运用蛋白质组学技术研究结肠黏膜、腺瘤及腺癌组织蛋白的差异表达

【目的】通过比较结肠正常黏膜、腺瘤、腺癌组织之间的蛋白质组表达差异，寻找结肠腺癌相关的蛋白质，筛选结肠癌早期诊断的分子标志物。【方法】运用比较蛋白质组学技术，对8例结肠癌患者（伴有腺瘤）的正常黏膜、腺瘤、腺癌组织提取的总蛋白进行双向电泳（2-D），分析凝胶图片选择两两间差异表达超过2倍的蛋白质进行MALDI-TOF／TOF质谱分析和生物学信息分析。【结果】成功建立结肠正常粘膜、腺瘤、腺癌的双向凝胶电泳图谱，在凝胶电泳图谱中平均蛋白质斑点数分别为3066、2986和3289,其中两两间表达差异超过2倍的斑点共有31个，质谱分析和数据库检索共鉴定出18种蛋白质，包括keratin 8、S100A6、protein disulfide isomerase等。从功能分析，这些差异蛋白与癌细胞的发生、增殖、分化、转移等相关。【结论】比较蛋白质组学能较好地提示结肠腺癌与腺瘤及正常组织间的蛋白质表达差异,而对相关差异表达蛋白的研究有可能为结肠癌的早期诊断和治疗提供新的分子靶向。     

运用蛋白质组学技术研究结肠粘膜、腺瘤及腺癌组织蛋白的差异表达

 ［目的］通过比较结肠正常粘膜、腺瘤、腺癌组织之间的蛋白质组表达差异，寻找结肠腺癌相关的蛋白质，筛选结肠癌早期诊断的分子标志物。［方法］运用比较蛋白质组学技术，对8例结肠癌患者（伴有腺瘤）的正常粘膜、腺瘤、腺癌组织提取的总蛋白进行双向电泳（2-D），分析凝胶图片选择两两间差异表达超过2倍的蛋白质进行MALDI-TOF/TOF质谱分析和生物学信息分析。［结果］成功建立结肠正常粘膜、腺瘤、腺癌的双向凝胶电泳图谱，在凝胶电泳图谱中平均蛋白质斑点数分别为3066 、2986和3289，其中两两间表达差异超过2倍的斑点共有31个，质谱分析和数据库检索共鉴定出18种蛋白质，包括keratin 8、S100A6、protein disulfide isomerase等。从功能分析，这些差异蛋白与癌细胞的发生、增殖、分化、转移等相关。结论 比较蛋白质组学能较好地提示结肠腺癌与腺瘤及正常组织间的蛋白质表达差异，而对相关差异表达蛋白的研究有可能为结肠癌的早期诊断和治疗提供新的分子靶向。     

结肠癌组织中PKCβ1、COX-2及nm23-H1的表达及其意义

目的：研究结肠癌、结肠腺瘤和癌旁正常结肠粘膜组织中蛋白激酶C（PKCβ1）、环氧化酶-2（COX-2）及转移抑制基因nm23-H1的表达及其临床意义。方法：65例结肠癌、16例结肠腺瘤和8例癌旁结肠粘膜组织采用免疫组织化学法检测PKCβ1、COX-2及nm23-H1的表达。结果：PKCβ1表达在结肠癌与腺瘤和正常黏膜差异显著（P〈0．01）,表达率和表达强度依次递减。COX-2在结肠癌、结肠腺瘤和正常结肠粘膜组织中的表达差异显著,结肠癌组织中COX-2的表达与结肠癌分化程度、淋巴结和远处转移以及Dukes分期有关,与年龄和性别无关。nm23-H1的表达在结肠癌、结肠腺瘤和正常结肠黏膜组织中差异有显著性（P〈0．01）,结肠癌组织中nm23-H1的表达与分化程度、远处转移及Dukes分期有关,但与其它临床病理资料无关。结论：PKCβ1可能与结肠黏膜上皮增生有关,可能参与了结肠的癌变过程,并可能在癌变早期发生改变。COX-2异常表达可能是结肠癌发生的早期事件,且在结肠癌的发生、发展中起一定作用。nm23-H1的表达下调,可促使结肠癌细胞获得进一步恶性分化及远处转移的潜能。     

硫氧还蛋白及硫氧还蛋白相互作用蛋白在结肠息肉癌变中的表达及意义

【摘要】 目的 探讨硫氧还蛋白（thioredoxin,Trx）与硫氧还蛋白相互作用蛋白（thioredoxin interacting protein,TXNIP）在结肠息肉、结肠腺瘤及结肠癌中的表达,分析Trx、TXNIP在结肠息肉癌变中的作用。 方法 收集河北北方学院附属第一医院2019年1月～2019年10月就诊的结肠息肉（结肠息肉组）20例、结肠腺瘤（结肠腺瘤组）40例、结肠癌（结肠癌组）20例以及正常结肠(正常结肠组)20例,通过ELISA法检测血清Trx、TXNIP的含量,采用胰岛素还原法检测血清Trx活性,苏木精-伊红染色（HE）法观察各组织的形态学,应用免疫组织化学法检测组织中Trx、TXNIP的表达,实时荧光定量PCR检测组织中Trx mRNA与TXNIP mRNA的表达水平。 结果 与正常结肠组比较,结肠腺瘤组与结肠癌组患者血清中Trx含量和活性明显升高,结肠息肉组、结肠腺瘤组患者与结肠癌组患者血清中TXNIP含量较正常结肠组明显下降,差异均有统计学意义（P＜0.05）;在结肠腺瘤组和结肠癌组组织中Trx阳性表达率明显高于正常结肠组,而TXNIP阳性表达率明显低于正常结肠组,差异均有统计学意义（P＜0.05）;与正常结肠组比较,结肠息肉组、结肠腺瘤组及结肠癌组组织中Trx mRNA的表达水平均明显上调,TXNIP mRNA的表达水平均明显下调,差异具有统计学意义（P＜0.05）。 结论 Trx在结肠息肉癌变中高表达,而TXNIP表达降低,表明两者都参与结肠癌前病变与癌组织的发生及发展,两者均在结肠息肉癌变过程中起着重要的作用。     

生长抑素受体SSTR1、SSTR2在结肠腺瘤型息肉中的表达及临床意义

目的 探讨SSTR1、SSTR2在结肠腺瘤型息肉的表达及临床意义.方法 采用免疫组化EnVisionTM二步法检测SSTR1、SSTR2亚型蛋白在对照组织、结肠腺瘤型息肉及结肠腺癌组织中的表达.结果 SSTR1在结肠癌及结肠腺瘤型息肉中无明显表达差异(P>0.05),与临床分期及肿瘤部位有明显差异(P>0.05),淋巴结转移癌的SSTR1的表达高于无淋巴结转移的结肠癌.SSTR2在结肠癌中的阳性率为20.5%,与临床分期、淋巴转移及肿瘤部位没有明显差异(各组之间均P>0.05);对照组结肠黏膜中的阳性率为71.4%,腺瘤中轻度不典型增生阳性率为59.5%;中重度不典型增生阳性率为41.5%.S S T R2在结肠腺瘤型息肉和正常结肠粘膜组织表达无明显差异(P＞0.05).结肠腺瘤型息肉的中、重度不典型增生低于轻度不典型增生(P＜0.05).S S T R2在结腺癌中的阳性率及表达强度最低,显著低于结肠腺瘤型息肉(P＜0.01),结肠腺瘤型息肉的中、重度不典型增生明显低于轻度不典型增生(P＜0.05)结论 SSTR2的阳性表达及表达强度对诊断结肠腺癌和监视结肠腺瘤型息肉癌变有重要意义.     

Galectin-3和CD44v6在结肠癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨半乳糖凝集素-3（Galectin-3）和细胞黏附分子（CD44v6）在结肠癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测86例结肠癌（结肠癌组）、16例正常结肠组织（正常对照组）、20例结肠腺瘤性息肉（结肠腺瘤性息肉组）组织中Galectin-3和CD44v6的表达情况。结果腺癌、黏液癌者Galectin-3阳性表达率均明显高于未分化癌者（均P〈0.01）,有淋巴结转移者Galectin-3、CD44v6阳性表达率均明显高于无淋巴结转移者（均P〈0.05）,低、中分化腺癌者CD44v6阳性表达率均明显高于高分化腺癌者（均P〈0.05）;结肠腺瘤性息肉组、结肠癌组Galectin-3、CD44v6阳性表达率均明显高于正常对照组（均P〈0.01）;结肠癌组Galectin-3阳性表达率与结肠腺瘤性息肉组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,而CD44v6阳性表达率明显低于结肠癌组（P〈0.01）。相关性分析显示,结肠癌组组织中Galectin-3与CD44v6呈正相关（r=0.087,P〈0.05）。结论检测Galectin-3和CD44v6能更准确地判断结肠癌的发生、发展和转移状况,进一步为结肠癌的随访、辅助治疗、判断预后等提供依据。     

STAT3在结直肠腺瘤性息肉与腺癌中的表达及意义

目的:探讨结直肠腺瘤性患肉及腺癌组织中STAT3的表达及临床意义.方法:采用免疫组化MaxVisionTM法检测80例正常肠粘膜、100例结直肠腺瘤性息肉和80例腺癌组织中STAT3的表达,并分析结直肠腺瘤性息肉组织中STAT3的表达与临床病理特征的关系.结果:STAT3在正常肠粘膜、结直肠腺瘤性息肉和腺癌组织中的阳性表达率依次增强,且均有统计学意义(P＜0.01).在结直肠腺瘤性息肉组织中,STAT3的表达率在直径≥2cm的息内高于直径＜1cm的息肉,重度不典型增生的息肉高于轻度不典型增生的息肉,左半结肠的息肉高于右半结肠的息肉(P＜0.01),其表达与年龄、性别无关(P＞0.05).结论:STAT3可能是结直肠腺瘤性息肉发展及癌变过程中的重要促进因子,对于预测结直肠腺瘤性息肉的癌变可能性及化学干预有重要意义.     

结肠癌组织中PKCβ1、COX-2及nm23-H1的表达及其意义

目的:研究结肠癌、结肠腺瘤和癌旁正常结肠粘膜组织中蛋白激酶C(PKCβ1)、环氧化酶-2(COX-2)及转移抑制基因nm23-H1的表达及其临床意义。方法:65例结肠癌、16例结肠腺瘤和8例癌旁结肠粘膜组织采用免疫组织化学法检测PKCβ1、COX-2及nm23-H1的表达。结果:PKCβ1表达在结肠癌与腺瘤和正常黏膜差异显著(P<0.01),表达率和表达强度依次递减。COX-2在结肠癌、结肠腺瘤和正常结肠粘膜组织中的表达差异显著,结肠癌组织中C0X-2的表达与结肠癌分化程度、淋巴结和远处转移以及Dukes分期有关,与年龄和性别无关。nm23-H1的表达在结肠癌、结肠腺瘤和正常结肠黏膜组织中差异有显著性(P<0.01),结肠癌组织中nm23-H1的表达与分化程度、远处转移及Dukes分期有关,但与其它临床病理资料无关。结论:PKCβ1可能与结肠黏膜上皮增生有关,可能参与了结肠的癌变过程,并可能在癌变早期发生改变。COX-2异常表达可能是结肠癌发生的早期事件,且在结肠癌的发生、发展中起一定作用。nm23-H1的表达下调,可促使结肠癌细胞获得进一步恶性分化及远处转移的潜能。     

环氧合酶在结肠腺瘤性息肉及结肠癌组织中的表达

目的:研究环氧合酶(COX-2)在结肠黏膜、结肠腺瘤性息肉以及结肠癌中的表达,并探讨COX-2与结肠癌和结肠腺瘤性息肉之间的关系。方法:随机续贯选择结肠腺瘤性息肉患者30例,结肠癌患者30例,以正常结肠黏膜30例作为对照组。用免疫组化方法检测COX-2的表达。结果:结肠癌组COX-2的阳性表达率显著高于正常结肠黏膜组(P<0.005)和结肠息肉组(P<0.05),结肠癌组COX-2的表达强度显著高于正常结肠黏膜组(P<0.01)和结肠腺瘤性息肉组(P<0.05),结肠腺瘤性息肉组的阳性表达率和表达强度高于正常结肠黏膜组(P<0.05)。结论:COX-2表达增高可能与结肠腺瘤性息肉和结肠癌的发生、发展有密切联系。     

Shh和Ptch在结肠癌、腺瘤性息肉中的表达及意义

目的:检测Shh和Ptch蛋白在结肠癌、腺瘤性息肉中的表达,探讨二者在结肠癌发生、发展的作用,关注其在不同临床病理特征中的表达差别,为临床工作提供理论支持.方法:以80例大肠癌、80例结肠腺瘤性息肉、80例正常结肠黏膜组织作为研究对象,采用免疫组织化学技术,检测Shh和Ptch蛋白的表达,比较二者在不同临床指标及临床病...     

HSP27在左侧结肠癌和右侧结肠癌差异表达的实验研究

目的：应用蛋白质组学技术筛选左侧结肠癌和右侧结肠癌组织中差异表达的蛋白,为左侧结肠癌（1eft sided coloncan cer,LSCC）和右侧结肠癌（right sided colon cancer,RSCC）在肿瘤生物学方面的差异提供分子遗传学依据。方法：收集人LSCC和RSCC组织标本,置-80℃超低温冰箱中保存。应用双向凝胶电泳、质谱分析和生物信息学分离和鉴定LSCC和RSCC中差异表达的蛋白质。应用RT—PCR,Western印迹和免疫组织化学技术检测差异表达蛋白的表达状态。结果：筛选出55个差异蛋白质点,成功鉴定出21种差异蛋白质。与RSCC比较,14种蛋白在LSCC表达上调,7种蛋白在LSCC表达下调,其中LSCC中HsP27表达下调。通过RT—PCR,Western印迹和免疫组织化学方法证实：在mRNA和蛋白水平,LSCC中HSP27的表达均低于RSCC。结论：LSCC和RSCC的蛋白质组存在差异表达,特别是HSP27在mRNA和蛋白水平均存在差异,这些可能是LSCC和RSCC生物学行为差异的分子遗传学基础。     

幽门螺杆菌感染与结肠腺瘤性息肉的关系研究

目的研究Hp感染与结肠腺瘤性息肉之间的关系。方法用一步法快检卡方法对患者的大便标本Hp助抗原进行检测，腺瘤性息肉患者为试验组（n=40）和对照组（n=56），两组进行Up感染的对比分析。结果腺瘤性息肉组中Hp助检出率显著高于对照组（P〈0．05）。结论幽门螺杆菌感染可能是引起结肠腺瘤性息肉的一个因素。     

Survivin、Cox-2在结肠腺瘤性息肉及腺癌中的表达

①目的探讨非家族性大肠腺瘤性息肉及腺癌中生存素（Survivin）及环氧化酶2（Cox-2）的表达。②方法收集我院2006年1月~2007年12月大肠腺瘤性息肉及腺癌标本,利用免疫组化技术分别检测40例腺瘤性息肉,40例大肠腺癌及相应的正常黏膜对照中Sur-vivin、Cox-2的表达情况。③结果Survivin及Cox-2在正常黏膜与腺瘤性息肉及腺癌中的表达依次增强,且均有统计学意义（P〈0.01）。④结论Survivin、Cox-2可能是大肠腺瘤发展及癌变过程中的重要促进因子,对于预测大肠腺瘤癌变可能性及化学干预有重要意义。     

热休克蛋白60在左侧和右侧结肠癌中的表达研究

[目的]筛选左侧结肠癌和右侧结肠癌的差异表达蛋白,并确定热休克蛋白60（Heat shock pro-tein60,HSP60）在左侧结肠和右侧结肠癌组织中的差异表达情况。[方法]收集左侧和右侧结肠癌组织及癌旁组织。应用二维电泳、质谱分析和生物信息学分析获得左侧和右侧结肠癌间的差异表达蛋白,并应用 RT-PCR ,Western Blot和免疫组织化学技术检测HSP60在左右侧结肠癌中表达情况,并分析其表达与患者临床病理变量的关系。[结果]建立了左侧和右侧结肠癌的蛋白质组差异表达谱,并发现HSP60是左侧和右侧结肠癌间差异表达蛋白,经过RT-PCR ,Western Blot和免疫组化检测证实 HSP60在左侧结肠癌组织表达强度和表达率显著高于右侧结肠癌,且差异均有显著性（ P ＜0．01）。[结论]HSP60在左侧结肠癌和右侧结肠癌中的表达存在差异,可能在左右侧结肠癌生物学行为差异中有重要意义。     

基于生物信息学的结肠癌核心基因筛选及验证

目的:利用生物信息学方法筛选结肠癌核心基因,并通过体外实验进行验证,挖掘潜在的结肠癌分子标志物.方法:从GEO数据库下载GSE23878、GSE37182和GSE74602数据集,应用R语言筛选结肠癌和癌旁组织的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),并对DEGs进行GO...     

HSP27在左侧结肠癌和右侧结肠癌差异表达的实验研究(英文)

目的:应用蛋白质组学技术筛选左侧结肠癌和右侧结肠癌组织中差异表达的蛋白,为左侧结肠癌(1eft sided colon cancer,LSCC)和右侧结肠癌(right sided colon cancer,RSCC)在肿瘤生物学方面的差异提供分子遗传学依据.方法:收集人LSCC和RSCC组织标本,置-80℃超低温冰箱中保存.应用双向凝胶电泳、质谱分析和生物信息学分离和鉴定ISCC和RSCC中差异表达的蛋白质.应用RT-PCR,Western印迹和免疫组织化学技术检测差异表达蛋白的表达状态.结果:筛选出55个差异蛋白质点,成功鉴定出21种差异蛋白质.与RSCC比较,14种蛋白在LSCC表达上调,7种蛋白在LSCC表达下调,其中LSCC中HSP27表达下调.通过RT-PCR,Western印迹和免疫组织化学方法证实:在mRNA和蛋白水平,LSCC中HSP27的表达均低于RSCC.结论:LSCC和RSCC的蛋白质组存在差异表达,特别是HSP27在mRNA和蛋白水平均存在差异,这些可能是LSCC和RSCC生物学行为差异的分子遗传学基础.     

结肠癌组织中乳酸脱氢酶B亚基蛋白表达变化及临床意义

目的：观察结肠癌（colon cancer）中乳酸脱氢酶B亚基（LDHB）蛋白的表达变化,并探讨其意义。方法：采用免疫组化SP法检测72例结肠癌组织（CC组）及72例结肠组织（对照组）中的LDHB蛋白,并分析LDHB蛋白表达与CC临床病理参数的关系。结果：CC组和对照组LDHB蛋白表达阳性的分别为27、61例,两组相比差异具有统计学意义（P〈0.05）。LDHB蛋白表达与CC临床分期和分化程度有关（均P〈0.05）,与患者年龄、性别、肿瘤直径无关（均P〉0.05）。结论：LDHB蛋白在结肠癌细胞癌组织中的表达低于非癌性结肠组织,其表达可能与结肠癌的发生有关。     

Hedgehog信号通路中SHH蛋白及其下游转录因子GLI1在Peutz-Jeghers综合征中的表达及意义

目的检测Hedgehog信号通路中SHH蛋白及其下游转录因子GLI1蛋白在人Peutz-Jeghers综合征(PJS)息肉中的表达,探讨其在PJS发生及恶变中的作用。方法采用免疫组织化学方法检测PJS息肉(20例)、正常肠黏膜组织(20例)、大肠腺瘤性息肉(25例)、大肠腺癌(25例)组织中SHH和GLI1蛋白的表达和分布,并比较表达程度的差异。结果免疫组织化学检测SHH蛋白和GLI1蛋白的阳性着色主要分布于胞膜和胞质,腺癌中GLI1蛋白的胞质和核染色增加。SHH蛋白和GLI1蛋白在正常肠黏膜组织、PJS息肉组织、腺瘤组织及腺癌组织中的阳性表达率和表达强度依次增高,差异具有统计学意义(Kruskal-Wallis H test,P<0.001)。SHH与GLI1的蛋白表达在PJS中经Spearman等级相关分析呈正相关(rp=0.503,P=0.024)。结论 SHH/GLI1在正常肠黏膜组织、PJS息肉组织、腺瘤组织及腺癌组织中均有表达,且表达水平依次增高,提示SHH-GLI1信号通路可能与PJS息肉的发生及恶变有关。     

宫颈永生化细胞和癌细胞胞膜差异蛋白质组学研究

目的建立HPV-16阳性的宫颈上皮永生化细胞（H8细胞株）和宫颈癌细胞（CaSKi细胞株）胞膜蛋白双向电泳图谱,寻找特征性的差异蛋白点。方法提取两种细胞胞膜蛋白质进行双向凝胶电泳（2-dimensronal gel electrophore-sis,2-DE）,建立电泳图谱,然后筛选出差异点进行基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱（matrix-assisted laser desorption/i-onization time-of-flight tandem mass spectrometry,MALDI-TOF-MS/MS）分析,鉴定出蛋白质。结果获得了分辨率和重复性均较好胞膜蛋白2-DE图谱,并分析找出了13个的差异蛋白点,对其中3个显著差异点进行质谱分析和初步鉴定。结论建立了H8和Caski细胞胞膜蛋白2DE图谱,并初步发现LRC8D、EDAR、MTX1蛋白在宫颈癌前病变和宫颈癌细胞胞膜中存在差异表达,为宫颈癌及癌前病变的诊断及癌变机制提供了帮助。