜动脉NO/NOS系统影响不同,可能是UⅡ作用于血管引起不同生物学效应的机制之一.     

高血压大鼠主动脉一氧化氮合成途径的变化

目的观察高血压大鼠主动脉内膜、中膜和外膜一氧化氮合成途径的改变,并探讨其可能的病理生理意义.方法 Wistar大鼠缩窄腹主动脉复制高血压模型,动物随机分为对假手术组和高血压组.取大鼠主动脉,分离血管内膜、中膜和外膜.分别测定其亚硝酸盐(NO2--)生成量、一氧化氮合酶(NOS)活性及L-精氨酸(L-Arg)转运,免疫组化染色检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的分布.结果与假手术组相比,高血压大鼠血浆中一氧化氮代谢产物(NOx)高26.2%(P<0.05);主动脉NO2--生成低65.8%(P<0.01),中膜及外膜孵育液的NO2--生成量分别高59.6%和123.6%(均P<0.01);主动脉内膜NOS活性低59.3% (P<0.01),中膜和外膜NOS活性分别高62.6%和118.7%(均P<0.01);血管内膜L-Arg转运率低62.5%(P<0.01),中膜和外膜L-Arg转运率分别高53.7%和99.8%(均P<0.01).iNOS免疫组化染色显示,高血压大鼠血管中膜和外膜尤其是外膜iNOS阳性染色明显增强.结论高血压大鼠血管壁一氧化氮合成与代谢发生改变,血管内膜L-Arg/NOS/NO途径受抑,而中膜和外膜尤其是外膜的L-Arg/NOS/NO系统的活性增强,血管生成的NO增多.提示血管中膜和外膜源NO增多在高血压时可能具有一定的代偿作用.     

尾加压素Ⅱ对大鼠胸主动脉及肠系膜动脉各部分产生一氧化氮的影响

目的　取离体大鼠胸主动脉和肠系膜动脉 ,将UⅡ与血管各层 (内、中、外膜 )组织共同孵育 ,观察UⅡ对NOS活性及NO生成的影响 ,以探讨UⅡ的血管活性效应的机理。材料与方法　分离雄性SD大鼠胸主动脉和肠系膜动脉 ,将胸主动脉各层分离 ,上述组织分别加入不同浓度尾加压素Ⅱ在 37℃、通以 95 %O2 ～ 5 %CO2 气体条件下进行血管组织孵育 ,孵育时间为 2小时和 4小时。测定孵育液中亚硝酸盐含量及组织中一氧化氮合酶活性。取最适浓度及最佳时间点 ,孵育血管后进行诱导型一氧化氮合酶免疫组织化学染色进行表达定位。结果　尾加压素Ⅱ (1 0 - 9、1 0 - 8mol/L)可以引起胸主动脉外膜一氧化氮生成增加 ,一氧化氮合酶活性增强 ,P <0 0 5 ,免疫组化证实血管外膜诱导型一氧化氮合酶表达呈强阳性 ,孵育 2小时和 4小时没有显著性差异 ,P >0 0 5 ;1 0 - 1 0 ～ 1 0 - 8mol/L浓度尾加压素Ⅱ可以浓度依赖性、时间依赖性刺激肠系膜动脉一氧化氮生成 ,免疫组化证实诱导型一氧化氮合酶在血管外膜和中膜表达增加 ,但NOS活性没有明显变化。结论　UⅡ可以刺激胸主动脉和肠系膜动脉血管外膜产生NO。UⅡ对胸主动脉及肠系膜动脉NO/NOS系统影响不同 ,可能是UⅡ作用于血管引起不同生物学效应的机制之一。     

氟伐他汀对高血压血管平滑肌细胞增殖的影响

目的:探讨氟伐他汀对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖的抑制作用.方法:培养自发性高血压大鼠主动脉血管平滑肌细胞,不同浓度的氟伐他汀和甲羟戊酸干预后,进行细胞计数和3H-TdR掺入率的测定.结果:(1)氟伐他汀呈浓度依赖性(10-5～10-7mol)抑制血管平滑肌细胞数目的增加和3H-TdR的掺入率;(2)10-3mol的甲羟戊酸几乎完全逆转了氟伐他汀对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用.结论:氟伐他汀抑制了高血压大鼠血管平滑肌细胞的增殖;甲羟戊酸代谢途径可能参与了血管平滑肌细胞的增殖过程.     

血管紧张素Ⅱ、内皮素对SHR主动脉平滑肌细胞增殖的作用

目的:探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、内皮素(ET-1)对SHR、WKY VSMC增殖的作用.方法:贴块法培养SHR、WKY VSMC,用　3H-TdR参入和细胞计数反映VSMC增殖情况.结果:SHR、WKY VSMC 　3H-TdR参入随AngⅡ、ET-1浓度的增加而增加,呈剂量依赖性.10-7mol/L AngⅡ、ET-1使SHR VSMC　3H-TdR参入提高到对照组的1.9、2.7倍,WKY VSMC 　3H-TdR参入提高到对照组的1.3、1.6倍.AngⅡ不促使SHR、WKY VSMC增生.10-7mol/L ET-1分别使SHR、WKY VSMC细胞数增加209±27%、97±13%.10-7mol/L AngⅡ和ET-1则使SHR、WKY VSMC　3H-TdR参入提高到对照组的7.0、4.2倍,细胞数增加3.0、1.3倍.结论:AngⅡ、ET-1对VSMC的增殖有协同效应.高血压时,VSMC对促生长因子敏感性增加,更易发生肥大增殖.     

D_1类多巴胺受体对肾上腺素α受体介导的促动脉平滑肌细胞增殖作用的影响

目的观察D1类多巴胺受体对肾上腺素α受体介导的血管平滑肌(VSM)细胞增殖的影响。方法以去甲肾上腺素(NE)10-6~10-9mol/L刺激Sprague-Dawley(SD)大鼠主动脉分离的VSM细胞,观察在D1类多巴胺受体激动剂(Fenoldopam)10-5~10-8mol/L存在的情况下,NE促细胞增殖作用的变化,细胞增殖用3H-TdR掺入量表示。结果NE呈浓度依赖性的促进SD大鼠VSM细胞的增殖,该作用由肾上腺素α受体介导,酚妥拉明存在的情况下可消除NE的促增殖作用。Fenoldopam本身对VSM细胞增殖无影响,但Fenoldopam可通过D1类多巴胺受体减弱NE(10-6mol/L)介导的VSM细胞增殖;该实验结果得到了人VSM细胞实验结果的印证。结论D1类多巴胺受体对NE介导的促VSM细胞增殖具有抑制作用,该作用可能在高血压的发生、发展中发挥一定的作用。     

高血压大鼠主动脉一氧化氮合成途径的变化

目的 观察高血压大鼠主动脉内膜，中膜和外膜一氧化氮合成途径的改变，并探讨其可能的病理生理意义。方法 Wistar大鼠缩窄腹主动脉复制高血压模型，动物随机分为对假手术组和高血压。取大鼠主动脉，分离血管内膜，中膜和外膜。分别测定其亚硝酸盐（NO2^-)生成量，一氧化氮合酶（NOS）活性及L－精氨酸（L－Arg)转运，免疫组化染色检测诱导型一氧化氮合酶（iNOS)的分布。结果 与假手术组相比，高血压大鼠血中一氧化氮代谢产物（NOx)高26．2％（P＜0．05）；主动脉NO2^-生成低65．8％（P＜0．01），中膜及外膜孵育液的NO2^-生成量分别高59．6％和123．6％（均P＜0．01）；主动脉内膜NOS活性低59．3％（P＜0．01），中膜和外膜NOS活性分别高62．6％和118．7％（均P＜0．01），血管内膜L－Arg转运率低62．5％（P＜0．01），中膜和外膜L－Arg转运率分别高53．7％和99．8％（均P＜0．01）。iNOS免疫组化染色显示，高血压大鼠血管中膜和外膜尤其是外膜iNOS阳性染色明显增强。结论 高血压大鼠血管管一氧化氮合成与代谢发生改变，血管内膜L－Arg/NOS/NO途径受抑，而中膜和外膜尤其是外膜的L－Arg/NOS/NO系统的活性增强，血管生成的NO增多。提示血管中膜和外膜源NO增多在高血压时可能具有一定的代偿作用。     

血管紧张素Ⅱ对大鼠血管外膜成纤维细胞骨桥蛋白表达的影响

目的研究血管紧张素Ⅱ对培养的大鼠胸主动脉外膜成纤维细胞骨桥蛋白表达的影响。方法大鼠外膜成纤维细胞被随机分为对照组、血管紧张素Ⅱ不同浓度(10-8、10-7、10-6和10-5mol/L)和时间(6h、12h和24h)干预组及血管紧张素Ⅱ加AT1受体拮抗剂氯沙坦和/或AT2受体拮抗剂PD123319干预组,用RT-PCR及Western blotting技术结合光密度扫描分析,观察血管紧张素Ⅱ对培养的大鼠胸主动脉外膜成纤维细胞骨桥蛋白表达的影响。结果血管紧张素Ⅱ10-6mol/L明显刺激外膜成纤维细胞骨桥蛋白的表达,6h、12h和24h桥蛋白较对照组分别升高65.43%、97.03%和105.11%(P<0.05);而24h阴性对照无明显变化。不同浓度的血管紧张素Ⅱ均可诱导骨桥蛋白表达,10-8、10-7、10-6和10-5mol/L管紧张素Ⅱ孵育后分别升高了70.46%、97.37%、123.10%和147.59%(P<0.01)。在血管紧张素Ⅱ刺激前1h分别加入氯沙坦(10-5mol/L)、PD123319(10mmol/L)、氯沙坦(10-5mol/L) PD123319(10mmol/L),共同孵育12h后,其抑制率分别为58.9%、0.92%和59.7%。Western blotting分析,12h不同剂量血管紧张素Ⅱ干预组(10-8、10-7、10-6和10-5mol/L)骨桥蛋白量较对照组分别提高了50.68%、63.03%和69.86%(P<0.05),氯沙坦明显抑制血管紧张素Ⅱ刺激的骨桥蛋白表达,抑制率达到61.7%(P<0.05),而PD123319作用后抑制作用不明显,抑制率仅为0.85%(P>0.05)。结论血管紧张素Ⅱ能在基因和蛋白水平上刺激大鼠外膜成纤维细胞骨桥蛋白的表达,此作用可能是通过AT1受体介导。     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.     

高血压降压治疗目标的再认识

根据传统的高血压水平的定义,1993年WHO高血压治疗指南提出血压控制目标为<140/90mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),但是并非所有患者都必须将血压降至同一水平,而应根据患者情况进行个体化治疗。Framingham进行的一项长达10～12年的心血管事件研究发现,第5年后,正常上限血压[收缩压(SBP