猴脑选择性深低温断血流复苏的实验研究(摘要)

目的:研究猴脑选择性深低温断血流(selectivecere braldeephypothermicbloodflowocclusionDHBO)复苏的可行性及安全断流时间.方法:分离双侧颈外静脉、颈内动脉和颈内静脉,右侧颈内动脉远心端插管并连接降温系统,右侧颈内静脉两端插管连接超滤复温系统,由此建立闭胸式脑局部体外循环.夹闭双侧颈外静脉、左颈内动脉和颈内静脉,经右颈内动脉高压4℃平衡液冷灌注,右侧颈内静脉远心端回流,经超滤复温后回输入同侧颈内静脉近心端.脑温维持≤2 0℃状态60～80min.手术前后监测各主要脏器酶学变化,术后每周进行一次神经功能缺失评分,主要内脏行光镜…     

猴脑选择性超深低温断血流复苏对脑电功率谱的影响

目的探讨选择性深低温灌注对猴脑严重缺血后脑电功率谱的影响。方法健康成年恒河猴3只,建立选择性超深低温断血流复温模型,使脑温维持在14.7℃～16.0℃,持续1 h,随后自然复温。全程予脑电图监测,随机采集常规电极信号,分析δ波、θ波、α波、β波4个频段的绝对功率值。结果脑电波幅随脑温降低而下降,主要以慢波为主,脑温降至18℃及以下时近乎呈直线状,复温后波幅随温度升高逐渐恢复。灌注期、低温维持期的绝对功率值与麻醉期相比差异有统计学意义(P<0.05),复温期则差异无统计学意义(P>0.05)。结论选择性脑超深低温具有脑保护作用,低温维持期主要存在以慢波(δ、θ)为主的脑电活动。     

选择性超深低温断血流对恒河猴脑干形态及功能的影响

目的研究选择性超深低温(14.3～16.0℃)断血流对恒河猴脑干形态及功能的影响。方法成年健康恒河猴6只,分为2血管阻断冷灌注组(n=4)和等温灌注组(n=2)。建立闭胸式脑局部体外循环。2血管阻断冷灌注组经右侧颈内动脉灌注4.0℃林格液,同侧颈内静脉回流,降低脑温至14.3～16.0℃,维持60 min后恢复脑血流,实验动物自然复苏。等温灌注组用相同方法灌注38.0℃林格液。手术中监测血流动力学指标变化,术后行神经功能缺失评分,取动物脑干行光学显微镜和电镜检查。结果 2血管阻断冷灌注组术中、术后血流动力学稳定,灌注60 min后安全复苏并长期存活,术后神经功能评分正常,脑干形态和组织结构无明显异常;等温灌注组于灌注60 min后均未能安全复苏,全部死亡,脑干形态和组织结构有不同程度异常。结论选择性超深低温断血流技术可明显提高猴脑干对缺血缺氧的耐受性,延长血流阻断时间,为临床应用选择性超深低温技术提供了理论依据。     

常温缺血后选择性超深低温对猴脑Bc1-2和Bax表达的影响

目的 观察猴脑常温缺血0 min、10 min、15 min、20 min后选择性脑超深低温断血流复苏对Bc1-2和Bax蛋白表达的影响.方法 健康成年恒河猴15只,雄性,随机分为4组,0 min组(双侧颈动脉常温下阻断0 min后行脑选择性超深低温灌注,即热缺血0 min,简称0 min组,n＝4),10 min组(方法同上,n＝4),15 min组(n＝4),20 min组(n＝3).依照昆明医学院第二附属医院神经外科前期方法建立模型,术后行神经功能缺失评分.实验猴灌注或复苏死亡后立即开颅取脑,长期存活猴饲养到术后4周处死开颅取脑.免疫组织化学法检测猴额叶神经细胞Bc1-2和Bax的表达水平.结果 0 min组、10 min组安全复苏并长期存活,术中、术后血流动力学稳定,术后神经功能评分无异常;15 min组长期存活2只,重残1只,死亡1只;20 min组则全部死亡.免疫组化结果表明:4组间相互比较,Bax的表达逐渐增高(P＜0.05).10 min组、15 min组、20 min组3组间猴脑额叶Bc1-2表达明显逐渐降低,3组间差异有统计学意义(P＜0.05);0 min组与20 min组比较差异有统计学意义(P＜0.05);0 min组较10 min组、15 min组猴额叶Bc1-2的表达无明显差异,无统计学意义(P>0.05).结论超深低温能显著降低Bax的表达,促进Bc1-2的表达,从而起到脑保护的作用.     

深低温低流量体外循环灌注对脑功能影响的研究

作者分析深低温低流量灌注（25ml·kg-1·min-1）和常规体外循环灌注（100ml·kg-1·min-1）的体动脉、颈内静脉的氧和乳酸含量，得出两者在体外循环期间脑细胞的代谢变化上基本相似的结论，认为深低温低流量体外循环灌注方法完全能保证脑组织代谢需要，防止脑组织损伤的并发症发生。     

不同灌注方法对深低温停循环下脑保护的实验研究

目的探讨不同灌注方法在深低温停循环下（DHCA）的脑保护的作用。方法实验动物选用健康白乳猪幼猪（农科院提供）40只。随机分为4组,每组10只。A组：单纯DHCA组;B组：DHCA＋逆行性脑灌注（RCP）;C组：DHCA＋单侧顺行性脑灌注（U—SACP）;D组：DHCA＋双侧顺行性脑灌注（B—SACP）。对照分析四组组间分别于CPB前（T1）、DHCA后30min（T2）、60min（T3）、90min（T4）和复温再灌注30min（T5）氧摄取率的变化。采用原位末端标记法（TUNEL染色法）观察和测定脑组织神经细胞凋亡的情况。结果与A组相比,B组、C组和D组可显著减少幼猪DHCA后神经细胞凋亡数目（P〈0．05）,T2、T3和T4 3个时间窗脑氧摄取率明显低于A组,差异有显著意义（P〈0．05）。A组可见明显神经细胞凋亡改变,B组仅见中等程度神经细胞凋亡改变,C组和D两组见少量神经细胞凋亡改变,A组与B组,C组和D组、B组与C组和D组差异具统计学意义（P〈0．05）,但是C组和D组差异没有统计学意义（P〉0．05）。结论SACP与RCP脑保护作用均优于DHCA,U—SACP与B—SACP脑保护作用好于RCP,但是两者差距没有统计学意义。     

间歇性增加脑部逆灌压对深低温停循环脑保护的实验研究

目的探讨间歇性增加脑部逆灌压对深低温停循环脑保护的作用。方法 15头山羊随机分为深低温停循环组(A组,N=5)、深低温低压逆灌组(L组,N=5)和深低温间歇性高压逆灌组(H组,N=5)。3组动物均经历深低温(15℃～18℃)停循环2 h,期间A组没有脑部逆行灌注,L组和H组经上腔静脉逆行灌注,L组逆灌压控制在20～25 mmHg,H组基础逆灌压为20～25mmHg,每隔10 min用40～45 mmHg的逆灌压灌注5 min,随后恢复至基础逆灌压。分别在体外循环前,深低温停循环前,复温开始,体外循环结束时记录平均动脉压、脑脊液压力和静脉血气值。用眼底镜观察羊的视网膜动静脉充盈情况。留取脑脊液标本,检测S-100含量。结果 3组转流过程中平均动脉压、脑脊液压力、颈静脉血氧饱和度没有显著性差异。3组颈静脉血乳酸值含量总体差异显著,H组低于L组和A组(P0.05)。配对t检验显示A组和L组体外循环结束后S-100含量明显高于体外循环前水平(P0.05),但是H组没有显著性变化。A组眼底视网膜血管没有血流,L组视网膜血管不充盈,H组在高流量灌注时视网膜血管充盈。结论间歇性增加脑逆灌压能够增加深低温停循环期间脑组织灌注,减少无氧代谢,对脑组织有保护作用。     

缺血后处理对深低温停循环大鼠脑保护作用的实验研究

目的心血管外科手术的脑保护问题成为近年来的研究热点。文中观察缺血后处理对深低温停循环（deep hypothermic circulatory arrest,DHCA）大鼠脑组织的保护作用,探讨其脑保护作用的机制。方法健康雄性清洁级SD大鼠36只,随机分为3组：假手术组、DHCA组、缺血后处理组。采用改良的四血管法制作DHCA大鼠脑保护模型。假手术组：只暴露而不电凝及夹闭血管。DHCA组：造模成功后,阻断45 min,开放后不做任何处理。缺血后处理组：建立DHCA模型,在开放时反复进行3个循环的开放15s/阻断15s,然后全面开放。再灌注24h,在各组中分别随机取8只大鼠,制作脑组织匀浆,检测其肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）及超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性及丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量;各组中余下的4只大鼠,制作脑组织病理切片,光镜及透射电镜观察脑海马组织常规病理及超微结构变化;TUNEL法检测海马神经细胞的凋亡。结果 DHCA组、缺血后处理组与假手术组相比,炎性因子TNF-α、IL-1、IL-6明显升高,SOD活性明显降低,MDA含量明显增加;而缺血后处理组与DHCA组相比,炎性因子TNF-α、IL-1、IL-6明显降低,SOD活性明显升高,MDA含量明显减少,其差别均具有统计学意义（P〈0.05）。病理学结果显示,缺血后处理组海马组织破坏和细胞损伤程度明显低于DHCA组,海马神经细胞的凋亡明显减轻。结论缺血后处理可以减轻炎症反应和改善氧自由基代谢,减少了脑组织细胞的凋亡和坏死,对DHCA大鼠具有显著的脑保护作用。     

L-精氨酸联合右锁骨下动脉选择性顺行脑灌注对深低温停循环脑保护的实验研究

目的: 研究氧化亚氮(NO)前体L-精氨酸(L-arg)和经右锁骨下动脉选择性脑灌注(SCP)在深低温停循环(DHCA)中对脑组织的保护效果.方法: 实验兔随机分成DHCA组、SCP组和SCP L-arg组,分别予深低温停循环、停循环下顺行脑灌注及L-精氨酸静脉滴注,复温后开颅取脑组织检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及caspase-3蛋白表达进行组间比较.结果: SCP组和SCP L-arg组和DHCA组相比,SOD活性明显增强,MDA和caspase-3蛋白的表达均明显下降(P＜0.05,P＜0.01);SCP组和SCP L-精氨酸组间的MDA含量无统计学差异(P＞0.05),但是后者的SOD活性显著增加,caspase-3蛋白的表达明显下降(P＜0.05).结论: 选择性顺行脑灌注和L-精氨酸联合选择性顺行脑灌注在深低温停循环过程中对脑均有保护作用,L-精氨酸联合选择性顺行脑灌注对脑的保护作用更好.