烫伤大鼠创面皮肤中神经肽P物质的变化

目的　观察皮肤创面神经肽P物质 (SP)的变化规律并探讨其来源。　 方法　运用免疫组化检测烫伤大鼠皮肤创面、创周和远处未损伤皮肤内含SP的神经分布密度的改变及其神经肽的分布 ,运用原位杂交技术观察其mRNA表达情况。　结果　烫伤后 15min在皮肤创面、创周和远处未损伤皮肤含SP的神经分布密度明显下降 (P <0.0 5 ),烫伤后 6～ 12h达到最低值 ,以后逐渐恢复。相比之下 ,在创周恢复过程中SP出现较早 ;在创面和创周的真皮层 ,SP免疫反应阳性的的巨噬细胞样大细胞从局部血管中游出 ,烫伤后 12h该细胞与局部含SP的神经关系密切 ,伤后 2 4h该细胞染色增强、破碎并释放大量SP免疫反应阳性的颗粒状物质 ,而后这些细胞在烫伤后 4 8h消失。原位杂交结果显示 ,伤后 6h相同大小细胞内表达编码合成P物质前体的前速激肽A(PPTA)mRNA。　 结论　皮肤烧伤后 ,SP不仅从皮肤内神经末梢释放 ,也可能从局部炎性细胞合成释放     

大鼠皮肤降钙素基因相关肽正常分布及烫伤后改变规律

目的探讨皮肤创面降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）的来源。方法运用免疫组化技术检测烫伤后早期大鼠皮肤烫伤创面,创周及远处未损伤皮肤内含ＣＧＲＰ的神经分布密度改变。结果烫伤后１５ｍｉｎ在以上所有部位的含ＣＧＲＰ神经纤维分布密度明显下降,烫伤后６至１２ｈ达到最低值,而后逐渐恢复,相比之下,在创周恢复过程出现较早;此外,在创面和创周的真皮层ＣＧＲＰ免疫反应阳性的巨噬细胞样大细胞从局部血管中游出,烫伤后１２ｈ该细胞与含ＣＧＲＰ神经关系密切,烫伤后２４ｈ该细胞染色增强,破碎并释放大量ＣＧＲＰ免疫反应阳性的颗粒状物质,而后这些细胞在局部消失。结论在皮肤创面针对烧伤损害ＣＧＲＰ可能不仅从皮肤神经末端释放,也能由局部炎性细胞合成释放。     

大鼠皮肤降钙素基因相关肽正常分布及烫伤后改变规律

目的 探讨皮肤创面降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）的来源。方法 运用免疫组化技术检测烫伤后早期大鼠皮肤烫伤创面,创周及远处未损伤皮肤内含ＣＧＲＰ的神经分布密度改变。结果 烫伤后１５ｍｉｎ在以上所有部位的含ＣＧＲＰ神经纤维分布密度明显下降,烫伤后６至１２ｈ达到最低值,而后逐渐恢复,相比之下,在创周恢复过程出现较早;此外,在创面和创周的真皮层ＣＧＲＰ免疫反应阳性的巨噬细胞样大细胞从局部血管中游出,烫伤后１     

大鼠烫伤后肾上腺内含降钙素基因相关肽神经的改变

目的探讨皮肤烫伤早期大鼠肾上腺内降钙素基因相关肽(CGRP)变化规律,为阐明烫伤后肾上腺内分泌功能改变的机理提供资料。方法采用15%深Ⅱ度大鼠烫伤模型,以免疫组化方法分别检测烫伤后不同时相点肾上腺皮质、髓质 CGRP 免疫反应阳性神经和细胞分布密度的改变。结果①在肾上腺被膜,皮质,髓质均有含 CGRP 神经分布,其中髓质更为密集。在髓质可见含 CGRP 神经与 CGRP 免疫反应阳性细胞密切接触;②烫伤早期大鼠肾上腺皮质和髓质含 CGRP神经的分布密度均下降,但髓质内 CGRP 免疫反应阳性细胞的分布密度上升。结论降钙素基因相关肽可能是烫伤大鼠肾上腺功能改变的影响因素之一。     

大鼠烫伤后肾上腺内含降素基因相关肽神经的改变

目的 探讨皮肤烫伤早期大鼠肾上腺内降钙素基因相关肽（CGRP）变化规律,为阐明烫伤后肾上腺内分泌功能改变的机理提供资料。方法 采用15％深Ⅱ度大鼠烫伤模型,以免疫组化方法分别检测烫伤后不同时相点肾上肾皮质、髓质CGRP免疫反应阳性神经和细胞分布密度的改变。结果 ①在肾上腺被膜,皮质,髓质均有含CGRP神经分布,其中髓质更为密集。在髓质可见含CGRP神经与CGRP免疫反应阳性细胞密切接触;②烫伤早期大鼠肾上腺皮质和髓质含CGRP神经的分布密度均下降,但髓质内CGRP免疫反应阳性细胞的分布密度上升。结论 降钙素基因相关肽可能是烫伤大鼠肾上腺功能改变的影响因素之一。     

大鼠烫伤后肾上腺内含降钙素基因相关肽神经的改变

目的探讨皮肤烫伤早期大鼠肾上腺内降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）变化规律,为阐明烫伤后肾上腺内分泌功能改变的机理提供资料。方法采用１５％深Ⅱ度大鼠烫伤模型,以免疫组化方法分别检测烫伤后不同时相点肾上腺皮质、髓质ＣＧＲＰ免疫反应阳性神经和细胞分布密度的改变。结果①在肾上腺被膜,皮质,髓质均有含ＣＧＲＰ神经分布,其中髓质更为密集。在髓质可见含ＣＧＲＰ神经与ＣＧＲＰ免疫反应阳性细胞密切接触;②烫伤早期大鼠肾上腺皮质和髓质含ＣＧＲＰ神经的分布密度均下降,但髓质内ＣＧＲＰ免疫反应阳性细胞的分布密度上升。结论降钙素基因相关肽可能是烫伤大鼠肾上腺功能改变的影响因素之一。     

烫伤大鼠垂体前叶P物质和降钙素基因相关肽神经的变化

目的　观察烫伤早期大鼠垂体前叶P物质 (SP)与降钙素基因相关肽 (CGRP)神经的形态分布变化。　方法　采用大鼠 30 %TBSAⅢ度烫伤模型 ,于伤后 1、2、6、10、12、2 4、72h 7个时相点 ,对垂体前叶SP和CGRP两种肽能神经行免疫组织化学染色观察 ;经图像分析测定 ,比较两种神经覆盖面积的变化。　结果　两种肽能神经的形态变化明显 ;伤后 1hSP、CGRP神经数目与对照相比分别增加 85 .7%和 6 0 .5 % ,神经纤维的膨体、分枝等明显增多 ;2h后减少 ,2 4h后趋于恢复。图像分析显示 :两种肽能神经的覆盖面积呈正相关变化 ,其基本变化趋势为伤后 1h升高 ,随后降低 ,伤后 12h降至最低点 ,然后回升。　结论　烫伤后早期大鼠垂体前叶的SP与CGRP神经形态分布发生明显变化 ,可能参与了全身应激反应的功能调节     

胰岛素在烫伤大鼠脑组织中的表达

目的观察烫伤大鼠脑组织中胰岛素的表达情况。方法将15只Wistar大鼠背部造成30％TBSAⅢ度烫伤(烫伤组),于伤后4、12、24 h以Zamboni液行左心室灌注,然后取大鼠脑组织,用免疫荧光法检测脑组织中胰岛素的表达。另取10只大鼠作为对照组,除不烫伤外,其余处理同烫伤组。结果对照组大鼠脑组织中胰岛素的表达不明显。烫伤组大鼠伤后4 h脑组织的嗅球、大脑皮质等部位可见胰岛素免疫反应阳性细胞,其细胞胞体较大,呈椭圆形或梭形;胞核大、圆而透亮,突起明显;阳性产物主要分布于细胞的细胞质,少数细胞的突起内也可见明显的胰岛素阳性产物。伤后12、24 h烫伤组大鼠脑组织中未见胰岛素免疫反应阳性细胞。结论大鼠脑组织具有自身合成胰岛素的潜能,但在正常基础状态下合成量极少,而在烫伤的应激状态下合成量增加。     

端侧神经吻合后再生状况的实验研究

目的研究端侧神经吻合后,神经再生的可能性和再生纤维的类型.方法将失神经后的兔耳大神经制成端侧吻合模型,12只动物被分成2、4、6、8和12周5个实验组和1个正常对照组,在受神经侧注入HRP逆行示踪,实验到期后对耳大神经纤维和相应的神经节进行HRP染色和CGRP的免疫组化染色,光镜下观察结果.结果逆行示踪显示,神经端侧吻合2～4周时,供神经侧C2、C3背根神经节内无HRP标记阳性的细胞,至第6周,背根神经节内开始出现HRP阳性细胞,8～12周阳性细胞的数量更多,尤其是胞体直径在50μm以上的阳性细胞数显著增加;2～4周时CGRP免疫组化的染色显示,背根神经节内的CGRP阳性标记细胞逐步增强,6周以后阳性标记的细胞数量增加,阳性细胞的胞体直径在12～40 μm范围内,属于中小直径的细胞胞体,同时观察到供神经纤维内的CGRP阳性纤维逐步增多,并跨越神经吻合口长入受神经体内,8～12周背根神经节内的CGRP阳性标记细胞的增加不显著,吻合口及受神经体内的神经纤维也增加不明显.结论端侧神经吻合后再生纤维可长入移植体,纤维再生的顺序是细小类的纤维首先再生.     

巴曲酶对深Ⅱ度烫伤创面微循环血流变化及愈合的影响

目的　探讨巴曲酶对大鼠烫伤早期创面淤滞带微循环血流变化及愈合过程的影响。　方法　Wistar雄性大鼠 2 0只 ,随机分为烫伤对照组及巴曲酶治疗组 ,在各组动物背部均造成 4cm× 4cm大小深Ⅱ度烫伤。分别于伤前、伤后 0 .5、2、4、6、12、2 4、72h测定创面局部皮肤血流量 ;于伤后立即、伤后 14、18d测定烫伤面积及残留创面面积 ;于伤后 30d将大鼠处死取材行组织学观察及毛囊计数。　结果　大鼠伤后 2 72h皮肤血流量进行性减少 ;与对照组相比 ,给予巴曲酶后皮肤血流量得到明显改善 ,创面愈合速度明显加快 ,愈合后皮肤附件明显增多。　结论　巴曲酶能逆转烧伤后创面淤滞带循环 ,加快创面愈合速度和提高皮肤愈合质量     

Nerve reinnervation and itch behavior in a rat burn wound model

In this study, we investigated whether postburn itch in rats, after a full thickness burn, is correlated to the nervous reinnervation of the burn wound area. For this purpose, we determined scratching duration (expressed as second/hour) at 24 hours, 2, 4, 8, and 12 weeks postburn and combined this with immunohistochemistry for protein gene product 9.5 (PGP9.5) to identify all nerve fibers, calcitonin gene related peptide (CGRP) to identify peptidergic fibers, tyrosine hydroxylase (TH) for sympathetic fibers, and growth‐associated protein 43 (GAP‐43) for regrowing fibers. We found a modest, but highly significant, increase in scratching duration of all burn wound rats from 3 to 12 weeks postburn (maximally 63 ± 9.5 second/hour compared to sham 3.1 ± 1.4 second/hour at 9 weeks). At 24 hours postburn, all nerve fibers had disappeared from the burn area. Around 4 weeks postburn PGP 9.5‐ and CGRP‐immunoreactive nerve fibers returned to control levels. TH‐ and GAP‐43‐IR nerve fibers, which we found to be almost completely colocalized, did not regrow. No correlation was found between scratching duration and nervous reinnervation of the skin. The present results suggest that in rat, like in human, burn wound healing will induce increased scratching, which is not correlated to the appearance of nervous reinnervation.     

Localization of calcitonin gene-related peptide within the genitofemoral nerve in immature rats.

BACKGROUND/PURPOSE: Calcitonin gene-related peptide (CGRP) has been proposed to influence migration and testicular descent by release from the genitofemoral nerve. The site of CGRP within the nerve has been controversial, with conflicting views on whether CGRP is synthesised and released from the motor nerves. METHODS: The genitofemoral nerve (GFN) was retrogradely labelled by fluorescent dye (DAPI) in 25 Sprague-Dawley rats (days 5, 16, and 31, n = 8 in each group; day 35, n = 1). Spinal cords and dorsal root ganglia (DRG) were removed two to three days later and sectioned for immunofluorescence. Substance P and CGRP-containing cells were labelled with fluorescein-linked antibodies. Specimens were examined by double fluorescence to identify cells with both markers. RESULTS: The motor nucleus of the GFN contained 119 cells on day 7 and 284 cells by days 19 through 34. A prominent band of CGRP-containing fibers, arising from the dorsal horn, synapsed with the GFN motor nucleus itself. CGRP-labelled GFN cells were found in the DRG by double labelling. CONCLUSIONS: CGRP from the GFN may affect gubernacular migration by release from the sensory nerves, rather than motor nerves as previously thought. The GFN motor nucleus receives CGRP-containing innervation from the dorsal horn, which may form part of the cremasteric reflex.     

烫伤大鼠肠道P物质含量和P物质能神经的观察分析

以３０％ＴＢＳＡⅢ度烫伤大鼠为模型，采用ＲＩＡ和ＩＨＣ的方法，动态观察了伤后７２小时大鼠空肠免疫活性Ｐ物质（ｉＳＰ）的含量及绒毛内Ｐ物质－免疫反应（ＳＰ－ＩＲ）阳性神经纤维的变化。结果发现：①烫伤大鼠空肠内ｉＳＰ伤后１小时出现显著升高，４小时仍处于高水平状态；８小时后明显下降，伤后７２小时一直处于低水平状态。②绒毛内ＳＰ－ＩＲ阳性神经纤维在形态、分布密度和纤维内ＳＰ－ＩＲ物质的含量都有明显的改变。图像分析定量结果表明：绒毛内ＳＰ－ＩＲ阳性神经纤维分布密度，伤后１小时明显增加，随后减少，４８小时再次出现增加；神经纤维内ＳＰ－ＩＲ阳性物质伤后１小时及４小时明显升高，１２小时明显下降，２４小时后再次升高。实验结果说明：烫伤后大鼠空肠内Ｐ物质出现应激性释放与消耗，Ｐ物质可能参与了烫伤后大鼠的肠道损伤；肠绒毛内的Ｐ物质能神经纤维是肠粘膜屏障损伤的直接参与因素。     

烫伤大鼠肠道P物质含量和P物质能神经的观察分析

以30%TBSAⅢ度烫伤大鼠为模型,采用 RIA 和 IHC 的方法,动态观察了伤后72小时大鼠空肠免疫活性 P 物质(iSP)的含量及绒毛内 P 物质—免疫反应(SP—IR)阳性神经纤维的变化。结果发现:①烫伤大鼠空肠内 iSP 伤后1小时出现显著升高,4小时仍处于高水平状态;8小时后明显下降,伤后72小时一直处于低水平状态。③绒毛内 SP—IR 阳性神经纤维在形态、分布密度和纤维内 SP—IR 物质的含量都有明显的改变。图像分析定量结果表明:绒毛内 SP—IR 阳性神经纤维分布密度,伤后1小时明显增加,随后减少,48小时再次出现增加;神经纤维内 SP—IR 阳性物质伤后1小时及4小时明显升高,12小时明显下降,24小时后再次升高。实验结果说明:烫伤后大鼠空肠内 P 物质出现应激性释放与消耗,P 物质可能参与了烫伤后大鼠的肠道损伤;肠绒毛内的 P 物质能神经纤维是肠粘膜屏障损伤的直接参与因素。