冷冻胚胎解冻移植264个周期临床分析

 【目的】探讨影响冷冻胚胎解冻移植妊娠率的因素。【方法】收集2001年11月到2006年1月264位病人在本中心进行冷冻胚胎解冻移植264个周期的资料,进行回顾分析。【结果】264个周期中有67个周期妊娠,周期妊娠率25.38%。妊娠组平均每次移植胚胎个数多于非妊娠组(2.84±0.57 vs 2.45±0.82,P<0.05),移植1个、2个、3个及以上冷冻解冻胚胎的妊娠率分别为9.38%、18.67%、38.22%,其中移植3个及以上胚胎者的妊娠率高于移植1个和2个胚胎者的妊娠率(P<0.05)。胚胎解冻后体外培养24h平均细胞数增长率≥50%者的妊娠率(34.43%)高于增长率<50%者(17.28%),P<0.05,至少移植一个胚胎细胞数在6细胞及以上的周期妊娠率明显高于移植胚胎细胞数小于6细胞的周期(35.85% vs 16.67%,P<0.05);移植Ⅰ级胚胎与Ⅱ级胚胎的妊娠率分别为35.26%、17.58%,P<0.05。新鲜移植周期妊娠者其冻融周期妊娠率为42.86%,而在新鲜移植周期未妊娠者其冻融周期妊娠率为28.31%,差异有显著性,P<0.05。自然周期、激素替代周期妊娠率分别为28.21%、21.30%，无统计学差异。LH峰日内膜厚度及类型无统计学差异。【结论】移植胚胎的个数、质量、发育潜能、原新鲜周期的结局影响冷冻胚胎移植能否妊娠。     

影响冻融胚胎复苏率和移植成功率因素分析

目的探讨影响冻融胚胎复苏率和移植成功率的相关因素。方法回顾性分析573个冷冻胚胎移植（FET）周期的临床资料,按冷冻前胚胎质量、胚胎发育时间、解冻后胚胎复苏程度和冷冻方法分别进行分组,分析不同分类各组间的胚胎复苏情况和（或）临床妊娠率差异。结果冷冻当天胚胎中有优质胚胎者的临床妊娠率显著高于无优质胚胎者（31．8％vs20．0％）（P〈0．05）。受精第2天冷冻者与受精第3天冷冻者的胚胎复苏率和临床妊娠率差异无统计学意义（79．1％vs82．9％和25．5％vs31．2％）（P〉0．05）。解冻后完全移植100％卵裂球完整者和混合移植者的临床妊娠率显著高于完全移植部分卵裂球损伤者（36．7％vs24．1％和29．2％vs24．1％）（P〈0．05）。冷冻方法改进后的胚胎复苏率和全胚复苏率显著高于冷冻方法改进前（82．0％vs66．3％和50．0％vs27．5％）（P〈0．05）。结论胚胎质量与胚胎复苏率和临床妊娠率密切相关,冷冻胚胎解冻后全胚复苏率与临床妊娠率正相关,冷冻过程中的操作细节是胚胎实验室保证冻融胚胎复苏、移植成功的重要因素。     

改良拮抗剂方案促排卵治疗后冻融胚胎移植与新鲜胚胎移植的临床结局比较

【目的】探讨改良拮抗剂方案促排卵治疗后冻融胚胎移植的临床结局是否优于新鲜胚胎移植。【方法】回顾性分析本中心2012年6～9月采用改良拮抗剂方案促排卵后将全胚冷冻后再行冻融胚胎移植的患者（冻胚组,68例）与当周期行新胚移植（鲜胚组,82例）的临床结局。【结果】冻胚组胚胎着床率、临床妊娠率分别为43．38％、66．17％,较鲜胚组胚胎着床率（30．98％）、临床妊娠率（42．68％）明显升高（P〈0．05）,而其流产率（8．89％VS11．43％）和多胎妊娠率（31．1％VS34．3％）比较差异均无显著性（均P〉0．05）。【结论】改良拮抗剂方案促排卵治疗中将全胚冷冻保存后再行冻融胚胎移植可以大大地提高临床妊娠率。     

超声引导下宫腔内胚胎移植术的临床观察

 【目的】研究腹部超声引导下胚胎移植对体外受精-胚胎移植结局的影响。【方法】回顾性分析2001年7月至2005年3月，在本中心接受体外受精-胚胎移植（包括卵母细胞内单精子注射）治疗的461名患者521个周期的资料，按照胚胎移植时有无B超引导分为常规胚胎移植组（A组）和超声引导下胚胎移植组（B组），分别有187个周期和334个周期，比较两组患者的临床妊娠率、胚胎种植率、胚胎残留率和异位妊娠率。【结果】A组和B组的周期妊娠率分别是35．8％（67／187）和38.3％（128／334），P〉0．05；胚胎种植率分别是17．4％（104／599）和23．2％（179／773），P〈0．01；胚胎残留率分别是3．7％（7／187）和0．3％（1／334），P〈0．01；异位妊娠率分别是3．0％（2／67）和1．6％（2／128），P〉0．05。【结论】腹部超声引导下胚胎移植能提高体外受精-胚胎移植的胚胎种植率，降低胚胎残留率，可能有助于改善临床妊娠率和降低异位妊娠率，是一种有效的胚胎移植方法。     

超声引导下宫腔内胚胎移植术的临床观察

【目的】研究腹部超声引导下胚胎移植对体外受精-胚胎移植结局的影响。【方法】回顾性分析2001年7月至2005年3月，在本中心接受体外受精-胚胎移植（包括卵母细胞内单精子注射）治疗的461名患者521个周期的资料，按照胚胎移植时有无B超引导分为常规胚胎移植组（A组）和超声引导下胚胎移植组（B组），分别有187个周期和334个周期，比较两组患者的临床妊娠率、胚胎种植率、胚胎残留率和异位妊娠率。【结果】A组和B组的周期妊娠率分别是35．8％（67／187）和38.3％（128／334），P〉0．05；胚胎种植率分别是17．4％（104／599）和23．2％（179／773），P〈0．01；胚胎残留率分别是3．7％（7／187）和0．3％（1／334），P〈0．01；异位妊娠率分别是3．0％（2／67）和1．6％（2／128），P〉0．05。【结论】腹部超声引导下胚胎移植能提高体外受精-胚胎移植的胚胎种植率，降低胚胎残留率，可能有助于改善临床妊娠率和降低异位妊娠率，是一种有效的胚胎移植方法。     

224例冻融胚胎移植周期分析

目的：探讨胚胎冷冻时机对复苏后胚胎发育的可能影响，并分析移植胚胎数量和质量与冻融胚胎移植妊娠结果的关系。方法：（1）将224个冻融胚胎移植周期，根据冷冻时间分为第2天（D2组）97例，第3天（D3组）127例两组，回顾比较解冻后两组的胚胎存活率、胚胎完好率和临床妊娠率等.（2）比较了移植不同胚胎个数（3、2、1个）和优质胚胎个数（3、2、1、0个）的临床妊娠率。结果：（1）D2组胚胎完好率为54．28％，显著高于D3组的40．65％（P〈0．05），D2组的胚胎存活率、妊娠率、种植率、多胎率和流产率分别为82．57％、26．80％、13．01％、34．62％、11．54％，与D3组（82．17％、37．01％、17．66％、36．17％、17．02％）的差异均无显著性（P〉0．05）。（2）移植3、2、1个胚胎分别可获得34．62％、26．47％、12．5％的临床妊娠率，各组之间比较差异无显著性（P〉0．05）；移植3个或2个优质胚胎的临床妊娠率没有差异，但其临床妊娠率显著高于只移植1个或没有优质胚胎组。结论：胚胎冷冻时机对早期分裂胚胎的发育潜能没有影响。冻融胚胎移植周期的妊娠率与移植的优质胚胎数目有关。     

体外受精治疗周期中剩余胚胎囊胚培养的临床价值

目的探讨体外受精治疗周期中d3移植和冷冻后剩余胚胎的体外发育潜能。方法对剩余胚胎继续培养至囊胚期,观察其囊胚发育率和质量,并分析治疗周期中剩余胚胎囊胚形成情况和妊娠结局的关系。结果收集115个IVF／ICSI-ET周期中的603枚剩余胚胎,囊胚培养后获得了222枚囊胚（36．82％）,其中优质囊胚49枚（8．13％）;36个周期（31．30％）共获得53枚冷冻囊胚（8．79％）;12例含有剩余胚胎来源囊胚的解冻移植周期,临床妊娠4例;≥6细胞、2PN来源胚胎囊胚形成率显著高于其他组（P〈0．05）;剩余胚胎有囊胚形成的周期临床妊娠率显著高于无囊胚形成组（P〈0．05）。结论根据d3胚胎形态学评分预测其发育潜能有一定局限性;通过囊胚培养筛选出剩余胚胎中具有发育潜能的并冷冻保存,是提高病人每个治疗周期可用胚胎数的可行方法;剩余胚胎囊胚形成情况可有效预测妊娠结局。     

三种不同受精方式的冻融胚胎和囊胚分娩结局及新生儿状况

目的比较三种不同受精方式的冻融胚胎和囊胚解冻移植后分娩结局及新生儿状况。方法回顾分析2012年1月～2013年4月于广西科技大学附属妇产医院生殖中心行冷冻胚胎移植（frozen—thawedembryotrans—fer,FET）治疗的2384个周期,按受精方式分为三组：A组常规体外受精（IVF）冻融胚胎解冻周期1436例,移植周期1429例,妊娠481例,分娩385例;冻融囊胚解冻周期545例,移植周期539例,妊娠284例,分娩238例。B组卵胞浆内单精子注射（ICSI）冻融胚胎解冻周期240例,移植周期239例,妊娠77例,分娩63例;冻融囊胚解冻周期66例,移植周期64例,妊娠28例,分娩23例。C组早期补救性卵胞浆内单精子注射（r-ICSI）冻融胚胎解冻周期65例,移植周期65例,妊娠16例,分娩14例;冻融囊胚解冻周期32例,移植周期31例,妊娠17例,分娩17例。比较三组妊娠率、流产率、异位妊娠率、早产率、平均早产孕龄、足月产率、平均足月产孕龄、新生儿男女性别比例、出生体重、出生缺陷等指标是否存在差异。结果A、B、C三组的冻融胚胎的妊娠率分别为33．6％、32．6％、24．6％,囊胚的妊娠率分别为52．7％、43．7％、54．8％,差异均无统计学意义（P〉0．05）。三组冻融胚胎和囊胚的流产率、异位妊娠率、早产率、平均早产孕龄、足月产率、平均足月产孕龄、出生体重、出生缺陷比较差异无统计学意义（P〉0．05）。A、B、C三组冻融胚胎的新生儿男女性别比差异有统计学意义（P〈0．05）,而冻融囊胚的新生儿男女性别比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论与常规IVF相比,ICSI、r-ICSI的冻融囊胚和冻融胚胎是安全有效的治疗手段。     

细胞松弛素B和解冻方法对玻璃化冷冻小鼠卵母细胞的影响

 【目的】探讨细胞松弛素B和解冻程序对玻璃微细管法（GMP）玻璃化冷冻小鼠卵母细胞的影响。【方法】以小鼠MII期卵母细胞为模型，研究冷冻前细胞松弛素B预处理、不同解冻程序对小鼠卵母细胞冷冻效果的影响；随后对经GMP玻璃化冷冻的卵母细胞直接进行培养以检测冷冻是否诱发孤雌发育。【结果】与对照组相比．细胞松弛素B预处理的卵母细胞存活率、受精率、卵裂率及囊胚率没有显著差异（89．3％vs91．3％．44．0％vs40．4％，30．0％vs27．7％，4．0％vs6．4％；P〉0．05）；采用连续浓度梯度递减解冻法的受精率明显高于间断浓度梯度递减解冻法（57．4％vs40．4％；P〈0．05），且前者的卵裂率和囊胚发育率也相对较高f40，2％vs27，7％，14．5％vs6．4％；P〉0．05）。冷冻复苏后卵母细胞的孤雌发育率稍高于未经冷冻的卵母细胞（17．1％vs3．2％；P〉0．05）。【结论】细胞松弛素B预处理对MII期小鼠卵母细胞的GMP玻璃化冷冻保存效果没有影响：采用连续浓度梯度递减解冻法能明显提高复苏后卵母细胞的体外发育能力。     

细胞松弛素B和解冻方法对玻璃化冷冻小鼠卵母细胞的影响

【目的】探讨细胞松弛素B和解冻程序对玻璃微细管法（GMP）玻璃化冷冻小鼠卵母细胞的影响。【方法】以小鼠MII期卵母细胞为模型，研究冷冻前细胞松弛素B预处理、不同解冻程序对小鼠卵母细胞冷冻效果的影响；随后对经GMP玻璃化冷冻的卵母细胞直接进行培养以检测冷冻是否诱发孤雌发育。【结果】与对照组相比．细胞松弛素B预处理的卵母细胞存活率、受精率、卵裂率及囊胚率没有显著差异（89．3％vs91．3％．44．0％vs40．4％，30．0％vs27．7％，4．0％vs6．4％；P〉0．05）；采用连续浓度梯度递减解冻法的受精率明显高于间断浓度梯度递减解冻法（57．4％vs40．4％；P〈0．05），且前者的卵裂率和囊胚发育率也相对较高f40，2％vs27，7％，14．5％vs6．4％；P〉0．05）。冷冻复苏后卵母细胞的孤雌发育率稍高于未经冷冻的卵母细胞（17．1％vs3．2％；P〉0．05）。【结论】细胞松弛素B预处理对MII期小鼠卵母细胞的GMP玻璃化冷冻保存效果没有影响：采用连续浓度梯度递减解冻法能明显提高复苏后卵母细胞的体外发育能力。     

体外受精非优质胚胎冻融的临床价值

目的探讨体外受精非优质胚胎冻融的临床价值。方法对接受冻融胚胎移植的653个周期患者的临床资料进行回顾性分析。结果冻存胚胎根据质量分为优质组、混合组、非优质组。3组两两比较解冻后胚胎存活率、卵裂球完整率，非优质组明显低于混合组（P〈0．05），后者也低于优质组（P〈0．05），但各组的胚胎利用率、流产率无明显差别（P〉0．05）。优质组的临床妊娠率与混合组差别无统计学意义（P〉0．05），但皆高于非优质组（P〈0．05）。结论冻存体外受精非优质胚胎可提高胚胎利用率和累积临床妊娠率，具有重要的临床价值。     

Review of Obstetrics and Perinatal Outcome of Multiple Pregnancies with Vanishing and Selective Embryo Reduction in an Oocyte Donation Program

To check previous findings of the most common complications among pregnancies with vanishing embryo（VE） in another actual study retropective and in group of patiens with selective embryo reduction （SER） Methods We defined vanishing phenomenon as the spontaneous loss of one or more embryos after visualizing heart activity at the first trimester of pregnancy. Selective embryo reduction was performed between 8th-12th pregnancy week, through vaginal punction and aspiration of embryonic mass. Results Vanishing embryo was observed in 86 patients （18.0%）. In 61 patients （70.9%） this phenomenom happened before 9th pregnancy week. The incidence of VE increased with higher number of gestational sacs initially visualized （P〈0.03）. First trimester bleeding was more common among pregnancies with VE than in the control （P〈0.005）. The incidence of pregnancy induced hypertension was lower in pregnancies with VE than in the controls （P〈0.03）. In contrast, preterm spontaneous rupture of membranes was higher, although without statistical significance. Gestational age at delivery, mode of delivery and birth weight was similar in the group of VE and the controls （P=NS）. Conclusion All these informations may be useful in counselling patients on the prognosis and outcome of pregnancies achieved by oocyte donation.     

胚胎玻璃化冷冻技术的临床应用(附成功分娩1例报道)

目的 探讨胚胎玻璃化冷冻技术的临床应用效果。方法 运用玻璃化冷冻技术保存75例患者的397个胚胎，复苏13例69个胚胎，并根据患者的情况进行胚胎移植。结果 69个胚胎中，丢失3个，存活26个，存活率为39，4％。复苏后8例患者因胚胎质量差未移植，另外5例患者共移植了14个胚胎，其中1例获得单胎妊娠，分娩1名健康女要。结论 玻璃化冷冻技术简便、经济，并能够有效地冻存人类早期胚胎，可成为胚胎冷冻方法的另一个选择。     

胚源性IL-1β与人类胚胎发育及种植的关系

目的探讨胚胎培养液中胚胎分泌的白细胞介素1β（interleukin-1β,IL-1β）水平与胚胎发育及植入潜能的关系。 方法选取首次行卵胞浆内单精子显微注射－胚胎移植（intracytoplasmic sperm injection-embryo transfer,ICSI-ET）手术的新鲜周期不孕患者80例,胚胎在体外采用单液滴单胚胎培养,在取卵受精后第3天进行胚胎移植,且移植胚胎数量均为2枚。收集新鲜周期移植胚胎相对应的卵裂期培养液微滴,采用酶联免疫吸附试验测定其上清的IL-1β水平。根据每周期胚胎种植率,将入组患者分A组43例（种植率为0%）、B组27例（种植率为50%）、C组10例（种植率为100%）。比较3组主要临床资料与胚胎实验室相关参数、在移植胚胎培养液中分泌的IL-1β水平、移植胚胎形态学累积评分;分析IL-1β水平、移植胚胎形态学累积评分之间的相关性。 结果80例患者中临床妊娠37例,临床妊娠率为46.3%,其中单胎妊娠27例,双胎妊娠10例。3组主要临床资料与胚胎实验室相关参数差异均无统计学意义（P＞0.05）。B组移植胚胎卵裂期培养液中IL-1β水平高于A组,C组高于A组和B组,差异有统计学意义（P＜0.05）。3组移植胚胎形态学累积评分差异无统计学意义（P＞0.05）。IL-1β水平与胚胎形态学累积评分呈正相关（r=0.587,P＜0.05）。 结论胚胎培养过程中胚胎分泌的内源性IL-1β与胚胎发育及植入存在密切相关性,其对胚胎的评估以及早期胚胎干预的研究可提供参考意义。     

应用全胚胎体外培养技术检测高热的胚胎毒性

目的：研究高热对胚胎发育的影响。方法：采用全胚胎体外培养技术。结果：在一同作用时间,温度升至４０℃时,７０％ 胚胎出现畸形;４２℃时,１００％ 胚胎出现畸形。在同一温度条件下延长高温作用时间,对胚胎毒性作用增强。光镜观察可见神经上皮变薄,细胞排列紊乱,细胞数量减少等。结论：高热影响胚胎的生长发育,并与高温值和作用时间明显相关。     

人原核期胚胎形态与胚胎移植后着床的关系

目的 探讨多个原核期形态学指标与取卵后第3天胚胎着床之间的关系,验证并筛选能正确反映胚胎移植后种植潜能的原核期形态指标.方法 选取年龄均≤35岁,HCG日子宫内膜厚度均≥8 mm,且取卵后第3天进行胚胎移植后100%植入的共30个移植周期患者(植入组),同时随机选取满足上述条件的100%未植入32个移植周期患者(未植入组).根据原核期形态包括两原核是否相邻、大小、居于胞浆中的位置,核仁前体(NPB)的排列方式、大小、数目,极体是否完整,胞浆晕的有无,胞质颜色及颗粒是否正常,胞质内空泡的有无进行数据统计,比较原核期形态与胚胎种植成功与否之间的关系.结果 植入组中两原核相邻、居中、大小一致的出现率明显高于未植入组(P＜0.05),其发育而来的取卵后第3天胚胎种植率明显增高.植入组中以NPB均线性排列、数目3～7个、中等大小出现率明显高于未植入组(P＜0.05),其发育而来的取卵后第3天胚胎种植率明显增高.胞浆形态中胞浆颗粒增粗明显降低胚胎种植率(P＜0.05),其它形态如极体、胞浆颜色、胞浆晕及胞浆内空泡均不影响胚胎种植率.结论 原核期胚胎形态可以反映受精卵的质量,但与取卵后第3天胚胎质量不完全一致,在IVF临床工作中是选择移植胚胎的一项辅助指标,能预测胚胎发育潜能.     

冷冻胚胎复苏后发育情况与妊娠结局的关系

目的 观察冷冻胚胎复苏并过夜培养后的卵裂球增殖情况与临床妊娠结局的关系。方法 回顾性分析2015年1月—2016年12月在同济大学附属同济医院生殖医学中心行冷冻胚胎复苏培养后移植的周期991例,按照复苏胚胎过夜培养后卵裂球增殖与否及增殖比例进行研究。依据移植的2枚胚胎是否增殖分为2枚增殖（S2）、1枚增殖（S1）及2枚均未增殖（S0）三组;在S2中,再根据卵裂球增殖比率分为a： 增殖形成桑葚胚或早期囊胚;b： 卵裂球增殖率≥50%;c： 50%＞卵裂球增殖率≥25%;d： 卵裂球增殖率＜25%,进一步分为A（aa、ab、ac、ad）、B（bb、bc、bd）和C（cc、cd、dd）三个区段共10组,统计各组临床妊娠率、流产率等指标。结果 S2、S1、S0三组临床妊娠率分别为46.41%、23.08%及12%,差异有统计学意义（P＜0.05）;A、B、C各区段的临床妊娠率分别为59.77%、47.43%及24.43%,差异有统计学意义（P＜0.05）;在各区段中,随着其中一枚胚胎的增殖比率下降,妊娠率均有不同程度降低。结论 冷冻胚胎复苏后过夜培养,选择移植进一步发育的胚胎具有更好的妊娠结局。     

影响胚胎移植与着床成功率的多种因素总结与分析

在人类辅助生殖技术中,多方面因素会影响胚胎移植与着床的成功率。除了胚胎质量、移植技术和子宫内膜容受性这些主要影响因素外,还有许多其他临床因素。本文对影响胚胎移植与着床成功率的各个因素进行综述和分析,从中总结经验,以期能够改善IVF/ICSI的结局。     

卵裂期胚胎sHLA-G抗原表达及其与胚胎发育和种植的关系

【目的】通过对卵裂期胚胎培养液可溶性人类白细胞抗原G(sHLA-G)的定性和定量分析,了解卵裂期胚胎sHLA-G抗原表达及其与胚胎发育和种植的关系。【方法】应用免疫发光WesternBlot了解卵裂期胚胎sHLA-G和HLA-I类抗原的表达情况;应用双抗体夹心法ELISA了解卵裂期胚胎培养液中sHLA-I类抗原的表达量与胚胎发育和种植的关系。【结果】①胚胎培养液中以sHLA-G抗原为主,其它sHLA-I类抗原量极少或不存在,因此用培养液中sHLA-I类抗原的量来估计培养液中sHLA-G的含量是可行的。②卵裂期胚胎培养液中1级胚胎sHLA-I类抗原的绝对吸光度(A)值为0.077±0.006;2级胚胎为0.064±0.002;3级胚胎为0.043±0.002;3组比较差异有显著性(P=0.014)。胚胎种植率与胚胎sHLA-I类抗原绝对A值的相关系数为0.426,P=0.004。它们的表达量与胚胎发育和种植的有关。【结论】卵裂期胚胎培养液中sHLA-G的表达量与胚胎发育和种植的有关。