中国人抗肌营养不良蛋白基因缺失的分布特点

目的了解国内Ｄｕｃｈｅｎｎｅ／Ｂｅｃｋｅｒ型肌营养不良症（ＤＭＤ／ＢＭＤ）患者基因缺失的分布特点。方法用１２对引物以多重ＰＣＲ检测与５６例ＤＭＤ／ＢＭＤ患者,分析缺失型患者抗肌营养不良蛋白（ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ）基因缺失的断裂点分布,并结合国内文献报道的２２１例病例资料,分析９对引物的总检出率及各引物的最佳组合。结果国内ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因缺失断裂点７２％位于４４～５１号内含子内,以４４号内含子最多（２２％）,５０号内含子次之（１７％）,位于４５～５１号内含子内的断裂点是４４号内含子的２．３倍。７号内含子断裂较少,仅４％的断裂点位于该内含子。９对引物的总检出率为４８％,其中５对引物的总检出率为４６％。两对引物的最佳组合为４８号和１７号,可检出３５％的患者。结论国内ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因４４～５１号内含子高度不稳定,容易发生断裂。７号内含子可能不是国内ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因缺失断裂的高发区域。在国内５对引物的总检出率接近９对引物,４８号和１７号外显子的二重ＰＣＲ扩增对于全国范围内ＤＭＤ／ＢＭＤ的筛选,尤其是结合其他方法进行大范围的产前筛选,不失为一种可取的选择。     

两步多重聚合酶链反应对假肥大型肌营养不良的基因诊断

应用分子生物学技术，用９组寡核苷酸引物分两步多重聚合酶链反应（ｍＰＣＲ）扩增ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因的９段脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）序列。对３６例ＤＭＤ和４例ＢＭＤ进行基因诊断。首先用缺失率较高的５对引物扩增，检出缺失者１７例，再用４对引物扩增，检出缺失者２例。这样，９对引物多重ＰＣＲ总缺失率占受检患者的４７．５％，表明此法可检测出７９．１％左右有基因缺失的患者。实验结果提示，两步多重ＰＣＲ可用于ＤＭＤ／ＢＭＤ的基因诊断。文中从ＤＭＤ／ＢＭＤ的临床表型与基因缺失的关系上进行了比较、探讨。     

两步—多重PCR诊断134例假肥大型进行性肌营养不良症基因缺失

研究临床检测假肥大型进行性肌营养不良症（ＤＭＤ／ＢＭＤ）基因缺失的有效手段。方法运用两步－多重聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术诊断ＤＭＤ／ＢＭＤ基因缺失。结果１３４例病人中，检测阳性率为４９．３％（６６／１３４）。结论多重ＰＣＲ诊断ＤＭＤ／ＢＭＤ基因缺失敏感、快速、准确，可在临床推广应用。     

X连锁肌营养不良症14例基因缺失的研究

应用９对引物的多重扩增对新疆地区的１４例Ｘ连锁肌营养不良症（ＭＤ）患者进行了基因分析。结果发现其中７例（５０％）有至少一个基因片段的缺失，且缺失热点集中于外显子４５～５１，这与国内外报道相近。同时发现，２例Ｂｅｃｋｅｒ型肌营养不良症的基因缺失均为一段，而５例Ｄｕｃｈｅｎｎｅ型肌营养不良症中的４例缺失各为２～３段。缺失片段多少是否与症状严重程度之间存在某种联系尚待研究论证。     

X连锁肌营养不良症14例基因缺失的研究

应用９对引物的多重扩增对新疆地区的１４例Ｘ连锁肌营养不良症（ＭＤ）患者进行了基因分析。结果发现其中７例（５０％）有至少一个基因片段的缺失，且缺失热点集中于外显子４５～５１，这与国内外报道相近。同时发现，２例Ｂｅｃｋｅｒ型肌营养不良症的基因缺失均为一段，而５例Ｄｕｃｈｅｎｎｅ型肌营养不良症中的４例缺失各为２～３段。缺失片段多少是否与症状严重程度之间存在某种联系尚待研究论证。     

脊髓性肌萎缩症的快速基因诊断研究

目的研究我国近端型脊髓性肌萎缩症（ＳＭＡ）患者的运动神经元生存基因（ＳＭＮ）外显子的缺失情况,探讨其快速基因诊断的可行性和临床应用价值。方法应用ＰＣＲ－酶切法检测２６例确诊的ＳＭＡ患者及２０名正常对照ＳＭＮ基因的第７、８号外显子的缺失情况。结果在２６例及２５例患者中,分别发现缺失了端粒ＳＭＮ基因（ＳＭＮ１）的第７和８号外显子,缺失率达１００％（２６／２６）和９６％（２５／２６）,而正常对照及患者的家系成员均未发现外显子缺失。结论应用ＰＣＲ－酶切法检测ＳＭＮ１基因缺失从而进行ＳＭＡ患者的基因诊断,具有准确、简便和快速的优点。     

线粒体肌病和脑肌病患者骨骼肌细胞线粒体DNA缺失分析

目的为了检测线粒体肌病和脑肌病患者的骨骼肌细胞的线粒体ＤＮＡ的缺失情况。方法从６例原发性线粒体肌病和１例脑肌病患者的骨骼肌活检标本中，提取总ＤＮＡ，以线粒体ＤＮＡ全长为探针进行分子杂交。结果发现１例ＭＥＲＲＦ患者有５ｋｂ的线粒体ＤＮＡ基因缺失，另１例线粒体肌病患者有１５ｋｂ的线粒体ＤＮＡ基因缺失，剂量分析表明缺失型线粒体ＤＮＡ分别占总线粒体ＤＮＡ的１９．３％和１０．７％。结论线粒体ＤＮＡ基因缺失是线粒体疾病的重要病因之一     

X连锁肌营养不良症14例基因缺失的研究

应用９对引物的多重扩增对新疆地区的１４例Ｘ连锁肌营养不良症（ＭＤ）患者进行了基因分析。结果发现其中７例（５０％）有至少一个基因片段的缺失，且缺失热点集中于外显子４５￣５１，这与国内外报道相近。同时发现，２例Ｂｅｃｋｅｒ型肌营养不良症的基因缺失均为一段，而５例Ｄｕｃｈｅｎｎｅ型肌营养不良症中的４例缺失各为２￣３段。缺失片段多少是否与症状严重程度之间存在在某种联系尚待研究论证。     

应用PCR－SSCP技术研究非缺失型DMD／BMD患者的基因内点突变

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法，结合ＤＮＡ测序技术，对２０例非缺失型ＤＭＤ／ＢＭＤ患者的Ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因１７号外显子区域进行检测，发现了一个由Ｇ～Ｔ碱基置换形成的点突变。表明该方法对非缺失型病例发病机制的阐明具有重要意义。     

用短串联重复序列单体连锁分析进行肌营养不良症产前基因诊断

目的对２０个迪谢内／贝克肌营养不良症（ＤＭＤ／ＢＭＤ）家系进行产前基因诊断。方法应用多重聚合酶链反应（ｍＰＣＲ）和短串联重复序列（ＳＴＲ）多态单体连锁分析对２０个ＤＭＤ／ＢＭＤ家系的成员进行产前基因分析。结果１６个家系可提供充足的多态性信息，４个散发型家系不能提供多态性信息。１１例男性胎儿中，３例存在基因缺失，４例非缺失型男性胎儿的单体型与其携带者母亲相同，确定为ＤＭＤ胎儿。９例女性胎儿中５例继承了母亲的单体型，为致病基因携带者。５１例先证者母亲及其他女性血亲为杂合型。结论ＳＴＲ单体连锁分析快速、准确，基因组ＤＮＡ需要量小，可提供的信息量高，适合非缺失型ＤＭＤ／ＢＭＤ家系产前诊断的需要。同时选择ＤＭＤ基因两端和基因内４个位点进行连锁分析，可大大提高诊断的准确率