DJ-1蛋白在喉鳞状细胞癌与Hep-2细胞系表达

 【目的】探讨DJ-1基因在喉鳞状细胞癌组织及Hep-2细胞系中的表达特征。【方法】采用间接免疫荧光方法,检测15例喉鳞状细胞癌手术切除癌组织、癌旁组织、正常黏膜标本和Hep-2细胞系的DJ-1蛋白。【结果】喉鳞状细胞癌组织与Hep-2细胞系中DJ-1蛋白均有表达;DJ-1蛋白在喉鳞状细胞癌组织的表达水平分别高于癌旁组织、正常黏膜组织,差异有统计学意义（F=8.098,P=0.002）;低分化喉癌较高分化喉癌的DJ-1水平增高,差异有统计学意义（t=3.099,P=0.008）;喉癌的临床分期和年龄与DJ-1蛋白的表达没有相关性（t=0.476,P=0.642;t=0.019,P=0.985）。【结论】喉鳞状细胞癌组织及Hep-2细胞系中均有DJ-1蛋白的表达,喉鳞癌组织内的表达高于癌旁组织和黏膜组织;DJ-1基因在喉鳞状细胞癌组织中的表达可能提示它参与了喉癌的发生发展的有关过程,为基因治疗提供了理论基础。     

AKT/mTOR信号通路在喉癌组织中的表达及意义

【目的】研究AKT/mTOR信号通路在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其与临床病理因素之间的关系。【方法】用免疫组化染色测定p-AKT和p-mTOR在喉癌（84例）、癌旁（24例）和正常黏膜组织（20例）中的表达情况,分析其与常见临床病理因素之间的关系。【结果】p-AKT在喉癌、癌旁和正常黏膜组织中的阳性表达分别为78.3%、29.2%、25%,p-mTOR在喉癌、癌旁和正常黏膜组织中的阳性表达分别为76.4%、50%、20%;AKT/mTOR信号通路的过度表达在喉癌、癌旁和正常黏膜组织中的表达呈递减的趋势;喉鳞状细胞癌组织中p-Akt与p-mTOR蛋白的表达呈正相关;此通路在喉癌组织中的表达与病理分化程度呈负相关性。【结论】AKT/mTOR信号通路在大部分喉癌组织中过度表达,可能是喉癌发生发展的重要机制之一。     

AKT/mTOR信号通路在喉癌组织中的表达及意义

【目的】 研究AKT/mTOR信号通路在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其与临床病理因素之间的关系。【方法】 用免疫组化染色测定p-AKT和p-mTOR在喉癌(84例)。癌旁(24例)和正常黏膜组织(20例)中的表达情况,分析其与常见临床病理因素之间的关系。【结果】 p-AKT在喉癌。癌旁和正常黏膜组织中的阳性表达分别为78.3%。29.2%。25%,p-mTOR在喉癌。癌旁和正常黏膜组织中的阳性表达分别为76.4%。50%。20%;AKT/mTOR信号通路的过度表达在喉癌。癌旁和正常黏膜组织中的表达呈递减的趋势;喉鳞状细胞癌组织中p-Akt与p-mTOR蛋白的表达呈正相关;此通路在喉癌组织中的表达与病理分化程度呈负相关性。【结论】 AKT/mTOR信号通路在大部分喉癌组织中过度表达,可能是喉癌发生发展的重要机制之一。     

RAD51及CHK1在喉鳞状细胞癌组织中的表达及意义

目的探讨RAD51及CHK1在喉鳞状细胞癌组织中的表达及意义。方法收集2012年1～12月于河北省眼科医院,经病理确诊且未经放化疗的喉鳞状细胞癌患者50例的癌组织、同一患者相对应的50例癌旁黏膜组织及17例非喉部恶性肿瘤疾病患者的喉部正常黏膜组织,采用免疫组化二步法检测标本组织中RAD51、CHKI的表达,分析二者间的关系。结果喉鳞状细胞癌组织中RAD51的阳性率（74．00％）明显高于相对应的癌旁黏膜组织（22．00％）,差异有统计学意义（x^2=11．235,P=0．014）;也高于非喉部恶性肿瘤疾病患者的喉部正常黏膜组织（17．64％）,差异有高度统计学意义（X2=12．346,P=0．001）。喉鳞状细胞癌组织中CHK1阳性率（78．00％）高于癌旁黏膜组织（16．00％）,差异有统计学意义（X2=9．235,P=0．041）;也高于正常黏膜组织（11．76％）。差异有统计学意义（x^2=11．386,P=0．010）;癌旁组织中CHK1的阳性率高于正常组织,但差异无统计学意义（x^2=1．245,P=0．612）。RAD51的阳性高表达与喉鳞状细胞癌的病理分级、淋巴结的转移、临床分期有关（P＜0．05）;CHK1的阳性表达与喉鳞状细胞癌的病理分级、淋巴结的转移、临床分期有关（P＜0．05）。喉鳞状细胞癌组织中RAD51的表达与CHK1的表达呈正相关（r=0．432,P＜0．01）。结论RAD51、CHK1在喉鳞状细胞癌组织中呈高表达,其表达与病理分级淋巴结的转移及临床分期有关,提示RAD51及CHK1的表达可能与喉鳞状细胞癌的预后和转移有关。     

应用免疫组织化学检测EphA2及其调节基因HoxA1、C-myc在喉癌组织中的表达及相互关系

目的：探讨同源异形盒基因A1（homeoboX genes A1,HoXA1）、癌基因（cancer-myc,C-myc）、促红细胞生成素产生肝细胞受体A2（erythropoietin-producing hepatocellular receptor A2,EphA2）与喉癌发生发展的关系,从分子生物学角度探讨喉癌的发病机制。方法40例喉癌组织及40例癌旁组织,取15例非喉癌患者的喉部正常黏膜组织做对照。所有肿瘤经病理检查证实为鳞状细胞癌,癌旁组织和正常组织取材经病理检查证实为炎症或正常。应用免疫组织化学检测喉癌组织、癌旁组织及喉部正常黏膜组织中 EphA2、HoXA1、C-myc 阳性表达率。结果EphA2、HoXA1、C-myc在喉癌组织中的阳性表达率分别高于癌旁组织和正常喉黏膜组织,而癌旁组织与正常喉黏膜组织间的表达差异无统计学意义。结论 EphA2蛋白、HoXA1蛋白、C-myc蛋白在喉癌中的表达与喉癌的发生、发展有关。     

FADD在喉癌的表达及临床意义

【目的】探讨FADD在喉癌组织中的表达情况及其与临床的关系。【方法】应用免疫组织化学方法检测30例喉鳞状细胞癌组织、20例喉乳头状瘤组织、20例癌旁正常粘膜组织中FADD的表达情况。【结果】（1）FADD在喉鳞状细胞癌组、喉乳头状瘤组及癌旁正常粘膜组中的阳性表达率分别为76.7%、90.0%、95.0%,阳性表达率总体有统计学意义（P〈0.05）。（2）FADD的阳性表达率在喉癌I~II期的阳性表达率为95.2%,III~IV期为50.0%,有统计学意义（P〈0.05）;在高分化癌组织中的阳性表达率为94.4%,中低分化癌组织中的阳性表达率为25.0%,有统计学意义（P〈0.05）。FADD阳性表达率与患者性别、年龄、不同临床分型及是否伴有淋巴结转移均无关,无统计学意义（P〉0.05）。【结论】FADD在喉癌的发生发展中起着重要的作用,癌组织中FADD的检测对临床预后的判断有一定的指导意义。     

MDM2蛋白在喉鳞状细胞癌中的表达意义

目的　初步探讨 MDM2在喉癌发生发展中的机制 .方法　采用链霉菌抗生物素蛋白 -过氧化物酶 (S- P)免疫组织化学法 ,检测 1 2例声带息肉 ,1 5例喉癌旁组织 ,1 1例喉不典型性增生及 41例喉鳞状细胞癌组织中 MDM2蛋白的表达 ,并研究蛋白表达与肿瘤病理分级、临床分期、临床分型、淋巴结转移的关系 .MDM2蛋白阳性表达为核着色 .结果　 MDM2蛋白表达阳性率在各个组分别为声带息肉 0 .0 % ,喉癌旁组织40 .0 % ,喉不典型性增生 72 .7% ,喉鳞状细胞癌组织 39.0 % .MDM2蛋白表达在声带息肉组与癌旁组织组、声带息肉组与喉不典型性增生组、声带息肉组与喉鳞状细胞癌组织组、喉不典型性增生组与喉鳞状细胞癌组织组 (P<0 .0 5)均有显著性差异 .喉鳞状细胞癌组 MDM2蛋白表达与临床分期有关 ,与病理分级、临床分型、淋巴结转移无关 .结论　 MDM2基因在喉癌发生、发展中有重要作用 ,其异常表达是喉癌发生中早期分子事件 ,检测 MDM2蛋白有助于喉癌早期诊断     

TIMP-2和VEGF表达与喉癌预后关系

目的 探讨组织基质金属蛋白酶抑制剂2（TIMP-2）和血管内皮生长因子（VEGF）与喉鳞状细胞癌预后的关系。方法 用EnVision免疫组化方法检测38例喉鳞状细胞癌及19例喉癌旁正常组织中TIMP-2和VEGF的表达;术后随访3～5年,患者中局部复发4例,颈淋巴结转移2例,肺部转移1例。结果 喉鳞状细胞癌组织中TIMP-2和VEGF的表达水平高于癌旁正常组织（P〈0．05）,无瘤生存的喉癌组织中VEGF的表达水平及VEGF／TIMP-2的比值均高于术后复发转移组（P〈0．01）,TIMP-2的表达水平前组低于后组（P〈0．01）。结论 TIMP-2和VEGF的表达水平及两者的比值与喉鳞状细胞癌的预后有关。     

喉黏膜白斑和喉鳞状细胞癌中survivin表达的意义

目的 探讨survivin蛋白在喉黏膜白斑和喉鳞状细胞癌中的表达情况及其意义。方法 通过免疫组化法对28例喉黏膜白斑、46例喉鳞状细胞癌、24例癌旁组织和16例正常喉黏膜中survivin的表达情况进行检测。结果 发现survivin蛋白在喉黏膜白斑、喉癌组织和癌旁组织中的阳性表达率分别为46．43％（13／28）、71.74％（33／46）、33．33％（8／24）；在正常黏膜组织中没有表达，喉癌组中的阳性表达率分别显著高于正常组织、癌旁组织、喉黏膜白斑中的表达率。中重度不典型增生喉黏膜白斑组的阳性表达率（66．67％）显著高于轻度不典型增生的阳性表达率（23．08％），发生了恶变的5例喉黏膜白斑组织中survivin蛋白均为阳性表达，但与喉癌的发生部位、分级、分期、淋巴结转移以及病理分级没有关联。结论 survivin在中重度不典型增生喉黏膜白斑组织和喉癌组织中过度表达，参与了喉癌的形成，是喉癌形成的一个早期事件，可望成为预测喉癌癌前病变发展成恶性肿瘤的一个诊断工具。     

肿瘤干细胞标志物CD44v6在喉鳞癌中的表达及意义

目的 研究肿瘤干细胞标志物CD44v6蛋白在喉癌组织与喉癌Hep-2细胞表达的相关性;探讨其与喉癌患者临床病理参数间的关系;分析肿瘤干细胞标志物CD44v6蛋白作为喉癌干细胞标志物的合理性.方法 采用免疫组化及免疫细胞化学技术分别检测53例喉鳞癌组织、20例喉癌旁正常组织及3组喉癌Hep-2细胞的CD44v6蛋白表达.结果 CD44v6蛋白在喉癌组织中阳性率为75.4%,正常喉黏膜组织中阳性率10%,差异有统计学意义(P<0.05).CD44v6蛋白表达阳性率与病理学分级、T分期相关(P<0.05),与临床分型及有无颈淋巴结转移组无相关性(P>0.05).喉癌Hep-2细胞的CD44v6蛋白阳性表达率分别为72%、75%、76%,平均为74.3%.结论 肿瘤干细胞标志物CD44v6蛋白在喉癌组织与喉癌Hep-2细胞中有相似的阳性表达率;CD44在喉鳞状细胞癌的发生发展过程中发挥着一定的作用,肿瘤干细胞标志物CD44v6蛋白是否可以作为喉癌干细胞的标志物尚需更多的实验研究.     

Survivin在肾癌组织和肾癌细胞系中的表达及意义

目的探讨存活蛋白(Survivin)在肾癌和肾癌细胞系中的表达情况及其与肾癌发生发展的关系。方法应用免疫组化方法检测66例肾癌患者和20例正常肾组织中Survivin的表达情况,应用Western blot和RT-PCR检测10例肾癌组织,正常肾组织及两种肾癌细胞系786-0和ACHN中Survivin的表达情况。结果肾癌组织和正常肾组织吸光度分别为0.031±0.002和0.875±0.124,差异具有显著性意义(P<0.01)。透明细胞癌,嗜色细胞癌和嫌色细胞癌吸光度值分别为0.873±0.091,0.904±0.103和0.813±0.126,各类型间差异无显著性意义。临床分期Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ、Ⅳ吸光度值分别为0.864±0.121,0.884±0.093和0.853±0.106,各期间比较差异无显著性意义。肾癌组织G1,G2,G3和G4吸光度值分别为0.693±0.092,0.762±0113,0.876±0.106和0.903±0.092,各级间比较,差异具有显著性意义(P<0.05)。Western blot和RT-PCR检测结果显示,正常肾组织表达阴性,肾癌组织和两种肾癌细胞系786-0和ACHN均有不同程度的Survivin蛋白和mRNA表达,统计学表明差异有显著性意义。结论Survivin和肾癌的分期,分型无关,和肾癌的分级有关,可以作为判断预后的标志物。     

漂洗技术对血液中肿瘤细胞去除作用的研究

目的　观察血液回收机漂洗技术能否将血液中的肿瘤细胞去除。方法　选择繁殖能力强 ,不易受损的细胞系肠肿瘤细胞LOVO和胃肿瘤细胞SGC ,计数后分别混入浓缩的红细胞中。采用血液回收机将其过滤、离心、漂洗。在漂洗后的浓缩红细胞中分离肿瘤细胞 ,台盼蓝染色计数存活的肿瘤细胞。将分离出的肿瘤细胞培养 1 4d ,进行克隆形成实验及DNA代谢物测定 ,观察肿瘤细胞的活性。结果　经血液回收机漂洗后仍然存在肿瘤细胞 ,但活性受到显著抑制 ;细胞培养 7d时 ,未发现肿瘤细胞有克隆形成 ;培养 1 4d后 ,肿瘤细胞有克隆形成。免疫组化实验显示 ,漂洗后肿瘤细胞DNA合成能力与对照组无显著性差异。结论　单纯采用血液回收机漂洗技术可显著减少血液中的肿瘤细胞 ,但不能完全去除血液中的肿瘤细胞     

维生素C对Hela细胞系增殖及细胞周期的影响

目的 探讨维生素C对Hela细胞系增殖及细胞周期的影响。方法 采用MTT测定，观察不同浓度维生素C(1μmol／L～3500μmol／L)对Hela细胞系增殖的抑制作用；运用流式细胞仪检测用药后细胞周期分布及增殖指数的变化。结果 各个浓度的维生素C对Hela细胞系增殖均有抑制作用，并呈剂量依赖性，3500μmol／L时，抑制率为66．15％。维生素C能使Hela细胞系阻滞于G0／G1期，抑制DNA的合成，使细胞增殖指数明显下降。且此作用随用药浓度的增加而增强。结论 维生素C在体外对Hela细胞系有明显的抑制作用，使细胞阻滞于G0／G1期。     

细胞周期素A在肾癌细胞增殖中的作用

目的研究细胞周期素A在肾癌组织中的表达及其在肾癌细胞增殖中的作用.方法应用免疫组化SABC法检测肾癌及正常肾组织中细胞周期素A及Ki--67基因的表达,运用统计学方法分析其差异,并通过Ki-67表达指数评价细胞周期素A在肾癌细胞增殖中的作用.结果细胞周期素A在肾癌及正常肾组织中的阳性表达率分别为12.12%和5.09%(P＜0.01).在肾癌组织中,病理分级较高、术后生存时间＜5年者呈高表达(P＜0.01),不同临床分期及有(无)局部淋巴结转移的肿瘤之间表达无显著差异(P＞0.05).Ki-67指数较高者,细胞周期素A呈高表达(P＜0.01),细胞周期素A阳性表达率与Ki-67指数显著相关(r=0.757,P＜0.01).结论细胞周期素A可能参与肾癌的恶性转化,但与肿瘤的临床进展过程无关.检测细胞周期素A的水平可反映肾癌细胞的增殖活性,并可作为肾癌预后估计的参考指标.     

SELDI-TOF-MS检测正常肾细胞株与肾癌细胞株的差异表达蛋白

目的分析体外培养的正常肾细胞株和肾癌细胞株的蛋白质表达差异。方法运用表面增强激光解吸离子化蛋白质芯片（SELDI-TOF-Ms）技术检测常规体外培养的正常肾细胞株（HK-2）和肾癌细胞株（786-0）。2种细胞株均用IMAC3（固定金属亲和）和WCX2（弱阳离子交换）2种芯片检测。采用PBSIIC型蛋白质芯片阅读机读取数据，Ciphegenproteinchip3．1软件采集数据，BiomarkerWizard软件分析2种细胞株的蛋白差异。结果SELDI-TOF-MS技术检测发现体外培养的肾癌细胞株与正常肾细胞株的蛋白质存在差异表达，共有15个蛋白质水平发生变化。IMAC3芯片发现差异峰6个，WCX2芯片发现差异峰9个。结论肾癌细胞株与正常肾细胞株之间的蛋白质谱有差异蛋白表达。     

DADS诱导人白血病细胞分化中的代谢变化

目的 研究二烯丙基二硫诱导人髓性白血病HL-60细胞分化过程中蛋白质组的差异表达.方法 运用蛋白质组学方法(双向凝胶电泳、质谱分析、生物信息学方法)分析鉴定DADS诱导HL-60细胞分化的差异表达蛋白质.结果 初步鉴定的差异表达蛋白质点中二型碳酸酐酶、磷酸丙糖异构酶、醛缩酶A在处理组中均表达下调,其功能与细胞代谢调节有关.结论 DADS可通过抑制二型碳酸酐酶表达和抑制糖酵解途径,抑制HL-60细胞增殖,诱导其分化.     

非小细胞肺癌中人乳头瘤病毒感染与细胞增殖及凋亡的关系

目的探讨人乳头瘤病毒（HPV）16、18型感染与原发性非小细胞肺癌（NSCLC）组织中细胞增殖及凋亡的关系及其意义。方法应用PCR、TUNEL和免疫组化SP法分别检测76例NSCLC及13例肺良性病变中HPV16、18型DNA、细胞凋亡和增殖细胞核抗原（PCNA）的表达，并分别计算增殖指数（MI）和凋亡指数（AI）。结果NSCLC中HPV16、18型总阳性率为40．8％（31／76），而肺良性病变组阳性率为7．7％（1／13），差异有显著性意义（P〈0．05）。HPV感染在不同组织学类型及有无淋巴结转移间差异无显著性意义，而在不同组织分化程度间差异有显著性意义（P〈0．05）。NSCLC中HPV阳性组与阴性组之间MI及AI差异均有显著性意义（均P〈0．05）。结论HPV16、18型感染在NSCLC发生中可能有病因学意义，其致癌机制之一可能通过减少癌变细胞凋亡和促进细胞异常增殖而导致细胞癌变。     

番茄红素对人前列腺癌PC-3细胞周期的阻滞作用

目的:研究番茄红素对人前列腺癌PC-3细胞周期的阻滞作用及分子机制.方法 体外培养PC-3细胞,采用MTT、细胞计数法、流式细胞仪和Western blotting方法分析番茄红素对PC-3细胞增殖的抑制作用、对细胞周期分布的影响及细胞周期相关蛋白的表达.结果 不同浓度番茄红素(1.5、3.0、6.0和12.0μmol/L)处理PC-3细胞48 h后,生长抑制率分别为11.34%、19.59%、30.92%、52.58%;常规培养PC-3细胞群体倍增时间为29.04 h,番茄红素浓度由1.5 μmol/L增加到12.0 μmoL/L时,其细胞群体倍增时间由36.58 h延长到88.32 h;流式细胞仪分析显示,番茄红素呈浓度依赖性将PC-3细胞阻滞在G0/G1期;在细胞周期阻滞的同时有P21 WAF1蛋白表达上调.结论 番茄红素对PC-3细胞的抑制增殖作用与G0/G1期阻滞有关,其分子机制可能与调节P21 WAF1表达有关.     

增殖细胞核抗原与口腔鳞癌预后的关系

对52例口脸粘膜鳞癌的石蜡包埋材料，用ABC法显示增殖细胞核抗原（Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达。根据PCNA表达的不同进行分级，其中阳性率＜25％为I级（低恶），25％－50％为Ⅱ级（中恶）＞50％为Ⅲ级（高恶）。结果表明，随PCNA分级从I－Ⅲ级生存率逐渐降低（P＜0．005）。PCNA分级在口腔粘膜鳞癌预后的判断有重要意义。