大肠癌胃泌素mRNA表达的临床研究

目的　研究胃泌素 (gastrin ,GAS)mRNA在大肠癌癌组织、近旁粘膜 (距癌组织 <3cm)、远旁粘膜 (距癌组织 >8cm)的表达变化及与临床病理参数的关系。方法　收集手术切除的大肠癌新鲜标本 5 0例 ,分别取癌组织、近旁粘膜和远旁粘膜 ,匀浆提取RNA ,逆转录巢式PCR扩增检测GASmRNA表达情况。结果　GASmRNA阳性表达率 :癌组织高于近旁粘膜 (P <0 .0 1) ,近旁粘膜高于远旁粘膜 (P <0 .0 5 ) ;低分化癌较高、中分化癌为高 (P <0 .0 1) ;C、D期较A、B期为高 (P <0 .0 1) ;粘液腺癌、印戒细胞癌、未分化癌较乳头状腺癌、管状腺癌为高 (P <0 .0 5 )。结论　大肠癌细胞或组织自身分泌GAS ,调节大肠癌的生长 ;GAS的表达变化是大肠癌发病原因之一 ;GASmRNA的表达与大肠癌的分化程度、临床分期、病理类型关系密切。     

大肠癌组织中cFLIPL mRNA的表达及临床意义

目的:观察大肠癌组织中cFLIPL mRNA的表达,探讨其与大肠癌生物学行为及临床预后的相关性.方法:应用半定量RT-PCR方法观察86例大肠癌组织及癌旁组织中cFLIPL mRNA的表达水平;免疫组化法测定大肠癌组织中CEA和P53蛋白的表达;微粒子酶联免疫荧光法(MEIA) 检测大肠癌患者术前血浆CEA、CA19-9水平.以86例大肠癌组织cFLIPL mRNA 的表达均值为界限,将大肠癌组织cFLIPLmRNA表达分为高表达、低表达,比较各临床、病理因素下大肠癌组织cFLIPL mRNA 的高表达率,比较高、低表达患者术后5年生存率的差异.结果:大肠癌组织中cFLIPLmRNA表达均值明显高于癌旁组织(0.59±0.10 vs 0.36±0.10,P＜0.05);86例大肠癌患者中高表达56例,高表达率为65.1%.cFLIPL mRNA高表达率在Dukes B、C、D期患者中依次增高,分别为55.3%、67.5%、100% (P＜0.05);cFLIPL高表达患者术后5年累计生存率明显低于低表达患者(41.1% vs 56.7%,P＜0.05).大肠癌组织cFLIPL高表达率在除临床Dukes分期外的其他不同临床、病理指标下无显著差异.结论:cFLIPL表达可能与大肠癌患者临床分期及术后预后有一定相关性;检测大肠癌组织cFLIPL表达水平将有助于全面掌握患者病情、指导治疗并判断预后.     

Dukes'A期结直肠癌术后复发转移分析

目的探讨Dukes’A期结直肠癌根治术后复发转移相关的临床病理因素。方法回顾性分析172例行根治术的Dukes’A期结直肠癌病例的临床病理资料。其中，非复发组144例，复发组28例。结果Dukes’A期直肠癌术后复发转移率（20．9％）比结肠癌（8．1％）高（x^2=4．800，P〈0．05）。肿瘤浸润至肌层术后复发转移率（18．4％，28／152）明显高于局限于黏膜下层肿瘤（0．0％，0／20）（P〈0．05）。而性别、年龄、病程、大体类型、肿瘤大小、组织学类型、分化程度与术后复发转移无关。结论Dukes’A期直肠癌比结肠癌术后更易发生复发转移。Dukes’A期结直肠癌浸润至肌层术后复发转移风险高于局限于粘膜下层。     

ATF-5在结直肠癌组织中的表达及其意义

目的研究转录激活因子5(ATF-5)在人结直肠癌组织中的表达及其意义。方法选取我院结直肠癌组织标本38例,正常结直肠组织标本12例,采用RT-PCR法检测两种组织标本中ATF-5的表达水平。结果38例结直肠癌组织标本中有32例ATF-5阳性表达,12例正常结直肠组织标本中无ATF-5阳性表达,两者比较差异有显著性(χ2=24.53,P<0.01)。结论结直肠癌组织中ATF-5高表达,ATF-5可能在结直肠癌的发生、发展中起关键作用。     

根治性直肠癌术后局部复发的预后分析

目的探讨根治性直肠癌术后局部复发影响预后因素。方法选取我院2009年1月-2012年12月1070例根治性直肠癌手术患者,对其临床资料进行分析,探讨影响其预后的因素。结果实施直肠癌根治性手术后,有9.91%患者出现局部复发。首次手术到复发持续时间为5~52个月,再次手术根治切除42例,姑息切除34例,探查12例,未手术者18例,存在统计学差异（P〈0.001）。再次手术后并发症发生率24%,3年生存率30.78%,5年生存率16.68%。结论局部复发的直肠癌是否完成根治性手术治疗对于患者预后效果具有明显的影响,因此直肠癌根治术后如出现局部复发且满足手术治疗条件应尽快治疗。     

根治性直肠癌术后局部复发的预后分析

目的探讨根治性直肠癌术后局部复发影响预后因素。方法选取我院2009年1月-2012年12月1070例根治性直肠癌手术患者,对其临床资料进行分析,探讨影响其预后的因素。结果实施直肠癌根治性手术后,有9.91%患者出现局部复发。首次手术到复发持续时间为5~52个月,再次手术根治切除42例,姑息切除34例,探查12例,未手术者18例,存在统计学差异(P<0.001)。再次手术后并发症发生率24%,3年生存率30.78%,5年生存率16.68%。结论局部复发的直肠癌是否完成根治性手术治疗对于患者预后效果具有明显的影响,因此直肠癌根治术后如出现局部复发且满足手术治疗条件应尽快治疗。     

结直肠癌患者外周血中人端粒酶逆转录酶mRNA的表达及其临床意义

目的探讨结直肠癌患者外周血中人端粒酶亚单位hTERTmRNA的表达及其意义。方法以hTERTmRNA为靶基因运用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测76例结直肠癌、22例良性大肠疾病患者和30例正常对照人群外周血中hTERTmRNA的表达。结果76例结直肠癌患者中有52例外周血hTERTmRNA表达阳性，阳性率为68.4％，22例良性大肠疾病患者中有1例外周血bTERTmRNA表达阳性，二者比较有显著性差异（P〈0．001）；30例正常对照人群外周血中均无hTERTmRNA表达。hTERTmRNA的阳性检出率与肿瘤分化程度和TNM分期密切相关，与其他因素无相关性。结论外周血细胞中hTERTmRNA的表达与肿瘤分期相关，有可能作为结直肠癌微转移的一个监测指标。     

肝癌患者手术前后外周血AFP mRNA定量检测的临床意义

目的：研究肝细胞肝癌患者手术前后外周血AFP mRNA表达量的变化，分析其作为微转移标记物的可行性及与复发转移的关系．方法：使用实时荧光定量RT—PCR检测64例肝细胞癌患者手术前后外周血AFP mRNA表达量，并进行平均6mo以上的随访；同时以8例肝硬化患者、4例肝增生患者、8例肝血管瘤患者和10例健康志愿者作为对照组，对比检测其外周血单核细胞AFP mRNA的表达量．结果：复发34例．HCC组的术前AFP mRNA表达量明显高于对照组．术前外周血AFP mRNA相对HCC的灵敏度为85．9％，特异性为90．3％，准确率为87．4％．HCC患者术后外周血AFP mRNA表达量明显高于术前．HCC组外周血术前、术后AFP mRNA水平表达量与术后复发转移有明显相关性，与TNM分期、血管癌栓或侵犯有相关性，但与术时肿瘤数目、癌细胞分化程度、包膜完整性均与血清AFP浓度无相关．术后HCC组外周血AFP mRNA表达量与肿瘤大小有相关性．结论：实时荧光定量RT—PCR法检测HCC患者外周血AFP mRNA表达量有很高的敏感性和特异性，可以反映HCC患者血中是否存在肝癌细胞．手术可促进部分HCC细胞脱落人血．监测外周血AFP mRNA水平对术后早期复发转移有预测价值．     

结直肠癌组织中BRMS1 mRNA的表达及意义

目的:探讨乳腺癌转移抑制基因1（BRMS1）mRNA在结直肠癌组织中的表达及临床意义。方法:采用RT-PCR法分别检测40例结直肠癌组织和20例正常结直肠组织中BRMS1 mRNA的表达,并分析其与各临床病理特征之间的关系。结果:BRMS1 mRNA在结直肠癌组织中低表达0.420±0.133,在正常结直肠组织中高表达0.836±0.102,差异有统计学意义（P<0.01）。结直肠癌组织中BRMS1 mRNA的表达水平与病人年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤分化程度及浸润深度无关（P>0.05）,而与淋巴结转移呈负相关关系（P<0.01）。结论:BRMS1 mRNA在结直肠癌组织中呈低表达,并有可能成为反映结直肠癌转移潜能的参考指标之一。     

结直肠癌组织FAT10 mRNA表达的临床意义

目的研究FAT10 mRNA在结直肠癌组织中的表达及其与结直肠癌临床病理学间的关系。方法应用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测FAT10 mRNA在51例结直肠癌组织、结直肠癌旁组织和正常结直肠黏膜组织的表达水平,并观察其与临床病理特征的关系。结果(1)RT-PCR法检测FAT10在结直肠癌组织病例中表达阳性率为68.6%,在结直肠癌旁组织及正常结直肠黏膜中表达阳性率分别为17.6%和13.7%;(2)结直肠癌组织FAT10表达水平与结直肠癌旁组织及正常结直肠黏膜组织比较,差异均有显著性(P<0.05);结直肠癌淋巴结转移组患者FAT10表达水平与未转移组相比较,差异有显著性(P<0.05);伴肝转移组的结直肠癌与无肝转移组结直肠癌FAT10表达水平差异有显著性(P<0.05);组织FAT10表达水平还与临床分期密切相关,FAT10水平随分期升高而升高。与患者年龄、性别、肿瘤所在部位、肿瘤大小及病理分化程度等,临床病理特性之间无相关性(P>0.05)。结论FAT10在结直肠癌组织中的表达明显上调,对应的癌旁组织及正常结直肠黏膜组织无表达或弱表达;测定FAT10的表达可能预测结直肠癌的发生潜能;结直肠癌组织中FAT10的阳性表达与肿瘤临床分期、有无淋巴结转移及肝转移有关,提示FAT10基因与肿瘤的侵袭、转移密切相关。     

外周血差异显示编码3mRNA定量检测在前列腺癌患者诊断与治疗监测中的初步应用

目的探讨外周血差异显示编码3（DD3）mRNA定量检测在前列腺癌诊断和治疗监测中意义。方法用荧光定量逆转录聚合酶链反应（FQ—RT—PCR）方法对35例未治疗前列腺癌、58例内分泌治疗后前列腺癌、59例良性前列腺增生患者和10例健康男性志愿者外周血DD3mRNA含量进行定量检测,并对DD3mRNA诊断及疗效监测价值进行评价。结果未治疗前列腺癌组外周血DD3mRNA含量明显高于治疗后前列腺癌组、前列腺增生组和健康男性志愿者组,差异具有统计学意义（P〈0．01）。未治疗前列腺癌患者随着临床分期增加,外周血DD3mRNA含量也增高,差异具有统计学意义（P〈0．01）。当临界值为846拷贝／ml时,DD3mRNA曲线下面积为0．822（95％CI：0．725～0．919）,灵敏度、特异度分别为74．3％、89．8％。结论外周血DD3mRNA定量检测是前列腺癌诊断的良好指标,可作为内分泌治疗过程疗效监测的指标。     

CK19、CK20 mRNA在上皮性恶性肿瘤患者外周血中的表达及其意义

目的：分析上皮性恶性肿瘤患者外周血中CK19、CK20mRNA的表达水平，探讨其临床病理意义。方法：随机选择和收集53例上皮性恶性肿瘤患者的外周血，应用巢式RT－PCR法联合检测其CK19、CK20mRNA表达情况，另取15例上皮性肿瘤组织的为阳性对照，15例非肿瘤患者外周血为阴性对照。结果：53例肿瘤患者外周血中CK19阳性率为35．8％（19／53，CK20阳性率41．5％（22／53），两者至少1项阳性者69．8％（31／53）。15例肿瘤组织中CK20阳性率为100％（15／15），CK19阳性率86％（13／15）；15例阴性对照CK19阳性2例，CK20阳性1例，结合肿瘤的临床病理资料分析，肿瘤患者外周血CK19、CK20mRNA阳性表达与肿瘤浸润深度，临床分期及淋巴结转移存在明显的相关性，而与肿瘤患者的年龄，性别，肿瘤分化程度无明显相关。结论：CK19、CK20mRNA可作为检测上皮性肿瘤外周血微转移的靶基因。联合检测肿瘤患者外周血CK19、CK20mRNA可增加外周血循环癌细胞的检测率。     

RT-PCR法检测肝癌患者周围和肝静脉血AFP mRNA及其临床意义

目的：通过对外周静脉因和肝静脉血AFPmRNA表达检测的比较，旨在寻找一种比较好的监测肝癌细胞转移的方法，并了解肝癌细胞在体内的转移机制。方法：抽取肝癌患者外周及肝静脉血，采用RT－PCR方法检测AFPmRNA，比较二者的阳性率。结果：在肿瘤直径＞5cm的肝癌患者，其外周血，肝静脉血AFPmRNA表达差异无显著性（P＝0．618），而在直径＜5cm的肝癌患者，其二处血AFPmRNA表达差异有显著性（P＝0．028）。结论：肝癌直径＜5cm的患者，直接检测肝静脉血能更准确地反映肝癌细胞肝内播散的情况。肝癌直径＞5cm的患者中，外周血，肝静脉血AFPmRNA表达差异无显著性，这部分患者的外周血AFPmRNA可代表其肝静脉血中AFPmRNA的状况。     

巢式RT-PCR技术检测肺癌76例微量癌细胞转移分析

目的 :建立检测肺癌患者外周血及淋巴结微转移癌细胞的敏感的分子检测方法 ,并探讨其临床应用的意义。方法 :采用巢式逆转录聚合酶链反应 ( RT- PCR)技术特异引物扩增 CK19- m RNA,以检测肺癌患者外周血及淋巴结中 CK19- m RNA的表达情况。分析CK19- m RNA扩增结果与患者临床指标的关系。结果 :76例肺癌患者外周血标本中 39例CK19- m RNA阳性 ,阳性率为 5 1 .3% ,2 7例肺良性病变中仅 1例阳性 ,阳性率为 3.7% ,1 5例健康对照者均为阴性。全部患者 1 5 7枚淋巴结中 CK19- m RNA检测出阳性率为 38.9%( 61 / 1 5 7) ,常规病理方法检出阳性率为 1 4.6% ( 2 3/ 1 5 7) ,两种方法比较 ,有显著性差异 ( P<0 .0 5 ) ,且 HE染色阴性的 1 34枚淋巴结中 ,经 RT- PCR法证实存在癌转移的阳性率为 2 8.3% ( 38/ 1 34) ,两组比较有显著性差异 ( P<0 .0 5 )。结论 :巢式 RT- PCR是一种特异性和敏感性均较高的癌细胞微量转移检测方法 ;可能有助于肺癌细胞微转移的早期诊断。     

外周血循环MUCl mRNA表达水平与乳腺癌、肺癌的相关性研究

目的研究外周血循环MUClmRNA表达水平与乳腺癌、肺癌、其他癌等疾病的相关性以及对乳腺癌等疾病的诊断价值。方法分别采集健康对照组、良性肿瘤组、乳腺癌组、肺癌组以及其他癌组入院患者的血清样本,采用实时定量荧光逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测外周血循环MUClmRNA含量。结果良性肿瘤组外周血循环MUClmRNA表达水平及阳性率（10％）与健康对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）,乳腺癌组外周血循环MUClmRNA表达水平及阳性率（50％）与健康对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）,乳腺癌组中以浸润性导管癌最高,各种类型乳腺癌比较差异无统计学意义（P〉0．05）,肺癌组外周血循环MUClmRNA表达水平及阳性率（60％）与健康对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）,其他癌组外周血循环MUClmRNA表达水平及阳性率（20％）与健康对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论MUCImRNA可以作为乳腺癌、肺癌的诊断标志物,但对乳腺癌分型的诊断没有价值。     

hTERT mRNA在食管癌组织中的表达及意义

目的 研究凋亡调控基因hTERT mRNA在食管癌癌组织中的表达及意义.方法 采用RT-PCR检测52例食管癌组织、30例癌旁食管组织（距离肿瘤至少5 cm）和7例非食管癌黏膜组织中hTERT mRNA的表达情况.结果 hTERT mRNA在食管癌组织和癌旁食管组织中表达的阳性率明显高于非食管癌组织（P＜0.05）,食管癌组织中的表达阳性率与癌旁食管组织的表达阳性率差异无统计学意义（P＞0.05）;hTERT mRNA在食管癌组织中的表达与患者年龄、病理类型、分化程度、浸润程度、淋巴转移和临床分期无相关性（P＞0.05）.结论 hTERT mRNA在食管癌组织中的表达可能是早期事件,检测hTERT mRNA的表达可能对食管癌的早期诊断及治疗具有指导意义.     

结直肠癌和息肉中Caspase通路上基因表达水平

目的:检测结直肠正常黏膜-结直肠息肉-结直肠癌中Caspase凋亡通路上相关基因的mRNA表达水平,探讨其在结直肠癌发生、发展中的作用.方法:收集了19例结直肠癌患者的肿瘤组织、86例结直肠息肉患者的息肉组织和10例正常对照的结直肠黏膜组织.采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT.PCR)测定结直肠正常黏膜、结直肠息肉、结直肠癌中Caspase通路上基因(Caspase-2、-3、-6、-7、-8、-9和.10)的mRNA表达水平.结果:年龄、性别等人口学特征在正常对照、息肉及结直肠癌病例组问分布均衡;与正常黏膜组比较,除Caspase-3在结直肠癌中表达升高外,其它基因mRNA表达均下降,但都没有达到统计学上的显著性水平;此外,除Caspase-9外,这些Caspase基因相互间mRNA表达水平存在显著的的正相关关系.结论:未发现Caspase凋亡通路上相关基因mRNA表达水平在肿瘤形成过程中发生显著变化;Caspase通路上基因相互之间表达水平呈显著相关.     

联合免疫磁珠与逆转聚合酶联反应在肝细胞癌患者外周血癌细胞检测中的应用

目的 研究联合免疫磁珠分类与巢式逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）在肝细胞癌患者外周血癌细胞检测中的应用价值。方法 分别收集肝细胞癌（45例）、肝硬化（16例）、肝炎（20例）患者及健康人（18例）的外周血，以CD15和Ber-EP4免疫磁珠富集血液中的癌细胞，用巢式RT-PCR检测其外周血甲胎蛋白（AFP）mRNA水平。结果 AFPmRNA在肝细胞癌、肝硬化和肝炎患者的检出率分别为72．1％．43．8％和25．0％，肝细胞癌组与肝硬化组和肝炎组比较的差异均有显著性意义（P〈0．05和P〈0．01）。结论 联合免疫磁珠分类与巢式RT-PCR法可提高肝细胞癌患者外周血AFPmRNA的检出率。     

定量RT-PCR检测结直肠癌患者外周血CK20 mRNA的表达

目的:检测结直肠癌患者外周血中细胞角蛋白20(CK20)mRNA的表达水平,并探讨其临床价值.方法:采用实时荧光定量RT-PCR法检测51例经病理学确诊的结直肠癌患者和30例健康对照者外周血CK20 mRNA的表达水平.结果:结直肠癌患者中CK20 mRNA阳性率为27.45%,而健康对照组阳性率为6.67%,两者相比差异有统计学意义(P<0.025).随着临床分期的提高,患者外周血中CK20 mRNA的表达率随之提高,但各分期间阳性率相比无显著统计学意义(P>0.05).Dukes'C期与D期患者中>10拷贝/ml者高于A期与B期患者.结论:检测结直肠癌患者外周血CK20 mRNA的表达水平可发现早期脱落的肿瘤细胞,对肿瘤微转移的诊断有一定的提示意义.