HSV-tk与p53基因对涎腺多形性腺瘤细胞的杀伤作用

目的　观察腺病毒介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)基因、野生型p53基因(wt-p53)联合杀伤人涎腺 多形性腺瘤细胞的效果。方法　采用腺病毒介导的HSV-tk基因、wt-p53基因联合转染人涎腺多形性腺瘤细胞,逆 转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测转染后的基因表达;四唑盐比色(MTT)法测定tk与p53基因治疗后对肿瘤细 胞的杀伤作用及旁观者效应,并采用相差显微镜观察基因治疗后肿瘤细胞的形态学变化。结果　单独转染wt-p53 及HSV-tk/GCV基因5 d后,涎腺多形性腺瘤细胞的存活率分别为54%和38%;两者联合转染5 d后,细胞的存活率 降至20%,两者差异有显著性(P<0.05)。结论　HSV-tk、wt-p53基因联合应用对涎腺多形性腺瘤的杀伤作用强于 此两基因单独应用的杀伤作用。     

涎腺多形性腺瘤p53基因突变的SSCP及核酸序列分析研究

目的 检测涎腺多形性腺瘤中ｐ５３基因第６外显子突变的密码及突变类型。方法 采用聚合酶链式反应－单股构型多态分析（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎｊ ｒｅａｃｔｉｏｎ－ｓｉｎｇｌｅ－ｓｔｒａｎｄ ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ,ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）技术及ＤＮＡ核酸序列测定方法对涎腺多形性腺瘤进行研究。结果 在１１例ＰＣＲ－ＳＳＣＰ阳性的肿瘤中,第６外显子异常者６例。对其中４例肿     

涎腺多形性腺瘤组织发生的探讨

采用钌红电镜组织化学技术对６例锶腺多殂性腺瘤进行研究，结果发现，粘液样区域内充满了钌红颗粒，在该区域肿瘤性肌上皮细胞浆内的分泌囊泡中也有钌红颗粒。于双层导管结构中，一些外周细胞也具有肌上皮细胞的特征，其细胞内和细胞外也见到钌红颗粒，导管上皮细胞不产生蛋白多糖，导管腔内的粘液不被钌红染色，观察结果表明，粘液样区域中的肿瘤性肿上皮细胞可能来自双层导管结构的外周细胞，它们分泌蛋白多糖形成粘液样区域，在我     

83例涎腺恶性多形性腺瘤临床病理分析

作者总结分析８３例恶性多形性腺瘤的临床病理特点。患者平均年龄５３岁，男女之比为１．２：１，肿瘤部位依次为腮腺４７．９％，颌下腺２４％、腭部２０％，肿瘤中恶性成份为癌型７６例，癌肉瘤７例。明显影响预后的因素有（１）肿瘤部位；（２）组织学亚型，（３）肿瘤分化程度，（４）浸润状况，（５）淋巴结有无转移。患者５年生存率为５２．７％，恶性程度明显高地其它常见型涎腺癌。作者认为多形性腺瘤是它的癌前病变，早期切     

涎腺恶性多形性腺瘤的病理类型

本文报告73例涎腺恶性多形性腺瘤,根据光镜形态分为9个亚型,即腺癌型、鳞癌型、肌上皮癌、低分化癌、癌肉瘤、腺样囊性癌、粘液表皮样癌、多形性腺癌、转移性多形性腺瘤各型。对不同组织类型和多项恶性指标及随访预后的关系进行对比和讨论。     

涎腺多形性腺瘤中Gli-2蛋白的表达及意义

目的 探讨转录因子Gli-2蛋白在涎腺多形性腺瘤(salivary pleomorphic adenoma,SPA)组织中的表达及其生物学意义.方法 采用免疫组织化学方法检测60例SPA组织中Gli-2蛋白的表达情况并进行分析.结果 Gli-2蛋白在60例SPA组织中高表达,主要表达在细胞核内,呈棕黄色颗粒.21例(3...     

36例涎腺多形性腺瘤的免疫组化研究

用S-100蛋白、波形蛋白和角蛋白三种抗体对36例涎腺多形性腺瘤进行免疫组化研究。结果发现:腺管样结构的内衬细胞与鳞化上皮和角化珠呈角蛋白阳性:部分腺管的外层瘤细胞和实性区的变异肌上皮细胞呈S-100蛋白、波形蛋白和角蛋白阳性;粘液样区和软骨样区呈S-100蛋白和波形蛋白阳性,偶尔呈角蛋白阳性。实验表明:涎腺多形性腺瘤的发生可能同纹管与排泄管的基底细胞有关。     

涎腺多形性腺瘤中赖氨酰氧化酶表达的研究

目的 检测涎腺多形性腺瘤(salivary pleomorphic adenoma,SPA)组织中赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)的表达,探讨LOX与SPA发生发展的关系.方法 取20例SPA组织标本,并配对20例SPA瘤旁涎腺组织,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和实时荧光定量PCR方法检测LOX mRNA在组织中的的表达水平,并分析其表达变化,用蛋白质印迹法检测LOX的蛋白表达水平.结果 SPA组织中LOX mRNA表达水平明显高于瘤旁涎腺组织(12.81 ±0.92),SPA组织中LOX蛋白表达水平明显高于瘤旁涎腺组织.结论 LOX mRNA和蛋白在SPA瘤组织中均呈高表达,提示LOX的异常表达可能参与了SPA的发生、发展.     

涎腺多形性腺瘤微血管密度及血管内皮生长因子表达的意义

目的:研究多形性腺瘤中血管内皮生长因子(VEGF)的表达和微血管密度(MVD),探讨其与该肿瘤的临床病理意义.方法:采用SP免疫组化染色方法检测33 例多形性腺瘤中VEGF的表达和MVD,用SPSS统计软件进行分析.结果:VEGF在多形性腺瘤中的表达率明显高于正常涎腺(P<0.05);MVD在多形性腺瘤中的分布与正常涎腺组织无显著性差异(P>0.05);VEGF在多形性腺瘤中的表达与MVD无显著相关性.结论:在涎腺多形性腺瘤中,VEGF有较高水平表达,MVD的分布需进一步研究.     

p16、p21在涎腺多形性腺瘤及恶性多形性腺瘤中的表达

目的:研究涎腺多形性腺瘤及恶性多形性腺瘤中抑癌基因p16、癌基因rasp21的表达,探讨基因在涎腺多形性腺瘤及恶性多形性腺瘤发生发展中的作用。方法:应用免疫组化SABC法检测正常涎腺组织、多形性腺瘤及恶性多形性腺瘤中p16、p21的表达。结果:(1)p16表达:正常组阳性表达率为100%,良性组为95%,恶性组为82.5%。正常组与恶性组、良性组与恶性组相比存在显著性差异(P<0.05),正常组与良性组之间无统计学差别。(2)p21表达:正常组阳性表达率为0%,良性组为65%,恶性组为72.5%。正常组与良性组或恶性组相比均具有显著性差异(P<0.01),但良性组与恶性组相比无显著差别。结论: 1.p16基因变异在涎腺多形性腺瘤及恶性多形性腺瘤的发生发展中起一定作用;2.ras基因产物p21过表达可能对涎腺多形性腺瘤及恶性多形性腺瘤的早期发生起重要作用。     

涎腺多形性腺瘤中纤维成份的电镜组化观察

目的 探讨多形性腺瘤粘液软骨样组织中纤维的种类及形成机理。方法 采用组织学及电镜组织化学技术观察８例多形性腺瘤。结果在多形性瘤液软骨样区域中,散在胶原纤维及弹怀纤维构成了该区域的支架结构。电组化研究表明,在多形性腺瘤软骨样组织, 含有直径约５０ｎｍ的胶原原纤维和弹性纤维团块。在粘液软骨样细胞浆内可分泌囊泡：一种含 着色黑、电子密度均匀、致前弹性蛋白分子;另一种含着色灰淡、电子密度不均匀,囊泡中充满     

Expression and mutations of p53 in salivary gland tumours

A series of 219 salivary gland tumours (103 carcinomas and 116 benign tumours) were analysed for p53 protein expression using immunohistochemistry, and for mutations in p53 gene using non-radioactive single strand conformation polymorphism (SSCP). p53 expression was present in 36% (42/116) of the benign tumours and in 54% (56/103) of the carcinomas. The highest prevalence of p53 expression was found in adenoid cystic carcinomas (69%). followed by mucoepidermoid carcinomas (67%). Of the benign tumours, pleomorphic adenomas showed the highest prevalence of p53 positivity (41%). In malignant tumours, expression of p53 bore no correlation to local recurrence, metastatic disease or survival of the patients. Exons 5 through 9 were analysed and four mutations were found in 20 cases of p53-immunopositive tumours and two in 20 p53-negative tumours. Each of the exons 5.6 and 8/9 had two mutations, whereas no mutations were detected in exon 7.     

HSV-TK自杀基因对涎腺多形性腺瘤细胞治疗的实验研究

目的研究单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(Herpes simplex virus thymidine kinase，HSV-TK)／丙氧鸟苷(ganciclovir，GCV)系统对人涎腺多形性腺瘤体外基因治疗的作用。方法采用腺病毒包装重组脂质体介导的含有HSV-TK全长的cDNA真核表达质粒PDC312-HSVTK转染人涎腺多形性腺瘤细胞，通过RT-PCR检测TK基因在转染细胞中的表达；用MTT法检测HSV-TK／GCV系统对多形性腺瘤细胞的杀伤作用和旁观者效应：采用倒置显微镜、组织学染色等观察HSV-TK／GCV系统作用细胞后的形态学改变。结果HSV-TK基因转染24小时后，肿瘤细胞开始出现空泡性变；转染48小时后，RT-PCR从转染的细胞中成功扩增出1150bp的特异性TK基因片段。转染36小时后加入不同浓度的GCV治疗，细胞出现核固缩，胞浆裂解，随之细胞死亡、脱壁的现象。细胞存活率随HSV-TK／GCV作用时间延长而逐渐下降，当加入10^-4mol／LGCV治疗7天时，HSV-TK／GCV系统的杀伤作用最强，细胞存活率为10．3％。当TK阳性的细胞占细胞总数50％时，其旁观者效应最明显，细胞存活率为31．7％。结论HSV-TK／GCV系统对涎腺多形性腺瘤细胞具有明显的杀伤作用和旁观者效应。     

唾液腺腺样囊性癌p53基因突变及其与临床病理的关系

目的:研究唾液腺腺样囊性癌(ACC)p53基因突变及其与临床病理因素的关系。方法:选择38例唾液腺ACC病理标本,采用聚合酶链式反应单链构象多态性分析(PCR-SSCP)进行p53基因突变(5-8外显子)的检测;应用SPSS10.0统计学分析软件,采用Kaplan-Meier法进行生存分析,并绘制生存曲线。p53基因突变与ACC各病理类型、局部复发率、远处转移率及临床分期的关系采用Fisher精确检验。结果:p53基因5-8外显子突变检出率为65.8%,p53基因突变与唾液腺ACC的肿瘤复发、远处转移及术后生存有关(P<0.05),与肿瘤病理类型、临床分期无关(P>0.05)。结论:p53基因突变在唾液腺ACC中有较高的检出率,并可能与患者的预后有关。     

Precancerous foci in pleomorphic adenoma of the salivary gland: recognition of focal carcinoma and atypical tumor cells by P53 immunohistochemistry

BACKGROUND: It is still controversial if atypical tumor cells scattered in salivary pleomorphic adenomas are precancerous and how carcinoma arises in pleomorphic adenomas. METHODS: We studied clinicopathologically the frequency and variation of cellular atypia among tumor cells and examined the expression status of p53 gene products as well as proliferating cell nuclear antigen (PCNA) in 101 surgical materials of pleomorphic adenomas. RESULTS: Histopathologically, atypical tumor cells were found in 51% of the cases examined. Their mode of distribution was classified into three groups: focal (six cases, 6%) which could be identified as focal carcinoma, measuring less than 1 mm in diameter; sporadic (15 cases, 15%) and singular (30 cases, 30%). These atypical cells were located mainly within sheet-like nests of tumor cells but not in chondroid or fibro-hyaline foci. Immunohistochemically, most of the atypical cells were positive for p53 gene products and PCNA. CONCLUSION: The results indicated that atypical cells with p53 protein accumulation in their nuclei could be regarded as cells in a precancerous state not yet forming an apparent carcinomatous nest. Some cell population with these atypical cells are likely to form focal carcinomas and then to an apparent form of carcinoma in pleomorphic adenoma.     

涎腺肿瘤与癌基因c-myc抑癌基因p53和人类乳头状病毒感染的关系

本实验采用免疫组化、PCR技术和核酸电泳方法,对涎腺多形性腺瘤和其它类型良恶性肿瘤进行对比研究,结果显示:在涎腺多形性腺瘤中,c-myc和p53阳性率分别为50％(10/20)和25％(5/20,均远低于涎腺恶性肿瘤阳性率100％(3/3),提示c-myc表达与涎腺上皮细胞增殖速度加快有关,其表达率升高,与细胞癌变有密切联系。p53阳性表达率,虽在恶性肿瘤较高,但仅为判断细胞分化程度的一个参考指标。关于腮腺肿瘤与HPV关系,15例多形性腺瘤和3例腮腺癌中,HPV6.11均为阴性,HPV16.18阳性反应各为1例(1/5和1/3),远远低于HPV16.18在口腔肿瘤中的感染率,考虑到腮腺与口腔组织所处环境差异(后者易受烟草刺激),HPV16.18的致癌作用,主要表现为协同关系。     

HER2基因在唾液腺恶性多形性腺瘤细胞增殖、周期、凋亡中的作用

目的:通过体外抑制唾液腺恶性多形性腺瘤（malignant pleomorphic adenoma,MPA）中人表皮生长因子受体2（Human epithelial growth factor receptor 2,HER2）,分析其与肿瘤细胞增殖、周期和凋亡等恶性生物学行为的相关性,以期评估其作为靶向治疗位点的可能性。方法:检测MPA细胞系中HER2蛋白表达及基因扩增情况,应用靶向抑制剂处理肿瘤细胞,检测肿瘤增殖、周期、凋亡等生物学行为的改变,HER2蛋白表达改变及其对下游通路的影响。采用SPSS 16.0软件包进行独立样本t检验。结果:SM-AP1、SM-AP4细胞中均存在HER2蛋白表达及HER2基因扩增,应用HER2靶向抑制剂可以显著降低肿瘤细胞的增殖能力,阻滞细胞周期进程,诱导肿瘤细胞凋亡,并且HER2下游PI3K/Akt和MAPK/ERK细胞通路受到抑制。结论:MPA肿瘤细胞系中存在HER2基因过表达及扩增,HER2在MPA恶性生物学行为中扮演重要角色。抑制HER2,可以改善MPA的恶性生物学行为。