四氢生物喋呤负荷试验在高苯丙氨酸血症鉴别诊断中的临床应用

目的探讨四氢生物喋呤（BH4）负荷试验在高苯丙氨酸血症（HPA）鉴别诊断中的应用价值。方法自2005年5月到2007年4月，51例HPA患儿采用口服BH4（20mg／kg）负荷试验。对其中血苯丙氨酸（Phe）浓度小于600μmol／L患儿采用口服Phe—BH4联合负荷试验，结合尿喋呤分析、血红细胞二氢喋呤还原酶（DHPR）活性测定。结果（1）在BH4负荷试验中，不同类型HPA患儿的血Phe浓度表现出各不相同的改变。51例HPA患儿中，共鉴别出5例BH4缺乏症，10例BH4反应性苯丙氨酸羟化酶（PAH）缺乏症，36例BH4无反应性苯丙氨酸羟化酶（PAH）缺乏症。（2）在17例中度苯丙酮尿症（PKU）患儿中，9例（52．9％）为BH4反应性PAH缺乏症。结论BH4负荷试验在HPA早期鉴别诊断中十分重要，部分中度PKU对BH4有反应，可使用BH4替代治疗。     

四氢生物喋呤缺乏症的新生儿筛查和诊断治疗

目的探讨BH4缺乏症的发病情况,治疗效果,总结经验,以便更好的指导今后筛查工作。方法应用化学荧光法进行血苯丙氨酸检测,阳性者采集血斑及尿纸片标本送台湾进行苯丙氨酸羟化酶基因分析及尿喋呤谱分析。结果自1997~2015年共筛查120万例新生儿,确诊2例,检出率为1∶60万。结论新生儿BH4缺乏症的筛查及早期诊断治疗,是减少出生缺陷,提高人口素质的重要措施之一。     

四氢生物蝶呤对高胆固醇血症所致血管内皮细胞功能异常的转复机制探讨

研究高胆固醇血症兔的血管内皮功能的异常状况及四氢生物喋呤（BH4）的转复机制。方法：18只新西兰兔，随机分为正常饮食组、高胆固醇饮食组、BH4加高胆固醇饮食组。喂养5周后，测定血中总胆固醇、一氧化氮（NO）及丙二醛水平，并取主动脉，进行离体血管舒张功能实验，测定不同条件下，血管条对乙酰胆碱的舒张反应。结果：与正常饮食组比较各胆固醇喂养组血清总胆固醇明显增高，有极显著性差异（P〈0．01）。高胆固醇饮食组与正常饮食组比较血中NO水平明显减低（P〈0．01），丙二醛浓度明显升高（P〈0．01）；BH4加高胆固醇饮食组与高胆固醇饮食组比较NO水平明显升高（P〈0．05），而丙二醛的水平较高胆固醇饮食组明显降低。不同组别的动脉对乙酰胆碱最大舒张功能存在明显差别，高胆固醇饮食组的舒张功能较其他组明显下降；BH4加高胆固醇饮食组的舒张功能，较高胆固醇组明显恢复。结论：高胆固醇血症导致血管内皮细胞舒张功能障碍，BH4对其具有转复作用，其转复机制可能与BH4升高血液中的NO和降低过氧化物的水平有关。     

四氢生物蝶呤反应性的苯丙酮尿症研究进展

本文综述对四氢生物蝶呤(BH4)反应性的苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因缺陷的苯丙酮尿症(PKU)的研究进展。分析BH4反应性的PAH基因突变,探讨这一现象潜在的发生机制,介绍一种新的临床分类法,并对PKU的BH4替代治疗前景进行展望。     

卡介苗接种对高盐及肾动脉狭窄术诱导的高血压大鼠血压的影响

目的:观察卡介苗接种对高盐负荷及肾动脉狭窄所致高血压的影响,为寻找防治人类高血压的新方法提供实验依据。方法:以高盐食物喂饲及肾动脉狭窄术分别制作高盐性高血压(SH)及肾性高血压(RH)模型。高盐喂饲或肾动脉狭窄术后4周,选择高血压大鼠及正常对照大鼠进行实验。所有大鼠腹部皮下接种卡介苗一次,接种前及接种后每周测定血压变化情况,同时每时段收集24 h尿样并以Greiss反应法进行一氧化氮终产物NO₂^-及NO₃^-(UNOx)的测定。3周后大鼠分别取主动脉组织并用Western blot法检测iNOS蛋白水平。结果:卡介苗接种对正常大鼠血压无明显影响。但接种1周时,能使高血压大鼠的血压明显下降。其中尤以卡介苗接种+L-精氨酸作用明显。NO测定表明,卡介苗接种后体内NO生成明显增加。Western blot结果证明卡介苗接种后,高血压大鼠主动脉血管组织中iNOS蛋白明显高于正常大鼠。结论:卡介苗接种能通过激活iNOS/NO途径降低某些类型高血压大鼠的血压。     

5／6肾切除大鼠残肾血小板源生长因子—α表达及其意义的探讨

目的：研究慢性肾衰残余肾组织血小板源生长因子－α（ＰＤＧＦ－α）的表达状况及其机理和意义。方法：采用斑点杂交和形态计量等方法，对假手术对照大鼠、５／６肾切除大鼠、以及５／６肾切除术后给予维生素Ｅ治疗的大鼠肾组织ＰＤＧＦ－αｍＲＮＡ含量及其相关指标进行定量分析。结果：①５／６肾切除大鼠残存肾组织ＰＤＧＦ－αｍＲＮＡ含量显著增高；②５／６肾切除大鼠周围血单个核细胞内游离钙浓度显著增高，细胞内游离钙浓度与ＰＤＧＦ－αｍＲＮＡ含量成正相关；③５／６肾切除大鼠残肾组织有显著的固有细胞增殖、肾小球硬化和肾间质纤维化，肾组织羟脯氨酸含量显著增高，ＰＤＧＦ－αｍＲＮＡ含量与硬化肾小球比率、病变肾小管和肾间质体密度、肾组织羟脯氨酸含量成正相关；④给予维生素Ｅ治疗的大鼠，随着细胞内游离钙浓度和ＰＤＧＦ－αｍＲＮＡ含量降低，残肾硬化肾小球比率、病变肾小管和肾间质体密度、肾组织羟脯氨酸含量显著下降。结论：ＰＤＧＦ－α高表达可能是残存肾组织进行性纤维化的重要原因之一；维生素Ｅ治疗能降低ＰＤＧＦ－α表达，抑制残肾纤维化，减缓残肾毁损速度     

氢氯噻嗪对大鼠的利尿作用的研究

目的：探讨氢氯噻嗪对大鼠的利尿作用及其作用机制。方法：选取20只自发性血压高大鼠（SHR）,其中10只采用灌胃针给予氢氯噻嗪灌胃,10mg/kg,设为A组;另外10只给予相同剂量的生理盐水灌胃,设为B组;持续4周。比较两组大鼠灌胃4周内的血压变化,24h尿量变化以及血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1）及细胞色素P450（CYP）表氧化酶2C11基因表达的情况。结果：氢氯噻嗪可显著降低SHR大鼠的血压,A组4周内的血压变化显著大于B组（P〈0.05）。A组大鼠2周、4周的24h尿量显著高于B组（P〈0.05）。且A组大鼠心脏、肾脏、肝脏中的AT1mRNA的下调水平,CYP表氧化酶2C11mRNA的上调水平的幅度显著大于B组（P〈0.05）。结论：氢氯噻嗪可能通过下调AT1和上调CYP表氧化酶2C11水平可能与其引起SHR强利尿效果有关,以降低血压和保护器官。     

多重扩增子高通量测序对高苯丙氨酸血症基因变异实验室检测效率的研究

目的 对高苯丙氨酸血症(hyperphenylalaninemia,HPA)干血片DNA样本进行多重扩增子高通量测序检测,研究该方法对HPA潜在病因的实验室诊断价值.方法 选取既往70例生化筛查为HPA的患儿干血片,提取DNA后使用覆盖126种遗传病130个基因的扩增子建库试剂盒建库,进行高通量测序和数据分析,获得样本基因变异信息.经一代测序验证位点准确性后,分析对样本具有诊断价值的变异位点信息进行疑似病因判定,评价高通量测序的检测和诊断效能.结果 高通量测序结果和既往部分样品的一代测序结果完全吻合.70例样本中,5例为PAH和PTPS纯合突变,53例检测出PAH或PTPS单个基因2～3个杂合突变位点,还有2例检出HPA信号通路相关的SPR基因或GCH 1基因各1个突变.检测结果中c.158G>A、c.728G>A、c.1068C>A、c.1238G>C、c.611A>G位点为PAH基因频率最高的5个突变.结论 通过高通量测序技术,可准确检测基因突变,提供病因解释,为后续召回和临床诊断提供重要参考.     

芝麻素对肾性高血压伴高血脂大鼠肾脏的保护作用研究

目的： 观察芝麻素对肾性高血压伴高血脂大鼠肾脏的保护作用。方法：制备两肾一夹型肾性高血压伴高血脂大鼠模型(RHHR)，灌胃给予不同剂量的芝麻素7周后，测定各组血清肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）、24 h 尿蛋白含量（UPE）和肾组织匀浆中抗氧化酶的活性，包括总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、总NOS（TNOS）、诱导型NOS（iNOS）、结构型NOS（cNOS）和抑制羟自由基能力及肾组织匀浆中丙二醛（MDA）、过氧化氢（H2O2）及一氧化氮（NO）含量。结果：高、中（100 mg/kg、33 mg/kg）剂量组芝麻素可抑制RHHR大鼠血清Scr、BUN和尿UPE水平升高（P<0.01）。与模型组比较可提高肾组织匀浆NO、cNOS、SOD、T-AOC和抑制羟自由基能力（P<0.01或P<0.05），降低MDA、iNOS 、H2O2（P<0.01或P<0.05）含量。结论：芝麻素对肾性高血压伴高血脂大鼠肾脏具有保护作用，其机制与抗氧化应激、清除自由基和抑制iNOS活性等有关。     

重组人诱导型一氧化氮合酶在V79细胞中的表达及四氢叶酸对其活性的影响

目的:探讨重组人诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)基因在V₇₉成纤维细胞中转染的可行性及四氢叶酸(H₄B)对转染后产生NO的影响。方法:将人iNOS基因通过真核表达载体转入V₇₉细胞中,经G₄₁₈筛选,RT-PCR、免疫荧光法进行鉴定。采用Griess法测定加入H₄B前后NO^-₂ 的生成量。结果:iNOS基因转染组V₇₉细胞中有iNOSmR NA的表达,细胞胞质中可见分泌的iNOS蛋白。未加H₄B时,iNOS转染组NO^-₂ 含量明显高于正常细胞组和空质粒转染组 (P <0.01,n=6),正常细胞组和空质粒转染组之间NO^-₂ 含量无明显差异 (P >0.05,n=6);加入H₄B后,iNOS转染组中NO^-₂ 含量较未加组明显增加,两者相比具有显著差异 (P <0.01,n=6),而正常细胞组和空质粒转染组与未加H₄B组相比无明显变化 (P >0.05,n=6)。结论:通过外界加入H₄B能显著增加成纤维细胞转染产生的iNOS的活性,成纤维细胞可以作为iNOS基因转染的靶细胞.     

Changes in blood pressure and heart rate following bilateral olfactory bulbectomy in rats

Changes in blood pressure and heart rate following bilateral olfactory bulb ablation were investigated in unanesthetized and unrestrained rats with chronic arterial cannula implants. After bilateral olfactory bulbectomy, the rat exhibited a marked increase of emotional responses to given stimuli and a high incidence of muricide. Blood pressure and heart rate at 5 and 10 days after olfactory bulbectomy were significantly lower than in intact rats (rats before bulbectomy) and/or sham operated rats. Marked decreases in blood pressure and heart rate were seen especially in the period when the animals showed exploratory behavior after being transferred to the experimental cage from the home cage. These results suggest that olfactory bulbectomy has a great influence not only on emotionality but also on the central regulatory system of blood pressure in the rat.     

Ramp rate of blood pressure changes does not affect aortic afferent sensitivity in anesthetized rats

To investigate whether the rate of change in blood pressure affects the sensitivity of the aortic baroreceptor afferent response, the change in aortic nerve activity (ANA) to two different rates of ramp increase in mean blood pressure (MBP), elicited by phenylephrine administration, was determined in the rat under urethane (1.5 g kg⁻¹) anesthesia. The sensitivity of the increase in ANA following a rapid (average ramp rate, 9.14 ± 0.60 mmHg s⁻¹, n = 11) or gradual (1.78 ± 0.24 mmHg s⁻¹, n = 11) increase in MBP was 2.03 ± 0.14% and 1.81 ± 0.20% of baseline mmHg⁻¹, respectively. These values were not significantly different from each other (P = 0.16). Furthermore, we found no correlation between the rate of ramp increase in MBP and the sensitivity of the increase in ANA (r = 0.24, P = 0.29, n = 22). These results suggest that, at least within the normal physiological range of MBP, the rate of the ramp change in blood pressure does not affect aortic baroreceptor afferent sensitivity in the anesthetized rat.     

血压对大鼠脑缺血/再灌注损伤的影响

目的： 研究血压变化对大鼠脑缺血/再灌注模型的影响。方法: 44只SD大鼠随机分为低血压组、正常血压组、高血压组及尿激酶/高血压组,制作缺血2 h再灌注24 h脑缺血/再灌注损伤模型,再灌注起始分别应用降压药物或升压药物改变平均动脉压水平（约20 mmHg）持续1 h,观察其神经功能改善、梗死体积、出血性转化的发生。结果: 再灌注24 h,低血压组神经功能恶化,其它各组均有不同程度的恢复;随着血压的升高,大鼠脑梗死体积有逐渐减小的趋势;尿激酶/高血压组出血性转化发生率最高,其次为低血压组及高血压组,而正常血压组最低;尿激酶/高血压组梗死灶周围皮层区MMP-9阳性细胞计数与其它各组比较均有显著差异（P<0.05）。结论: 再灌注期间升高血压有利于脑缺血大鼠神经功能预后的改善。大鼠脑缺血再灌注模型出血性转化发生率随着血压的升高或降低均有增加的趋势,其发生可能与MMP-9的过量表达有关。     

Measurement of blood pressure in unrestrained rats

A method that allows continuous recroding of blood pressure in rats and other small animals is described. Surgical, recording, calibration, and catheter construction techniques are explained. The techniques allow blood pressure recording from free-roving rats for relatively long periods of time but do not require complicated maintenance procedures to insure catheter patency.     

经腹腔转染iNOS基因对大鼠的降血压作用

目的:研究经腹腔转染人iNOScDNA进入正常大鼠体内对大鼠血压的影响及转染的iNOS基因在其体内表达的情况。方法:经腹腔基因转染。结果:①经腹腔转染iNOS基因大鼠的血压从转染后第2d起明显较注射前降低,至第6d降低仍有显著差异(P＜0.01);②转染iNOS基因大鼠在转染后第3d、第6d腹腔巨噬细胞的NO水平明显高于对照组(P＜0.01)。结论:经腹腔转染iNOS能明显降低大鼠血压。     

Effect of exercise on blood pressure in rats with chronic NOS inhibition

Regular training lowers blood pressure in hypertensive humans and other animals. We investigated the response to 4 weeks of treadmill exercise training in hypertensive male Wistar rats receiving the nitric oxide synthase inhibitor N ^ω-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME). The rats were on either a short- (4 weeks) or long-term (10 weeks) L-NAME treatment protocol and were subjected to running exercise that started concomitantly in the short-term group and in the 6th week in the long-term group. Four weeks of exercise training induced a fall in mean arterial pressure in both the short- [mean (SEM) 137.6 (4.0) mmHg] and long-term hypertensive groups [161.4 (2.3) mmHg] compared to their sedentary hypertensive controls [160.4 (3.3) mmHg and 176.8 (8.9) mmHg, respectively]. Exercise also increased muscle nitric oxide synthase activity in both of the trained hypertensive groups. Muscle nitrite levels were higher in the exercising short-term hypertensive group compared to both the sedentary control and the sedentary hypertensive groups, and were not different between the sedentary and exercising long-term hypertensive groups. Increased wall thickness of the aortic and mesenteric vessels was observed in the hypertensive groups, but was prevented in the exercising long-term hypertensive group. In rat, exercise reduces the elevated blood pressure in L-NAME-induced hypertension via increasing nitric oxide synthase activity. Changes in vessel structure with exercise training may also be involved in the blood-pressure-lowering effects. Electronic Publication     

Role of heating in non-invasive blood pressure measurements in rats

The “tail-cuff technique for indirect blood pressure measurements was standardized, with respect to heating, in experiments on 47 adult Sprague-Dawley rats. The direct, intra-arterial, and the indirect blood pressures were simultaneously obtained. Pulse volume was recorded from the tail by a non-invasive technique, and was controlled by gradual application of heat. It was found that pulse volume and body temperature were poorly related. A stable relation existed, however, between the error in the indirect blood pressure recordings and the pulse volume. The error was minimized, provided that the heating was adjusted to induce a pulse volume of at least 25% of the maximum obtainable value. It was suggested that the validity of the indirect blood pressure recording could be improved, if heat application was regulated on the basis of observations of pulse volume in the tail instead of ambient temperature or body temperature. Errors due to excessive vasoconstriction, or discomfort due to overheating could thereby be minimized.     

兔急性颅内高压时,颅内压及血压对眼内压的影响

本文以颅内压、血压与眼内压之间的病理生理为基础,应用通经分析方法,分析实验兔急性颅内压增高时,眼内压上升的机理。结果提示急性颅内高压时,不仅颅内高压本身直接引起眼内压上升,同时,颅内高压所导致的血压增高亦可间接地促使眼内压上升。     

颈淋巴引流阻滞对清醒自由活动大鼠的血压的影响

 目的：观察颈淋巴引流阻滞（CLB）对清醒自由活动大鼠的血压的影响，并初步探讨其机制。 方法： 采用SD大鼠，随机分为假手术组（Sham组）和CLB组。应用监测清醒自由活动大鼠血流动力学变化的手段，分别连续记录两组大鼠在假手术和CLB手术术前及术后第1、3、7、11、15 d收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、心率（HR）的变化。测定两组大鼠术前、术后第1、7及15 d压力感受性反射敏感性（BRS）。脱机分析其相应的血压波动性（BPV）、心率变异性（HRV）。 结果： CLB术后第1天SBP、DBP、MAP、HR及BRS下降，第7天降至最低，BRS在7 d后无明显恢复，而血压及心率随着CLB时间的延长呈先下降后上升。相反，HRV、BPV先上升后下降。 结论： CLB可导致清醒自由活动大鼠血压降低，心血管系统神经调节功能下降。