喉癌相关抗原免疫电镜的定位研究

目的 研究喉癌混合单克隆抗体相关抗原的定位，为喉癌的早期诊断及导向药物治疗奠定理论基础。方法：采用三株喉癌单克隆抗体ＬＣ９、ＬＣ１１、ＬＣ１２混合对９０例病理证实的喉癌组织切片（病理Ⅰ级４９例，Ⅱ级４１）、１４例喉癌前病变及１０例正常喉粘膜进行免疫组化染色（ＡＢＣ法）光镜观察，同时采用ＬＳＡＢ法对９例新鲜喉癌组织细胞行免疫过氧化物酶标记电镜包埋前染色，对混合单克隆抗体相应抗原进行超微结构的定位观察     

大环内酯类抗生素对鼻窦粘膜细胞表面抗原的影响

采用大环内酯类抗生素疗法（红霉素类），治疗慢性鼻窦炎改善患者３０例（有效组），未行该疗法者１５例（对照组）。手术摘除前筛窦粘膜或鼻息肉，标本用福尔马林固定后，制成石蜡切片，行ＨＬＡ－ＤＲ、ＣＤ６８单克隆抗体免疫组化染色。立即冷冻标本制成切片，采用ＬＳＡＢ法，分别行ＣＤ４、ＣＤ８单克隆免疫组化染色。于２００倍镜下，观察５个视野窦粘膜阳性细胞数。结果发现，两组ＣＤ６８、ＨＬＡ－ＤＲ阳性细胞数无明显差异，ＣＤ４阳性细胞数有效组较对照组显著减少（Ｐ＜０．０１），ＣＤ８阳性细胞数未见明显差异。ＣＤ４／ＣＤ…     

鼻咽癌中D型周期素的差异性表达及cyclinD1基因扩增的研究

一、材料与方法1.由湖南省肿瘤医院病理科提供2 0例石蜡切片标本。其中 18例鼻咽低分化鳞癌 ,1例鼻咽中分化乳头状鳞癌 ,1例鼻咽慢性炎症。2 .质粒抽提、鉴定、重组插入片段的回收、探针的标记 :ＣｙｃｌｉｎＤ1质粒由美国南加州大学病理系周见远博士提供 ,碱裂解法大规模抽提质粒 ,以纸浆法回收的重组插入片段为模板 ,根据ＤｉｇＤＮＡＬａｂｅｌｉｎｇａｎｄＤｅｔｅｃｔｉｏｎＫｉｔ提供的说明书进行Ｄｉｇ 11 ｄＵＴＰ标记及探针效率检测。3.ＳＰ法 :根据链霉菌抗生物素蛋白 过氧化酶免疫组化染色试剂盒提供的说明书进行免疫组化检测 ,…     

喉癌及喉咽癌颈部淋巴结微转移的检测及临床意义初探

目的 比较半连续切片H&E染色及免疫组化染色两种方法,用于检测喉及喉咽部鳞形细胞癌患者颈部常规病理学阴性淋巴结中微转移的检出率,并初步探讨其与临床病理因素及早期复发的关系。方法 对13例喉及喉咽部鳞型细胞癌患者经常规病理检查为阴性的15侧326个淋巴结, 采用50μm半连续切片苏木精－伊红染色法及细胞角蛋白CK(AE1/ AE3)免疫组化EnVison两步法行微转移灶检测, χ2 检验用于检验两种不同方法的阳性检出率。统计所有病例的各临床病理因素（年龄、性别、临床分型、pT 分期、肿瘤分级、原发灶浸润深度）,随访11～56个月（中位时间31个月）,采用χ2 检验分析各临床病理因素与微转移之间的相关性以及微转移与早期复发的相关性。结果 ①全部75个蜡块经半连续切片后免疫组化和苏木精－伊红染色切片各750张,免疫组化组中经CK(AE1/ AE3) 单克隆抗体标记后,共40张切片（5.33%）分别对应5 例(38.46 %) 患者中的7 个淋巴结(2.14 %)呈阳性反应。而相应的苏木精-伊红染色切片,若不与免疫组化对照,其阳性切片数为24张（3.20%）,分别对应2例患者的3个淋巴结。两组间阳性切片数的检出率差异有统计学意义（Ρ<0.05）;②除年龄外的各临床病理因素与微转移之间差异无统计学意义( Ρ>0.05) ;有微转移和无微转移患者的早期复发率差异无统计学意义(Ρ>0.05) 。结论 对于喉及喉咽鳞癌的颈部淋巴结微转移,单纯的苏木精－伊红染色切片,即使是连续或半连续切片,有经验的病理科医师仍然会有一定的漏检率,而免疫组化方法可提高其检出率。微转移与临床病理因素及预后间的可能相关性尚有待大样本和长期随访资料的进一步探讨。     

上呼吸道良性病变的P_(53)蛋白表达

P53基因是一个肿瘤抑制基因。在多种肿瘤的发生过程中都有P53基因的丢失或突变，但在正常上皮和良性病变中有关P53基因的研究极少。该研究以109例喉良性病变为研究对象。其中，喉乳头状瘤52例（16例青少年型，36例成年型），声带小结和喉息肉各10例，内翻性乳头状瘤17例和鼻息肉20例。取患者的石蜡包埋的组织块为对象，以单克隆抗体DO-1进行免疫组化染色。结果显示P53蛋白在细胞核中的阳性率分别是：青少年喉乳头状瘤88％（14／16）；成年人喉乳头状瘤92％（33／36）；声带小结40／（4／10）；喉息肉80％（8／10）；内翻性乳头状瘤41％（…     

喉癌相关抗原免疫电镜的定位研究

目的研究喉癌混合单克隆抗体相关抗原的定位,为喉癌的早期诊断及导向药物治疗奠定理论基础。方法采用三株喉癌单克隆抗体ＬＣ９、ＬＣ１１、ＬＣ１２混合对９０例病理证实的喉癌组织切片（病理Ⅰ级４９例,Ⅱ级４１例）、１４例喉癌前病变及１０例正常喉粘膜进行免疫组化染色（ＡＢＣ法）光镜观察,同时采用ＬＳＡＢ法对９例新鲜喉癌组织细胞行免疫过氧化物酶标记电镜包埋前染色,对混合单克隆抗体相应抗原进行超微结构的定位观察。结果喉癌组织中喉癌相关抗原检出率（９７．７％）与正常喉粘膜相比明显增高（Ｐ＜０．０１）;混合单克隆抗体相应抗原主要定位于细胞膜性结构,即细胞膜、核膜、线粒体膜和内质网膜。结论混合喉癌单克隆抗体具有良好的特异性,带有药物的单克隆抗体可通过膜性结构来攻击癌细胞,达到治疗作用。混合单克隆抗体检测的相关抗原均分布于细胞膜和／或细胞浆中,细胞核无着色。     

PCNA在喉粘膜不典型增生及喉癌组织中表达的意义(摘要)

ＰＣＮＡ在喉粘膜不典型增生及喉癌组织中表达的意义（摘要）张欣欣，郑军，杨占泉采用免疫组化ＬＳＡＢ法，用抗增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的单克隆抗体（ＰＣ１０）对９例正常喉粘膜，２９例喉粘膜不典型增生及３６例喉鳞状细胞癌进行标记及分析。结果：①ＰＣＮＡ分布...     

猫喉连续切片进行三维重建

利用猫喉连续切片进行喉计算机三维重建，以观察喉返神经（RLN）的真实解剖走行，重点是它与周围喉支架组织的关系。使用猫喉标本2个，连续切片，片厚为10Pm，一喉每20张取～张行HE染色，另一喉每15张取一张行SevierMunger银染色。切片经放大后利用MTJ－68摄像机取像后输入KONTRON／IBMAT计算机系统，经IBAS—20软件将图像数字化，序列数字化信息输入ISGAllegro三维重建系统进行重建。重建后的图像能准确地观察喉的结构：甲状动脉，构状软骨一甲状板间隙，RLN与环甲关节的关系，喉外的RLN分支点及其喉内的神经分支，RLN与喉…     

CD105与喉鳞状细胞癌血管生成及生物学行为的关系

目的：研究CD105在喉鳞状细胞癌血管中的表达,及其喉鳞状细胞癌生物学行为的意义。方法：采用双重免疫组织化学染色技术分别检测CD34／Ki67、CD105／Ki67在30例喉鳞状细胞癌和10例正常喉黏膜石蜡标本中的表达,分别以抗CD34和抗CD105单克隆抗体标记量化新生微血管（MVD）,以抗Ki67单克隆抗体标记增殖的内皮细胞,并结合临床资料进行分析。结果：正常组和喉鳞状细胞癌组比较,MVDCD105差异有统计学意义（P〈0．05）;喉鳞状细胞癌组CD105标记的微血管增殖指数（PI）高于CD34标记组（P〈0．01）;MVDCD34与MVDCD105在喉鳞状细胞癌高分化组和低分化组的差异均有统计学意义（P〈0．05）;MVDCD34与MVDCD105均与淋巴结转移无关（P〉0．05）;MVDCD34与肿瘤的浸润范围无关（P〉0．05）,与喉鳞状细胞癌的临床分期也无关（P〉0．05）;MVDCD105则随肿瘤浸润范围的增大而增加（P〈0．01）,且随临床分期升高而增加（P〈0．01）。结论：CD105是新生血管的特异性标志物,新生血管密度与肿瘤的大小、临床分期相关,但与喉鳞状细胞癌的淋巴结转移无关。     

转移相关基因CD44V6在喉癌中表达及意义

为探讨转移相关基因ＣＤ４４Ｖ６与喉鳞癌颈淋巴结转移和其他生物学行为的关系，采用免疫组化ＳＰ法对３９例喉鳞状细胞癌进行标记分析，结果发现：ＣＤ４４Ｖ６阳性率，淋巴结转移组（８８．２４％）明显高于无淋巴结转移组（５９．０９％），在喉鳞癌Ⅲ级高于鳞癌Ⅰ－Ⅲ级（５０％），对ＣＤ４４Ｖ６阳性的组织切片研究同仁三某些切片中不是全部癌细胞均为ＣＤ４４Ｖ６阳性，有部分癌细胞为阴生反应。上述结果表明，在喉鳞癌组织内     

喉癌及喉粘膜不典型增生组织中表皮生长因子受体的表达

本研究采用免疫组化ＬＳＡＢ法及图象分析技术，用抗ＥＧＦ－Ｒ的单克隆抗体对８例正常喉粘膜、２５例喉粘膜不典型增生及５３例喉鳞癌组织进行标记及分析。     

声带癌前病变的免疫组织化学研究-PC-NA和MIB-1抗体测定

最近报道认为，采用单克隆抗体法，测定肿瘤细胞的增殖能力，有助于肿瘤恶性度和预后的判定。活检声带病变和癌标本６１例，男５８例，女３例。其中声带粘膜增生９例；异形性轻度改变１２例，中度改变１０例，重度改变８例；声带息肉８例；鳞癌（ＳＣＣ）１４例。标本用１０％福尔马林固定后，石蜡包埋，制成４Ｐｍ切片，进一步处理后，分别行ＰＣＮＡ和ＭＩＢ－１抗体免疫染色。于显微镜下，随意观察扁平上皮基底层至表层１０００细胞，胞核呈现褐色染色者为阳性。结果发现，ＰＣＮＡ指数和ＭＩＢ－１平均阳性率（％）：声带息肉分别为１．…     

喉癌及喉粘膜不典型增生组织中表皮生长因子受体的表达

本研究采用免疫组化ＬＳＡＢ法及图象分析技术，用抗ＥＧＦＥ的单克隆抗体对８例正常喉粘膜、２５例喉粘膜不典型增生及５３例喉鳞癌组织进行标记及分析。结果发现，随着喉粘膜病变的加重，ＥＧＦ－Ｒ的染色强度ＰＵ值有逐渐增高的趋势，与正常喉粘膜（ＰＵ＝１３．３６±４．２６）相比，喉癌（原位癌ＰＵ＝２１．６２±１０．４２，进展期癌ＰＵ＝２６．６３±６．９２）及重度不典型增生（ＰＵ＝２３．６４±７．２８）组织中ＥＧＦ－Ｒ过度表达。研究结果提示，ＥＧＦ－Ｒ与喉癌的发生有一定的关系，重度不典型增生有高度的恶变潜能     

增殖细胞核抗原在喉粘膜不典型增生及喉癌组织中表？…

目的：研究增殖细胞核抗原在喉粘膜不典型增生及喉癌组织中的表达。方法：采用免疫组化ＬＳＡＢ法，用抗增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的单克隆抗体对９例正常喉粘膜、２９例喉粘膜不典型增生及３６例喉鳞状细胞癌进行标记及分析。结果：随着喉粘膜病变的加重，ＰＣＮＡ的标记指数（ＬＩ）有逐渐增高的趋势。而ＬＩ与喉鳞状细胞癌的病理分级、Ｔ分期、淋巴结转移及肿瘤生长部位均无关。结论：ＰＣＮＡ对喉鳞状细胞癌的早期诊断有重要意     

增殖细胞核抗原在喉粘膜不典型增生及喉癌组织中表达的意义

目的：研究增殖细胞核抗原在喉粘膜不典型增生及喉癌组织中的表达。方法：采用免疫组化ＬＳＡＢ法，用抗增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的单克隆抗体对９例正常喉粘膜、２９例喉粘膜不典型增生及３６例喉鳞状细胞癌进行标记及分析。结果：随着喉粘膜病变的加重，ＰＣＮＡ的标记指数（ＬＩ）有逐渐增高的趋势。而ＬＩ与喉鳞状细胞癌的病理分级、Ｔ分期、淋巴结转移及肿瘤生长部位均无关。结论：ＰＣＮＡ对喉鳞状细胞癌的早期诊断有重要意义，在指导临床治疗上也有重要的参考价值。     

CD44蛋白在人喉癌中的表达及其临床意义

目的：ＣＤ４４基因是一各肿瘤转移相关基因。研究检测ＣＤ４４ｖ６蛋白拓喉癌中的表达及其临床意义。方法：用ＣＤ４４ｖ６单克隆抗体,通过免疫组化Ｓ－Ｐ法,对６９例喉鳞状细胞癌蜡块标本和１０例正常喉粘膜标本进行研究,并结合资料进行预后分析。结果：６９例喉鳞状细胞癌、１０例正常喉粘腊中ＣＤ４４ｖ６蛋白阳性表达率分别为５２．２％（３６／３９）和０．０％（０／１０）。ＣＤ４４ｖ６蛋白阳性表达与肿瘤发生部位、病理     

中耳淋巴上皮样癌中存在EB病毒

中耳或外耳道淋巴上皮瘤或与ＥＢ病毒（ＥＢＶ）相关的癌ＥＢ病毒从未报道过，故而作者对此进行研究。研究材料为经病理组织切片证实的中耳非角化性鳞癌５例及未分化癌２例。所有病例均排除了鼻咽癌，临床表现中耳炎及耳息肉５例，听力损害及面神经麻痹１例，耳后肿块累及乳突１例。用毛地黄毒苷标记的探针完成ＥＢＶ编码ＲＮＡＳ（ＥＢＥＲ）原位杂交，用３５Ｓ－标记的抗敏感探针完成对照杂交，用标准抗生蛋白链菌素──生物素过氧化酶法完成ＥＢＶ潜膜蛋白－１（ＬＭＰ－１）和ＥＢＮＡ２的免疫组化染色。结果。５例非角化性鳞癌及２例未…     

鸡内耳感觉上皮细胞的自然增殖状态

为研究出生后鸟纲动物内耳感觉上皮细胞是否存在持续的细胞增殖，采用８天龄正常鸡１０只（２只做阴性对照），按１００ｍｇ／ｋｇ剂量腹腔注射ＤＮＡ合成的前体物质５－溴脱氧尿核苷（５－ｂｒｏｍｏｄ－ｅｘｙｕｒｉｄｉｎｅ，ＢｒｄＵ），６小时后处死动物，取颞骨制备石蜡切片，结合免疫细胞化学技术，对鸡基底乳头和前庭器官中的细胞增殖活动进行观察。结果发现，鸡基底乳头切片中未见阳性标记细胞，而椭圆囊斑、球囊斑及壶腹嵴感觉上皮中存在着数量较少的标记支持细胞和标记毛细胞。结论：出生后的鸟纲动物前庭器官存在着较低水平的持续增殖。提示：出生后鸟纲动物前庭器官可能保持着潜在的对抗病理损伤的修复能力。     

生物素探针原位核酸杂交检测喉乳头状瘤人乳…

采用定位准确、敏感性高、特异性强的原位核酸杂交技术，生物素标记ＨＰＶ６、１１、１６、３０型作探针，在喉乳头状瘤石蜡包埋及冰冻标本检测人乳头瘤病毒同源列。４５例石蜡标本１７例ＨＰＶ６阳性１９例ＨＰＶ１１阳性，ＨＰＶ１６、３０无一例阳性。实验结果为喉乳头状瘤的病毒病因不说提供了直接证据。对喉乳头状瘤发病与ＨＰＶ型别关系，ＨＰＶ型别在幼年型及成年型喉乳头状瘤检出率不同进行了比较和讨论。     

慢性鼻窦炎患者上颌窦粘膜白细胞介素-1βmRNA及细胞粘附分子的定位研究

白细胞介素-1β（IL－1β）是慢性鼻窦炎窦口潴留液中的主要细胞因子，其炎症以鼻及鼻窦粘膜的多形核中性粒细胞（PMNS）浸润为特征。报告对慢性鼻窦炎患者上颌窦粘膜中IL－1βmRNA的定位研究以及对培养的人粘膜微血管内皮细胞和慢性鼻窦炎患者上颌窦粘膜的细胞粘附分子、细胞间粘附分子-1（ICAM－1）及内皮-淋巴粘附分子-1（ELAM-1）表达和分布的研究。标本来源于5例诊断明确的慢性上颌窦炎的成年患者，用地高辛标记的寡核着酸探针作原位杂交法检测IL－-βmRNA，以相应细胞粘附分子的单克隆抗体按免疫组化方法检测ICAM-1及和EL…