IgM类抗HCV独特型抗体（抗HCV—Ab2）的ELISA法检测及意义

用抗人μ链单克隆抗体建立的ＥＬＩＳＡ法检测１５２例肝病患者ＩｇＭ类抗ＨＣＶ独特型抗体，甲肝阳性率０％（０／１５），乙肝８．５％（４／４７），丙肝３２．１％（２６／８１），丙肝合并乙肝者２２．２％（２／９）。丙肝组内频率为急肝０％（０／１７），慢性迁延性肝炎３８．１％（８／２１），慢性活动性肝炎４３．８％（１４／３２），肝炎肝硬化３６．４％（４／１１）。本法重复性好，批内变异系数４．６％，批间变异系数８．５％。用纯化人抗ＨＣＶ抗体进行阻断，阻断率＞８５％，丙肝组与乙肝组有显著性差异（Ｐ＜０．０１），与各种自身免疫性疾病无交叉，有较好的特异性和精密度，且与血清中ＩｇＭ抗ＨＣＶ关系密切，提示丙型肝炎ＩｇＭ类抗ＨＣＶ－Ａｂ２具有模拟抗原的作用，是慢性丙型肝炎的重要检测指标并与丙肝慢性化有关。     

具有抗—HBs结合活性的单克隆抗—抗独特型抗体的制备和鉴定

B_3为我室建立的带有HBsAg表位内影像的单克隆抗独特型抗体(mAb_2)。本文采用脾脏内和尾静脉内注射途径,用B_3免疫BALB/c鼠,获得了具有抗-HBs结合活性的同系单克隆抗-抗独特型抗体(mAb_3)3B_8株。这一结论基于以下两点观察:(1)3B_8能与纯化的HBsAg结合。纯化的HBsAg或抗-HBs均能以剂量依赖形式抑制这一结合;(2)3B_8能以剂量依赖形式抑制抗-HBs与B_3的结合。小鼠在从未接触HBsAg的情况下,单独用B_3免疫,获得了具有抗-HBs结合活性的单克隆抗-抗独特型抗体3B_8,进一步证明我室过去建立的mAb_2B_3株,确实带有HBsAg表位内影像。     

抗HBs的双抗原夹心BA-ELISA检测和应用

<正> 血清抗HB_s效价的测定是考核乙肝疫苗效果和判断人体有无抗乙型肝炎免疫力的重要指示。因此寻找一种较为理想的抗HB_s测定方法正在引人注目。现有PHA和ELISA等方法敏感性较差,阳性检出率低。近年来建立的ABC-ELISA(以下简称ABC法)用以检测人血清中抗HBs,阳性检出率有所提高。但该法使用非特异性第二抗体,使在特导性放价放大的同时,非特异性效应也随之增大,从而影响该法的使用效果。双抗原夹心BA-ELISA是以抗原固相化,以生物素化HBsAg和亲和素-辣根过氧化物酶结合物为指示。从而在克服单纯双抗原夹心法(以下简称夹心法)阳性检出率低的同     

抗人甲状腺球蛋白抗—抗独特型抗体（Ab3）的诱导和鉴定

用抗人甲状腺球蛋白单克隆抗体（抗ＴＧ－Ａｂ１）免疫家兔，在诱导产生抗－ＴＧ独特型抗体（抗ＴＧ－Ａｂ２）同时，诱导产生了抗－抗独特型抗体（抗ＴＧ－Ａｂ３）。其特异性经间接ＥＬＩＳＡ、ＴＧ中和抑制试验和抗ＴＧ－Ａｂ２阻断抑制试验证实。     

Dot—IGSS和Dot—ELISA法检测GBM—Ab和Tub—Ab的比较研究

本实验应用斑点免疫金银染色及斑点酶联免疫吸附试验对５０例ＳＬＥ患者体内的肾小球基底膜抗体及肾小管抗体进行了检测比较。结果表明：Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ法检测ＧＢＭ－Ａｂ和Ｔｕｂ－Ａｂ的阳性率分别是６２％和７６％，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法检测ＧＢＭ－Ａｎ和Ｔｕｂ－Ａｂ的阳性率分别是６８％和７８％。     

小鼠抗—HBs的单克隆抗独特型抗体杂交瘤细胞系的建立及鉴定

用纯化的小鼠单克隆抗-HBs(Ab1)免疫同系BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓细胞融合,获得两株(MA1、MA3)持续分泌抗-HBs的单克隆抗独特型抗体(抗-1d,Ab2)杂交瘤细胞系。对MA3做了较全面的鉴定。MA3的Ig类型为IgM,核型分析结果染色体数为106条。通过ELISA竞争抑制和中和抑制试验表明,MA3所分泌的Ab2既能被不同来源的抗-HBs所中和,又能被HBsAg所竞争,且都呈现剂量依赖关系。将纯化的MA3 IgM免疫同系小鼠,诱导出具有抗-HBs活性的抗-抗-独特型抗体(Ab3)。因此认为MA3所分泌单克隆抗体(McAb),可模似HBsAg,具有类似HBsAg的免疫原性,是一种带有HBsAg表位内影像的抗-HBs的单克隆抗-1d。     

大鼠抗—HBs的单克隆抗独特型抗体杂交瘤细胞系的建立

用纯化的小鼠单克隆抗—HBs和纯化的大鼠多克隆抗—HBs免疫LOU/C大鼠,取免疫大鼠脾细胞与IR983F骨髓瘤细胞融合,获得两株(TD_1、TD_2)持续分泌抗—HBs的单克隆抗独特型抗体(抗—Id,Ab_2)杂交瘤细胞系。对TD_2进行了较全面的鉴定,TD_2的Ig类型为IgG,亚类为IgG_(2?),核型分析结果染色体数为65条。通过ELISA竞争抑制和中和抑制试验表明,TD_2所分泌的Ab_2既能被不同来源的抗—HBs所中和。又能被HBsAg.所竞争,且都呈现剂量依赖关系。将纯化的TD_2IgG免疫同系大鼠,诱导出了具有抗—HBs活性的抗—抗—独特型抗体(Ab_3)。上述结果证实,TD_2所分泌的单克隆抗体(McAb)是带有HBsAg表位内影像,具有HBsAg免疫源性的抗—HBs的单克隆抗—Id。     

乙肝标志物ELISA检测不同方法的比较研究

目的 探讨全自动ELISA系统检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HbcAb(HBV-M)是否在重复性、准确度等方面优于手工法和半自动法,为其更好地在临床实验室开展工作提供进一步的数据和基础.方法 用以上各项指标的弱阳性质控品,分别做手工法、半自动法和全自动法的批内和批间重复性试验.另用三种方法分别检测临床血清标本,每项810人份.定性结果不完全一致的标本,HBsAg用中和法做确证试验,其余四项用化学发光法作为参考方法进行验证.结果 批内与批间重复性比较,全自动法的CV小于手工法和半自动法.三种方法检测临床标本,定性结果两两比较,均显示一致性非常好(k＞0.8,P＜0.05);进行卡方检验,除HBcAb的半自动法阳性率显著高于全自动法(P＜0.0125)外,其余项目三种方法两两比较,均无显著性差异(P ＞0.0125).经过确证/参考试验验证,全自动法、半自动法、及手工法不完全一致的标本,HBsAg17份,符合个数分别为15、9和4;HBsAb 24份,符合个数分别为17、13、7;HBeAg 9份,符合个数分别为7、2、5;HBeAb 34份,符合个数分别为19、16、19;HBcAb 36份,符合个数分别为28、15、19.结论 ①全自动法比半自动法和手工法具有更好的重复性.②三种方法有非常好的一致性,均能较好的诊断乙型肝炎.③全自动法ELISA检测HBV-M比半自动法和手工法准确度更高,可进一步提高这些项目的检验质量.     

乙型肝炎患者血清免疫球蛋白检测的意义

目的 分析乙型肝炎患者血清免疫球蛋白检测的意义。方法 选取本院2016年8月~2018年3月120例确诊为乙型肝炎的患者作为观察组,对其临床资料进行回顾性分析,同时选取120例健康体检者作为对照组,对比两组受检者血清免疫球蛋白检测结果。结果 观察组IgG、IgM、IgA水平分别为（15.63±2.63）g/L、（2.97±0.98）g/L、（2.97±1.62）mg/L均高于对照组的（11.05±1.08）g/L、（1.52±0.27）g/L、（1.81±0.27）mg/L,差异有统计学意义（P＜0.05）;通过对比120例患者治疗前后相关指标可以发现,治疗好转者IgG、IgM、IgA、TBLI水平均低于病情恶化者,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 对于乙型肝炎患儿患者而言,实施血清免疫球蛋白检测的价值明显,既能对患者病情严重程度加以判断,还能为乙型肝炎的诊断和治疗提供可靠依据。     

5031例精神病患者乙型肝炎血清学标志物检测结果分析

对我院精神病患者乙型肝炎病毒（HBV）血清学标志物检测结果进行分析,估计其传染性程度,为精神病患者乙肝预防、诊断和治疗提供实验室依据。用ELISA方法检测我院三年来门诊及住院精神病患者乙肝五项指标,并对所有数据进行统计与分析。结果显示,5031例血清标本中检出HBV血清学标志物3023例,总感染率60.1%。血清学标志物模式可分为感染期模式组和恢复期模式组,两组共20种模式。结论：乙肝五项指标检测结果显示,精神疾病患者较同类人群血清总感染率偏高,HBV血清学标志物模式也较为复杂,除HBsAg阳性、抗-HBs阴性、HBeAg阳性、抗-HBe阴性、抗-HBc阳性组具有传染性外,其他模式也存在一定的传染性。建议对住院精神疾病患者注射乙肝疫苗,以减少乙肝的传染率。     

老年慢性乙型肝炎患者肝组织内Pre－S2蛋白的表达及意义

用免疫组织化学方法和单克隆抗体检测５７例老年慢性乙肝患者肝组织内Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白和ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ，并与６３例非老年患者进行比较。老年组Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白总阳性率为７５．４％（４３／５７），非老年组为５４．０％（３４／６３），两组差异显著。老年组Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白阳性细胞数非常显著地高于非老年组，膜型Ｐｒｅ－Ｓ２阳性率９３．０％（４０／４３），Ｐｒｅ－Ｓ２与ＨＢｓＡｇ符合占９１．２％（５２／５７）。４３例Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白阳性标本中血清ＨＢｅＡｇ阳性５３．５％（２３／４３），ＨＢｅＡｂ阳性４１．９％（１８／４３）。认为老年慢性乙肝肝内Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白表达高于非老年的，Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白免疫反应与ＨＢｓＡｇ相似并可能在ＨＢｓＡｇ免疫特性中起作用。     

乙型肝炎病毒表面抗原定量检测及临床意义分析

乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）定量检测是临床治疗乙型肝炎的一个非常重要的指标,它不仅能区分乙型肝炎病程的各种分期,而且对药物治疗效果及预后有良好的预测作用.本文从乙型肝炎病毒表面抗原的结构、定量检测的方法学以及在临床中的应用等方面做一综述分析.     

前S1抗原与抗-HBc IgM检测结果探讨

检测患者乙型肝炎病毒前S1抗原（Pre-S1Ag）与抗-HBc IgM的水平,探讨两者与HBV急性感染的相关性,为乙型肝炎的早期诊治提供必要的理论依据。对90份临床标本分别采用PCR技术检测HBV-DNA载量阳性标本,采用固相R IA（SPR IA）检测HBeAg、抗-HBc IgM,采用胶体金免疫层析法检测Pre-S1Ag,并对结果进行分析。结果表明90份HBV-DNAPCR阳性标本中Pre-S1Ag阳性71份,HBeAg阳性60份,抗-HBc IgM阳性14份,其检测结果有显著性差异（P〈0.05）。血清Pre-S1Ag、抗-HBc IgM及HBeAg与HBV复制紧密相关。Pre-S1Ag明显优于抗-HBc IgM及HBeAg。因此,Pre-S1Ag的检测对乙型肝炎临床早期诊断、抗病毒治疗方案的选择和预后判断具有重要意义。     

乙型肝炎患者免疫功能的检测及其临床意义

研究乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞和血清免疫球蛋白的变化及临床意义.采用流式细胞仪检测150例乙肝患者和30名健康者(对照组)外周血T淋巴细胞亚群(CD3 CD4 、CD3 CD8 )、NK细胞,免疫散射法检测血清免疫球蛋白(IgG、IgM、IgA)变化.结果表明各临床类型乙肝患者NK细胞降低,与对照组比较有显著性差异(P<0.01);慢性乙型肝炎组、慢性重型乙型肝炎组、肝硬化组外周血CD3 CD4 、CD3 CD8 T细胞均下降,其中慢性重型乙型肝炎组外周血CD3 CD8 与对照组比较有显著性差异(P<0.01),急性乙型肝炎组外周血T细胞亚群变化不明显(P>0.05);各临床类型乙型肝炎患者血清免疫球蛋白IgG、IgA随着病情的进展逐渐升高,与对照组比较有显著性差异(P<0.01).因此认为慢性乙肝患者存在细胞免疫和体液免疫功能紊乱,免疫功能的检测对乙肝的诊断、治疗及预后的判断有着一定临床意义.     

病毒性肝炎患者白细胞介素－6的检测及其临床意义

应用夹心ＥＬＩＳＡ检测了５６例乙型病毒性肝炎患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）白细胞介素－６（ＩＬ－６）的诱生水平。乙型慢性活动性肝炎（ＣＡＨ）、乙型肝炎后肝硬化（ＨＣ）和乙型重型肝炎（ＳＨ）ＰＢＭＣｓ经脂多糖诱导后，ＩＬ－６的诱生水平分别为１２．８４±３．２６ｎｇ／ｍｌ、１１．７９±３．０１ｎｇ／ｍｌ和３８．４２±８．３７ｎｇ／ｍｌ，明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０５～０．０１）。ＣＡＨ和ＳＨ患者的ＩＬ－６水平与肝细胞变性坏死，蛋白质合成障碍和患者的预后也有一定的关系。上述结果提示，机体内ＩＬ－６的调节紊乱可能与病毒性肝炎的发病机理有关。     

不同HBV-DNA载量乙型肝炎肝硬化患者血小板参数及D-二聚体检测的临床意义

目的 探讨不同乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)载量乙型肝炎肝硬化患者血小板参数及D-D变化情况. 方法 以2015年1月至2016年12月间我院收治的乙型肝炎肝硬化患者60例作为研究对象,所有患者均进行HBV-DNA病毒载量检测、血小板参数检测以及D-二聚体(D-D)检测.将乙型肝炎肝硬化患者按照HBV-DNA载量数量级进行分组,对各组间血小板参数及D-D表达水平进行比较.另收取同期于我院进行常规体检的健康人25例作为对照组.结果 乙型肝炎肝硬化患者血小板计数(PLT)、血小板比容(PCT)、明显低于对照组,平均血小板体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)及D-D明显高于对照组;检测下限组、低载量、中载量及高载量组患者之间血小板参数及D-D均存在显著差异(P<0.05),并且下限组、低载量、中载量及高载量组患者的PLT和PCT依次逐渐减小,MPV、PDW及D-D依次逐渐增大. 结论 乙型肝炎肝硬化高HBV-DNA载量患者存在明显凝血纤溶功能失衡,提示应对患者进行早期抗病毒干预,以减少病毒复制,维持凝血纤溶平衡.     

乙型肝炎病毒外膜大蛋白检测的临床意义

目的：通过检测患者血清乙肝病毒外膜大蛋白（HBV-LP）、HBV-DNA、乙肝病毒标志物（HBV-M）,探讨HBV-LP对于反映体内乙肝病毒复制的意义。方法：采用荧光定量PCR方法对180份HBV感染血清的HBV-DNA进行检测,并采用酶联免疫吸附试验（ELISA）对HBV-LP、HBV-M及HBV-DNA进行检测。结果：大蛋白的检出结果与HBV-DNA的检出结果无明显差异。不同HBV-M模式的HBV-DNA与HBV-LP的检出结果均无显著性差异。HBV-DNA拷贝数的对数值与HBV-LP表达具有相关关系（r=0.95,P〈0.05）。结论：HBV-LP能够反映HBV的复制情况。血清中HBV-LP的含量与HBV-DNA的拷贝数具有较好的相关性。