刺梨和金荞麦提取物抑制内皮细胞生长和血管生成

[目的]探讨刺梨提取物（CL）、金荞麦提取物（FR）对人脐静脉内皮细胞ECV-304增殖及凋亡的影响以及对鸡胚尿囊膜血管新生的影响。[方法]IC30浓度CL/FR单独或两药的1/2IC30浓度联合作用于ECV-304细胞,MTT法检测ECV-304细胞的增殖抑制率;流式细胞术检测ECV-304细胞早期凋亡细胞比例;RT-PCR和Western blot法分析Ki-67及Bax、Bcl-2 mRNA/蛋白表达的变化。计算经100μg/mlCL、100μg/mlFR、CL50μg/ml＋FR50μg/ml联合作用后的7日龄鸡胚尿囊膜血管抑制率。[结果]IC30CL、IC30FR和1/2（IC30CL＋IC30FR）对ECV-304细胞的抑制率分别为30.87%±1.2%,32.93%±1.4%和43.67%±1.5%。CL、FR单独应用或联合使用均可明显抑制ECV-304细胞生长,呈剂量依赖性,且诱导凋亡。与单独用药组比较,联合用药组Ki-67、Bcl-2 mRNA/蛋白表达率均有显著降低,而Bax mRNA/蛋白表达均显著增高。CL、FR单独或联合应用均可抑制鸡胚尿囊膜新生血管的生长,以CL作用更明显。[结论]CL和FR单药及联合应用都具有抑制ECV-304细胞增殖和诱导凋亡的效用,两药联合比单药更明显。两药单用和联合都可明显抑制鸡胚尿囊膜血管生成。     

FR/CL体外干预人胃癌细胞株SGC-7901及人肺癌细胞株A549生长

目的 研究金荞麦提取物FR联合刺梨提取物CL对人胃癌细胞株SGC-7901及人肺癌细胞株A549增殖及凋亡的影响.方法 MTT法检测FR、CL对SGC-7901、A549细胞的增殖抑制率;流式细胞术分析早期凋亡细胞比; RT-PCR、Western blot分析Ki-67及Bax、Bcl-2表达的变化.结果 FR、CL单药均可明显抑制SGC-7901、A549细胞的生长,呈剂量依赖性;两药IC_(30) 浓度联合呈增效效应; IC_(30) 浓度FR、CL单药和1/2 IC_(30) (FR)+1/2 IC_(30) (CL)联合对SGC-7901细胞的抑制率分别为(33.89±0.22)%、(30.86±1.17)%和(44.25±0.50)%,对A549细胞的抑制率分别为(30.91±1.72)%、(29.07±1.41)%和(43.62±2.15)%.流式细胞术结果表明,对照组、FR组、CL组、联合组细胞早期凋亡比例依次增加,两单药组及联合组与对照组之间、联合组分别与两单药组之间的差异均具统计学意义(P<0.05);与单药组比较,联合组Ki-67、Bcl-2 mRNA/蛋白表达率有显著降低,而Bax mRNA/蛋白表达显著增高.结论 FR、CL均可抑制人胃癌细胞株SGC-7901细胞、人肺癌细胞株A549的增殖和诱导其凋亡,且联合应用存在增效效应.     

RNA干扰靶向抑制食管癌细胞株Nucleostemin基因表达

[目的]探讨NHeleostemin（NS）基因特异性RNA干扰对食管癌Eca-109细胞株增殖和凋亡情况的影响。[方法]用NS特异性siRNA表达载体转染食管癌Eca-109细胞株．利用MTT法测试细胞增殖抑制率：RT—PCR法检测NS基因表达量的变化．流式细胞仪法检测细胞周期分布和细胞凋亡情况。[结果]与阴性对照组相比．PCDNA4／C—NS—silencer组细胞的增殖速率降低,24h、48h、72h细胞增殖抑制率分别为57．8％、74．9％、87.3％：NS基因表达量下降,GdG,期细胞百分率显著升高,S期细胞减少,细胞凋亡率增加。[结论]RNAi技术可显著抑制食管癌Eca-109细胞株NS基因表达,导致细胞增殖缓慢．细胞周期阻滞．凋亡增加。     

奈达铂联合顺铂对人食管癌细胞株（Eca-109）抑制作用机制的研究

目的研究奈达铂（NDP）联合顺铂（DDP）对人食管癌细胞株Eca-109的增殖及凋亡的影响,并探讨其机制。方法采用MTT法检测NDP联合DDP对Eca-109细胞的增殖抑制率,中效原理法判断联合用药的相互作用;采用RT-PCR和蛋白印迹法分析Ki-67及Bax表达的变化。结果NDP、DDP均明显抑制Eca-109细胞的生长,且呈剂量依赖性;两者联合使用低浓度时呈拮抗效应,高浓度时呈协同效应;IC50浓度的NDP、DDP和1/2IC50（NDP）＋1/2IC50（DDP）对Eca-109细胞的抑制率分别为（41.9±4.1）%、（47.4±2.9）%和（52.5±0.9）%;与单独用药组比较,联合用药组Ki-67基因（蛋白）表达显著降低,而Bax基因（蛋白）表达显著增高。结论1/2IC50浓度NDP和DDP联合应用与两药IC50浓度单独应用相比,对Eca-109细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡能力均有明显增强。     

VX-680联合顺铂对人SK-HEP-1细胞株增殖影响机制探讨

目的：体外观察AuroraB激酶抑制剂VX-680与顺铂（cisplatin,DDP）联合对人肝癌细胞SK—HEP-1细胞株增殖的抑制作用及化疗敏感性,并且初步探讨其机制。方法：MTT法检测VX-680单独或联合DDP对人肝癌细胞SK—HEP-1增殖的抑制作用。流式细胞术（flowcytometry,FCM）分析单独用药及联合用药对SK—HEP-1细胞生长凋亡和周期的影响。蛋白质印迹法检测实验组中AuroraB、p53和Bcl-2蛋白的表达。结果：VX-680与DDP均能抑制SK—HEP-1细胞的生长,呈剂量依赖性,并且联合用药后的抑制率明显高于单用药组,P〈0．05。当VⅪ680为3．125μmol／L和DDP为0．125μg／mL联合时,产生协同作用,Q—1．36;FCM检测发现,联合用药组（17．4±0．3）％的细胞凋亡率明显高于对照组的（1．1±0．2）％,VX-680组为（5．97±0．5）％,DDP组为（7．53±0．7）％。细胞周期结果显示,联合用药组S期和Gl期细胞减少,而停滞在G2／M期细胞比例明显增加（68．3±1．2）％,明显高于单用药组DDP的（16．7±0．9）％和VX-680的（43．6±1．1）％及对照组的（23．5士0．8）％,P〈0．05;并且通过蛋白质印迹检测发现,在联合用药组中的AuroraB激酶表达减少,p53表达增加,Bcl-2表达减少。结论：VX-680能够通过促进细胞凋亡抑制SK—HEP-1细胞的增殖,有效提高SK—HEP-1对DDP的化疗敏感性,其机制与AuroraB的表达减少、p53表达增加及Bcl-2表达减少有关。     

YKL-40调控子宫内膜癌顺铂化疗耐药性的实验研究

目的 探讨沉默甲壳质酶蛋白 40（YKL-40）表达对子宫内膜癌顺铂（DDP）耐药细胞株Ishikawa／DDP的影响。方法 采用DDP长期浓度梯度递增法体外建立Ishikawa／DDP耐药细胞株，并检测多药耐药相关基因（MDR1）和Bcl-2、Bax和caspase-3的表达，采用MTT法检测Ishikawa细胞和Ishikawa／DDP细胞的增殖活性，计算半数抑制浓度（IC50）。Ishikawa／DDP分别转染NC阴性序列（NC组）和siRNA YKL-40（si-YKL-40组），另设未转染细胞作为对照组，采用MTT法、划痕实验和Annexin V／PE双染法检测DDP对si-YKL-40组Ishikawa／DDP细胞增殖、迁移能力和凋亡的影响。结果 体外成功建立Ishikawa／DDP耐药细胞株，3.125、6.25、12.5、25、50、100 μmol／L DDP对Ishikawa／DDP细胞的增殖抑制率分别为（6.93±2.45）％、（8.14±4.50）％、（11.37±4.62）％、（15.18±3.97）％、（26.29±5.08）％、（41.32±7.64）％，明显低于Ishikawa细胞（P＜0.05）。DDP对Ishikawa和Ishikawa／DDP的IC50分别为14.58 μmol／L和116.70 μmol／L，Ishikawa／DDP的耐药指数为8.004。QPCR检测结果显示，Ishikawa细胞YKL-40、MDR1、Bcl-2、Bax、caspase-3 mRNA表达量分别为0.82±0.15、0.43±0.11、1.05±0.23、1.17±0.20、0.96±0.18，而Ishikawa／DDP细胞分别为1.87±0.40、2.34±0.46、1.52±0.28、0.72±0.21、0.49±0.17，差异有统计学意义（P＜0.05）。3.125、6.25、12.5、25、50、100 μmol／L DDP对si-YKL-40组细胞的增殖抑制率分别为（10.95±2.74）％、（18.73±5.30）％、（32.79±5.47）％、（52.28±6.58）％、（61.73±5.26）％、（65.45±7.33）％，明显高于对照组和NC组，差异有统计学意义（P＜0.05）。DDP对si-YKL-40组细胞的IC50为22.19 μmol／L。与对照组和NC组比较， si-YKL-40组细胞凋亡率升高、愈合率下降；YKL-40、MDR1、Bcl-2蛋白表达量下调， Bax和caspase-3蛋白表达量上调，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 沉默YKL-40可显著提高Ishikawa／DDP细胞株对DDP的敏感性，并促进细胞凋亡，其具体机制可能与下调MDR1、Bcl-2表达，及上调Bax和caspase-3表达有关。     

康莱特注射液对吉非替尼诱导人肺腺癌A549细胞株凋亡影响的实验研究

目的 探讨康莱特注射液联合吉非替尼对人肺腺癌A549细胞株增殖和凋亡的影响。 方法 应用MTT法计算康莱特注射液作用于人肺腺癌A549细胞株48 h的半数抑制浓度（IC50）,检测康莱特注射液（5、10、20、40、80、100、160 μl／ml）、吉非替尼（0.1、0.5、1.0、5、10、20、40 μmol／L）以及康莱特注射液（80 μl／ml）联合吉非替尼（0.1、0.5、1、5、10、20、40 μmol／L）作用于人肺腺癌A549细胞株24、48、72 h的增殖抑制率;流式细胞仪Annexin V/PI 双标法检测康莱特注射液、吉非替尼及两药联合作用于A549细胞48 h后的凋亡率;免疫细胞化学法检测各药物处理组作用于A549细胞48 h后FAS、AKT2蛋白表达;RT-PCR技术检测各组FAS mRNA、AKT2 mRNA的表达水平。均设未加药的A549细胞为空白对照组。结果 康莱特注射液作用于人肺腺癌A549细胞株48 h的IC50为80 μl／ml。康莱特注射液联合吉非替尼作用于A549细胞的增殖抑制率高于两单药组和空白对照组,且呈时间和浓度依赖性（P＜0.05）。两者的联合作用在一定浓度范围内呈现出协同的抗瘤效果。流式细胞术检测显示,两药联合组的细胞凋亡率显著高于两单药组和空白对照组（P＜0.05）。免疫细胞化学和RT-PCR检测显示,与空白对照组比较,康莱特组和两药联合组FAS蛋白和mRNA的表达水平均升高（P＜0.05）,AKT2蛋白和mRNA表达水平均下调（P＜0.05）。结论 康莱特注射液联合吉非替尼对人肺腺癌A549细胞株有明显的促凋亡作用,康莱特注射液可能增加人肺腺癌A549细胞对于吉非替尼的敏感性。     

赖氨匹林对黑色素瘤B16细胞的增殖抑制作用

[目的]探讨非甾体抗炎药赖氨匹林（Aspisol）对小鼠黑色素瘤细胞株B16的增殖抑制作用及其可能的机制。[方法]应用MTF比色法分析细胞生长抑制作用,流式细胞技术测定凋亡率,应用Western blot分别检测COX-2蛋白和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。[结果]2～8mmol／L赖氨匹林可抑制B16细胞的生长,且其作用具有剂量和时间依赖性（P〈0．01）。赖氨匹林（2、4、8mmol／L）作用24h后诱导B16细胞的凋亡率分别为5．05％±1．23％、9．25％±1．46％、14．80％±1．98％,并呈浓度依赖性;与对照组（0．18％±0．13％）比较差异有显著性（P〈0．01）。赖氨匹林抑制B16细胞COX-2蛋白的表达（P〈0．05）;赖氨匹林可促进Bax蛋白表达（P〈0．05）,但抑制Bcl-2的表达（P〈0．05）。[结论]赖氨匹林通过影响COX-2蛋白的表达,调节凋亡相关蛋白表达,抑制B16细胞增殖。     

白藜芦醇对食管癌细胞凋亡相关基因survivin和bax表达的影响

[目的]探讨白藜芦醇诱导食管癌Eca109细胞凋亡的作用机制。[方法]MTT比色法测定细胞增殖的抑制率;透射电镜下观察细胞凋亡形态学变化;RT-PCR法和流式细胞术（FCM）检测白藜芦醇对Eca109细胞survivin和bax表达的影响。[结果]白藜芦醇对Eca109细胞生长有抑制作用．抑制率达76．42％．并呈剂量一时间效应关系。白藜芦醇处理细胞后可见凋亡形态学变化,部分细胞体积变小。染色质浓缩及边集。RT—PCR法和FCM检测结果显示白藜芦醇可抑制survivin上调,促进bax的表达。[结论]白藜芦醇能诱导食管癌Eca109细胞凋亡,其机制可能与调节survivin和bax的表达有关。     

Bcl-XL反义寡核苷酸增强食管癌细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性

目的探讨Bcl -XL反义寡核苷酸(ASODN)在下调Bcl- XL表达、增加食管癌细胞株EC9706对5氟尿嘧啶(5Fu)敏感性中的作用。方法设细胞对照组、空白对照组、无关序列寡核苷酸(N ODN)组、ASODN组、5Fu组及ASODN联合5Fu组,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测EC9706细胞的增殖抑制率;RT PCR和Westernblot检测Bcl- XLmRNA和蛋白表达水平的改变;吖啶橙荧光染色和流式细胞技术定量检测EC9706细胞的凋亡率。结果Bcl -XLASODN联合5Fu治疗组对食管癌细胞增殖的抑制率为71.58%,对Bcl XLmRNA表达抑制率为81.25%,并可显著下调Bcl XL的蛋白表达;凋亡指数为69.5%,凋亡率为(63.32±9.23)%,与细胞对照组、空白对照组、N -ODN组、ASODN组及5Fu组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论ASODN联合5Fu可有效抑制食管癌细胞EC9706的增殖,通过ASODN下调Bcl XL表达,可显著增强食管癌细胞对5Fu的敏感性。     

Inhibition of tumor growth in vitro by a combination of extracts from Rosa roxburghii Tratt and Fagopyrum cymosum

Objective: Traditional Chinese herbal medicines have a very long history. Rosa roxburghii Tratt andFagopyrum cymosum are two examples of plants which are reputed to have benefits in improving immuneresponses, enhancing digestive ability and demonstrating anti-aging effects. Some evidence indicates that herbalmedicine soups containing extracts from the two in combination have efficacy in treating malignant tumors.However, the underlying mechanisms are far from well understood. The present study was therefore undertakento evaluate anticancer effects and explore molecular mechanisms in vitro. Methods: Proliferation and apoptosiswere assessed with three carcinoma cell lines (human esophageal squamous carcinoma CaEs-17, human gastriccarcinoma SGC-7901 and pulmonary carcinoma A549) by MTT assay and flow cytometry, respectively, afterexposure to extract from Rosa roxburghii Tratt (CL) and extract from Fagopyrum cymosum (FR). IC30 of CL andFR were obtained by MTT assay. Tumor cells were divided into four groups : control with no exposure to CLor FR; CL with IC30 CL; FR with IC30 FR; CL+FR group with 1/2 (IC30 CL + IC30 FR). RT-PCR and Westernblot analysis were used to detect the expression of Ki-67, Bax and Bcl-2 at mRNA and protein levels. Results:Compared with the CL or FR groups, the combination of CL+FR showed significant inhibition of cell growthand increase in apoptosis; the mRNA and protein expression levels of Ki-67 and Bcl-2 in CL+FR group wereall greatly decreased, while the expression of Bax was markedly increased. Conclusions: These results indicatethat the synergistic antitumor effects of combination of CL and FR are related to inhibition of proliferation andinduction of apoptosis.     

菱角提取物诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡

[目的]探讨菱角提取物对人肝癌SMMC-7721细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用。[方法]采用MTT法检测菱角提取物对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用;丫啶橙染色、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测细胞凋亡。[结果]菱角提取物能抑制SMMC-7721细胞的增殖,且呈明显的剂量依赖性。荧光显微镜下细胞呈典型的凋亡形态学改变。[结论]菱角提取物可抑制SMMC-7721细胞的增殖并诱导其凋亡。     

告达庭激活Caspase-3诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡

[目的]评价告达庭体外诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡的作用。[方法]MTT法检测细胞活性;吖啶橙染色观察核形态;流式细胞术检测细胞凋亡率：Western-blot及比色法检测Cas-pase-3表达及活性。[结果]告达庭抑制SGC-7901细胞的活性,具有浓度、时间依赖性;告达庭70μM能使SGC-7901细胞出现核染色体浓聚等典型的凋亡形态学改变,告达庭35、70μLM使细胞凋亡率升高,并使Caspase-3蛋白表达量和蛋白活性显著升高。[结论]告达庭可能通过激活Caspase-3诱导SGC-7901细胞凋亡。     

羟基喜树碱对SW1990体外增殖及凋亡的影响

目的：探讨羟基喜树碱（HCPT）体外抑制人胰腺癌细胞株SW1990增殖并诱导其凋亡的作用。方法：体外培养的胰腺细胞以不同浓度的HCPT处理20至24h后,用MTT法测定细胞增殖,以Annexin V早期凋亡检测试剂盒,电子显微镜,流式细胞仪和原位末端标记分析以及bcl-2免疫细胞化学标记分析检测细胞凋亡情况,结果：MTT细胞增殖,在浓度为3．125ug/ml-100ug/ml各组,药物作用24h,后,肿瘤细胞的增殖抑制率显著高于对照线。（2）原位末端标记及流式细胞仪检测,在0．05mg./ml浓度下,作用20h后,肿瘤细胞的凋亡率在13．2－15．3％之间,在0．1mg/ml浓度下,作用20h后,凋亡率在26．1－30．4％之间。（3）电镜及Annexin V荧光检测：在0．05mg/ml浓度下,凋亡以早期表现为主,早期凋亡率约为15％,（4）bcl-2免疫细胞化学表达：经0．05mg/ml浓度作用24h后,bcl-2表达较对照组明显减少,结论：HCT在体外可抑制SW1990细胞的增殖,部分作用机制是诱导细胞凋亡,可作为细胞凋亡诱导剂用于胰腺癌治疗。     

Apogossypolone对乳腺癌MCF-7细胞株放射增敏的体外实验研究

[目的]探讨Apogossypolone(ApoG2)对乳腺癌MCF-7细胞株的放射增敏作用及其作用机制。[方法]①MTT法检测ApoG2单药对MCF-7细胞的抑制率,确立细胞半数抑制浓度(IC50)。②根据MTT结果选取低浓度(相似文献   

GW843682X对鼻咽癌细胞周期和凋亡的影响

[目的]研究GW843682X对鼻咽癌5-8F细胞周期和凋亡的影响。[方法]培养鼻咽癌5-8F细胞,0、6.25、12.5、25、50、100、200和400nmol/L的GW843682X处理后,用CCK8试剂检测药物对细胞增殖的影响。分别以0、250,500,1000nmol/L的GW843682X处理5-8F细胞48h后,用PI单染流式细胞仪检测药物对5-8F细胞周期的影响。用Annexin V-FITC双染细胞后,经流式细胞仪检测细胞凋亡的变化。[结果]CCK8比色结果显示,GW843682X能抑制鼻咽癌5-8F细胞的增殖,当药物浓度大于50nmol/L时,细胞增殖显著受抑。细胞周期检测结果显示,与阴性对照组比较,GW843682X增加了G2/M期细胞阻滞,减少了G0/G1期细胞比例（P〈0.05）。细胞凋亡检测结果显示,与对照组相比,随着GW843682X浓度的增加,凋亡细胞所占比例逐渐增大,当药物浓度达到500nmol/L和1000nmol/L时,凋亡细胞所占比例显著增加（P〈0.05）。[结论]GW843682X能够显著抑制鼻咽癌5-8F细胞的增殖,可以诱导细胞阻滞于G2/M期,其诱导5-8F细胞凋亡呈一定的剂量依赖性。     

大蒜提取物S-烯丙基半胱氨酸对人食管鳞癌TE-13细胞株增殖和凋亡作用的研究

[目的]研究S-烯丙基半胱氨酸（SAC）对人食管鳞癌细胞株TE-13增殖、凋亡等生物学特性的影响。[方法]MTT比色法和细胞克隆形成实验检测SAC作用于人食管鳞癌细胞株TE-13的增殖活性,流式细胞术分析肿瘤细胞的凋亡,WesternBlot检测细胞内STAT3、Mcl-1、Survivin蛋白的表达。[结果]SAC明显抑制TE-13细胞的增殖率和克隆形成率,并且具有时间和浓度依赖性。进一步研究发现SAC作用于细胞后通过抑制STAT3、Mcl-1和Survivin蛋白的表达,活化Active-caspase3蛋白的表达从而诱导细胞凋亡和坏死。[结论]S-烯丙基半胱氨酸通过抑制STAT3、Mcl-1和Survivin的表达．进而抑制TE-13细胞的增殖．诱导其凋亡。     

重楼皂甙Ⅰ对肺腺癌细胞株PC9增殖及凋亡的影响

[目的]评价重楼皂甙Ⅰ对肺腺癌细胞株PC9增殖和凋亡的影响.[方法]以体外培养的肺腺癌细胞株PC9为研究对象,MTT法检测重楼皂甙Ⅰ对PC9细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪检测重楼皂甙Ⅰ对PC9细胞周期的影响,Annexin-V-FITC/PI双染法检测重楼皂甙Ⅰ对PC9细胞凋亡的影响,Western blot法检测重楼皂甙Ⅰ对PC9细胞Bcl-2、Bax、caspase-3蛋白表达的影响.[结果]不同浓度重楼皂甙Ⅰ能有效抑制PC9细胞的增殖,且呈时间浓度依赖性(P＜0.01).2.5.μg/ml重楼皂甙Ⅰ作用PC9细胞12h、24h、48h后,出现G2/M期阻滞.2.5μg/ml重楼皂甙Ⅰ作用PC9细胞24h、48h后,细胞凋亡率明显增加,与对照组相比,具有统计学差异(P＜0.01).2.5μg/ml重楼皂甙Ⅰ作用PC9细胞48h后,Bcl-2蛋白表达降低、Bax及caspase-3蛋白表达增加,与对照组相比,亦具有统计学差异(P＜0.01).[结论]重楼皂甙Ⅰ能抑制PC9细胞的体外增殖,且抑制作用表现出时效和量效关系,其机制可能与G2/M期阻滞、促进细胞凋亡、降低Bcl-2蛋白表达、增加Bax及caspase-3蛋白表达有关.