Notch信号通路相关蛋白在前列腺癌中的表达及临床意义

目的 本研究旨在探讨Notch信号通路相关蛋白在前列腺癌中的表达及临床意义.方法 采用实时定量PCR(Q-PCR)和Western blotting方法检测135例新鲜前列腺癌病理组织标本及临近非肿瘤组织标本中Notch 1、Notch 3及Hes1 mRNA和蛋白表达情况.同时采用免疫组化方法检测135例前列腺癌病理组织标本与临近非肿瘤组织标本中Notch 1、Notch 3及Hes 1蛋白表达情况,并分析各蛋白表达与前列腺癌患者临床病理因素的关系.结果 135例新鲜前列腺癌病理组织标本Q-PCR及Western blotting结果表明,与临近非肿瘤组织相比,前列腺癌组织中Notch 1、Notch 3及Hes 1 mRNA和蛋白表达均上调(P均＜0.05).免疫组化的结果表明,59.26％(80/135)前列腺癌样本为Notch 1阳性,高于临近非肿瘤组织17.78％ (24/135)(P＜0.05);65.19％(88/135)前列腺癌样本为Notch 3阳性,高于临近非肿瘤组织22.22％(30/135) (P＜ 0.05);62.22％ (84/135)前列腺癌样本为Hes 1阳性,高于临近非肿瘤组织17.78％(24/135)(P＜0.05).统计分析证实Notch 1蛋白表达与前列腺癌的肿瘤转移密切相关(x2=7.532,P=0.003);Notch 3蛋白表达与前列腺癌的肿瘤转移密切相关(x2=7.532,P=0.003);Hes 1蛋白表达与前列腺癌的肿瘤大小密切相关(x2=6.781,P=0.012).结论 Notch信号通路相关蛋白Notch 1、Notch 3及Hes 1在前列腺癌患者组织中表达升高,Notch信号通路的激活可能在前列腺癌发生、发展过程中起重要作用.     

早中期食管鳞状细胞癌中Notch1与血管内皮生长因子C的表达及其意义

目的 研究Notch1与血管内皮生长因子C(VEGF-C)在早中期食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达及其与临床病理特征的关系.方法 收集2007年5月至12月在本院行食管癌根治术的40例早中期ESCC和8例正常食管组织病理标本,免疫组化方法检测Notch1和VEGF-C的表达,并探讨其与临床病理特征的关系,分析Notch1和VEGF-C表达的相关性.结果 与正常食管组织比较,早中期ESCC组织Notch1表达阳性率下降[47.5%(19/40)比100.0%(8/8),P=0.006)],而VEGF-C表达升高[67.5%(27/40)比0.0%(0/8),P=0.000].高、中、低分化ESCC组织中Notch1表达阳性率分别为80.0%(8/10)、50.0%(7/14)、25.0%(4/16),Notch1表达阳性率随肿瘤分化程度降低而降低(P=0.023),但在肿瘤浸润程度和淋巴结转移中差异无统计学意义(均P＞0.05).高、中、低分化ESCC组织中VEGF-C表达阳性率分别为30.0%(3/10)、71.4%(10/14)、81.3%(13/16),VEGF-C表达阳性率随分化程度的降低而升高(P=0.024).淋巴结转移阳性组VEGF-C表达阳性率高于淋巴结转移阴性组[100.0%(16/16)比45.8%(11/24),P=0.000].与T2分期组比较,T3～T4分期组ESCC组织VEGF-C表达阳性率升高[82.1%(23/28)比33.3%(4/12),P=0.000].Notch1与VEGF-C表达呈负相关(r=-0.486,P=0.003).结论 Notch1在早中期ESCC中表现为抑癌基因,其异常低表达可能是引起VEGF-C异常高表达的因素之一.     

星形细胞肿瘤中PTEN蛋白表达及与微血管密度的相关性

目的 :研究不同恶性程度星形细胞肿瘤中PTEN蛋白的表达及与肿瘤微血管密度 (MVD)之间的相关性。方法 :应用免疫组织化学S P法检测 72例星形细胞肿瘤和非肿瘤脑组织中PTEN蛋白的表达并对肿瘤MVD计数 ,分析其意义及两者间的相关性。结果 :PTEN阳性染色主要定位于细胞质中 ,肿瘤总阳性率为 5 4 17% (39/ 72 ) ,其中Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级者PTEN阳性表达率分别为 81 82 % (18/ 2 2 )、42 86 % (15 / 35 )和 37 5 0 % (6 / 15 )。星形细胞瘤PTEN表达率明显高于间变性星形细胞瘤和多形性胶质母细胞瘤 (P <0 0 1) ;星形细胞肿瘤MVD计数 ,72例肿瘤平均MVD为 38 2 2 ,其中Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级者MVD分别为2 8 81± 9 42、41 17± 13 96和 5 3 11± 15 85 ,肿瘤组各级别间差异均有显著性 (P <0 0 1) ;星形细胞瘤以窦状扩张型血管、间变性星形细胞瘤以芽状或条索状血管为主 ,而多形性胶质母细胞瘤部分以球状血管丛为特征 ;PTEN蛋白的表达与肿瘤中MVD呈负相关 (r =- 0 5 11,P <0 0 1)。结论 :PTEN基因突变或缺失在星形细胞肿瘤的发生发展中可能起重要作用 ,与肿瘤恶性分化程度密切相关 ;PTEN表达的检测结合MVD与形态的测定有助于提高评估患者术后生存的准确性     

Survivin在反应性和肿瘤性星形胶质细胞中的表达及意义

目的探讨survivin、bc l-2和K i-67在星形胶质细胞反应性增生与低级别星形胶质细胞瘤中表达的区别及意义。方法利用组织芯片和免疫组化PV6000通用型二步法检测正常脑组织、星形胶质细胞反应性增生、低级别(Ⅰ~Ⅱ级)和高级别(Ⅲ~Ⅳ级)星形胶质细胞瘤中survivin、bc l-2和K i-67蛋白的表达情况。结果正常脑组织中三者均为阴性表达;survivin、bc l-2和K i-67在星形胶质细胞反应性增生组中阳性率分别为26.7%、26.7%和22.2%;在低级别星形胶质细胞瘤组中阳性率分别为53.2%、50.0%和70.2%;在高级别星形胶质细胞瘤组中阳性率分别为88.1%、79.2%和95.2%。survivin、bc l-2和K i-67在增生组与低级别组之间差异均具有显著性(P<0.01)。结论survivin和bc l-2在星形胶质细胞反应性增生及星形胶质细胞瘤的发生、发展中起重要作用;survivin、bc l-2和K i-67联合应用在两者的鉴别诊断中可能有一定的意义。     

乳腺癌和癌旁乳腺组织中Notch1基因mRNA及蛋白的表达

目的 检测Notch1基因mRNA及Notch1蛋白在人乳腺癌和癌旁乳腺组织中的表达,分析其临床病理学意义.方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法榆测60例乳腺浸润性导管癌和60例癌旁乳腺组织中Notch1基因mRNA,应用免疫组织化学SP法检测60例乳腺浸润性导管癌、30例导管原位癌及60例癌旁乳腺组织Notch1蛋白的表达,分析Notch1表达水平与乳腺癌临床病理特征的相关性.结果 Notch1基因mRNA在人乳腺浸润性导管癌及癌旁乳腺组织中均有表达.Notch1蛋白在癌旁乳腺组织和导管原位癌中的阳性牢分别为55%(33/60)、70%(21/30),二者差异无统计学意义(P>0.05),在乳腺浸润性导管癌中的阳性率为90%(54/60),明显高于癌旁乳腺组织和导管原位癌的阳性率(P<0.05).乳腺浸润性导管癌Notch1蛋白的高表达与肿瘤的淋巴结转移(P=0.006)、病理学分级(P=0.001)和TNM分期(P=0.022)均呈显著正相关.结论 乳腺浸润性导管癌存在Notch1蛋白的高表达.Notch1蛋白高表达与乳腺癌的恶变演进有关.Notch1基因的表达可能影响乳腺癌的发生、发展.     

Notch1和JAG1在乳腺癌和癌旁组织的表达比较

目的 检测Notch1和JAG1在乳腺癌中的表达,及其与乳腺癌相关临床指标的关系,分析Notch基因在人类乳腺癌中的作用和意义.方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测60例乳腺癌组织和25例癌旁正常乳腺组织中Notch1和JAG1的表达, 对乳腺癌组织与癌旁组织进行表达率和表达强度标准化系数的统计学比较, 并在不同的腋窝淋巴结转移情况间、不同TNM分期和病理学分级间进行Notch1表达强度标准化系数的统计学比较.结果 乳腺癌组织Notch1的表达率和标准化系数分别为93.3%和0.83, 均明显高于癌旁正常乳腺组织, 乳腺癌组织中JAG1的表达率为10%,癌旁组织中无JAG1表达,伴腋窝淋巴结转移的病例Notch1标准化系数高于无腋窝淋巴结转移的病例;乳腺癌Ⅰ期病例Notch1标准化系数(0.57)低于Ⅱ期(1.05),Ⅱ期高于Ⅲ期(0.59),Ⅰ期与Ⅲ期差异无统计学意义;乳腺癌I级病例Notch1标准化系数(0.55)低于Ⅱ级(0.83)和Ⅱ级低于Ⅲ级(1.05),Notch1可能在分化较好的人乳腺癌中的表达是低的,在分化较差的人乳腺癌中的表达是增高的.结论 人类乳腺癌中存在Notch1和JAG1的异常高表达,而在癌旁正常乳腺组织存在Notch1和JAG1的低表达和不表达,该研究为进一步探明Notch基因的表达对乳腺癌的发生、发展的影响奠定了良好的基础.     

类风湿关节炎患者外周血单个核细胞Notch及其配体表达

为研究Notch信号途径在类风湿关节炎(RA)发病机制中的作用,选取活动期RA患者,采用流式细胞术结合细胞表面及细胞内染色技术检测外周血单个核细胞Notch受体及配体表达情况,并与正常对照进行比较。结果发现,活动期RA患者外周血T细胞Notch2、Notch3及Notch4表达较正常人明显增加,Notch1分子表达均较少,二者未见差异。其中表达Notch分子的细胞以CD4+T细胞为主。二者B细胞Notch1、Notch2、Notch3及Notch4的表达均较低,之间未见明显差异。RA患者单核细胞Jagged1分子表达明显增加,而Delta1表达降低。结果提示活动期RA患者外周血单个核细胞中不同群体细胞存在Notch及其配体表达水平的改变。     

少突胶质细胞瘤染色体1p/19 q杂合性缺失与p53蛋白表达的相关性研究

目的 探讨少突胶质细胞瘤染色体1p/19q杂合性缺失及p53蛋白的表达情况,与星形细胞起源的肿瘤进行比较研究并探讨其意义.方法 选择2004-2005年间,经病理组织学诊断为不同类型和级别的胶质瘤合计191例,包括:WHOⅡ级少突胶质细胞瘤116例,其中30例为新鲜组织;间变性少突胶质细胞瘤45例和不同级别星形细胞起源的肿瘤石蜡组织30例;采用PCR-微卫星技术检测染色体1p/19q杂合性缺失情况;采用免疫组织化学方法 对184例胶质瘤石蜡切片p53蛋白表达情况进行半定量分析.结果 86例WHO Ⅱ级少突胶质细胞瘤石蜡标本染色体1p缺失率为69.8%(60/86)、19q缺失率为64.0%(55/86)、1p/19q联合缺失率为57.0%(49/86);45例间变性少突胶质细胞瘤中,1p缺失率为71.1%(32/45)、19q缺失率为60.0%(27/45)、1p/19q联合缺失率为55.6%(25/45);两种级别间差异无统计学意义(P>0.05).30例WHO Ⅱ级少突胶质细胞瘤新鲜标本染色体1p缺失率为70.0%(21/30)、19q缺失率为63.3%(19/30)、1p/19q联合缺失率为60.0%(18/30),与石蜡标本的缺失率比较差异无统计学意义(P>0.05).30例星形细胞起源的肿瘤染色体对应三种缺失率分别为23.3%(7/30)、33.3%(10/30)及20.0%(6/30),与少突胶质细胞瘤差异有统计学意义(P<0.05).86例WHO Ⅱ级少突胶质细胞瘤中,仅7例有p53蛋白阳性表达(占8.1%);45例间变性少突胶质细胞瘤中,有14例呈阳性表达(31.1%),两者差异有统计学意义(P=0.007).少突胶质细胞瘤p53蛋白阳性表达明显低于星形细胞起源的肿瘤(P=0.001).在间变性少突胶质细胞瘤中,染色体1p/19q杂合性缺失与p53蛋白阳性表达呈负相关(P<0.05).结论 石蜡和新鲜组织均可用于染色体1p/19q杂合性缺失的检测.在间变性少突胶质细胞瘤中,染色体1p/19q杂合性缺失与p53蛋白阳性表达呈负相关.检测少突胶质细胞瘤染色体1p/19q杂合性缺失和p53蛋白表达,对提高病理诊断的精确性、指导治疗及预后判断具有重要意义.     

非小细胞肺癌中Notch1、HIF-1、VEGF蛋白及Notch1 mRNA的表达及意义

目的 探讨Notch1、HIF-1、VEGF蛋白及Notch1 mRNA在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织的表达及其临床病理学意义.方法 采用免疫组化SP法和原位杂交法分别检测65例NSCLC组织、15例正常支气管上皮组织中Notch1、HIF-1、VEGF蛋白及Notch1 mRNA的表达.结果 Notch1、HIF-1、VEGF蛋白及Notch1 mRNA在非小细胞肺癌中阳性表达率分别为81.5%(53/65)、96.9%(63/65)、93.8%(61/65)、73.8%(48/65),均明显高于正常支气管上皮组织阳性表达率(P<0.05);NSCLC中Notch1、HIF-1、VEGF蛋白及Notch1 mRNA的表达均与临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05);Notch1、HIF-1与VEGF蛋白间均正相关;Notch1蛋白与Notch1 mRNA的表达呈正相关.结论Notch1、HIF-1、VEGF蛋白及Notch1 mRNA在NSCLC中均表达上调,提示在肺癌的发生、发展中可能起重要作用;检测NSCLC组织Notch1蛋白及mRNA可作为判断肿瘤侵袭与转移的重要指标.     

Notch1受体在乳腺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系

目的 探讨Notch1受体与乳腺癌患者的临床病理特征及预后的关系.方法 应用免疫组化技术检测106例乳腺癌组织中Notch1受体、ER、PR、CerbB-2受体表达情况,分析其与临床病理特征及预后的相关性.结果 乳腺癌组织中Notch1受体表达明显高于癌旁正常组织(P＜0.05);Notch1受体表达与CerbB-2具有相关性(P＜0.05),与ER、PR无显著相关性(P＞0.05);Notch1受体高表达组5年生存率低于低表达组(P＜0.05).结论 乳腺癌组织中Notch1受体表达明显高于癌旁正常组织;Notch1受体表达与CerbB-2具有相关性,推测Notch1受体可能与CerbB-2存在交互作用;Notch1受体高表达与预后不良有关.     

Up-regulated expression of Notch1 and Jagged1 in human colon adenocarcinoma

Deregulated expression of Notch molecules is observed in many malignant tumors, however, the expression of Notch1 and Jagged1 in colon adenocarcinoma is still unknown. This study is to investigate the expression of Notch1 and Jagged1 in human colon adenocarcinoma. Sixty-five human colon adenocarcinoma and 60 adjacent nontumor colon tissue sections were detected by immunohistochemistry. Ten paired fresh surgical human colon adenocarcinoma and adjacent nontumor colon samples were analyzed by Western blot and RT-PCR. Both Notch1 and Jagged1 were expressed in the cytoplasm of neoplastic cells of colon adenocarcinoma tissue. The protein and mRNA levels of both molecules were higher in colon adenocarcinoma than in adjacent nontumor tissue. Moreover, Notch1 was positively correlated with tumor stage. This investigation demonstrates that Notch1 and Jagged1 are up-regulated in human colon adenocarcinoma and suggests that Notch1/Jagged1 signaling might play a role in the development of colon adenocarcinoma.     

Notch1信号在乳腺癌干细胞分化中的作用

目的 探讨Notch1信号与CK5、CK8在乳腺癌干细胞分化中的作用.方法 采用免疫组化SP法检测Notch1、CK5、CK8在96例乳腺浸润性导管癌中的表达.结果 Notch1在浸润性导管癌75%(72/96)表达; CK5在浸润性导管癌中17.7%(17/96)呈现阳性;CK8在浸润性导管癌中92.7%(89/96)表达.5例CK5 /CK8-表型病例中,有1例Notch1阳性;12例CK5 /CK8 表型病例中,4例伴Notch1阳性;77例CK5-/CK8 表型病例中,有67例伴Notch1的表达,并且Notch1与浸润性导管癌的这种免疫表型的分化模式呈相关关系(P=0.000).结论 Notch1信号在乳腺上皮干细胞恶性转化中表达上调,Notch1基因可能是一种癌基因,对乳腺癌干细胞的分化起调节作用.     

乳腺癌和乳腺导管内增生性病变Notch1基因甲基化的检测及临床意义

目的 探讨Notch1基因甲基化与乳腺浸润性导管癌(IDC)及乳腺导管内增生性病变的相关性.方法 用基质辅助激光解析电离时间飞行质谱仪(MALDI-TOF MS)对89例乳腺IDC、20例导管原位癌(DCLS)、11例不典型导管增生(ADH)及20例普通型导管增生(UDH)组织进行Notch1基因甲基化的定量检测.采用...     

连续血液净化对重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织及Notch1信号表达的影响

目的：探讨连续血液净化对重症急性胰腺炎（SAP）大鼠胰腺组织、Notch 信号表达的影响。方法：将大 鼠随机分为3 组,空白组仅作开腹处理,未建立SAP模型,SAP组和干预组均建立SAP模型,建模后干预组进行 12 h 连续连续血液净化,其余大鼠不进行连续血液净化。H-E 染色检测胰腺形态,并作病理评分,TUNEL 检测 胰腺细胞凋亡率,免疫印迹和PCR检测Notch 等信号蛋白和mRNA表达。结果：建模后12 h,SAP组病理评分与 空白组比较差异有统计学意义,干预组病理评分低于SAP组。SAP组胰腺细胞凋亡率与空白组比较升高明显,与 SAP组比较,干预组凋亡率降低,组间比较差异有统计学意义。3 组大鼠胰腺组织Notch1、Hes1、Bcl-2 及Bax 表达比较差异有统计学意义。SAP组胰腺组织中Notch1、Hes1、Bcl-2 蛋白及mRNA表达高于空白组,Bax 蛋白 及mRNA表达低于空白组;干预组胰腺组织中Notch1、Hes1、Bcl-2 蛋白及mRNA表达与SPA 组比较降低明显, Bax 蛋白及mRNA表达与SPA 组比较有所升高。结论：重症急性胰腺炎采用连续血液净化治疗后胰腺细胞凋亡减 少,胰腺组织病理损伤改善,其机制可能与抑制Notch1、Hes1、Bcl-2 表达,激活Bax 活性相关。     

Notch Signaling May Be Involved in the Abnormal Differentiation of Epidermal Keratinocytes in Psoriasis

Localization of each keratin isoform differs among epidermal layers. Proliferating basal cells synthesize keratin 14 (K14) and suprabasal cells express keratin 10 (K10) in normal skin. Notch signaling is essential for keratinocyte differentiation. Notch1 is expressed in all epidermal layers, Notch2 in the basal cell layer and Notch3 in basal cell and spinous cell layers in normal epidermis. It has been poorly elucidated how localization and expression levels of Notch molecules are related to epidermal molecular markers K10 and K14 in psoriatic skin with abnormal differentiation of epidermal tissue. This study aimed to investigate the relationship between abnormal differentiation of epidermal cells in psoriatic skin and expression of Notch molecules. We investigated keratins (K14 and K10) and Notches (1, 2, 3 and 4) using immunohistochemistry in psoriatic skin (n=30) and normal skin (n=10). In normal skin, K14 and K10 were discretely observed in the basal cell layer and suprabasal layer, respectively. In psoriatic skin, K14 was expressed in the pan epidermal layer while it and K10 were co-expressed in some middle suprabasal layer cells. Notch1, 2, 3, and 4 localized in all epidermal layers in normal skin. In psoriatic skin, Notch1, 2, and 4 mainly localized in suprabasilar layers and Notch3 is lacalized in pan epidermal, suprabasilar, and basilar layers. Protein and mRNA of Notch1, 2, and 3 isoforms decreased in psoriatic epidermis compared with normal epidermis. These data suggest that decrements in these Notch molecules might cause aberrant expression of K10 and K14 leading to anomalous differentiation of the epidermis in psoriatic lesions.     

Clinicopathological significance of aberrant Notch receptors in intrahepatic cholangiocarcinoma

Notch signaling has been reported to be activated to promote biliary epithelial cell differentiation and tubulogenesis during bile duct development. In this study, clinicopathological significance of aberrant expression of Notch receptors in intrahepatic cholangiocarcinoma (ICC) was investigated. Thus, forty-one ICC specimens were examined by immunohistochemistry using anti-Notch1-4 antibodies, respectively. Expression of Notch receptors was scored by percentage of positive tumor cells and intensity of immunostaining. Clinicopathological parameters and survival data were compared with the expression of Notch receptors, respectively. Expression of Notch receptors was identified in cancer cells, as well as in non-neoplastic cells. Compared with adjacent non-tumor liver tissues, Notch1 and 4 were up regulated, and Notch2 and 3 were relatively weaker. Positive immunostaining of Notch1 in ICC cells was detected in 34 cases (82.9%), Notch2 in 23 (56.1%), Notch3 in 16 (39.0%) and Notch4 in 14 (34.1%). Notch1 was overexpressed in cases with tumor size > 5 cm (P = 0.036). Expression of Notch2 was correlated inversely with histological grade (P = 0.016). Overexpression of Notch4 was more common in cases with serum CA125 > 35 U/ml than cases with CA125 ≤ 35 U/ml (P = 0.048). Expression of Notch3 was not correlated with any other clinicopathological parameters. Moreover, Notch4 was related to poor survival (P < 0.001). To conclude, this study reveals that aberrant expression of Notch receptors 1 and 4 might play important roles during ICC progression.     

佐剂关节炎大鼠肺功能与Treg、Notch信号通路的关系

目的:观察佐剂关节炎(Adjuvant arthritis,AA)大鼠肺功能、外周血调节性T细胞(Treg)及肺组织Notch通路变化。方法:将20只SD大鼠随机分为正常对照组(NC)和模型对照组(MC),每组10只;向MC组大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂0.1 ml致炎,复制成AA模型;致炎18天后,观察两组大鼠足跖肿胀度(E)、关节炎指数(AI)、肺功能、肺组织形态学变化,采用流式细胞术检测外周血Treg,PT-PCR法检测肺组织Notch受体及配体表达。结果:AA大鼠E、AI、1秒内平均呼气流量(FEV1/FVC%)、肺组织Notch3、Notch4及Delta1的表达明显升高;75%肺活量的最大呼气流量(FEF75)、用力最大呼气流量(PEF)、肺动态顺应性(Cldyn)降低,外周血CD4+CD25+Treg、肺组织Notch1、Jagged1、Jagged2的表达水平显著降低(P<0.01或P<0.05)。相关分析显示,肺功能参数FVC、FEF75与CD4+CD25+Treg呈正相关,FEF50、MMF与Jagged1、Notch1呈正相关;FEF25、FEF50、PEF与Delta1、Notch3、Notch4呈负相关(P<0.01或P<0.05)。结论:AA大鼠发生关节炎症同时,出现肺功能、Treg降低及Notch通路的变化;肺功能与Treg、Notch受体/配体呈高度相关性,提示Treg和Notch通路可能参与肺功能降低的过程。