转化生长因子β与椎间盘细胞Ⅰ型胶原基因调控的关系

目的：探讨ＴＧＦ－β在椎间盘Ⅰ型胶原代谢中的作用及作用机制。方法：应用斑点杂交和原位杂交技术检测了ＴＧＦ－β对椎间盘原代培养及传代培养的纤维环细胞、髓核细胞中Ⅰ型胶原ｍＲＮＡ,ＴＧＦ－β１浓度为１ｎｇ／ｍｌ、１０ｎｍ／ｍｌ,其作用分别是０ｎｇ／ｍｌ组的１．１８倍及１．３７倍;对于传代培养４ 纤维环细胞,其调节作用分别是０ｎｇ／ｍｌ组的１．４８倍及２．０３倍。结论：ＴＧＦ－β可以按照剂量依赖方式正向     

转化生长因子β对椎间盘细胞Ⅱ型胶原基因表达的调节作用

目的 探讨转化生长因子β（ＴＧＦ－β）对椎间盘细胞Ⅱ型胶原基因表达的调节作用。方法 应用原位杂交技术检测ＴＧＦ－β１对人胚椎间盘原代培养及传代培养的纤维环细胞、髓核细胞中Ⅱ型胶原ｍＲＮＡ的调节作用,其中ＴＧＦ－β１浓度分别为０ｎｇ／ｍｌ、１ｎｇ／ｍｌ和１０ｎｇ／ｍｌ;采用ＶＩＤＡＳ软件计算杂交涂片中细胞的平均光密度值,进行胶原ｍＲＮＡ相对定量。结果 （１）原代培养的椎间盘纤维环细胞,ＴＧＦ－β１浓     

转化生长因子β对椎间细胞Ⅰ,Ⅲ型胶原基因表达的调节作用

探讨转化生长因子（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒβ,ＴＧＦ－β）对椎间盘Ⅰ,Ⅲ型胶原基因表达的调节作用。方法应用斑点杂交和原位杂交技术检测了ＴＧＦ－β１对椎间盘原代培养及传代培养的纤维环细胞,髓核细胞中Ⅰ型胶原ｍＲＮＡ的调节作用,采用ＶＩＤＡＳ软件计算杂交膜斑点及发校涂片中细胞的平均光密度值,进行胶原ｍＲＮＡ相对定量。结果（１）对于原代培养的椎间盘纤维环细胞Ⅰ型胶原ｍＲＮＡdisp     

TGFβ1，bFGF对前列腺基质细胞增殖和分化的影响

目的　探讨前列腺基质增生的机制。　方法　系用ＭＴＴ和ＴＵＮＥＬ法检测体外原代无血清培养的前列腺基质细胞的增殖,用免疫组化、ＲＴＰＣＲ 方法检测平滑肌细胞特异性标记蛋白的表达。　结果　ＴＧＦβ有多重效应：浓度为０－０１ ～１０．００ｎｇ／ｍｌ 的ＴＧＦβ可抑制指数增生期前列腺基质细胞增殖;浓度低于０－１ｎｇ／ｍｌ 的ＴＧＦβ刺激平顶期前列腺基质细胞增殖;浓度高于１ｎｇ／ｍｌ 的ＴＧＦβ促增殖平顶期的成纤维细胞向平滑肌细胞分化。ｂＦＧＦ对于指数增生期和平顶期细胞均有刺激增殖的作用,并抑制增殖平顶期的成纤维细胞向平滑肌细胞分化。　结论　ＴＧＦβ１／ｂＦＧＦ比例的改变有调节前列腺基质细胞的稳态平衡的作用。     

生长因子在大鼠前列腺组织中的表达及雄激素的调控作用

目的　观察雄激素水平改变对大鼠前列腺组织碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ） 和转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）表达的影响。方法　采用分子杂交技术研究ｂＦＧＦｍＲＮＡ 及ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ 在去势和未去势大鼠前列腺组织中表达的差异。结果　去势组ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ 杂交斑点ＩＯＤ 均值为３１５．５,是未去势组（１７９）的１．７６ 倍;而未去势组ｂＦＧＦｍＲＮＡ 杂交斑点ＩＯＤ 均值为４４５ ．３,是去势组（２００．３） 的２．２２倍,差异均有显著性（Ｐ＜０ ．０１）。结论　雄激素水平变化可影响ｂＦＧＦｍＲＮＡ 及ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ 的表达,ｂＦＧＦ及ＴＧＦβ１ 介导雄激素的作用。     

转化生长因子β1对肾间质成纤维细胞胶原表达的影响

目的　探讨肾间质纤维化的机制。方法　体外培养大鼠肾间质成纤维细胞,采用Ｌ３Ｈ脯氨酸掺入法测定胶原合成及ＲＴＰＣＲ 技术观察转化生长因子β（ＴＧＦβ１） 对体外培养的大鼠肾间质成纤维细胞Ⅰ和Ⅲ型胶原ｍＲＮＡ 表达的影响。结果　ＴＧＦβ１ 可促进肾间质成纤维细胞的３Ｈ脯氨酸掺入,且随着ＴＧＦβ１ 剂量的增加,３Ｈ脯氨酸掺入量增加,胶原合成增多。ＴＧＦβ１ 可促进Ⅰ和Ⅲ型胶原ｍＲＮＡ 的表达,且在ＴＧＦβ１ 浓度２ ～１０ ｎｇ／ｍｌ 时ｍＲＮＡ 的表达量与浓度呈现正相关;在６ ～４８小时内与时间呈现正相关。结论　ＴＧＦβ１ 可能通过促进肾间质成纤维细胞胶原的合成及ｍＲＮＡ 的表达而参与肾间质纤维化。     

PSA对前列腺增生间质细胞的生长抑制作用

目的探讨前列腺特异性抗原（ＰＳＡ）对前列腺间质细胞的生长调控作用。方法原代培养前列腺间质细胞，分别用ＰＳＡ（１μｇ／ｍｌ），β型转化生长因子（ＴＧＦβ１，５ｎｇ／ｍｌ）、ＰＳＡ＋ＴＧＦβ１及无血清培养液处理，分别于第１～４天作ＭＴＴ试验测定细胞生长曲线。用不同剂量的ＰＳＡ处理细胞，观察其细胞生长与凋亡的反应。结果ＰＳＡ组的活细胞密度比同期对照组减少２０．４％～４９．５％，ＴＧＦβ１无明显影响，ＰＳＡ＋ＴＧＦβ１在前３天与ＰＳＡ组差异无显著性，第４天则为０．０３６±０．００４，明显低于ＰＳＡ组（０．０５５±０．０１０），Ｐ＜０．０５。随着ＰＳＡ浓度的升高，ＭＴＴ试验显示的活细胞密度逐渐减少，Ｅｌｉｓａ实验显示细胞凋亡指数逐渐增加。结论ＰＳＡ对前列腺间质细胞有抑制生长和诱导凋亡的作用。     

雄激素对人增生前列腺组织中生长因子表达的调控作用

为了了解碱性成纤维细胞生长因子（ｂ－ＦＧＦ）和转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）在人良性前列腺增生症发病中的作用,采用分子杂交技术研究ｂ－ＦＧＦ和ＴＧＦ－β１在人增生前列腺组织中的表达,并观察雄激素水平改变对ｂ－ＦＧＦ及ＴＧＦ－β１表达的影响。２０例行耻骨上经膀胱前列腺摘除术的患者随机分成两组。其中一组术前口服甲地孕酮（１２０ｍｇ／ｄ）及己烯雌酚（２ｍｇ／ｄ）一周。结果：患者的外周血睾酮浓度从服药前的４０６．１±２３１．４μｇ／Ｌ降至服药后１８．０±９．１μｇ／Ｌ（均值±标准差）,均达到药物去势水平;未服药组前列腺组织ｂ－ＦＧＦｍＲＮＡ表达水平是服药组的２．０９倍（Ｐ＜０．０１）;服药组前列腺组织ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ表达水平是未服药组的１．４９倍（Ｐ＜０．０１）。提示雄激素水平变化可影响ｂ－ＦＧＦ及ＴＧＦ－β１的表达,ｂ－ＦＧＦ及ＴＧＦ－β１异常表达可能参与了人类良性前列腺增生症的发病。     

转化生长因子-β1及其Ⅱ型受体在肝细胞癌中的基因表达

目的 探讨转化生长因子－β１（ＴＧＦ－β１）及其Ⅱ型受体（ＴＧＦ－βＲⅡ）在肝细胞癌中的基因表达。方法 用ＲＴ－ＰＣＲ和免疫组化技术,分别检测３０例肝癌组织和癌旁肝组织中ＴＧＦ－β１及ＴＧＦ－βＲⅡ在ｍＲＮＡ和蛋白水平的表达。结果 （１）ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ阳性表达,在肝癌组织中为２４／３０,癌旁肝组织中为２６／３０,Ｐ〉０．０５;但ＴＧＦ－β１蛋白水平在肝癌组织阳性表达低于癌旁肝组织（Ｐ〈０．０     

增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中TGF—β1及Ⅰ,Ⅲ型胶原基因 …

目的 检测增生性瘢痕（Ｈ）和瘢痕疙瘩（Ｋ）组织中ＴＧＦ－β１及Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ的表达,了解其相互关系及意义。方法 斑点杂交分析检测Ｈ和Ｋ组织中Ⅰ、Ⅲ前胶原及ＴＧＦ－β１ｍＲＢＡ稳态水平的改变;原位杂交检测ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ在组织中的空间分布。结果 ①Ｋ和Ｈ组织中ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ稳态水平明显高于Ｎ组和Ｓ组;②Ｋ选择性Ｉ型前胶原ｍＲＮＡ表达增强,而Ｈ组织中Ⅰ、Ⅲ前胶原ｍＲＮＡ表达均增强。     

腹膜透析对转化生长因子β1在残存肾中表达的影响

探讨清除循环中毒素后生长因子和残存肾小球的改变。方法采用分子杂交技术和组织病理分析方法在肾次全切除的残存肾大鼠模型上研究腹膜透析（ＰＤ）对转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）ｍＲＮＡ在残存肾中表达的影响和肾小球硬化的变化。分模型组和ＰＤ组，第８周ＰＤ组开始作腹膜透析至第１２周。分别在第７周和１２周各组杀检６只作肾病理检查（ＨＥ．ＰＡＳ染色）和ＴＧＦ－β１ｃＤＮＡ缝隙点样杂交。结果在实验的第７周两组间肾小球硬化指数（ＧＳＩ）及ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ表达均无显著性差异。第十二周，ＰＤ组的ＧＳＩ及ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ表达均显著低于模型组。ＧＳＩ改变程度与ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ表达丰度变化呈明显正相关（ｒ＝０．６５Ｐ＜０．０５）。结论腹膜透析可明显减少ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ的表达并延缓残存肾小球的硬化     

黄芪当归合剂对肾病综合征鼠肾转化生长因子β1的影响

目的探讨黄芪当归合剂降脂及减少肾小球细胞外基质沉积的作用是否与肾脏转化生长因子（ＴＧＦ）β１表达的改变有关。方法用嘌呤霉素致肾病综合征大鼠，随机分肾病对照、中药、西药治疗三组。用免疫组化及原位杂交观察肾脏ＴＧＦβ１表达及细胞外基质（ＥＣＭ）沉积。以计算机图象分析进行半定量比较。结果正常组，可见ＴＧＦβ１蛋白及ｍＲＮＡ于肾小管上皮细胞微弱表达，肾小球系膜区ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ弱表达。其余各组ＴＧＦβ１蛋白表达位于肾小管上皮细胞，ｍＲＮＡ表达位于肾小球系膜细胞及肾小管上皮细胞，而后者表达更明显。两治疗组ＴＧＦβ１表达较肾病组明显降低（Ｐ＜０．００１），两治疗组间比较，无显著性差异。两治疗组细胞外基质沉积均明显少于肾病对照组。结论黄芪当归合剂及ＨＭＧＣｏＡ还原酶抑制剂对肾病综合征鼠能明显减少肾小球细胞外基质沉积，同时使ＴＧＦβ１表达的下调。提示黄芪当归合剂可能通过这一下调作用减少肾小球细胞外基质的沉积     

LFA-1共刺激诱导狼疮性肾炎外周血单个核细胞IL-10表达的研究

目的：探讨淋巴细胞功能相关抗原－１（ＬＦＡ－１）对活动性狼疮肾炎（ＬＮ）外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）白介素 １０（ＩＬ－１０）的调节作用。方法：利用半定量 ＲＴ－ＰＣＲ技术观察 ＬＦＡ－ １共刺激对活动性 ＬＮ患者 ＰＢＭＣ ＩＬ－１０ ｍＲＮＡ表达的影响。结果：单独抗ＣＤ３抗体（３０ ｎｇ／ｍｌ）能诱导ＬＮ 患者ＰＢＭＣ ＩＬ－１０ ｍＲＮＡ轻微表达（０．４３＋０．０３ｖｓ ０．５５±０．４４,Ｐ＜０．０５）而在抗ＣＤ３抗体（３０ ｎｇ／ｍｌ）存在的情况下,抗ＬＦＡ－１抗体（２ μｇ／ｍｌ,相当于ＬＦＡ－１配体）共刺激时明显增加了ＰＢＭＣ ＩＬ—１０ ｍＲＮＡ表达（１．３１±０．０８ｖｓ ０．５５＋０,０４,Ｐ＜０．０１）。ＬＦＡ－１中和抗体明显抑制了这种共刺激诱导的ＩＬ—１０ ｍＲＮＡ表达（１．３１±０．０８ｖｓ ０．６４ ±０．０３,Ｐ＜０．０１）。抗ＬＦＡ－１抗体单独刺激时并不引起 ＩＬ－１０ ｍＲＮＡ表达变化（Ｐ＞０．０５）。结论：ＬＦＡ－１作为共刺激分子诱导 ＩＬ－ １０ ｍＲＮＡ表达可能是其参与 ＬＮ发病的机制之一。     

转化生长因子β1在单侧肾切除糖尿病大鼠肾皮质中表达

目的 研究转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）在单侧肾切除糖尿病大鼠肾皮质中表达。方法 将Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分成单侧肾切除Ａ组和单侧肾切除糖尿病Ｂ组，观察ＳＴＺ注射一、四周后血糖、血胰岛素水平、体重、肾重、肾重／体重及肾组织蛋白含量变化。利用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交检测肾皮质ＴＧＦβ１、１α（ＩＶ）前胶原及纤维连接蛋白（ＰＮ）ｍＲＮＡ表达，Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交检测ＴＧＦβ１蛋白水平。另外，使用荧光分光度法测     

增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中TGF-β1及Ⅰ、Ⅲ型胶原基因表达的改变及意义

目的检测增生性瘢痕（Ｈ）和瘢痕疙瘩（Ｋ）组织中ＴＧＦβ１及Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ的表达,了解其相互关系及意义。方法斑点杂交分析检测Ｈ和Ｋ组织中Ⅰ、Ⅲ前胶原及ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ稳态水平的改变;原位杂交检测ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ在组织中的空间分布。结果①Ｋ和Ｈ组织中ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ稳态水平明显高于Ｎ组和Ｓ组;②Ｋ选择性Ⅰ型前胶原ｍＲＮＡ表达增强,而Ｈ组织中Ⅰ、Ⅲ前胶原ｍＲＮＡ表达均增强。结论ＴＧＦβ１在Ｈ和Ｋ的发病机理中起了重要作用,Ｋ和Ｈ发生发展中具有不同的分子机理。     

胰岛素对人卵泡内泡膜细胞分泌雄激素的影响

培养取自月经周期正常妇女卵泡期卵泡的内泡膜细胞，观察人绒毛膜促性腺激素（ｈＣＧ）和胰岛素（ＩＮＳ）对内泡膜细胞分泌雄烯二酮（Ａ）、１７α羟孕酮（ＯＨ－Ρ）和孕酮（Ｐ）的影响。结果表明，ｈＣＧ和ＩＮＳ均刺激内泡膜细胞增加Ａ、ＯＨ－Ｐ和Ｐ的分泌。两者刺激内泡膜细胞分泌激素增加的浓度分别是０．５ＩＵ／ｍｌ和１０ｎｇ／ｍｌ。与基础状态相比，ＩＮＳ（５ｎｇ／ｍｌ）刺激Ａ、ＯＨ－Ｐ、Ｐ的分泌分别增加２．９、４．７和２．４倍，ｈＣＧ（０．１ＩＵ／ｍｌ）分别增加７．４、３．４和２．８倍；ＩＮＳ＋ｈＣＧ共同刺激分别增加９．５、９．３和４．３倍。ＩＮＳ在人卵巢甾体激素的合成中起重要的调节作用     

骨痂组织冰冻切片前胶原及转化生长因子－β1基因表达的原位定位

目的观察骨痂组织中前胶原、转化生长因子－β１（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒβ１,ＴＧＦ－β１）基因表达模式,分析ＴＧＦ－β１在骨折愈合过程中的作用,探索骨组织冰冻切片原位杂交技术。方法采用不脱钙的大鼠骨痂组织冰冻切片进行原位杂交,观察骨痂组织中前胶原和ＴＧＦ－β１基因的表达,并与先前研究作对照。结果杂交信号清晰,定位良好,特异性高。骨折第１周末,成纤维细胞的Ⅲ型前胶原基因表达占主导,Ⅰ型前胶原ｍＲＮＡ阳性成骨细胞也出现于膜内化骨区。ＴＧＦ－β１在分化、增殖的成骨细胞以及接近成熟的软骨细胞有显著表达。骨折第２周末,Ⅱ型前胶原和ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ在成熟的软骨细胞大量表达,而Ⅰ型前胶原ｍＲＮＡ表达也明显增加。骨折第４周末,软骨骨痂基本被骨组织替代,见散在Ⅰ型前胶原ｍＲＮＡ表达阳性的成骨细胞。同时证实共有表型表达的现象存在。结论实验结果与以往有关研究结果的吻合,提示ＴＧＦ－β１在骨折愈合过程中,尤其在细胞分化、增殖中,起重要的调节作用。同时,也说明了此方法是一种快捷、灵敏、又不失特异性的骨组织原位杂交方法。     

转移生长因子—β,碱性成纤维细胞生长因子诱导人成骨细胞表达血小板衍生生

目的 探讨转移生长因子（ＴＧＦ）－β、碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）对人成骨细胞血小板衍生生长因子（ＰＤＧＦ）－ＢｍＲＮＡ表达的影响及其意义。方法 体外分离培养人成骨细胞。在体外培养的成骨细胞中分别加入１０、２０、４０、８０、１６０ｕｇ／Ｌ梯度浓度的ＰＤＧＦ－ＢＢ培养细胞２４ｈ,以摄取＾３Ｈ－ＴｄＲ为细胞增殖指标检测细胞增殖状况。以４ｕｇ／Ｌ的ＴＧＦ－β和１０ｕｇ／Ｌ的ｂＦＧＦ培养细胞２４ｈ,寡核苷酸探针检测细胞ＰＤＧＦ－ＢｍＲＮＡ的表达。结果 １０～１６０ｕｇ／Ｌ的ＰＤＧＦ－ＢＢ可促进成骨细胞增殖（Ｐ〈０．０５）。在普通培养条件下,细胞下表达ＰＤＧＦ－ＢｍＲＮＡ;当培养体系中加入ＴＧＦ－β和ｂＦＧＦ,可见ＰＤＧＦ－ＢｍＲＮＡ的表达。结论 ＰＤＧＦ－Ｂ基因的表达可能是骨组织生长的储备因素,ＴＧＦ－β和ｂＲＮ     

胃癌侵袭性及其根治手术对病人血清转化生长因子β1浓度？…

探讨转化生长因子β１对人胃癌侵袭性的作用。方法 应用酶联免疫吸附法测定２９例胃癌病人血清ＴＧＦβ１浓度。应用点杂交法分析癌灶组织的ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ水平。结果 浸润型组或伴有淋巴结转移组的血清ＴＧＦβ１浓度和ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ表达水平分别明显高于膨胀型组或无淋巴结转移组，切除瘤体后上述各组的血清ＴＧＦβ１浓度均明显下降。     

ＴＧＦβ及ＰＣＮＡ在肾细胞癌中的表达及其临床意义

目的：探讨肾细胞癌中转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）及增残细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达及其价值。方法：采用免疫组织化学技术（ＳＰ法）对４６例肾细胞癌和１１例正常肾组织标本中ＴＧＦβ１、PCNA,结合临床资料进行分析,结果：肾癌组ＴＧＦβ１表达量较正常组高（Ｐ＜０．０５）;PCNA在肾癌组高表达（Ｐ＜０．０１）,且在高分期、高分级肾细胞癌中表达量较低分期,低分级肾细胞癌高（Ｐ＜０．０５）,TGFβ１表达量与ＰＣＮＡ表呈负相关关系（Ｐ＜０．０１）,ＴＧＦβ１表达量低及ＰＣＮＡ表达量高的肾癌患者预后差（Ｐ＜０．０５）,结论：ＴＧＦβ１对处于增残太怕肾细胞癌是一种重要负性调节因子,可抑制肾癌发展,ＴＧＦβ１及ＰＣＮＡ表达可作为判断肾细胞癌预后的指标。