共表达IL-7和CCL19的VSVΔ51溶瘤病毒在肝癌中的抗肿瘤活性研究

目的:构建共表达白细胞介素7(interleukin-7,IL-7)和趋化因子配体19[chemokine(C-C motif) ligand 19,CCL19]的溶瘤病毒VSVΔ51(7×19 VSVΔ51),并探索其在肝癌中的抗肿瘤活性。方法:细胞的活力测定(MTS法)检测溶瘤病毒对肿瘤细胞的细胞毒性;ELISA法检测病毒感染上清及肿瘤组织匀浆中的IL-7和CCL19的含量;皮下移植瘤模型检测溶瘤病毒的肿瘤抑制能力;流式细胞术检测肿瘤浸润T细胞的表型;免疫组化法检测肿瘤浸润T细胞及IFN-γ的含量。结果:VSVΔ51和7×19 VSVΔ51病毒均可以在小鼠肝癌细胞H22和Hepa1-6中复制,在2 PFU时裂解细胞的效率接近100%;VSVΔ51和7×19 VSVΔ51病毒均对小鼠肝癌移植瘤的生长产生抑制作用,且7×19 VSVΔ51病毒较VSVΔ51病毒抑制能力更强[瘤质量(232.7±13.72) mg vs.(603.8±20.3) mg,P<0.000 1];7×19 VSVΔ51病毒组治疗后肿瘤组织中IL-7[(673.5±62.6)pg·ml^-1     

新城疫病毒抗恶性肿瘤研究进展

溶瘤病毒疗法是临床治疗恶性肿瘤的新突破,其通过感染肿瘤细胞,引起病毒性细胞病变反应并诱发宿主抗肿瘤免疫,从而选择性杀死肿瘤细胞。新城疫病毒(NDV)是一种禽副黏病毒,对小鼠和人的抗肿瘤和免疫刺激作用已在临床前及临床研究中被证实,是最具潜力的溶瘤病毒之一。随着反向遗传学技术的不断成熟,使用该技术构建的以NDV为载体的插入外源基因重组NDV在免疫活性肿瘤模型中的研究成为热点。重组NDV不但可以稳定表达外源治疗基因,还可以增强病毒杀伤肿瘤和诱导宿主抗肿瘤免疫应答的能力。但其治疗恶性肿瘤的效果未来需大量临床试验验证。     

动物肠道溶瘤病毒实验治疗荷瘤小鼠的非瘤器官光镜及电镜观察

用动物肠道溶瘤病毒(Ecco-18)实验治疗荷瘤小鼠(P_(615))时,对其非瘤器官进行了光镜和电镜观察。结果发现,荷瘤小鼠各脏器均未查到病毒颗粒或病毒性物质。各脏器的超微结构与对照组相比未见病理改变。     

病毒溶瘤机制研究概况

用病毒作为治疗肿瘤的一种手段可以追溯到上个世纪初期.有报道记载,患有恶性肿瘤的病人当接种狂犬疫苗或患有某种病毒病以后,肿瘤会自发的消退[1,2].20世纪20年代的动物实验证明,病毒能够感染实验小鼠的肿瘤细胞,并使其裂解.50年代又有报道说,新城疫病毒和流感病毒可以有效地裂解小鼠的肿瘤细胞[3].     

携带抗FAP×抗CD3双特异性抗体重组溶瘤痘病毒的构建及其抗癌活性观察

目的: 构建携带抗成纤维细胞活化蛋白(fibroblast activation protein,FAP)和抗小鼠CD3分子的双特异性抗体溶瘤痘病毒（rVVDD BiTE.FAP）,并体外检测该病毒对过表达FAP小鼠肺癌细胞株抑制作用。方法: 利用同源重组技术将PF17R启动子调控的BiTE-FAP基因和PSEL启动子调控的DsRed基因克隆入缺失痘苗生长因子(vaccinia growth factor,VGF)基因的vSC20亲本病毒TK基因处,经软琼脂空斑筛选获得VGF和TK双基因缺失的重组溶瘤痘病毒rVVDD BiTE.FAP。采用空斑计数法比较重组溶瘤病毒和亲本病毒vSC20在小鼠肺癌细胞株中的复制能力;采用MTS法检测重组溶瘤病毒rVVDD BiTE.FAP和rVVDD GFP对小鼠肺癌LLC细胞株的抑制效果,并用MTS、LDH实验进一步检测溶瘤病毒和小鼠脾脏T细胞对靶细胞的协同杀伤效果,采用ELISA法检测细胞因子IL 2和IFN γ的表达。结果： 通过同源重组技术和软琼脂空斑法筛选获得rVVDD-BiTE.FAP重组溶瘤痘病毒。rVVDD-BiTE.FAP与亲本病毒具有同等复制能力;小鼠T细胞能够增强rVVDD-BiTE.FAP抗肿瘤效果。结论： rVVDD-BiTE.FAP具有高效抗肿瘤活性。     

溶瘤病毒的研究进展

近年来,溶瘤病毒用于肿瘤治疗的研究发展非常迅速,有些溶瘤病毒已进入临床试验阶段,并取得了一些令人鼓舞的成果。文章简要综述了溶瘤病毒肿瘤治疗的靶向性、杀伤性、安全性和疗效监测。     

溶瘤病毒的研究进展

近年来,溶瘤病毒用于肿瘤治疗的研究发展非常迅速,有些溶瘤病毒已进入临床试验阶段,并取得了一些令人鼓舞的成果.文章简要综述了溶瘤病毒肿瘤治疗的靶向性、杀伤性、安全性和疗效监测.     

溶瘤病毒治疗胰腺癌的研究进展

溶瘤病毒是一类具有复制能力的肿瘤杀伤型病毒。这类病毒可以依靠病毒本身的特异性在肿瘤细胞中复制而杀死并裂解肿瘤细胞,从中释放出来的病毒又可以进一步感染周围的肿瘤细胞,以此达到理想的治疗效果。腺病毒和人类Ⅰ型疱疹病毒是目前治疗胰腺癌研究最深入的溶瘤病毒。使用溶瘤病毒治疗胰腺癌的优点在于并不是每一个细胞都需要病毒转染,并且正常组织细胞不会受到影响,因而具有非常广阔的应用前景。现对溶瘤病毒治疗胰腺癌的作用机制进行综述。     

放疗联合溶瘤病毒治疗对肿瘤细胞的影响

溶瘤病毒治疗是近年来兴起的一种新的肿瘤基因治疗途径。在溶瘤腺病毒被批准用于临床治疗肿瘤的情况下,溶瘤病毒治疗与放疗相结合将对恶性肿瘤的治疗产生重要影响。文章就放疗联合溶瘤病毒治疗对肿瘤细胞的杀伤作用作一综述。     

CEA重组痘苗病毒对实验性CEA阳性肝癌的预防和治疗作用

目的：探讨CEA重组痘苗病毒(CEA—rV)对小鼠CEA阳性肿瘤的预防和治疗作用。方法：①预防作用观察：将实验小鼠分为4组，第1、2组和第3、4组分别皮下接种野生型痘苗病毒(W—VV)和CEA—rV3次，末次接种后，第1、3组皮下注射同源鼠CEA阴性肝癌细胞(Hepa—CEA)，第2，4组接种Hepa—CEA^ 。肿瘤细胞接种后每周测量肿瘤体积，共6周。②治疗作用观察：第1、2组先皮下注射Hepa—CEA^-，3、4组接种Hepa-CEA^ ，7d后1、3组皮下接种W—VV，2，4组接种CEA—rV。肿瘤细胞接种后每周测肿瘤体积，共6周。结果：①预防作用：接种CEA—rV和Hepa—CEA^ 组(第4组)小鼠在观察期内无肿瘤形成，其他小鼠皮下均有肿瘤形成，并且以相近速度增长。②治疗作用：接种Hepa—CEA^ 和CEA—rV组(第4组)小鼠皮下肿瘤生长缓慢，瘤块较小，其他3组肿瘤生长迅速，瘤块较大。整个实验过程中各组小鼠均未表现出其他任何不良反应。结论：CEA—rV对实验性CEA阳性肿瘤具有良好的预防和治疗作用，而且预防作用更佳。     

溶瘤病毒的治疗进展

目前治疗肿瘤常用方法包括手术治疗、放射治疗和化学治疗,但这些手段对某些癌症却不起作用,因此新的癌症治疗手段有待探索。溶瘤病毒在肿瘤治疗方面已经成为一种新兴制剂。溶瘤病毒疗法联合免疫激活已成为有吸引力的肿瘤治疗手段,同时也具有原位肿瘤疫苗的作用。而且,溶瘤病毒可以构建成具有肿瘤特异性、可强化免疫激活途径或可与其他肿瘤治疗药物联合使用的制剂。     

溶瘤病毒研究现状及进展

对于癌症的治疗,一直是人们努力研究的方向。传统的放化疗存在抗肿瘤能力低,杀伤指数小,副作用大等一系列缺陷,早在一百年前,已有人发现极少数的肿瘤患者在感染病毒后,出现肿瘤暂时消退的现象,引起了人们极大兴趣,并开始尝试用病毒治疗肿瘤,但限于人们认知能力及科技手段的局限,历经数十年,未取得明显进展。近年来,随着肿瘤生物学、遗传学、病毒学等相关学科的飞速发展,才为我们提供了一系列研究溶瘤病毒(oncolytic virus)及病毒和肿瘤相互作用机制的有力工具。这样,肿瘤的病毒治疗便进入了一个实质性发展阶段。     

溶瘤病毒治疗淋巴造血系统肿瘤研究进展

淋巴造血系统肿瘤是一类严重威胁人类健康的克隆性恶性疾病,包括淋巴瘤及白血病,发病率有逐年上升趋势。虽然随着化疗、靶向治疗及造血干细胞移植的进展,部分类型淋巴瘤和白血病的疗效已有很大提高,但是其预后仍然较差,病死率高,寻找新的治疗方法提高疗效成为目前的研究热点。近年来,溶瘤病毒抗肿瘤已应用于临床,成为肿瘤治疗研究的热点,现就溶瘤病毒治疗淋巴造血系统肿瘤研究进展综述如下。1溶瘤病毒作用机制     

加载MAGE-A10/hβD-2双基因溶瘤病毒对膀胱癌细胞增殖及肿瘤生长的影响

目的 探讨加载黑色素瘤相关抗原A10(MAGE-A10)和人β防御素2(hβD-2)基因的溶瘤病毒SG502-MAGE-A10-hβD-2对膀胱癌增殖及肿瘤生长的作用。方法 构建加载MAGE-A10和hβD-2基因的溶瘤病毒SG502-MAGE-A10-hβD-2,半数组织培养感染剂量法测定病毒滴度。CCK-8法测定溶瘤病毒SG502及SG502-MAGE-A10-hβD-2对T24及MB49细胞系增殖的影响,其中SG502组加入SG502病毒,SG502-MAGE-A10-hβD-2组加入SG502-MAGE-A10-hβD-2病毒,对照组加入PBS,分别培养24、48、72、96 h。采用MB49细胞构建C57BL/6小鼠皮下移植瘤模型,待肿瘤生长至100～150 mm³后将成瘤的18只小鼠按照随机数字表法分成对照组、SG502组及SG502-MAGE-A10-hβD-2组,每组各6只。对照组给予50μl生理盐水进行瘤内多点注射,SG502组给予含有2×108个病毒颗粒数的SG502病毒的50μl生理盐水溶液进行瘤内多点注射,SG502-MAGEA10-hβD...     

溶瘤腺病毒靶向治疗肿瘤干细胞的研究进展

肿瘤干细胞(或肿瘤起始细胞)由于具有很强的肿瘤起始能力和浸润转移能力而成为许多肿瘤中难治性的细胞群体。有研究表明肿瘤干细胞对化疗、放疗抵抗,因此与肿瘤的复发有关。针对肿瘤干细胞治疗策略将会影响肿瘤治疗的成败,已有研究表明溶瘤腺病毒可通过感染的方式杀伤肿瘤干细胞,因此可以克服肿瘤干细胞对药物耐受、对放化疗抵抗的机制;另外,通过基因工程的方法在溶瘤腺病毒的构建过程中增加一些外源性抗肿瘤基因,还可促进溶瘤病毒的特异性和抗肿瘤活性。该文总结溶瘤腺病毒靶向针对肿瘤干细胞的研究进展,以期为今后的临床治疗和应用提供理论基础。     

新城疫病毒体内外抗肿瘤作用的研究

目的 :了解新城疫病毒体内外抗肿瘤作用。方法 :用小鼠肉瘤 1 80 ( S1 80 )、小鼠肝癌 ( Hep)为瘤株 ,对新城疫病毒进行体内外抗肿瘤药效试验 ,观察其对荷瘤小鼠免疫器官重量的影响。结果 :新城疫病毒对小鼠移植性 S1 80实体瘤有明显抑制作用 ,可延长 Hep腹水癌小鼠生命 ,对 S1 80和 Hep瘤细胞的体外存活有明显抑制 ,可增加荷瘤小鼠胸腺重量。结论 :新城疫病毒在实验条件下有一定抗肿瘤作用 ,能延缓免疫器官衰退。     

CCL20重组慢病毒对小鼠肿瘤生长的影响

目的 通过CCL20重组慢病毒整合的间充质干细胞,观察肿瘤原位高表达CCL20能否激发机体的抗肿瘤免疫。方法 构建小鼠CCL20重组慢病毒lenti—mCCL20,体外转导BALB／c小鼠间充质干细胞（mMSCs）,杀稻瘟索（blasticidin）筛选出稳定表达mCCL20的混合克隆,命名为lenti—mCCL20-mMSCs,与CT26混合后皮下接种至同系BALB／c小鼠,设lenti-null—mMSCs与CT26混合接种、mMSCs与CT26混合接种、CT26单独接种为对照,观察肿瘤生长情况。结果 构建了重组慢病毒lenti—mCCL20,体外转导BALB／c小鼠MSCs,获得lenti—mCCL20-mMSCs,动物实验发现CCL20瘤内表达增加肿瘤内淋巴细胞的浸润,但促进肿瘤生长。结论 CCL20瘤内表达增加肿瘤内淋巴细胞的浸润,促进肿瘤生长,机制有待进一步研究。     

人用病毒性减毒活疫苗的溶瘤作用

溶瘤病毒治疗是一种利用天然或基因修饰病毒,选择性杀伤恶性肿瘤细胞,或激活人体适应性免疫应答的新型肿瘤免疫疗法.目前,多个具有增强肿瘤靶向性、抗肿瘤疗效和安全性的基因修饰溶瘤病毒已进入临床试验阶段或批准上市.采用活病毒既要具有良好的肿瘤杀伤作用,又要保证对人体的安全性,给溶瘤病毒疗法带来了极大的挑战.人用减毒活疫苗是一类...     

溶瘤病毒联合丝裂霉素对膀胱癌细胞体内外杀伤的实验研究

目的 探讨溶瘤病毒与丝裂霉素联合应用对膀胱癌T-24细胞体内外生长的抑制效应和机制.方法 将溶瘤病毒不同的感染复数或与丝裂霉素（0.1 mg/L）联合应用,通过细胞生长抑制实验及裸鼠皮下移植瘤模型,观察其对膀胱癌T-24细胞的作用及其机制.结果 与单独应用相比,溶瘤病毒与低剂量的MMC联合可明显抑制T-24细胞体外生长,诱导T-24细胞凋亡,裸鼠体内肿瘤发生时间延迟,4周后肿瘤体积与单独应用时相比,差异有显著性（P＜0.05）.与体外处理结果一致.结论 溶瘤病毒与MMC联合应用可显著增强MMC对T-24细胞的杀伤作用,进一步提高膀胱癌的疗效.     

新城疫病毒对裸小鼠人肺腺癌移植瘤的抑瘤作用

目的 观察新城疫病毒（NDV）对裸小鼠人肺腺癌移植瘤的抗肿瘤作用。方法 建立人肺腺癌细胞系在裸小鼠体内移植瘤动物模型,瘤体内1次局部注射NDV病毒作抗肿瘤研究,同时设PBS对照。观察5周,绘制肿瘤生长曲线,处死后量瘤并作光电镜观察其病理学改变。结果 NDV对裸小鼠人肺腺癌移植瘤的生长有明显地抑制作用（抑瘤率为71.62%)。NDV组与对照组瘤重均值之间差异显著（P＜0.01）。对照组14％的肿瘤发生肝及肺的转移。电镜下可见肿瘤细胞内NDV粒子出芽。结论 NDV对裸小鼠有俩腺癌移植瘤有明显地抑瘤作用。其抑瘤作用与NDV选择性地在肿瘤细胞内增殖并导致肿瘤细胞凋亡及溶解肿瘤细胞有关。