白细胞介素6对豚鼠离体近端结肠平滑肌收缩的影响

目的:研究白细胞介素6(IL-6)对豚鼠近端结肠平滑肌的影响及其机制.方法:观察IL-6对结肠收缩的影响;用河豚毒素(TTX)阻断肠神经后观察不同浓度IL-6对结肠平滑肌收缩的影响;损伤Cajal间质细胞(ICC)后观察IL-6对结肠平滑肌收缩的影响.结果:在带有ICC的近端结肠纵行肌加入IL-6后,结肠平滑肌的收缩振幅增加和频率加快,呈浓度依赖性:加入TTX后,收缩的幅度和频率,同拮抗前相比分别降低和减慢(0.206±0.027 g vs 0.300±0.039 g;9.770±1.711 s vs 8.483±1.113 s:P<0.01,P<0.05):TTX阻断后加入IL-6(80μg/L),振幅增加和频率加快(P<0.01,P<0.05):破坏结肠ICC,收缩幅度和频率分别与损伤ICC后加入IL-6无显著性差异(80μg/L),而与正常结肠收缩振幅和频率有显著性差异(P<0.01).结论:IL-6对豚鼠近端结肠平滑肌的收缩活动有兴奋作用,其兴奋效应主要是通过肠神经元介导.ICC是IL-6对平滑肌兴奋途径的一个不可缺少的中间环节.     

决明子对家兔离体小肠平滑肌活动的影响

目的研究决明子对家兔小肠活动张力及频率的影响。方法肠断置放于灌流肌槽中,加入不同浓度的决明子水煮液,分别记录与观察小肠平滑肌的收缩活动。结果决明子水煮液浓度达到10 mg/ml时,对家兔离体小肠平滑肌收缩张力有显著的促进作用(P0.05);当决明子水煮液浓度达到20 mg/ml时,对离体小肠平滑肌收缩频率有显著抑制作用(P0.05),且表现出剂量依赖性;阿托品明显阻断决明子对家兔离体小肠平滑肌收缩张力的促进作用。结论决明子能加强小肠平滑肌收缩幅度,但减缓小肠平滑肌的活动频率。阿托品可以阻断决明子对家兔离体小肠平滑肌活动张力的促进作用。     

IL-1β及IL-1ra对结肠癌细胞表达uPA的影响

目的研究白细胞介素（IL）-1β和白细胞介素受体拮抗剂（IL-1ra）对结肠癌细胞表达uPA的影响,探讨IL-1β对结肠癌细胞迁移能力的影响。方法体外培养人结肠癌细胞,加入IL-1β和IL-1ra,应用半定量逆转录-聚合酶链反应方法,比较不同处理组结肠癌细胞中uPAmRNA的表达。结果IL-1β可促进结肠癌细胞的生长增殖,上调uPAmRNA的表达,呈一定的剂量效应关系;在时间系列组中,可检测到uPA mRNA的表达,以24 h表达最高。IL-1ra可以抑制IL-1β对uPA mRNA表达的上调作用。结论IL-1β促进结肠癌细胞生长增殖,刺激结肠癌细胞uPA高表达,从而促进结肠癌的迁移,IL-1ra可抑制IL-1β的作用。     

胆囊收缩素对胆固醇结石豚鼠离体胆囊肌条的影响

目的:建立胆固醇结石实验动物模型,探讨胆囊收缩素(cholecystokinin,CCK)对胆固醇结石豚鼠离体胆囊肌条收缩的影响,并研究胆道动力因素在胆固醇结石形成中的作用.方法:喂养致石饲料构建豚鼠胆固醇结石模型.采用灌流法加药,利用张力换能器记录豚鼠离体胆囊肌条张力的变化,观察10-9、10-8、10-7 mol/L的CCK-8对正常豚鼠离体胆囊肌条(A组)、喂养致石饲料4 wk(B组)、8 wk(C组)豚鼠离体胆囊肌条及正常豚鼠损伤Caial间质细胞(interstitial cell of cajal,ICC)后离体胆囊肌条(D组)的影响.结果:A组无结石发生,B组及C组共有13例结石发生:A组、B组及C组加入CCK后收缩振幅均增加,呈浓度依赖性:B、C两组振幅加入CCK后的效应值同A组相比变小,起作用时间慢(P<0.05);损伤胆囊ICC后,收缩幅度增加不明显,与CCK浓度无显著差异,而与A组相比效应值有显著性差异(10-9mol/L:0.461±0.071 vs 1.461±0.252:10-8mol,L:0.608±0.118 vs 2.484±0.283:10-7mol/L:0.641±0.129 vs 3.312±0.311,均P<0.01).结论:离体胆囊肌条肌张力降低及对CCK的效应性降低在胆囊结石病的发生发展中有重要作用;而损伤ICC后,胆囊离体肌条对CCK的效应性明显降低,ICC可能在胆囊结石等胆囊动力性疾病中发生作用.     

Cajal间质细胞介导的糖尿病大鼠胃离体平滑肌条收缩功能的研究

目的通过观察Cajal间质细胞介导的糖尿病大鼠和普通大鼠胃离体平滑肌条的收缩功能,体外高糖状态对大鼠胃离体平滑肌条收缩功能的影响,以及糖尿病大鼠胃壁Cajal间质细胞含量及形态学的改变,探讨Cajal间质细胞在糖尿病胃轻瘫发病机制中的作用。方法（1）动物分组处理：将20只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、1型糖尿病组。后组以腹腔注射STZ建立1型糖尿病动物模型。（2）胃离体平滑肌条收缩功能的测定：用瞿颂义方法,取胃体上1／3和胃窦环行肌肌条,与张力换能器相连,并输入生理记录仪,记录糖尿病组和对照组胃肌条的机械收缩运动。（3）给予体外不同浓度高糖,观察胃离体平滑肌条收缩状态的变化。（4）用免疫组化的方法,比较糖尿病组和对照组胃壁Cajal间质细胞含量及形态学的改变。结果与正常组比较,糖尿病组液体胃排空率较正常对照组显著延迟（正常组74．38±3．62％,糖尿病组52．00±5．40％）（P〈0．01）;糖尿病大鼠胃平滑肌条体外收缩振幅和频率较正常对照组减少（P〈0．05）;体外高血糖状态并没有直接影响到胃平滑肌条的收缩;免疫组化结果显示糖尿病组Cajal间质细胞在胄体及胃窦的分布稀疏,数量减少,胃体与胃窦的减少比较没有明显差异。结论本研究结果显示,Cajal间质细胞的病变可能是糖尿病胃轻瘫的重要发病机制,而体外高糖状态不作为直接导致为平滑肌收缩功能异常的独立危险因素。     

IL-1β与人慢性胃炎的相关性研究

目的 探讨IL-1β与人慢性胃炎之间的相关性.方法 收集西安交通大学医学院第一附属医院胃镜检查的胃活检标本,福尔马林固定,制备石蜡切片,进行病理分型和IL-1β SABC免疫组化染色.结果 慢性萎缩性胃炎组IL-1β表达的阳性率高于慢性浅表性胃炎组(P<0.05);慢性萎缩性胃炎组中,异型增生组IL-1β表达的阳性率高于肠腺化生组(P<0.05).结论 IL-1β在慢性胃炎的转归和发展中具有较高的预测价值.     

脂多糖对原代大鼠腹膜间皮细胞IL-1β和IL-6表达的影响

目的研究原代腹膜间皮细胞(PMCs)对不同浓度脂多糖(LPS)刺激的反应效果,探讨术后腹腔粘连体外细胞最佳造模方法。方法运用不同浓度LPS于不同时间点刺激PMCs,ELISA法检测各组细胞上清液中白介素(IL)-1β、IL-6蛋白含量,qRT-PCR检测IL-1β、IL-6 mRNA水平,扫描电镜观察LPS刺激前后PMCs的活性变化情况。结果 ELISA测得各组大鼠PMCs培养上清液IL-1β和IL-6浓度随着培养时间推移和LPS浓度增加而表现出明显差异(P0.01),尤其以24 h、10μg/ml为LPS最佳刺激时间和最佳刺激浓度;qRT-PCR实验中LPS最佳刺激时间为24 h,但是最佳刺激浓度为5μg/ml;正常PMCs扫描电镜下表面被丰富的微绒毛覆盖;LPS刺激后PMCs剥脱、肿胀明显,具有细胞间隙,偶见基底膜。结论LPS能够刺激大鼠PMCs诱发炎症损伤,进一步放大炎症反应,模拟术后腹腔粘连微环境,作为术后腹腔粘连体外细胞模型。     

IL-1β对人冠状动脉平滑肌细胞妊娠相关血浆蛋白A分泌的影响

目的探讨IL-1β对人冠状动脉平滑肌细胞（HCASMC）分泌妊娠相关血浆蛋白A（PAPP-A）的影响。方法培养HCASMC,至第5～7代时,分别加入20μg/L和0μg/L的IL-1β（0μg/L组为对照组）,分别孵育2、4、8、24、36 h后,收集细胞培养上清液;采用IL-1β（0、5、20、4μg/L）刺激HCASMC 6 h后分别收集细胞和细胞培养上清液。用ELISA法检测细胞培养上清液内PAPP-A的表达量。结果IL-1β组PAPP-A表达量在2 h时开始增加,8、24和36 h时其浓度显著高于对照组（P均〈0.05）;随着IL-1β剂量增加,PAPP-A的表达量不断升高,其中20μg/L和40μg/L组的浓度均显著高于0μg/L组的浓度（P均〈0.05）。结论IL-1β可使HCASMC分泌PAPP-A增加,并呈时间和剂量依赖性。     

胃癌患者血清和组织IL-1β水平变化及临床意义

目的研究IL-1β与胃癌发生的相关性，探讨IL-1β在胃癌发生中的作用，为胃癌的防治提供新的思路。方法收集70例胃癌、45例癌旁和70例胃炎手术切除组织和胃镜下活检标本，采用免疫组化SABC法测定组织IL-1β蛋白表达水平；以双抗体夹心ELISA法测定胃癌、胃炎患者血清中IL-1β含量，并进行比较。结果胃癌患者血清IL-1β水平显著高于胃炎病人（P〈0．05），且与临床分期有关，进展期胃癌高于早期胃癌（P〈0．05）。IL-1β蛋白在胃癌、癌旁和胃炎中的表达率分别为65．95％、44．44％和22．50％；胃癌组IL-1β表达高于癌旁、胃炎组。低、未分化癌组织IL-1β的表达高于高、中分化癌组织（P〈0．05）；进展期胃癌高于早期胃癌（P〈0．05）。结论胃癌患者血清、胃粘膜组织中IL-1β表达高于胃炎组，提示胃粘膜IL-1β表达与胃癌的发生有一定的关系。     

胰岛素对血管平滑肌细胞转化生长因子β1及其受体表达的影响

流行病学调查的资料显示 ,5 0 %以上的 2型糖尿病患者并发高血压 ,这将加重患者的大血管粥样硬化的形成。近年来研究发现 :高血糖是血管损伤的重要因素 ,却不是此并发症的唯一因素〔1〕;胰岛素抵抗所导致的高胰岛素血症是血管硬化的独立高危因子 ,胰岛素能直接加强血管平滑肌细胞(ＶＳＭＣ)增生 ,参与血管硬化的病理过程。为此 ,本研究观察胰岛素对血管平滑肌细胞ＴＧＦβ1和Ⅰ、Ⅱ型ＴＧＦβ受体表达的影响。一、材料和方法1.材料 :实验动物 :ＳＨＲ和ＷＫＹ大鼠 (购自上海第二医科大学附属瑞金医院上海市高血压研究所 ) ,雄性 ,7～ 10周龄…     

黄芪多糖对2型糖尿病大鼠血清IL-1β、IL-6、IL-18的影响作用

选择健康清洁级Wistar大鼠,随机分糖尿病模型组及正常对照组,通过测定相应生化指标对结果进行分析。结果：①糖尿病模型组饮水、饮食及尿量明显高于正常对照组,体重明显下降,正常对照组无明显变化。②黄芪多糖治疗组症状得到明显控制,FBS（空腹血糖）、FINS（空腹血清胰岛素）、IL-1β（白细胞介素一1B）、IL-6（白细胞介素-6）、IL-18（白细胞介素-18）水平明较阳性对照组下降（P〈0．05）;黄芪多糖治疗组几-18水平低于阳性对照组,但无统计学意义（P〉0．05）。结论：黄芪多糖可降低糖尿病大鼠血糖及胰岛素水平,也可降低血清IL-1B、IL-6,从而改善胰岛素抵抗,但对IL-8的影响作用不够显著。     

IL-1β、IFN-γ对胰岛β细胞凋亡及胰岛素释放的影响

体外分离培养SD大鼠胰岛细胞,分别或共同加入IL-1β(终浓度20u/mL)和IFN-γ(终浓度150u/mL)处理.加入11.1mM的葡萄糖刺激胰岛素释放.应用放射免疫分析法测定培养液上清中胰岛素浓度,流式细胞术检测胰岛细胞凋亡.结果IL-1β单独作用于胰岛细胞,能抑制高糖刺激下胰岛素分泌及促进胰岛细胞凋亡.但与对照组比较差异无显著性(P＞0.05);IFN-γ单独或联合IL-1β能显著抑制胰岛素分泌(P＜0.05),促进胰岛细胞凋亡(P＜0.05).结论IFN-γ和IL-β能诱导胰岛β细胞凋亡,并且有协同作用.与自身免疫性糖尿病的发生、发展有一定关系.     

IL-1β、IFN-γ对胰岛β细胞凋亡及胰岛素释放的影响

体外分离培养SD大鼠胰岛细胞，分别或共同加入IL-1β（终浓度20u／mL）和IFN-γ（终浓度150u／mL）处理。加入11．1mM的葡萄糖刺激胰岛素释放。应用放射免疫分析法测定培养液上清中胰岛紊浓度，流式细胞术检测胰岛细胞凋亡。结果：IL-1β单独作用于胰岛细胞，能抑制高糖刺激下胰岛素分泌及促进胰岛细胞凋亡。但与对照组比较差异无显著性（P〉0．05）；IFN-γ单独或联合IL-1β能显著抑制胰岛紊分泌（P〈0．05），促进胰岛细胞凋亡（P〈0．05）。结论：IFN-γ和IL-β能诱导胰岛β细胞凋亡，并且有协同作用。与自身免疫性糖尿病的发生、发展有一定关系。     

AEG1促进肝癌细胞HepG2分泌细胞因子IL-6、IL-1β的实验研究

目的研究AEG1能否促进肝癌细胞HepG2分泌细胞因子IL-6、IL-1β,探讨AEG1是否参与改变肿瘤微环境。方法用脂质体稳定转染法分别转染pcDNA3.1(-)-AEG1(AEG1全长质粒)、psilencer 2.0-shAEG1(AEG1干扰质粒)至HepG2细胞,相对应以转染空质粒pcDNA3.1(-)、psilencer 2.0的HepG2细胞为对照组;采用实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)、Western blotting检测AEG1 mRNA和蛋白表达变化;采用实时荧光定量RT-PCR和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞因子IL-6、IL-1β的表达和分泌。结果与转染相应空载体的阴性对照组和未转染的空白对照组相比,分别转染AEG1全长质粒/AEG1干扰质粒后,HepG2细胞中AEG1的蛋白表达明显增高/降低。转染AEG1全长质粒的HepG2细胞中IL-6、IL-1βmRNA均较对照组和空白组明显增强(P均<0.05),细胞培养介质中IL-6、IL-1β蛋白浓度也显著高于对照组(P均<0.05);转染AEG1 shRNA的HepG2细胞中IL-6、IL-1βmRNA均较对照组和空白组降低(P均<0.05),细胞培养介质中IL-6、IL-1β蛋白浓度也低于对照组(P均<0.05)。结论成功构建稳定过表达和沉默AEG1的HepG2细胞,AEG1能调控IL-6、IL-1β的表达和分泌。     

大鼠在运动性学习记忆时小脑IL-1β含量和IL-1β免疫阳性细胞的变化

目的观察大鼠在运动性学习记忆时小脑IL-1β含量和IL-1β免疫阳性细胞的变化，探讨IL-1β与运动性学习记忆的关系。方法40只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型7d组、模型14d组、模型21d组，用水迷宫建立运动性学习记忆模型，采用双抗体夹心ELISA法测定IL-1β含量和用免疫组化方法和图像分析技术，检测IL-1β免疫反应阳性细胞在小脑表达的变化。结果模型组大鼠小脑IL-1β含量和免疫反应阳性细胞数量比对照组显著增加（P〈0．05）。结论IL-1β参与了运动性学习记忆的过程，并与运动性学习记忆的巩固有关。     

IL-1β双相调节血管平滑肌细胞膜电位机制研究

目的 观察不同浓度白介素（IL）-1β对血管平滑肌细胞膜电位的影响,探讨IL-1β通过过氧化氢（H2O2）调节血管平滑肌细胞BKca通道活性的机制。方法 实验分组按照不同浓度分为对照（生理盐水处理）组、IL-1β浓度分别为1 、10 、50 ng/ml组;按照与IL-1β共培养时间分组为30 min 、24 h、48 h组）,通过激光共聚焦显微镜检测细胞膜电位探针DIBAC4（3）标记的大鼠主动脉平滑肌细胞（ASMCs）膜电位,观察catalase(H2O2清除剂)、IBTX（BKca通道开放剂）、NS1619（BKca通道阻滞剂）、4-AP（Kv通道阻断剂）对ASMCs膜电位的影响。结果 ①IL-1β对ASMCs膜电位具有双向调节作用,即短时间处理膜电位超极化;长时间处理膜电位去极化,且均有浓度依赖性特征。②IL-1β通过H2O2调节BKca通道,进而影响膜电位;③IL-1β短时间处理ASMCs通过H2O2调节膜电位;长时间处理至少部分通过H2O2调节膜电位。结论 IL-1β对血管平滑肌细胞膜电位存在时间相关的双相调节作用,这一作用可能通过H2O2（短时间）上调BKca通道活性或（长时间）下调BKca通道活性来实现。     

银杏叶提取物对豚鼠结肠平滑肌细胞的直接作用

目的 :探讨银杏叶提取物 (ExtractofGinkgobiloba,EGb)对豚鼠游离结肠平滑肌细胞的直接作用机制。方法 :用含 1g/LⅠ型胶原酶及 0 .1g/L大豆胰蛋白酶抑制剂的消化液 ,消化获得游离的豚鼠结肠平滑肌细胞 ,将不同浓度EGb加入细胞悬液中 ,用显微镜测微尺随机观察 50个细胞长轴变化情况 ,计算用药前后细胞平均长度。如果 :EGb对结肠平滑肌细胞具有舒张作用 ,在 0 .1 1～ 3 .5g/L浓度范围内 ,EGb对结肠平滑肌细胞的作用呈剂量 -效应关系 ,最大反映浓度为 1 .75g/L ,其舒张效应为 1 2 .79% (P <0 .0 5)。EGb预先孵育 1min ,可抑制乙酰胆碱 (ACh)效应的 44 .1 3 % (P <0 .0 1 )。腺苷酸环化酶激动剂Forskolin可增强EGb的舒张效应 ,与单独应用EGb组相比较 ,舒张百分数增加 8.87% (P <0 .0 5)。结论 :EGb对豚鼠游离结肠平滑肌细胞具有直接作用 ,这种作用可能与cAMP信号传导通路相关     

小檗碱对豚鼠结肠平滑肌细胞膜离子通道的影响

小檗碱 (黄连素 ,Ber)是从毛茛科黄连属植物根状茎中提取的一种异喹啉生物碱 ,在中国及印度被用作止泻药已有三千余年的历史。传统上Ber主要用于治疗感染性腹泻 ,近年来国内外学者研究发现 ,Ber具有抑制小肠黏膜分泌作用[1] 。为了进一步探讨Ber对动力性腹泻的作用 ,采用膜片钳技术研究Ber对豚鼠结肠平滑肌细胞膜钙离子激活钾通道 [IK(Ca) ]和延迟整流钾通道 [IK(V) ]的影响 ,探讨其治疗运动性腹泻的机制。一、材料与方法1.试剂和仪器 :Ⅱ型胶原酶购自美国WorthingtonBio chemical公司 ,Ber、胰蛋白酶抑制剂、牛血清白蛋白等均购自美…     

IL-1β和IL-1RⅠ型在慢性综合应激致抑郁大鼠结肠组织中的表达

目的研究白介素-1β（IL-1β）和白介素-1受体Ⅰ型（IL-1RⅠ型）在慢性综合应激致抑郁大鼠结肠组织中的表达变化。方法 20只雄性Wistar大鼠随机分成两组：对照组（10只）和抑郁组（10只）。抑郁组大鼠连续接受35 d不同的应激,对照组不予任何刺激。整个实验过程中,于实验第0 d和第35 d测量各组大鼠体质量。用旷场试验和液体消耗实验测定大鼠行为。采用RT-PCR方法测定各组大鼠结肠组织IL-1β的表达量,免疫组织化学方法测定各组大鼠结肠组织中IL-1RⅠ型表达量。结果经过35d慢性应激后,抑郁组大鼠质量明显低于对照组（P〈0.01）;旷场实验显示,抑郁组大鼠总行程、运动平均速度及直立次数较正常对照组明显减少（P〈0.05）;液体消耗试验显示,造模前两组大鼠糖水消耗无明显差异（P〉0.05）,35 d应激后抑郁组大鼠糖水消耗显著低于对照组（P〈0.01）,而纯水消耗显著高于对照组（P〈0.01）;免疫组织化学显示,抑郁组大鼠结肠平滑肌中IL-1RⅠ型的含量高于对照组（P〈0.05）;RT-PCR显示,抑郁组大鼠结肠组织中IL-1β的表达量高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论IL-1β和IL-1RⅠ型在慢性综合应激致抑郁大鼠结肠组织中呈高表达,提示IL-1β和IL-1RⅠ型可能在抑郁致结肠动力障碍的发生发展过程中起着重要作用。